抗原抗体反应ppt课件

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抗原抗体凝集(沉淀)反应形成 的条件:
1、抗原结合价必须在2价以上; 2、抗体结合价也必须是2价或2价以上; 3、抗原抗体能形成复合物但不一定能形成沉淀; 4、抗原抗体结合形成大分子凝集物的前提是要求其结合
价彼此饱和; 5、当抗原大大过量时,只有溶解状态的抗原抗体复合物,
而无沉淀出现,在免疫检测中称为前带现象。
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第二节 影响抗原抗体反应的因素
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一、反应物自身因素
• 抗原:理化性状、表位种类和数目 • 1、抗原
• 抗原的理化性状、抗原决定簇的数目和种类均可影 响血清学反应结果 例如,可溶性抗原与相应抗体 反应出现沉淀,而颗粒性抗原与相应抗体反应则出 现凝集;单价抗原与抗体结合不出现可见反应;粗糙 型细菌在生理盐水中易出现自凝;红细胞与IgG类 抗体结合不出现直接凝集等。
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• 抗原抗体分子间的作用力.
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抗原抗体交叉反应
抗原抗体专一 性反应
交叉反应
无反应
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二、抗原与抗体结合的可逆性
抗原抗体的结合反应是一个可逆的反应
Ab+Ag
Ab:Ag
• 可逆性指复合物在一定条件下可发生解离,恢 复抗原抗体的游离状态。抗原抗体结合是分子表面
抗体 抗原
前带(prezone):抗体过量 后带(postzone):抗原过量 等价带(equivalence zone):
抗原抗体比例合适
抗 原 抗 抗体过量 体 沉 淀 量
平衡点
抗原过量
前带
抗体一定抗原增加
后带
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抗原与抗体反应中量的关系
• 比例性(proportionality) 是指抗原与抗体发生可见反应需要一定的量比关系,只有当二者 浓度比例适当时,才形成较大的抗原抗体结合物。以沉淀反应为例,在加入固定量抗体的一排 试管中,再依次加入一定量的递增浓度的抗原进行反应,结果发现随着抗原浓度的增加,沉淀 很快出现,但抗原超过一定范围之后,沉淀速度和沉淀量随抗原浓度增加反而降低,甚至到最 后不出现沉淀, 沉淀反应的速度反映了参加反应的抗原和抗体浓度的适合程度,适合程度高反应快,反之 则慢。通常把最迅速出现可见反应时的抗原抗体的浓度比或量比称为抗原抗体反应的最适比 (optimal ratio)或称等价点(equivalence point)。抗原与抗体比例最合适的范围称等价带 (equivalencezone)。在最适比反应条件下,抗原抗体几乎全部结合成复合物,上清液中基本 无游离的抗原和抗体。当抗原和抗体浓度比超过此范围时,可见反应的速度和复合物的量都会 迅速降低,甚至不可见,上清液中可测出游离的抗原或抗体。因抗原抗体比例不合适而不出现 可见反应,称带现象(zone phenomenon)。如果抗体过量时,称为前带(prozone);抗原 过量时,称为后带(postzone)。在同一抗原抗体反应系统中,不管抗原和抗体浓度如何变化, 其沉淀反应的最适比始终恒定不变, Marrack提出的网格学说解释了抗原抗体反应比例性的机制。天然抗原大多是多价的,抗 体至少为两价,当抗原与抗体在等价带结合时,相互交叉连接成具有立体结构的网格状复合体, 形成肉眼可见的沉淀物。当抗原或抗体过剩时,由于过剩方的结合价得不到饱和,只能形成较 小复合物,并存在有较多游离的抗原或抗体,不能出现可见反应。但是,当抗原或抗体为单价, 不管抗原与抗体的量比关系是否合适,均不能出现可见反应现象。
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三、抗原与抗体反应的阶段性
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三、抗原与抗体反应的阶段性
当抗体与抗原结合时,如果是颗粒抗原,则 出现凝集现象;如果是可溶性抗原,则产生沉淀 作用,是抗原抗体反应的继发过程。
当抗原与同型抗体相遇时,在合适条件下, 不论彼此量的多少,都立即发生特异性的结合形 成抗原抗体复合物,这一过程通常只需要几秒的 时间便可完成,称为反应的一级阶段。
的结合。

影响因素: a.抗体对相应抗原的亲合力-亲
合力越高,结合越牢固,越不易解离

b.环境因素对复合物的影响:-pH、离子强度
• 应用:由于抗原抗体结合的可逆性,可利用亲
和层析法分离纯化抗原或抗体;利用待测抗原和标
准抗原与抗体的竞争结PP合T学习,交流进行抗原或抗体的定量
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三、抗原与抗体反应中量的 关系—eg沉淀反应
姓名:张瑞玲 第七章 抗原与抗体相学互号作:用
20159147 专业:药物化 学 课程:免
疫基础原理
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第一节:抗原 抗体反应特点
阶段性
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第一节 抗原与抗体反应的特点
一、特异性
抗原与抗体相互结合只局限于一些大分子表 面的特定部位,即抗原决定簇和抗体结合位点之间, 且以亲和力的作用方式结合在一起。抗原抗体的结 合并没有共价键形成,而是由这些特定部位之间的 短程分子力相互作用的结果。这些吸引力只有在极 短的距离内才有效。因此抗原决定簇与抗体结合位 点在空间上必须处于紧密接触状态,才能产生足够 的结合力。这种分子间的互补结构决定了抗原抗体 结合的专一性。
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在一级阶段之后,继发出现抗原与抗体间进 一步交联而形成网络状凝集物,进而出现可见的凝 集和沉淀,称为反应的二级阶段。
二级阶段是抗原抗体网格生长的阶段,速 率要慢的多。
影响因素:很大程度上依赖于温度、离子 强度等外界条件,但更重要的是需要合适的抗原抗 体分子比例。
只有当二者的结合价彼此饱和时,才能连 接成一个大网格样凝集物,出现凝集或沉淀。
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反应物自身因素
• 抗体:来源、特异性、亲和性、效价
• 2、抗体
• 抗体是血清学反应中的关键因素,对反应的影响表现在以下三个方面:
• (1)来源:来自不同动物的免疫血清,其反应性有差异。家兔等大多数动物的免疫血清 具有较宽的等价带,通常在抗原过量时才易出现可溶性免疫复合物;马等大动物和人 的免疫血清等价带较窄,少量的抗原或抗体过剩,均可形成可溶性免疫复合物;家禽 免疫血清不能结合哺乳动物的补体,并且在高盐浓度(80g/L NaCl溶液中沉淀现象 明显。单克隆抗体一般不适用于沉淀反应或凝集反应