多克隆抗体制备免疫小鼠

多克隆抗体制备免疫小鼠

多克隆抗体制备免疫小鼠是一种常用的制备多克隆抗体的方法。下面是具体的步骤：

1. 选择抗原：首先需要确定所需要制备抗体的抗原。抗原可以是蛋白质、多肽、多糖等。

2. 免疫小鼠：将所选抗原注射到小鼠体内，以诱导其产生特异性抗体。通常，抗原会和佐剂（如完全弗氏佐剂）混合，以增强免疫响应。

3. 免疫程序：将抗原注射到小鼠体内，通常分为初次免疫和加强免疫两个阶段。初次免疫后，会进行一定的间隔时间（通常是2-4周）再次注射抗原，以增强免疫效果。

4. 细胞融合：在小鼠免疫后，从其脾脏中采集免疫细胞

（通常是脾细胞），与骨髓瘤细胞（如SP2/0或NS1等）进行细胞融合。

5. 筛选和培养：将融合细胞进行稀释后，接种到培养基中，以培养成杂交瘤细胞。培养基中通常会添加相应的选择剂，以选择出杂交瘤细胞。

6. 克隆筛选：将培养出的杂交瘤细胞进行单克隆化，即分

离成单个克隆细胞。这可以通过稀释法或细胞限 dilution

法来进行。

7. 抗体鉴定：对筛选出的单克隆细胞进行抗体鉴定，通常

采用酶联免疫吸附试验（ELISA）或免疫组化技术来检测抗体的特异性和亲和力。

8. 抗体生产：经过抗体鉴定后，将选出的单克隆细胞培养

扩大，并进行大规模的培养和抗体生产。

多克隆抗体制备免疫小鼠的主要优点是可以获得多种不同

的抗体，具有较高的灵敏性和多样性。然而，由于免疫小

鼠需要一定的时间来产生抗体，需要一定的动物资源和成

本支出，而且制备的抗体可能存在一定的批次变异。因此，每个实验室需要根据自己的需求和实际情况来选择适合自

己的抗体制备方法。