两性霉素B缓释微球的制备及缓释性能研究

两性霉素B微生物限度检查方法验证方案两性霉素B微生物限度检查方法验证方案目录一、验证目的二、验证参与人员与职责三、验证方案内容四、验证数据收集五、验证结果与评价要求六、验证方案批准两性霉素B微生物限度检查方法验证方案一．验证试验目的通过本次验证试验制定出一整套具体有效的方法，对两性霉素B原料的药微生物限度项目进行检查，其中包括细菌、霉菌、酵母菌计数方法，大肠埃希菌检查方法及沙门氏菌检查方法，通过这些检查方法对两性霉素B原料药的微生物限度进行严格控制，以确保产品质量。

二．验证参与人员与职责三．两性霉素B微生物限度检查验证方案内容1．验证对象：两性霉素B原料药2．验证依据：企业标准3．实验设备恒温培养箱30℃～35℃、35℃～37℃移液枪4．验证所使用的供试品、菌种及试剂供试品：两性霉素B原料药供试品批号：AI070401AI070402AI070501菌种：①大肠埃希菌[CMCC（B）44102]②金黄色葡萄球菌[CMCC(B) 26003]③白色念珠菌[CMCC(F) 98001]④乙型副伤寒沙门菌[CMCC(B) 50 094]试剂：营养琼脂培养基、改良马丁培养基、改良马丁琼脂培养基、营养肉汤培养基、胰蛋白胨大豆琼脂培养基、胆盐乳糖培养基、4-甲基伞形酮葡萄苷酸培养基、四硫磺酸钠亮绿基础培养基、胆盐硫乳琼脂培养基、曙红亚甲蓝琼脂培养基、磷酸二氢钾、磷酸氢二钠、氯化钠、蛋白胨、靛基质5．验证的测定方法5.1菌种培养及计数从大肠埃希菌斜面上取一环大肠埃希菌培养物，至营养肉汤培养基中，置30℃～35℃恒温培养箱中培养22小时。

从金黄色葡萄球菌斜面上取一环金黄色葡萄球菌培养物，至营养肉汤培养基中，置30℃～35℃恒温培养箱中培养18小时。

从白色念珠菌斜面上取一环白色念珠菌培养物，至改良马丁培养基中，置23℃～28℃恒温培养箱中培养24小时。

从沙门氏菌斜面上取一环沙门氏菌培养物，至营养肉汤培养基中，置35℃～37℃恒温培养箱中培养22小时。

两性霉素B脂质体的制备及稳定性研究
赵荣生;侯新朴;严宝霞
【期刊名称】《中国医药工业杂志》
【年(卷),期】2001(32)4
【摘要】采用薄膜 -超声法制备了两性霉素 B脂质体 ,稳定性考察的结果表明 ,制得的两性霉素 B脂质体在较低温度(4°C)条件下贮存时能保持良好的物理和化学稳定性 ;在近似生理条件下能较长时间地保持比较完整的脂质体结构 ,稳定性良好。

【总页数】3页(P160-162)
【关键词】两性霉素B;脂质体;制备;稳定性;多烯类抗真菌药
【作者】赵荣生;侯新朴;严宝霞
【作者单位】北京大学第三医院药剂科;北京大学药学院
【正文语种】中文
【中图分类】R978.5;R944.9
【相关文献】
1.Vc纳米脂质体悬浮液及其前体脂质体的制备与稳定性研究 [J], 鲍士宝;喻婷婷;马福敏
2.两性霉素B长循环脂质体冻干剂的制备工艺研究 [J], 张丽霞;王会娟;孙莉
3.两性霉素B前体脂质体的制备工艺研究 [J], 隋琳;田野;王永利;王立华;庚丽丽;赵瑶;王璐璐
4.染料木素脂质体的制备及其包封率和稳定性研究 [J], 谢琳;韦龙华;蒋雯丽;熊建文;易慧;蔡锦源;崔娜
5.两性霉素B脂质体缓释体系的制备—治疗黑热病药物新剂型研究 [J], 王雅静;李雄伟
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两性霉素B及其卵磷脂-胆固醇脂质体降解动力学研究【摘要】目的考察以卵磷脂、胆固醇为膜材制备的两性霉素B脂质体的稳定性及降解动力学。

方法应用高效液相色谱法考察光和热对两性霉素B溶液及其脂质体中药物稳定性及降解动力学的影响，并拟合其降解动力学模型，求算降解半衰期。

结果两性霉素B溶液及其脂质体光降解分别符合一级和零级动力学过程，降解半衰期分别为2.6和24.7d；热降解过程分别符合零级动力学和Higuchi方程；40℃下半衰期分别为27.8和1532.8d；60℃下半衰期分别为8.2和17.9d。

结论脂质体可明显降低两性霉素B的光和热降解，延长药物降解半衰期，显著提高两性霉素B的稳定性。

【关键词】两性霉素B；卵磷脂；胆固醇；脂质体；稳定性；降解动力学ABSTRACT Objective To study the stability and degradation kinetics of amphotericin B in liposome. Methods The light and thermal stabilities of amphotericin B in liposome and solution were determined by detecting its content using HPLC and the degradation kinetics was also investigated. Results The light degradation kinetics of amphotericin B in liposome and solution fit the zero- and first-order equations， and their half lives were 24.7d and 2.7d， respectively. While their thermal degradation kinetics complied with the Higuchi model and zero-order equations， respectively. The amphotericin B in liposome was more stable than that in solution at 40℃ and 60℃. The half lives of amphotericin B in liposome and solution were 1，532.8d and 27.8d at 40℃，but 17.9d and 8.2d at 60℃， respectively. Conclusion The liposome can improve the light and thermal stabilities of amphotericin B significantly.KEY WORDS Amphotericin B; Egg phospholipid; Cholesterol; Liposome; Stability; Kineticsequation近年来，深部真菌感染的发病率有升高趋势，且病情大多严重，病死率高，特别在严重全身性疾病(如恶性肿瘤、血液病)基础上免疫功能明显下降以及长期应用广谱抗生素、免疫抑制剂、肾上腺皮质激素或放疗、化疗时更容易发生。

两性霉素B聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒的制备及小鼠体内分布研究徐楠;邹豪;范国荣;温海;陈江汉【期刊名称】《第二军医大学学报》【年(卷),期】2007(28)3【摘要】目的:制备携载两性霉素的聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒(AmB-PBCA-NP),研究其对血脑屏障的透过能力。

方法:孵化法制备AmB-PBCA-NP,以聚山梨酯-80进行表面修饰,建立高效液相色谱分析法,流动相选择乙腈-水(40:60)及4%乙酸,405 nm处检测。

小鼠分3组,每组28只,分别注射AmB粉针剂、脂质体(AmB-L)及纳米制剂(AmB-PBCA-NP),通过检测小鼠脑组织等脏器中的药物浓度,评价其主动脑靶向作用。

结果:AmB-PBCA-NP平均粒径94.38 nm,平均包封率为82%,载药量56.1%。

给药后AmB粉针剂组小鼠脑内未能检测出药物,AmB-L组于3 h后测得微量浓度,而AmB-PBCA-NP组小鼠30 min即测得可观浓度,3 h后达133 ng/g。

结论:聚山梨酯-80修饰的AmB-PBCA-NP具有主动脑靶向作用。

【总页数】4页(P242-245)【关键词】脑膜炎,隐球菌性;两性霉素B;聚氰基丙烯酸正丁酯;血脑屏障【作者】徐楠;邹豪;范国荣;温海;陈江汉【作者单位】第二军医大学长征医院皮肤性病科;第二军医大学药学院药剂学教研室;第二军医大学药学院药物分析学教研室【正文语种】中文【中图分类】R978.5【相关文献】1.链霉素聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒小鼠体内抗结核菌活性的研究 [J], 桂卉;邹龙;范学工2.加替沙星聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒小鼠体内分布特征 [J], 朱玲;贾欣;阿有梅;张振中3.聚氰基丙烯酸正丁酯荧光纳米微球的制备及其在小鼠体内分布情况研究 [J], 李春梅;张林;侯艳红;李楠4.阿米替林聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒在大鼠体内药动学与组织分布学分析 [J], 王旭生;王爱芹;朱欣茹;张朝辉;宋景贵;张萍5.携载两性霉素B的聚氰基丙烯酸正丁酯纳米粒的制备及特性评价 [J], 徐楠;邹豪;温海;陈江汉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

两性霉素B（专业知识值得参考借鉴）本文极具参考价值，如若有用请打赏支持我们！不胜感激！两性霉素B(专业知识值得参考借鉴)一概述两性霉素B（AmphotericinB）为多烯类抗真菌药物。

对本品敏感的真菌有新型隐球菌、皮炎芽生菌、组织胞浆菌、球孢子菌属、孢子丝菌属、念珠菌属等，部分曲菌属对本品耐药；皮肤和毛发癣菌则大多耐药。

本品对细菌、立克次体、病毒等无抗微生物活性。

常用治疗量所达到的药物浓度对真菌仅具抑菌作用。

二适应证用于隐球菌、球孢子菌、荚膜组织胞浆菌、芽生菌、孢子丝菌、念珠菌、毛霉、曲菌等引起的内脏或全身感染。

三临床应用1.静滴①从小剂量开始，一般按1、3、5、10mg递增，逐渐增加剂量到0.7mg（kg·d）。

开始剂量增加要慢，患者反应不明显时可适当加快增量速度。

②两性霉素B每次的剂量溶入500ml5％葡萄糖注射液中，6～8小时内滴完。

选择葡萄糖注射液在pH5.5，如低于pH5.3时主药稳定性下降，如pH低可用碳酸氢钠注射液调整其pH值。

③用药中患者反应明显时，可用小剂量糖皮质激素（如地塞米松1～2mg）拮抗。

④为预防寒战和高热可在用药前20～30分钟，直肠给消炎痛栓剂1/3（25mg）。

⑤两性霉素B对光不稳定，输液时应避光进行。

⑥用药过程中应监测肝肾功能、电解质。

⑦两性霉素B总量一般为2～3g。

2.雾化吸入适用于肺及支气管感染病例。

一日量5～10mg，溶于注射用水100～200ml中，分4次用；3.局部病灶注射浓度1～3mg/ml，3～7天用1次，必要时可加普鲁卡因注射液少量；对真菌性脓胸和关节炎，可局部抽脓后注入药5～10mg，每周1～3次。

四不良反应毒性较大，可有发热、寒战、头痛、食欲不振、恶心、呕吐等反应，静脉用药可引起血栓性静脉炎，鞘内注射可引起背部及下肢疼痛。

对肾脏有损害作用，可致蛋白尿、管型尿，定期检查发现尿素氮＞20mg％或肌酐＞3mg％时，应采取措施，停药或降低剂量。

药物制剂中的微球制剂释放性能研究随着医学和制药技术的不断发展，药物制剂中的微球制剂逐渐成为一种备受关注的新型给药系统。

微球制剂具有很多优势，例如可控释放、延缓药物代谢速率和降低药物副作用等。

本文将对药物制剂中的微球制剂释放性能进行探讨和研究。

一、微球制剂的定义及特点微球制剂，顾名思义就是指微小球状的制剂形式。

微球材料可以从凝胶材料、聚合物或其他生物材料中制备得到。

它们通常有一个中心核心（例如药物）被一层或多层壳材所包裹。

微球制剂具有以下特点：1. 可控释放性能：微球制剂可以通过材料的选择和包覆层的控制来调节释放速率，实现药物的持续释放。

2. 缓慢代谢速率：微球制剂可以减慢药物的代谢速率，延长药物在体内的停留时间，提高药物疗效。

3. 降低副作用：微球制剂可以减少药物在非靶器官的分布，降低药物的副作用发生。

4. 简便的制备方法：微球制剂的制备方法简单易行，适用于大规模工业化生产。

二、微球制剂的制备方法微球制剂的制备方法多种多样，常见的包括乳化法、溶剂挥发法、喷雾法和凝胶滴定法等。

1. 乳化法：通过将被包覆物（如药物）的溶液加入到乳液中，并加入表面活性剂和乳化剂，利用乳化剂的作用使药物分散在乳液中形成液滴，最终制备成微球制剂。

2. 溶剂挥发法：利用溶剂挥发的原理，将药物和壳材均溶于有机溶剂中，制备成微球制剂。

3. 喷雾法：将药物溶液通过喷雾器，形成非常细小的液滴，使药物颗粒在空气中快速干燥，形成微球制剂。

4. 凝胶滴定法：将药物溶液滴入含有交联剂的溶液中，交联剂会使溶液凝胶化，从而制备成微球制剂。

三、微球制剂的释放性能研究方法研究和评价微球制剂的释放性能需要使用一些常见的实验方法和测试手段，如体外释放试验、内外料流体力学、颗粒形态分析等。

1. 体外释放试验：将微球制剂与仿体液或模拟体液相接触，通过采集不同时间点上的溶液，测定被释放药物的浓度，进而评估微球制剂的释放性能。

2. 内外料流体力学：通过分析在微球制剂内外流体体系中的流速、压力等参数，揭示微球制剂释放性能的物理机制。

两性霉素B(专业知识值得参考借鉴)一概述两性霉素B（AmphotericinB）为多烯类抗真菌药物。

对本品敏感的真菌有新型隐球菌、皮炎芽生菌、组织胞浆菌、球孢子菌属、孢子丝菌属、念珠菌属等，部分曲菌属对本品耐药；皮肤和毛发癣菌则大多耐药。

本品对细菌、立克次体、病毒等无抗微生物活性。

常用治疗量所达到的药物浓度对真菌仅具抑菌作用。

二适应证用于隐球菌、球孢子菌、荚膜组织胞浆菌、芽生菌、孢子丝菌、念珠菌、毛霉、曲菌等引起的内脏或全身感染。

三临床应用1.静滴①从小剂量开始，一般按1、3、5、10mg递增，逐渐增加剂量到0.7mg（kg·d）。

开始剂量增加要慢，患者反应不明显时可适当加快增量速度。

②两性霉素B每次的剂量溶入500ml5％葡萄糖注射液中，6～8小时内滴完。

选择葡萄糖注射液在pH5.5，如低于pH5.3时主药稳定性下降，如pH低可用碳酸氢钠注射液调整其pH值。

③用药中患者反应明显时，可用小剂量糖皮质激素（如地塞米松1～2mg）拮抗。

④为预防寒战和高热可在用药前20～30分钟，直肠给消炎痛栓剂1/3（25mg）。

⑤两性霉素B对光不稳定，输液时应避光进行。

⑥用药过程中应监测肝肾功能、电解质。

⑦两性霉素B总量一般为2～3g。

2.雾化吸入适用于肺及支气管感染病例。

一日量5～10mg，溶于注射用水100～200ml中，分4次用；3.局部病灶注射浓度1～3mg/ml，3～7天用1次，必要时可加普鲁卡因注射液少量；对真菌性脓胸和关节炎，可局部抽脓后注入药5～10mg，每周1～3次。

四不良反应毒性较大，可有发热、寒战、头痛、食欲不振、恶心、呕吐等反应，静脉用药可引起血栓性静脉炎，鞘内注射可引起背部及下肢疼痛。

对肾脏有损害作用，可致蛋白尿、管型尿，定期检查发现尿素氮＞20mg％或肌酐＞3mg％时，应采取措施，停药或降低剂量。

尚有白细胞下降、贫血、血压下降或升高、肝损害、复视、周围神经炎、皮疹等反应。

试用期间可出现心率加快，甚至心室颤动，多与注入药液浓度过高、速度过快、用量过大，以及患者低血钾有关。

注射用两性霉素B以下内容仅供参考，请以药品包装盒中的说明书为准。

妊娠：B哺乳：L3注射用两性霉素B说明书【说明书修订日期】规格：5mg、50mg核准日期：2007年11月20日修改日期：2008年12月17日修改日期：2010年04月30日修改日期：2010年10月01日修改日期：2010年10月09日修改日期：2012年10月01日规格：25mg核准日期：2007年05月17日修改日期：2008年12月17日修改日期：2010年04月30日修改日期：2010年10月01日修改日期：2010年10月09日修改日期：2012年10月01日【药品名称】注射用两性霉素B【英文名称】Amphotericin Bfor Injection【汉语拼音】ZhusheyongLiangxingmeisu B【成份】本品主要成份为：两性霉素B。

辅料：脱氧胆酸钠、氢氧化钠、磷酸二氢钠。

【性状】本品为黄色至橙黄色疏松块状物或粉末。

【适应症】本品适用于敏感真菌所致的深部真菌感染且病情呈进行性发展者，如败血症、心内膜炎、脑膜炎(隐球菌及其他真菌)、腹腔感染(包括与透析相关者)、肺部感染、尿路感染和眼内炎等。

【规格】(1)5mg(5000单位)(2)25mg(2.5万单位)(3)50mg(5万单位)【用法用量】静脉用药：开始静脉滴注时先试以1-5mg或按体重一次0.02-0.1mg/kg给药，以后根据患者耐受情况每日或隔日增加5mg，当增至一次0.6-0.7mg/kg时即可暂停增加剂量，此为一般治疗量。

成人最高一日剂量不超过1mg/kg，每日或隔1-2日给药1次，累积总量1.5-3.0g，疗程1-3个月，也可长至6个月，视病情及疾病种类而定，对敏感真菌感染宜采用小剂量，即成人一次20-30mg，疗程仍宜长。

鞘内给药：首次0.05-0.1mg，以后渐增至每次0.5mg，最大量一次不超过1mg，每周给药2-3次，总量15mg左右。

复合bFGF缓释微球的制备与性能测定【关键词】，碱性成纤维细胞生长因子Preparation and characteristic test of bFGFimpregnated microsphere【Abstract】 AIM: To prepare the basic fibroblast growth factor (bFGF)impregnated microsphere and to study its characteristics. METHODS: The bFGFimpregnated microsphere was prepared by improved emulsified coldcondensation method. The physical properties， drug content and encapsulation were detected. The drug release in vitro was measured by ELISA. RESULTS: The average diameter of microsphere was (12.4±3.6)μm， the average drug content was 0.24% and encapsulation was 96.82%. In vitro， 28.23% of bFGF was sustainedreleased on the first day，57.19% from the second to the fifth day and 93.94% by the seventh day. CONCLUSION: The preparation method is simple， rapid and accurate and the release of bFGF from the microspheres can be sustained for a longer time.【Keywords】 basic fibroblast growth factor; microsphere; sustainedrelease; encapsulation【摘要】目的：制备复合碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的可降解缓释微球，考察其各项性能，为进一步应用于组织工程奠定基础. 方法：采用改良的乳化冷凝法交联制备复合bFGF的缓释微球，测定微球形态、粒径、载药率和包裹率等，并采用ELISA法考察其体外bFGF的缓释效能. 结果：缓释微球平均粒径(12.4±3.6) μm；平均载药率为0.24%，平均包裹率为96.82%. d 1体外释放28.23%，2~5 d时累积释放率达到57.19%， d 7时释放减慢且累计浓度为93.94%. 结论：复合bFGF的缓释微球制备工艺简便，性能优良；可在较长时间内持续释放活性bFGF，与组织工程支架的结合应用具有可行性.【关键词】碱性成纤维细胞生长因子；微球；缓释；包裹率0引言生长因子的应用一直是组织工程领域的重要课题之一. 它具有多种生物学活性，可提供有利于细胞生长的微环境，促进新生组织血管生成等［1］. 但由于生长因子半衰期短，溶液进入体内后迅速扩散、变性或酶解，难以保持其生物活性［2］. 我们制备复合碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor，bFGF)的缓释微球载体，并考察微球形态、粒径、载药率、包裹率及释放效果等性能，以期利用此种新型载体在较长时期内持续释放bFGF，为今后与组织工程支架的结合应用奠定基础.1材料和方法1.1材料明胶(等电点50，相对分子量99 000，华美生物工程公司)，人重组bFGF 溶液(25 mg/L，等电点9.6，Sigma公司)，人bFGF定量EIA试剂盒（QuantiKineR， R&Dsystems），250 g/L戊二醛，丙酮，异丙醇，无水乙醚，液体石蜡，氨基乙酸为国产分析纯，Span80(Sigma公司)为进E1分析纯，水为双蒸水，JJ1型精确电子搅拌器仪，TGL16G高速离心机，GENESIS冻干机(Virtis公司)，BX41数码显微镜（Olympus).1.2方法1.2.1复合生长因子微球的制备将含有10 g/L Span80的液体石蜡30 mL 置于三口瓶中预热至55℃，快速搅拌下滴加入同样温度的明胶水溶液4 mL，并调节搅拌速度至450 r/min，继续搅拌10 min；形成油包水乳剂后迅速改冰浴，继续搅拌10 min，使其完成固化；加入250 g/L戊二醛0.1 mL，搅拌下预固化2 h，4℃固化24 h，用适量丙酮、异丙醇、乙醚洗涤，挥去乙醚，真空干燥，得淡黄色粉末状微球，将200 μL的bFGF溶液滴加在20 mg的冻干明胶微球上，在室温下保持30 min以使bFGF完全融入微球. 钴60照射灭菌封存. 以丙酮为分散剂将空白微球样本及含有bFGF的微球样本置于光镜下，观察其外形及分散度. 同时测量500个微球的直径计算其平均粒径. 以算术平均径为微球的平均粒径，计算公式为：平均粒径=n1d1+n2d2+…+nndn/n1+n2+n3+…+nn式中n1，n2…nn为粒子数，d1，d2…dn为粒径.1.2.2微球含量及缓释性能测定根据人bFGF定量EIA试剂盒说明书配置标准液，在492 nm处测各孔A值. 以标准品0，8，16，31，62，125，250和500 ng/L之A值作出标准曲线并拟合线形回归方程. 取微球样品20 mg，放入PBS缓冲液中，加热至完全溶解，冷却后再用缓冲液稀释定容. 测出A492 nm值，然后在标准曲线上查处相应bFGF含量，并由此计算出微球的载药率以及标准率. 载药率=（bFGF质量/缓释微球质量）×100%. 包裹率=（bFGF质量/缓释微球中bFGF理论质量）×100%. 取缓释微球(2 mg)，用PBS缓冲液100 mL作为溶出介质. 药物体外溶出仪的温度保持在(37.0±0.5)℃．磁力搅拌转速100 r／min. 分别于各时间点(1，2，3，4，5，6，7 d)取样100 μL. 每次取样后，立即补充同温度的PBS缓冲液100 μL. 按1~7 d顺序，将稀释10倍的样品，分别加入微孔板7个孔中，每孔加样50 μL并同时加入样品稀释液各50 μL. 将反应板充分混匀后置37℃ 120 min. 用洗涤液将反应板充分洗涤4~6次，向滤纸上印干. 每孔加入第一抗体工作液50 μL，将反应板置37℃ 60 min. 洗板，并在每孔中加入酶标抗体工作液100 μL.将反应板放置于37℃ 60 min. 洗板后加入底物工作液100 μL，置37℃暗处反应10 min. 每孔中加入一滴终止液，混匀. 在A492 nm处测各孔值.根据A值在标准曲线上查出相应bFGF含量.2结果2.1缓释微球的形态和粒径空白缓释微球呈圆球状，形态及粒径大小较均匀（Fig 1A）；复合有bFGF的缓释微球经溶涨体积变大，形态饱满(Fig 1B). 微球粒径7~20 (12.4±3.6) μm，占85.6%.2.2bFGF标准曲线在492 nm处测各孔A值，由此绘制标准曲线（Fig 2）并拟合线性回归方程为： A=0.0042C+0.0154，r=0.9996 （P<0.001），bFGF在0~500 ng/L范围内符合线性关系.2.3缓释微球中bFGF的含量在492 nm处测定得A值，根据回归方程计算出相应bFGF含量. 缓释微球中bFGF质量为4.841 μg，由此得出微球平均载药率为0.24%，平均包裹率为96.82%（n=5）.2.4缓释微球体外溶出度测定由缓释微球体外释放样品各个时间点的A值得出的bFGF浓度，并由此绘制出微球体外累积释放量曲线（Fig 3）.A: Blank; B: bFGFimpregnated.3讨论bFGF是一类具有较高活性的多聚肽，对多种中胚层和神经外胚层来源的细胞具有广泛的生物学活性，可改变一些细胞的趋化性，诱导或抑制特殊蛋白质的合成或分泌［3］. 但由于这种多功能细胞因子半衰期短，易失去活性，应用效果不甚理想. 我们设计的缓释微球可缓释药物、靶向输送、保证药物的治疗作用的前提下减少给药剂量以及降低药物毒性等［4］. 通过含量测定，缓释微球对bFGF的包裹率可达96.82%. 体外证实，复合bFGF缓释微球在7 d内对上皮细胞仍有促进增殖活性［5］. bFGF的累积释放量呈缓慢上升趋势， d 1累积释放率为28.23%，不存在初始阶段的“突释”现象［6］；2~5 d，累积释放量率57.19%，克服了部分同类产品释放药物时初期浓度过大，短期内又迅速降低现象;到7 d时，累积释放率达到93.94%，虽然释放速率减慢，但体外仍有bFGF生物活性.本实验对缓释载体的研制尚处于实验室阶段，但由于此种缓释微球性能优良，可以根据组织工程化产品应用的不同需要，生产出包裹其他药物的缓释微球，也可同时包裹几种生长因子发挥联合调控的作用. 本设计工艺简便，能较长时间持续释放活性生长因子，在组织工程研究领域具有广阔的应用前景.【参考文献】［1］ Richardson TP，Peters MC．Polymeric system for dual growth factor delivery［J］．Nat Biotechnol， 2001;19(9)：1029-1034.［2］ Kawai K，Suzuki S，Tabata Y，et al. Accelerated tissue regeneration through incorporation of basic fibroblast growth factorimpregnated gelatin microspheres into artificial dermis ［J］. Biomaterial，2000;21：489-499.［3］ Kinsella L，Chen HL，Smith JA，et al．Interactions of putative heparinbinding domains of basic fibroblast growth factor and its receptor，FGFR1，with heparin using synthetic peptides［J］．Glycoconj J，1998；15：419-422．［4］ Maysinger D， Krieglstein K， Filipovic J，et al．Microencapsulated ciliary neurotrophic factor：Physical properties and biological activities［J］． Exp Neurol， 1996；138：177-l88．［5］黄沙，金岩，吴红. 制备复合生长因子的缓释微球并考察其对细胞的影响［J］. 上海生物医学工程，2004；25（4）：22-25.Huang S， Jin Y， Wu H. Preparation and cell effect test of bFGFimpregnanted microspheres［J］. Shanghai Biomed Eng，2004；25（4）：22-25.［6］ Edelman ER，Mathiowitz E， langer R， et al. Controlled and modulated release of basic fibroblast growth factor［J］．Biomaterial，1991；12:619-626.。