p_5HRE_AFPp_p53__省略_合磁流体热疗对肝癌细胞的抑制作用_赵成桂

第5期周海斌，等:新型冠状病毒肺炎疫情期间大型综合医院ERCP感染防控现状与策略485除后方可入院，本次研究时限内（1个月）观察效果可靠。

患者入院期间的各环节人员限制措施,可以有效做到隔离⑷，同时地面及空气消毒对防止疫情传播有着很好的作用［7］，本次研究时限内（1个月）观察效果可靠%本次研究发现,ERCP执行次数较既往明显减少,而急诊ERCP的成功率、并发症率等与既往研究类同）8.0*，高难度ERCP如常进行,并未受疫情影响，说明疫情防控措施到位可保证ERCP技术水平稳定,在研究时限内（1个月）观察效果可靠％心理管理在疫情控制中同样重要％患者对医院做出的各项措施配合良好，对各环节的顺利实施起到重要作用％本文是对新冠肺炎疫情突发后,我科执行疫情期间ERCPX作的回顾性阐述，研究时间短，患者后续回访不足,后续将持续改进方案,以确保防疫工作的顺利开展％参考文献：）1*POTHOULAKIS I,PARAGOMI P,ARCHIBUGI L,a al.Clinicalfeaturac of hypertriglyceridemic-induced acuta pancrealtis in an ic-ternationaO,multicentae,prospective cohort(apprentice consortium) )J*.Pancreatology,2020,20(3):325-330.)2*张波，秦瑾，刘运喜.医疗机构《软式内镜清洗消毒技术规范》实施解疑)J* •中华医院感染学杂志,2018,28(9)：1432-1435.)3*刘运喜，邢玉斌,索继江，等.《软式内镜清洗消毒技术规范》解读与释义)J* •中华医院感染学杂志,2017,27(16):3612-3615. )4*刘运喜，邢玉斌,巩玉秀•软式内镜清洗消毒技术规范WS507­2016)J*•中国感染控制杂志,2017,16(6)：587-592.)5*SHI H S,HAN X Y,JIANG NC,et at.Radiologicai findinyc from81 patients with COVIB-19pneumonic in Wuhan,China：a descriptive study)J*.Lancet InfeC Dis,2020,20(4)：425-434.)6*HELLEWELL J,ABBOTT S,GIMMA A,et at.Feasibility of controi-liny COVIB-19outbreaks by isolation of cases and contacts)J*.The LanceiG.oba.Hea.ih,2020,8(4)：488-496))7*XIBNG S W0,KIMT Y,CHIB P Y,ei al.Air,surfacc environmen­tal,and personal protective equipment contamination by severe acute respiratora syndrome coronavirus-2(SARS-CoV-2)from a symptom­atic patieni)J*.JAMA,2020,28(6)：1690-1698.)8*李国熊，张啸.ERCP并发症及防治对策)J* •中国内镜杂志，2005,11(8)：824-827.)9*李兆申，许国铭,孙振兴，等•诊断性与治疗性ERCP早期并发症与处理)J* •中华消化内镜杂志,2002,19(2)：77-80.)10*张东海，李兆申•中国ERCP的常见并发症及防治研究进展)J* •中国内镜杂志,2002,8(1)：32-35.丛羽生教授团队研究成果揭示肿瘤抑制因子p53生物学功能调控新机制2020年8月17日，杭州师范大学医学院、浙江省衰老与癌变生物学重｛实验室丛羽生教授团队在Nature Ce#lio.gy在线发表了题为"UFMylation maintaine tumgs suppressor p53stability by antayoniziny iie ubiquitination"的研究论文（Rtpswww.nature.jos^aticles/s41556-020-0559-z）。

门静脉癌栓是原发性肝癌重要生物 学行为
在影像设备引导下瘤体局部注射rAdP53，rAd-P53蛋白在肿瘤细胞核内表 达，2－3天达到高峰，吸引T淋巴细胞等肿 瘤杀伤性细胞聚积在瘤组织，通过直接的靶 向rAd-P53对肿瘤细胞进行杀伤，同时导 致细胞周期G2/ M 期阻滞和诱导凋亡和细 胞增殖生长抑制，
谢谢
其它治疗手段都有局限性，临床疗效有待 于进一步提高。PVTT随着分子生物学、免 疫学理论和基因转移技术的发展及对肿瘤发 病机制的深入认识，基因治疗给肝癌、门静 脉癌栓治疗开辟了新的途径。
门静脉癌栓是原发性肝癌重要生物 学行为
基因治疗是利用基因制品在肿瘤细胞内产生 目的蛋白质或多肽，发挥特异性生物治疗作 用，更加接近医学科学所期望达到的最高目 标。P53基因具有上调多种抗癌基因和下调 多种癌基因的活性，并抑制血管内皮生长因 子（VEGF）和药物多抗性（MDR）基因 表达作用。
基于上述理论，我院在肝动脉灌注化疗栓塞 （TACE）治疗基础上，超声引导下局部注 射rAd-P53，经皮肝门静脉瘤体穿刺序贯 注射P53和化疗药物栓塞治疗原发性肝癌门 静脉癌栓，取得较好疗效，现总结如下：
临床资料

1.1 一般资料 本组18例病例，男14例，女4例。年龄 36~55(平均年龄41)岁。全部患者乙型 肝炎表面抗原(HBsAg)均为阳性，血清 甲胎蛋白>4 000ng/ml 5例,400~4 000ng/ml 3例,>20~399ng/m8例。 肝功能Child分级:A级11例, B级5例。

门静脉癌栓是原发性肝癌重要生物 学行为
目前，文献中有手术切除、TACE、放 疗、高强度聚焦超声、局部药物注射等治疗 手段。临床表明若能手术切除肿瘤并取出癌 栓者生存期明显延长。但是，门静脉癌栓的 出现通常被视为肿瘤晚期，术中取栓这一方 法并不适用于临床上占绝大多数明确诊断的 非手术患者。

热疗对人肝癌HepG2细胞凋亡的影响李素杰;周瑾;王海松;马胜辉【摘要】@@ 原发性肝癌是我国常见恶性肿瘤之一,在各种恶性肿瘤的死亡顺序中居第二位,每年死亡20多万人,约占世界肝癌死亡人数的一半以上[1].恶性肿瘤的发生、发展的过程,是细胞的过度增殖和细胞凋亡受到抑制的过程[2].诱导细胞凋亡已成为治疗肿瘤的一个新热点.应用加热治疗肿瘤早已被临床所接受,但加热对肝癌HepG2细胞凋亡的影响未见报道.为此,我们以肝癌HepG2细胞为模型,观察不同加热时间对肝癌HepG2细胞凋亡的影响.【期刊名称】《承德医学院学报》【年(卷),期】2010(027)004【总页数】2页(P446-447)【关键词】肝癌;原发性;细胞凋亡;加热治疗;影响【作者】李素杰;周瑾;王海松;马胜辉【作者单位】承德医学院临床医学系2007级,河北承德,067000;承德市中心医院肿瘤外科【正文语种】中文【中图分类】R454.5原发性肝癌是我国常见恶性肿瘤之一，在各种恶性肿瘤的死亡顺序中居第二位，每年死亡20多万人，约占世界肝癌死亡人数的一半以上[1]。

恶性肿瘤的发生、发展的过程，是细胞的过度增殖和细胞凋亡受到抑制的过程[2]。

诱导细胞凋亡已成为治疗肿瘤的一个新热点。

应用加热治疗肿瘤早已被临床所接受，但加热对肝癌HepG2细胞凋亡的影响未见报道。

为此，我们以肝癌HepG2细胞为模型，观察不同加热时间对肝癌HepG2细胞凋亡的影响。

1 材料与方法1.1 细胞与培养人肝癌细胞株HepG2:购自南京凯基生物科技有限公司，为单层贴壁生长。

培养液为RPMI1640培养基(GIBCO公司产品），内含10%新生牛血清，100u/ml青霉素，100μg/ml链霉素。

将HepG2细胞置于37℃，5%CO2培养箱内培养至指数生长期进行实验，隔2-3d传代一次，细胞消化液为0.25%的胰酶。

1.2 细胞处理及分组取生长状态良好的HepG2细胞若干瓶，采用随机对照原则分为对照组和实验组。

文章编号
１ｏ ０ ８ （ ０ １ ０ ０ １ ０ ０ ４— １８ ２ １ ）２— ２ ４— ３
ｄ ｉ１．９ ９ ｊｉ ｎ １０ ０ ８ ．０ １０ ．４ ｏ：０ ３ ６／．ｓ ．０ ４． １８ ２ １．２ ０４ ｓ
近年来随着对肝癌的照射 方法和范围的改进 ， 由全肝照
滞和凋亡 ， ０ ３基 因变 异将 失去这 种功 能 ， 是产生 肿瘤 而５ 这 细胞放射不敏感以致抵抗 的重要 原因。这一观 点通过 转染
肿瘤细胞受到放射线照射后能够直接引起 细胞 Ｄ Ａ双链损 Ｎ
伤 （ Ｓ ） 随后 ， ＤＢ ， 共济失调性 毛细管扩 张症突变 基 因（ Ｔ Ａ Ｍ）
基 因 ４个 突 变 位 点 发 现 １３ 突 变 点 对 射 线 敏 感 ， １３ ２Ａ 而 ４ Ａ， １５ 和 ２ ３ ７Ｈ ７ Ｈ对 射 线 不 敏 感 ， 因此 认 为 肿瘤 射 线 敏感 性 依 赖 ｐ３基 因 突变 位 点 。 ５
３ ｐ ３在放 疗诱 导Hale Waihona Puke 瘤 细胞 凋 亡 中 的作 用 ５
・
２４・ １
西南 国防医药 ２ １ 年 ２月第 ２ 卷 第 ２期 ０１ １
综 述 ・ 座 讲
ｐ ３基 因 与 原 发 性 肝 癌 放 疗 关 系 研 究 进 展 ５
刘 明玉 ， 继军 （ 郑 综述 ） 肖华 亮 （ 阅） ， 审
［ 关键词】 ｐ３ 原发性肝癌 ； ５； 放疗
中图 分 类 号 Ｒ７ ５ ７ ３ ． 文献标识码 Ａ
ｐ３基因 ， 建肿 瘤细胞 内变 异 ｐ３基 因功能 ， ５ 重 ５ 使肿 瘤细 胞
放射敏感性 明显提 高被证实 。细胞经射线 照射后会 有多 条 通路维持细胞遗传完整性 ， 细胞周期调控是 决定放射敏感 性

肝癌组织GPC3通过活化YAP抑制p53的表达王坪锋;李雪洁;李莹;严世荣;胡培【期刊名称】《湖北医药学院学报》【年(卷),期】2022(41)6【摘要】目的:探讨肝癌组织GPC3与p53的相关性及调节机制。

方法:从湖北医药学院附属太和医院收集肝癌组织标本38例,免疫组化分别检测癌组织与癌旁组织GPC3与p53的表达;体外培养肝癌Huh7细胞,分别转染GPC3过表达质粒和siRNA后,real-time PCR、western blotting、免疫荧光检测p53与YAP的表达;干扰YAP的表达后,western blotting与免疫荧光检测p53的表达;Huh7细胞同时转染GPC3过表达质粒和靶向YAP的siRNA,western blotting检测p53的表达。

结果:肝癌组织GPC3的表达与p53的表达存在显著负相关,Huh7细胞过表达GPC3下调p53的表达,干扰GPC3的表达则相反,但不改变p53的mRNA水平;干扰YAP蛋白则显著上调p53的表达,并减轻GPC3对p53的下调作用。

结论:肝癌组织GPC3通过活化YAP蛋白抑制p53的表达。

【总页数】6页(P565-568)【作者】王坪锋;李雪洁;李莹;严世荣;胡培【作者单位】湖北医药学院生物医学工程学院;湖北医药学院附属太和医院检验科【正文语种】中文【中图分类】R73【相关文献】1.小片段干扰 RNA 抑制人肝癌细胞株中YAP 基因表达的研究2.B细胞非霍奇金淋巴瘤组织中YAP1和P53的表达及意义3.B细胞非霍奇金淋巴瘤组织中YAP1和P53的表达及意义4.肝癌分化程度与肝脏CT强化特点及CD34、p53、GPC3、CK19、Ki-67表达的关系5.抑制YAP对宫颈癌细胞增殖、凋亡、迁移及p53、Fra-1表达的影响因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

血清P53抗体与原发性肝癌P53基因治疗效果的相关性分析史守良;吴会静;胡万宁;韩敏利;马龙滨;陈宝明【期刊名称】《现代中西医结合杂志》【年(卷),期】2012(021)006【摘要】目的观察原发性肝癌患者血清P53抗体与P53基因治疗效果的相关性,并探讨P53基因治疗后血清P53抗体与肿瘤标志物、肝功能水平、肝内肿瘤情况以及Child-Pugh评分的关系,为原发性肝癌的P53基因治疗提供合理的依据.方法40例原发性肝癌患者均给予速溶表柔比星+今又生处理,分析行TACE半年后血清P53抗体水平与P53基因治疗效果以及具体指标的相关性.结果①术后半年的低Child-Pugh评分组、低水平肿瘤标志组、高肝功能组的血清P53抗体水平高于相对应组,且具有统计学差异(P<0.05或0 01);②不同肝内肿瘤个数的血清P53抗体水平比较无显著性差异,但小肿瘤组的血清P53抗体水平高于大肿瘤组(P<0.01);③血清P53抗体水平与AFP、CEA、AST/ALT、GGT/ALT呈显著负相关.结论采用P53基因治疗药物今又生治疗原发性肝癌效果显著,且血清P53抗体水平与治疗后的各项指标具有相关性,可进行治疗效果的评价和预测.【总页数】3页(P573-575)【作者】史守良;吴会静;胡万宁;韩敏利;马龙滨;陈宝明【作者单位】河北省唐山市人民医院,河北,唐山,063000;河北省唐山市人民医院,河北,唐山,063000;河北省唐山市人民医院,河北,唐山,063000;河北省唐山市人民医院,河北,唐山,063000;河北省唐山市人民医院,河北,唐山,063000;河北省唐山市人民医院,河北,唐山,063000【正文语种】中文【中图分类】R735.7【相关文献】1.血清P53抗体与原发性肝癌临床特征的关系 [J], 张英平;田晓林;潘肃2.P53基因及其相关抗体在原发性肝癌中的研究进展 [J], 梁焕3.原发性肝癌患者血清p53抗体和甲胎蛋白与临床特征的关系 [J], 李洪庆;武俊芳;杨廷桐;张艳芳;李磊;刘中文4.血清P53抗体与原发性肝癌病理分化程度的相关性研究 [J], 拉孜;官泳松;次白5.孕期血清脂蛋白、p53基因表达与小于胎龄儿早期生长受限的相关性分析 [J], 周训玺;彭敏;王莹;徐泽荣;孙国强因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

分类号R735.7 密级公开学号1002010153学校代码 90031博士学位论文APE1激活突变型p53及其在肝癌放疗抵抗中的协同作用∗寸艳萍指导教师王 东 教授导师组成员王东 仲召阳 杨雪琴培养单位第三军医大学第三附属医院肿瘤科申请学位类别博士学术学位 专业名称肿瘤学论文提交日期2013年5月论文答辩日期2013年5月答辩委员会主席丁彦青评阅人朱波 王东林 张贺龙 毕锋 伍钢二〇一三年五月∗本课题受国家自然科学基金（No.30872975）资助。

目录缩略语表 (1)英文摘要 (3)中文摘要 (8)论文正文APE1激活突变型p53及其在肝癌放疗抵抗中的协同作用 (13)第一章前言 (13)第二章 mtp53癌基因特性及其与肝癌放疗敏感性的关系 (16)2.1 材料与方法 (16)2.2 结 果 (29)2.3 讨 论 (35)第三章APE1在mtp53肝癌细胞株放射治疗中的作用 (38)3.1 材料与方法 (38)3.2 结 果 (44)3.3 讨 论 (51)第四章APE1对mtp53 R249S作用的机制研究 (53)4.1 材料与方法 (53)4.2 结 果 (58)4.3 讨 论 (65)第五章 Ad5/F35-APE1siRNA增强mtp53肝癌放疗敏感性的动物实验研究 (69)5.1 材料与方法 (69)5.2 结 果 (73)5.3 讨 论 (80)全文结论 (82)参考文献 (83)文献综述 (90)研究生期间发表论文情况 (105)致谢 (106)缩略语表英文缩写 英文全称 中文全称AI Apoptosis index凋亡指数 APE1Apurinic apyrimidinic endonuclease 脱嘌呤脱嘧啶核酸内切酶 BERBase excision repair 碱基切除修复 BSABovine serum albumin 牛血清白蛋白 cDNA complementaryDNA 互补DNA DAB Diaminobenzidine二氨基联苯胺 DMSO Dimethylsulfoxide 二甲基亚砜 DNA Deoxyribonucleicacid 脱氧核糖核苷酸 DTT Dithiothreitol二硫苏糖醇 EDTAEthylene dianinetraccetic acid 乙二胺四乙酸 EGFPEnhance Green Fluorescent Protein 加强绿色荧光蛋白 EMSA ElectrophoreticMobility Shift Assay 凝胶电泳迁移实验 FCM Flowcytometry 流式细胞分析 FCSFetal calf serum 胎牛血清 FITC Fluoresceinisothiocyanate 异硫氰酸荧光素 h hour小时 HCC hepatocellularcarcinoma 肝细胞肝癌 HRP Horseradishperoxidase 辣根过氧化酶 IR IonizingRadiation 电离辐射 KD Kilo-doltons千道尔顿 LB Luria-bertaniLB 培养基 min Minute分钟 MOI multiplicityof infection 效靶比 MTT 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl-2H-tetrazoliumbromide 3-(4，5-二甲基噻唑-2)-2，5-二苯基四氮唑嗅盐 NP-40 NonidetP-40 非离子型去污剂OD Opticaldensity 光密度PBS Phosphate buffered saline 磷酸盐缓冲液PCR polymerase chain reaction 聚合酶链式反应PFA Polyformaldehydum 多聚甲醛PI Propidiumiodide 碘化丙锭acid 核糖核酸RNA Ribonucleicminute 转/分rpm revolutionsperSDS sodium dodecyl sulphate 十二烷基硫酸钠sec second 秒siRNA Small interfering RNA 小干扰RNATEMED tetramethylethylenediamine 四甲基乙二胺TUNEL TdT-mediated biotin-dUTP nick-endTdT介导dUTP缺口末端标记labellingμl Microlitre 微升APE1 activates mutant p53 and its role in radioresistanceof hepatocellular carcinomaAbstractHepatocellular carcinoma (HCC) is one of the most common malignant diseases with 600,000 new cases reported each year worldwide, and more than 50% of the new HCC cases and deaths have occurred in China. Although aggressive surgery offers significant rates of cure, only 15% of patients are eligible for optimal resection at diagnosis. The efficacy of chemotherapy and radiotherapy for HCC remain disappointing. Radiotherapy represents a major therapeutic option for HCC patients, but the efficacy of this therapy is limited by intrinsic radioresistance of the tumor cells. Ionizing radiation (IR) can result in lethal cell damage, which is correlated with DNA damage induction and repair. The activity of the DNA damage repair pathway is the major factor leading to radioresistance in tumors, including hepatoma. DNA-repair systems play an important role in protecting the genomic stabilization and integrity. However, an elevated DNA repair capacity in tumor cells is associated with drug or radiation resistance.The human apurinic/apyrimidinic endonuclease (here-after, APE1) is a key enzyme in the DNA base excision repair (BER) pathway, which plays a critical role in repairing DNA damaged by irradiation. In addition to its DNA repair function, APE1 maintains a number of transcriptional factors including p53 by both redox-dependent and -independent mechanisms in their reduced and active state, thereby regulating their DNA-binding activity, influencing gene expression and maintaining genomic stability. As known that, the p53 gene is mutated in approximately 50% of hepatoma cells. In our previous study, we found APE1 high expression was associated with mutp53 status. The inhibition rate of Ad5/F35-APE1 siRNA+Ad5- wtp53+IR group was higher than that of Ad5-wtp53+IR group. These suggest that APE1 acts with mtp53 to regulate the radioresistance of HCC. APE1 can enhance the DNA-binding activity of wtp53 by redox-dependent and independent mechanisms. Moreover, the redox–independent activation of wtp53 is due to a regulatory interaction of APE1 with thep53 C-terminal regulatory domain (CRD), which is intact in most of the frequently encountered mutp53 proteins, containing the most common R249S mutation in HCC. In this study, we detect the impact of APE1 regulation on mtp53 and the possible mechanism to elucidate the mechanisms of HCC radioresistance and provide new evidences for HCC therapyObjective1.To investigate the “gain of function” oncogenic effect of mtp53 and explore its correlation with radiosensitivity of HCC in vitro;2.To investigate the inhibitory effects of Ad5/F35-APE1 siRNA combined with radiotherapy on human HCC cells in vitro.3.To investigate the mechanism of regulatory role of APE1 on mtp53;4.To investigate the inhibitory impacts of Ad5/F35-APE1 siRNA combined with radiotherapy on HCC xenografts with p53 mutation.Materials and Methods1.The oncogenic effect of mtp53 and its correlation with radiosensitivity of HCC: The radiosensitivity of human HCC cell lines with different p53 status (HepG2, wtp53; Hep3B, p53-/-; MHCC97L,mtp53) was detected by MTT assay, colony formation assay and flow cytometry analysis; Hep3B was infected with pCMV-wtp53 or pCMV-mtp53 R249S, then the radiosensitivity was also detected.2.The regulation effects of APE1 on mtp53 R249S: The human HCC HepG2, Hep3B and MHCC97L cells were infected with Ad5/F35-APE1 siRNA or Ad5/F35-EGFP, then the radiosensitivity was detected by MTT assay, colony formation assay and flow cytometry analysis; Meanwhile, Western Blot and qRT-PCR were used to detect APE1、P53 and P21 protein and mRNA expression.3.The mechanism of regulatory role of APE1 on mtp53: The p53 response element of the p21Waf1-promoter (p53-RE) was prepared either in its linear form or in a stem loop conformation. EMSA was used to detect the DNA binding activity of latent and reduced mtp53 R249Son P53RE-Iine and p53RE-structure; Chromatin immunoprecipitation (ChIP) assays were performed to analyze the DNA binding affinity of p53 to the p21 promoter region of its downstream genes.4.Study of inhibitory impacts of Ad5/F35-APE1 siRNA combined with radiotherapy on HCC xenografts with p53 mutation: Nude mice hepatocarcinoma xenograft model was established by using human HCC HepG2 and MHCC97L cell lines. There are four groups: Ad5/F35-EGFP control group, Ad5/F35-APE1 siRNA group, Ad5/F35-EGFP+IR group and Ad5/F35-APE1 siRNA+IR group. We measured the tumor volumes and plotted the tumor growth curves. The tumor growth inhibition ratio was observed by Ki-67 immunohisto- chemistry. Apoptosis index was detected by using TUNEL.Results1.The oncogenic effect of mtp53 and its correlation with radiosensitivity of HCC: HepG2、Hep3B and MHCC97L cells were irradiated with different doses of X ray, and then the radiosensitivity was detected. After irradiation, the cell survival and colony formation rate was decreased , and tumor cells apoptosis was increased in a dose-dependent manner; at same dose of X ray, the cell survival and colony formation rate of MHCC97L was higher than that of HepG2 and Hep3B cells, and the apoptosis rate of MHCC97L was lower than two cell lines；the cell survival and colony formation rate of Hep3B was higher than that of HepG2 at the same dose of radiation.Hep3B were infected with pCMV-wtp53 and pCMV-mtp53, and then irradiated with X ray. The cell survival and colony formation rate was decreased, and tumor cells apoptosis was increased in a dose-dependent manner; at the same dose of X ray, the cell survival and colony formation rate was pCMV-mtp53 group>non-infection group>pCMV-wtp53 group, and apoptosis rate was pCMV-wtp53 group> non-infection group > pCMV-mtp53 group.2.The regulation effects of APE1 on mtp53 R249S:HepG2、Hep3B and MHCC97L were infected with Ad5/F35-APE1 siRNA or Ad5/F35-EGFP; and then irradiated with X ray. The cell survival and colony formation rate decreased, apoptosis rate increased in a dose-dependent manner after irradiation. At the same dose of irradiation, the cell survival and colony formation rate in Ad5/F35-APE1 siRNA group was much higher, and the apoptosis rate was lower, compared with Ad5/F35-EGFP group.After irradiation, the expression of APE1 protein increased in a dose-dependent manner, and reached the highest level at 6 Gee dose. HepG2 and MHCC97L cells were infected withAd5/F35-APE1 siRNA or Ad5/F35-EGFP, and irradiated with 6 Gy X-ray. Western Blot was performed to detect the protein expression of APE1、P53 and P21. Ad5/F35-APE1 siRNA could inhibit irradiation-induced APE1 expression in both HepG2 and MHCC97L cells. Ad5/F35-APE1 siRNA also suppressed irradiation-induced WTP53 and P21 protein expressions in HepG2 cells. Silencing of APE1 inhibited irradiation-induced MTP53 protein expression in MHCC97L cells, but no P21 protein was found.3.The mechanism of regulatory role of APE1 on mtp53:Reduced wtp53 bound effectively to p53RE-line and p53RE-structure, but reduced mtp53 bound to nonlinear DNA, not to linear DNA. APE1 stimulated wtp53 DNA binding to linear and nonlinear DNA, and promoted mutant p53 DNA binding to nonlinear DNA.WTAPE1 enhanced the p21 DNA activity, p21 mRNA and protein expression in HepG2 cells, whereas Ad5/F35-APE1 siRNA inhibited them. WTAPE1 could enhance p21 DNA activity in MHCC97L cells, but not p21 mRNA and protein expression; Knowdown of APE1 suppressed the p21 DNA binding activity, but not p21 mRNA and protein expression.4.Study of inhibitory impacts of Ad5/F35-APE1 siRNA combined with radiotherapy on HCC xenografts with p53 mutation: The tumor growth inhibition ratio and apoptosis index in Ad5/F35-APE1 siRNA+IR group were significantly higher, compared with the Ad5/F35- EGFP control group, Ad5/F35-APE1 siRNA group and Ad5/F35-EGFP+IR group. There was no significant difference of the tumor growth inhibition ratio and apoptosis index in Ad5/F35- APE1 siRNA group and Ad5/F35-EGFP+IR group, but it was higher than in control group.Conclusion1.The radiosensitivity of human HCC cell lines was HepG2>Hep3B>MHCC97L; After infection with pCMV-wtp53 and pCMV-mtp53 in Hep3B cells, the radiosensitivity was pCMV-wtp53 > non-infection group > pCMV-mtp53 group. These results indicated that mtp53 was related to radioresistance of HCC.2.Ad5/F35-APE1 siRNA can enhance the radiosensitivity of HCC cell lines; APE1 may act with Mtp53 protein, activate the p53 down scream gene, but not p21 gene, exert the cooperative effect on radioresistance of HCC.3.Reduced Mtp53 bound strongly and specifically to nonlinear DNA; APE1 stimulated mutant p53 DNA binding to nonlinear DNA.4.The combination of Ad5/F35-APE1 siRNA and radiotherapy can significantly inhibit the growth of HCC cells, and promote apoptosis of tumor cells. Therefore, combine gene therapy targeting APE1 with radiotherapy may be a promising new approach for treatment of unresectable HCC in the future.Keywords: Hepatocellular carcinoma; apurinic/apyrimidinic endonuclease; wild-type p53; mutant p53; radiotherapy; gene therapy; DNA damage and repair; radiosensitivity; radioresistantAPE1激活突变型p53及其在肝癌放疗抵抗中的协同作用∗摘要肝癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一，每年有600,000新发病例，并且超过50%的新发病例和死亡发生在中国。

Ｍ ｅ ｈｏ ｓ ｈ ｏ ｉｅ ａｉ ｎ ｏ ｐＧ一 ｅ ｌ ｓ ｄ ｔ ｒ ｎ ｄ ｂ ｔ ｄ Ｔ ｅ Ｐｒ ｌ ｒ ｔｏ ｆＨｅ ｆ ２ ｃ ｌ ｗａ ｅ ｅ ｍｉ ｅ ｙ ＭＴＹ ａ ｓ ｆ ｒａ ｍｉ ｉｔａ ｉ ｎ ｗｉｈ ｓ ｒｆ ｎ ｂ ａｏ ｅ ｙ ｅ ｔ ｅ ｍｉ ｌ ｎ ｒ ｓ ｒ ｅ ｉ ｎ ｓ ｓ ｙ ａ ｔ ｄ ｎ ｓｒ ｔ ｔ ｏ ａ ｅ ｉ ｌ ｎ ，ｈ ｐ ｒｈ ｒ ａ ａｏ ｅ ｏ ｏ ａ ｎ ｂ ｉ ｅ ｏ ｆ
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编辑／ 杜苏利
索拉非尼联 合热疗不 同联合方案对肝癌 Ｈｅ Ｇ－ 细胞增殖抑 制的影响 ｐ ２
丁 素银 ， 肖广显 ， 素静 ， 英俊 丁 程

然而 ， 由于肝供体 的获取较难以及移植后肝的复发
转移 ， 使得肝移植仅适合于肝 内有少于 ３ 个可见小 病灶 的病人 ； 巨大的肿块也不能行外 科手术 ， 因为 有可能会造成肝衰竭及高危险性的转移 ； 经导管肝 动脉栓塞术 （Ａ Ｅ 、 Ｔ Ｃ ． 经皮穿刺肝 内无水 乙醇注射 ） 以及射频治疗 已经被证 明并 不能改善 病人 的中位
维普资讯
国外医学临床放射学分册 Ｆｒｇ ｅｉ ｌ ｃ ｎｅ Ｃｉｃ ａｉｏｉ ｌ ａ ｉｅ２０ ａ；０（ ：８６ ｏ ｉ Ｍ ｄ ａ Ｓｉ ｃｓ ｌ ｉ Ｒ ｄ ｌ ｃ ｓ ｃ ０７Ｊｎ３ １ ５－０ ｅｎ ｃ ｅ ｎ ａ ｌ ｏ ｇａ Ｆ ｃｌ ）
反应 为 Ｉ Ⅱ度发 热（９ 、 战（３ ， ／ ７％）寒 ５％）注射部位
疼痛 ， 未能检测到最大耐受量嗍 。
重组 人 ｐ ３ 病毒的应 用并没有像许多研究 ５腺 者想像 的那样安全 。Ｇ ｒ ａ ｉ 指出， ｅ ｌｎ 等阎 ｏｒ 腺病毒的注 射能导致病毒颗粒及转导细胞强烈 的免疫反应 ， 释
生存期。最近的体内体外试验均表 明， 因治疗有 基 可能成为肝癌综合治疗的重要组成部分。基因治疗 的关键在于其有效的靶 向性和转染性。试验及临床 证实［腺病毒介导的 ｐ ３ 因有很高 的转染率 ， １ 】 ， ５基 而 且给药途径不 同， 肝癌细胞 中的转染基 因含量也有
差异 ， 且其安全性还需进一步的试验和临床研究加 以完善。本文就重组人 ｐ ３ ５ 腺病毒治疗肝癌的安全
例病人的资料证实 ， ｄ ｐ ３ Ｎ ｒ ／５ Ａ没有插入宿主细 Ａ Ｄ 胞的危险 陛。 应用一些有损 Ｄ Ａ的肿瘤治疗方法 ， Ｎ
如放射治疗和化疗 ， 不但不增加重组腺病毒的整合 频率 ， 相反对放疗 、 化疗有增敏作用四 。实验观察到 把 Ｂ ２０ 腺病毒载体转染后能显著提高 ｐ３基因 Ｂ １２ ５

现 代 中西 医结 合 杂 志 Ｍｏ ｅｎＪ ｕｎ ｌ ｆ ｎｅ ｒｔ ｒ ｉｏ ａ Ｃ ｉ ｓ ｎ ｓ ｒ Ｍｅ ｉｉ ０ ２ Ｆ ｂ ２ （ ） ｄ ｒ ｏ ｒａ ｏ Ｉｔ ａ ｄ Ｔａ ｔ ｎ ｌ ｈｎ ｅａ ｄ Ｗｅｔ ｎ ｄｃ ｅ２ １ ｅ ， １ ６ ｇ ｅ ｄｉ ｅ ｅ ｎ
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44花姜酮纳米颗粒通过p53通路诱导细胞周期阻滞发挥对肝细胞癌细胞的抗肿瘤作用刘海石1，张文林2，王鹏1，郭佐铭1，张玉宝1*，张松岩1*（1哈尔滨医科大学附属肿瘤医院肝胆胰外科，黑龙江 哈尔滨 150040；2伊春林业管理局中心医院 ，黑龙江 伊春153000）刘海石 硕士研究生哈尔滨医科大学附属肿瘤医院肝胆胰外科基金支持：黑龙江省卫生计生委科研课题（2018-239）*通信作者：张松岩E-mail:********************* 张玉宝E-mail:******************目的：本研究旨在探索花姜酮纳米颗粒对人肝细胞癌细胞抗肿瘤作用及其机制。

方法：检测花姜酮纳米颗粒对人肝细胞癌HepG-2细胞的细胞增殖、集落形成、侵袭、p16、p21、p53、CyclinD1及CDK4蛋白在Western-Blot 上的表达水平及细胞周期分布的影响。

结果：花姜酮纳米颗粒可以上调人肝细胞癌HepG-2细胞p16、p21及p53蛋白的表达，下调CyclinD1和CDK4蛋白的表达，引起细胞周期G1-S 期阻滞，使人肝细胞癌HepG-2细胞的增殖，集落形成及侵袭能力下降。

结论：花姜酮纳米颗粒通过p53通路引起人肝细胞癌HepG-2 细胞周期G1-S 期阻滞，抑制其恶性生物学行为。

关键词：花姜酮；纳米；细胞周期；p53蛋白摘要Zerumbone nanoparticles induce cell cycle arrest through the p53 pathwayand exert antitumor effects on hepatocellular carcinoma cellsLiu Haishi 1, Zhang Wenlin 2, Wang Peng 1, Guo Zuoming 1, Zhang Yubao 1*, Zhang Songyan 1*(1 Department of Hepatobiliary and Pancreatic Surgery, Harbin Medical University Cancer Hospital, Harbin 150040, Heilongjiang, China; 2 Yichun Forestry Administration Central Hospital , Yichun 153000, Heilongjiang, China)AbstractObjective: The purpose of this study was to explore the anti-tumor effect of HJT1 - NP on human hepatocellular carcinoma cells and its mechanism.Methods: To investigate HJT1-NP effects on cell proliferation, colony formation, invasion, proteins expression levels of p16, p21, p53, CyclinD1 and CDK4 in human hepatocellular carcinoma HepG-2 cells by western-blot analysis and cell cycle distribution.Results:The HJT1 - NP could up-regulate the proteins expression of p16, p21 and p53 in human hepatocellular carcinoma HepG-2 cells, down-regulate the proteins expression of CyclinD1 and CDK4, induce G1-S phase arrest of cell cycle, and decrease the proliferation, colony formation and invasion ability of human hepatocellular carcinoma HepG-2 cells.Conclusion: HJT1-NP could induce G1-S phase arrest of human hepatocellular carcinoma HepG-2 cells and inhibit its malignant biological behavior through P53 pathway.Key words: Zerumbone; Nanometer; Cell cycle; P53原发性肝癌（primary hepatic carcinoma，PHC）是全球最为常见的恶性肿瘤之一，国际癌症研究机构（international agency for research on cancer，IARC）的统计数据显示原发性肝癌已成为全球第四大癌症死亡原因[1]。

p53和顺铂对Wnt通路抑制剂FrpHE的表达作用腊蕾;班武;任青青【摘要】将携带p53基因的复制缺陷型腺病毒载体Adp53导入到p53完全缺失的人肝癌细胞株中,培养人肿瘤细胞,并分别加入5μmol/L顺铂(Pt)作用24h,以RT-PCR技术检测FrpHE mRNA的表达作用,以流式细胞术检测Adp53的转基因情况和β-catenin的改变为功能指标评价Wnt通路的变化.FrpHE mRNA表达水平在转染Adp53和作用Pt 24 h后即有明显升高,在人大肠癌细胞和人神经胶质瘤细胞中,未见FrpHE mRNA表达.β-catenin表达水平逐渐下降.提示外源性物质p53和顺铂能明显诱导FrpHE的表达,进而产生抑制Wnt通路的作用.%Human hepatocarcinoma cells were transfected with a replication-defective advenovirus encoding (Adp53), human tumor cells were transfected with antitumor-drug cisplatin after 24 h, Adp53 and /3-cafenm expression was measured by fluorescence-activated cell sorting (FACS) and then Wnt signaling pathway inhibitor FrpHE expression was detected by RT-PCR. FrpHE mRNA was initially potentiated by Adp53 and cisplatin after 24 h, no inhibitor FrpHE was expressed in Lovo and U251, /3-catenin expression levels was descent. Extogenous materials p53 and cisplatin induced expression of FrpHE and suppress Wnt signaling pathway.【期刊名称】《生命科学研究》【年(卷),期】2011(015)005【总页数】5页(P415-419)【关键词】Adp53;顺铂;FrpHE;Wnt通路;β-catenin【作者】腊蕾;班武;任青青【作者单位】南方医科大学南方医院药学部,中国广东广州 510515;广州军区总医院,中国广东广州 510010;南方医科大学南方医院药学部,中国广东广州 510515【正文语种】中文【中图分类】R394.6;Q756Wnt信号通路(Wnt通路)是近年来肿瘤分子生物学领域研究的热点,在胚胎发育、中枢神经系统形成中起关键作用,研究发现,其信号传导通路的各种分子成分及它们的结构和功能、活化与失活与肿瘤的发生密切相关[1,2].这种异常活化的Wnt通路,有可能产生抑制肿瘤细胞生长的作用.目前研究表明,FrpHE(Frizzled-related protein)是Wnt通路的抑制因子[3,4],通过与Wnt蛋白结合,形成复合物,诱导快速内吞作用,从而抑制Wnt信号通路.FrpHE 是由细胞内分泌的内源性蛋白质或生物活性物质,它不但在机体内发挥主要功能,而且其本身也肯定会受到许多细胞内外因素的调控.例如,在p53阳性细胞有Wnt通路抑制剂的大量表达[5],外源性p53可通过抑制Wnt信号通路可能会作为抗肿瘤作用的一个靶点,Wnt信号通路很可能会作为抗肿瘤作用的一个靶点.既然如此,说明外源性物质对Wnt信号通路存在调节,换言之,Wnt信号通路是否为外源性物质的作用靶点呢？阐明这个问题对于抑制剂和外源性物质在肿瘤治疗中所起的作用以及应用价值是非常有意义的,因此,本文选择了外源性物质抑癌基因p53和抗肿瘤药顺铂对Wnt通路抑制剂表达的影响进行研究,以了解外源性物质是否通过抑制剂介导Wnt通路的调控.Hep3B为第二军医大学郭亚军博士惠赠;Adp53为深圳市赛百诺有限公司惠赠;小鼠抗人p53抗体购自Santa公司;羊抗小鼠 IgG-FITC购自Sigma公司;Trizol购自核酸蛋白分离液Gibico公司;AMV 酶、dNTP Mixture、Taq 酶、Oligo(dT)18为大连宝生物工程有限公司产品.该细胞生长于10%胎牛血清的DMEM完全培养液,细胞培养于37℃、5%CO2培养箱中.基因转染前一天将细胞接种于6孔板中.去除培养液,将感染液(Adp53)加入细胞中,浓度按需要进行调整,总体积为每孔0.5 mL.摇匀后放入37℃,5%CO2培养箱中孵育,每15 min摇晃1次,1 h后除去感染液,加入培养液,放入培养箱中培养.细胞感染Adp53,经顺铂作用后以胰酶消化成单细胞悬液,PBS洗涤两遍后以2%多聚甲醛固定30 min,离心去上清后悬于PBS+0.1%Triton-100+10%山羊血清的染色液中30 min,离心去上清后加入小鼠抗人p53,兔抗人β-catenin抗体后室温孵育60 min,洗涤2次后加入羊抗小鼠LgG-FITC,室温孵育30 min后洗两遍,过400目尼龙网,上机检测.分别收集经转染后转染时间为16、20、24、28、32、36、40 h 和转染剂量为0.05、0.5、5、50 pfu/cell的各个时间点的Hep3B细胞,按TRIZOL Reagent使用说明进行抽提细胞总RNA.FrpHE引物序列[6]:上游引物5′-CCGTGCTGCGCTTCTTCTTCTGTG-3′,下游引物5′-GCGGGACTTGAGTTCGAGGGATGG-3′(461 bp);GAPDH引物序列:上游引物5′-CACAGTCCATGCCATCACTGC-3′下游引物5′-GGTCTACATGGCAACTGTGAG-3′(609 bp)(上海博亚生物技术有限公司合成);RT-PCR过程:按产品说明书操作,逆转录反应条件为42℃,60 min.PCR条件为:94℃2 min热启动,94℃1 min变性,58℃ 1 min退火,72℃ 1 min延伸,反应35个循环.将转染剂量为0(空白)、5 pfu/cell时应用流式细胞术观察Adp53的转基因情况,从图1可看出,空白组p53表达呈阴性,未有荧光量显示,Adp53转染24 h后96%以上的细胞p53表达呈阳性,平均荧光量增加了约50倍,表明p53基因转染成功.为研究p53诱导FrpHE的时效关系,我们观察了Adp53转染后不同时间FrpHE表达,如图2所示,FrpHE在p53转染后20 h起明显增加,在32 h最高,36、40 h时逐渐回落,但仍高于对照组水平.为研究p53诱导FrpHE mRNA的量效关系,我们观察了不同剂量Adp53转染后FrpHE mRNA的表达,如图3所示,FrpHE mRNA在Adp53转染剂量为5pfu/cell时最强,在50 pfu/cell时逐渐回落,但仍高于对照水平.在人肿瘤细胞加入顺铂作用24 h后,FrpHE mRNA的表达较未加药物的肿瘤细胞(对照组)明显增加,在人大肠癌细胞和人神经胶质瘤细胞中,未见FrpHE mRNA表达,见图4.以上结果显示外源物质Adp53和抗肿瘤药顺铂的导入对Wnt通路抑制剂FrpHE mRNA表达具有上调作用,为了进一步观察FrpHE上调后是否对Wnt通路产生抑制作用,我们进一步观察了Wnt通路的关键因子β-catenin表达水平的变化.为研究β-catenin表达的时效关系,我们观察了肝癌细胞Hep3B(p53缺失)Adp53转染后不同时间β-catenin的表达.采用流式细胞术检测,结果显示,在转染时间为0、24、36、48、60 h 时,βcatenin的表达水平 (阳性细胞数)分别为:(82±7)%、(66±9)%、(39±5)%、(33±6)%,(21±3)%.可见,随着转染时间的增加,β-catenin的阳性细胞百分比强度和平均荧光量强度逐渐下降,表明在p53诱导Wnt通路抑制剂FrpHE上调后,Wnt通路受到抑制而引起β-catenin的下调 (经x2检验,P＜0.05).采用流式细胞术检测,结果显示,当转染剂量分别为 0、0.5、5、50(pfu/cell)时,β-catenin 的阳性细胞百分比数和平均荧光量强度表达水平分别为(89±6)%、(80±4)%、(66±9)%、(22±6)%.可见,随着转染剂量的增加,β-catenin的阳性细胞百分比强度和平均荧光量强度逐渐下降,表明p53对βcatenin 起下调作用(经 x2检验,P＜0.05).采用流式细胞术检测,加药24 h后,结果显示:1)在人肝癌细胞 (HepG2,wt p53)中,βcatenin的阳性细胞百分比强度为:对照组(71±9)%、顺铂组(46±7)%,表达水平降低.2)在人大肠癌细胞 ((Lovo,wt p53)中,βcatenin的阳性细胞百分比强度为:对照组(39±5)%、顺铂组(11±7)%,表达水平降低.3)在人神经胶质瘤细胞 (U251,mutant p53)中,β-catenin的阳性细胞百分比强度为:对照组(79±6)%、顺铂组(58±5)%,表达水平降低.4)在人肝癌细胞 ((Hep3B,p53 null)中,βcatenin的阳性细胞百分比强度为:对照组(85±9)%、顺铂组(62±8)%,表达水平降低.经 x2检验,P＜0.05.以上结果显示通过外源性p53和抗肿瘤药顺铂的导入,β-catenin的表达下调,而β-catenin这种变化在时间及剂量上与p53和抗肿瘤药顺铂诱导抑制剂FrpHE是相吻合的,表明外源性p53和顺铂能诱导FrpHE的表达,进而引起Wnt通路的抑制. Wnt通路包括细胞外因子Wnt、跨膜受体、β连环蛋白(β-catenin)、降解复合物(Destruction complex)以及转录因子T细胞因子(T cell factor,TCF)等组成[7].正规的Wnt信号只有在卷曲蛋白和辅助受体低密度脂蛋白受体相关蛋白 (Low density lipoprotein receptor related protein,LRP)均与Wnt结合时才能激活.该通路通过调节TCF家族的DNA蛋白结合转录性质来调控细胞的行为,其核心是胞质内β-catenin稳定,当β-catenin水平低下时,Wnt通路关闭;反之,Wnt通路开启. 在没有Wnt信号刺激的情况下,胞质内的GSK-3β能与其它蛋白(如:APC、Axin 等)以复合物的形式磷酸化β-catenin,使β-catenin降解,βcatenin处于低水平状态.在有Wnt信号刺激的情况下,由细胞分泌的Wnt蛋白与细胞表面受体FZD(frizzled protein receptor)和LRP5/6结合后,即激活细胞内的信号传导,不能磷酸化β-catenin,导致β-catenin积聚进入细胞核,促进靶基因无限制转录,肿瘤细胞增殖[8,9].本研究结果显示,加入外源性物质p53和顺铂后,在肿瘤细胞中,抑制剂FrpHE mRNA的表达水平下降(见图2～4),Wnt信号通路的关键调节因子β-catenin表达水平下降(见 2.5、2.6、2.7),从而抑制 Wnt通路,提示 FrpHE的表达机制非常复杂,其本身会受到许多内外因素的影响,例如:它可能与受体竞争结合Wnt蛋白,或直接与Wnt蛋白结合,由此阻断了Wnt信号传导通路[10].抑癌基因p53能直接抑制或杀灭癌细胞,顺铂通过直接抑制DNA复制抗肿瘤,现有的实验说明抑癌基因p53和抗肿瘤药顺铂还可通过对抑制剂FrpHE的上调作用,从而抑制Wnt通路,抑制剂FrpHE可能是p53和顺铂抗肿瘤作用的一个靶点,这很可能是p53和顺铂抗肿瘤作用的另外一种方式.因此,通过对新作用环节的研究,进一步探寻抗肿瘤的新靶点,为研究抗肿瘤新药提供新靶点和新依据.令人意外的是,通过顺铂对抑制剂的诱导作用,在人大肠癌细胞株Lovo及神经胶质瘤细胞U251中未见FrpHE mRNA的表达,说明它们可能是FrpHE缺失型的肿瘤细胞株,也许是抑制剂FrpHE本身或通过顺铂的介入在大肠癌中的表达水平很微弱或者根本就没有表达.看来,抑制剂在肿瘤细胞中的表达并不都是一致的,存在着一定的差异,FrpHE在肿瘤的发生过程可能是一个很关键的因素,有待于我们进一步的探讨.【相关文献】[1]KARIM R,TSE G,PUTTI T.The significane of the Wnt pathway in the pathology of human cancers[J].Pathology,2004,36(2):120-128.[2]van NOORT M,MEEDLDIIK J,van der ZEE R,et al.Wnt signaling controls the phosphorylation status of beta-catenin[J].The Journal of BiologicalChemisity,2002,5(20):17901-17905.[3]ROTH W,WILD-BODE C,PLATTEN M,et al.Secreted frizzled-related proteins inhibit motility and promote growth of human malignant gliomacells[J].Oncogene,2001,9(37):4210-4220.[4]LEE H C,KIM M,WANDS J R.Wnt/Frizzled signaling in hepatocellular carcinoma[J].Front Biosci,2006,5(11):1901-1915.[5]WANG J,SHOU J,CHEN X.Dickkopf-1,an inhibitor of the Wnt signaling pathway,is induced by p53[J].Oncogene,2000,19(14):1843-1848.[6]KAO L C,TULAC S,LOBO B,et al.Global gene profiling in human endometrium during the window of implantation[J].Endocrinology,2002,143(6):2119-2138.[7]GILES R H,van E S J H,CLEVERS H.Caught up in a Wnt storm:Wnt signaling incancer[J].Biochimica et Biophysica Acta,2003,1653(1):1-24.[8]MAO B,WU W,DAVIDSON G,et al.Kremen proteins are Dickkopf receptors that regulate Wnt/β-catenin signaling[J].Nature,2002,417(6889):664-667.[9]TULAC S,NAYAK N R,KAO L C.Identification characterization and regulation of the canonical Wnt signaling pathway in human endometrium[J].The Journal of clinical Endocrinology Metabolism,2003,88(8):3860-3866.[10]KAWANO Y,KYPTA R.Secreted antagonist of the Wnt signaling pathway[J].Joural of Cell Science,2003,116(Pt13):2627-2634.。

放疗联合热疗对肝癌细胞的协同杀伤作用张力;马立辉;龚明玉;王宁;王广;杨玉香;柳逢春【期刊名称】《世界华人消化杂志》【年(卷),期】2010()18【摘要】目的:研究放疗联合热疗对肝癌细胞有无协同杀伤作用,为临床应用提供实验依据.方法:以人肝癌细胞株HepG2为研究对象,实验分成4组:(1)对照组;(2)单纯热疗组;(3)单纯放疗组;(4)放疗与热疗联合组.各组分别进行实验.采用流式细胞术检测细胞凋亡情况,电镜观察肝癌细胞的超微结构,免疫组织化学检测P53蛋白表达变化.结果:与对照组相比,3个治疗组的肿瘤细胞的凋亡率均增加(19.98%±1.76%,20.83%±1.84%,32.16%±2.03%vs16.47%±1.24%,P<0.05或0.01),细胞超微结构损伤,P53蛋白的表达增加(34.98%±1.16%,35.21%±1.23%,45.50%±1.55%vs32.00%±1.05%,P<0.05或0.01);与单纯的放疗或热疗组相比,放疗与热疗联合组的肝癌细胞凋亡率明显增高(P<0.01),超微结构损伤更显著,P53蛋白的表达显著增加(P<0.01).结论:放疗联合热疗对肝癌细胞的杀伤有协同作用,其机制可能通过上调P53蛋白表达,诱导细胞凋亡实现的.【总页数】6页(P1879-1884)【关键词】肝癌;放疗;热疗;协同作用;细胞凋亡【作者】张力;马立辉;龚明玉;王宁;王广;杨玉香;柳逢春【作者单位】承德医学院附属医院肿瘤放化疗科;承德医学院生物化学教研室;承德市医学情报站【正文语种】中文【中图分类】R977.9【相关文献】1.磁感应热疗联合放疗对小鼠4T1移植瘤的杀伤作用 [J], 王晖;曾亮;欧阳伟炜;周菊梅;席许平;唐劲天2.热疗联合放化疗对人肺腺癌耐药细胞株A549/DDP的协同杀伤作用 [J], 陈雪琴;马胜林;牟翰舟;冯建国;潘月龙3.10-羟基喜树碱联合热疗对肝癌协同杀伤作用的研究 [J], 祝子华;祝金泉4.调强放疗联合局部热疗对晚期肝癌病灶中Mortalin表达的影响及其与细胞增殖、EMT的关系 [J], 李东5.放疗联合热疗诱导肝癌HepG2细胞凋亡及其与Bcl-2和Bax蛋白表达关系的研究 [J], 张力; 龚明玉; 李毅学; 张立广; 王兴艳因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。