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TLC 显色剂

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TLC显色剂配制碘：不饱和或者芳香族化合物配制方法：在100ml广口瓶中，放入一张滤纸，少许碘粒。

或者在瓶中，加入10g碘粒，30g硅胶紫外灯：含共厄基团的化合物，芳香化合物硫酸铈：生物碱配制方法：10%硫酸铈(IV)+15%硫酸的水溶液氯化铁：苯酚类化合物配制方法：1% FeCl3 + 50% 乙醇水溶液.桑色素(羟基黄酮) ：广谱, 有荧光活性配制方法：0.1% 桑色素+甲醇茚三酮：氨基酸配制方法：1.5g 茚三酮+ 100mL of 正丁醇+ 3.0mL 醋酸二硝基苯肼(DNP) ：醛和酮配制方法：12g二硝基苯肼+ 60mL 浓硫酸+ 80mL 水+ 200mL 乙醇香草醛(香兰素) ：广谱配制方法：15g 香草醛+ 250mL 乙醇+2.5mL 浓硫酸高锰酸钾：含还原性基团化合物，比如羟基，氨基，醛配制方法：1.5g KMnO4 + 10g K2CO3 + 1.25mL 10% NaOH + 200mL 水. 使用期3个月溴甲酚绿：羧酸，pKa<=5.0配制方法：在100ml乙醇中，加入0.04g溴甲酚绿，缓慢滴加0.1M的NaOH水溶液，刚好出现蓝色即至。

钼酸铈：广谱配制方法：235 mL 水+ 12 g 钼酸氨+ 0.5 g 钼酸铈氨+ 15 mL 浓硫酸茴香醛(对甲氧基苯甲醛)1 ：广谱配制方法：135 乙醇+ 5 mL 浓硫酸+ 1.5 mL of 冰醋酸+ 3.7 mL 茴香醛，剧烈搅拌，使混合均匀. 茴香醛(对甲氧基苯甲醛)2 ：萜烯，桉树脑(cineoles), withanolides, 出油柑碱(acronycine)配制方法：茴香醛:HClO4:丙酮:水(1:10:20:80)磷钼酸(PMA) ：广谱配制方法：10 g of 磷钼酸+100 mL 乙醇显色剂：碘：适用于不饱和或者芳香族化合物配制方法：在100ml 广口瓶中，放入一张滤纸，少许碘粒。

或者在瓶中，加入10g 碘粒，30g 硅胶高锰酸钾适用于含还原性基团化合物，比如羟基，氨基，醛配制方法：1.5g KMnO4 + 10g K2CO3 + 1.25mL 10% NaOH +200mL 水. 使用期3 个月磷钼酸(PMA)广谱配制方法：10 g of 磷钼酸+100 mL 乙醇紫外灯适用于含共轭基团的化合物，芳香化合物硫酸铈：生物碱配制方法：10%硫酸铈(IV)+15%硫酸的水溶液氯化铁苯酚类化合物配制方法：1% FeCl3 + 50% 乙醇水溶液.桑色素(羟基黄酮)广谱, 有荧光活性配制方法：0.1% 桑色素+甲醇茚三酮适用于氨基酸配制方法：1.5g 茚三酮+ 100mL of 正丁醇+ 3.0mL 醋酸二硝基苯肼(DNP)适用于醛和酮配制方法：12g 二硝基苯肼+ 60mL 浓硫酸+ 80mL 水+ 200mL乙醇香草醛(香兰素)广谱配制方法：15g 香草醛+ 250mL 乙醇+2.5mL 浓硫酸溴甲酚绿适用于羧酸，pKa<=5.0配制方法：在100ml 乙醇中，加入0.04g 溴甲酚绿，缓慢滴加0.1M的NaOH 水溶液，刚好出现蓝色即至。

钼酸铈广谱配制方法：235 mL 水+ 12 g 钼酸氨+ 0.5 g 钼酸铈氨+ 15 mL浓硫酸茴香醛(对甲氧基苯甲醛)1广谱配制方法：135 乙醇+ 5 mL 浓硫酸+ 1.5 mL of 冰醋酸+ 3.7 mL茴香醛，剧烈搅拌，使混合均匀.茴香醛(对甲氧基苯甲醛)2适用于萜烯，桉树脑(cineoles), withanolides, 出油柑碱(acronycine)配制方法：茴香醛:HClO4:丙酮:水(1:10:20:80)经常需要利用溶剂的极性大小，对展开剂的极性予以调整。

TLC显色试剂及配方大全TLC显色试剂及配方大全显色试剂显色剂可以分成两大类：一类是检查一般有机化合物的通用显色剂；另一类是根据化合物分类或特殊官能团设计的专属性显色剂。

显色剂种类繁多，本章只能列举一些常用的显色剂。

l．通用显色剂①硫酸常用的有四种溶液：硫酸-水(1：1)溶液；硫酸-甲醇或乙醇(1：1)溶液；1.5mol／L硫酸溶液与0.5-1.5mol／L硫酸铵溶液，喷后110oC烤15min，不同有机化合物显不同颜色。

②0.5％碘的氯仿溶液对很多化合物显黄棕色。

③中性0.05％高锰酸钾溶液易还原性化合物在淡红背景上显黄色。

④碱性高锰酸钾试剂还原性化合物在淡红色背景上显黄色。

溶液I：1％高锰酸钾溶液；溶液Ⅱ：5％碳酸钠溶液；溶液I和溶液Ⅱ等量混合应用。

⑤酸性高锰酸钾试剂喷1.6％高锰酸钾浓硫酸溶液(溶解时注意防止爆炸)，喷后薄层于180oC加热15～20min。

⑥酸性重铬酸钾试剂喷5％重铬酸钾浓硫酸溶液，必要时150oC烤薄层。

⑦5％磷钼酸乙醇溶液喷后120oC烘烤，还原性化合物显蓝色，再用氨气薰，则背景变为无色。

⑧铁氰化钾-三氯化铁试剂还原性物质显蓝色，再喷2mol／L盐酸溶液，则蓝色加深。

溶液I：1％铁氰化钾溶液；溶液Ⅱ：2％三氯化铁溶液；临用前将溶液I和溶液Ⅱ等量混合。

2．专属性显色剂由于化合物种类繁多，因此专属性显色剂也是很多的，现将在各类化合物中最常用的显色剂列举如下：(1) 烃类①硝酸银／过氧化氢检出物：卤代烃类。

溶液：硝酸银O.1g溶于水lml，加2-苯氧基乙醇lOOml，用丙酮稀释至200ml，再加30％过氧化氢1滴。

方法：喷后置未过滤的紫外光下照射；结果：斑点呈暗黑色。

②荧光素／溴检出物：不饱和烃。

溶液：I．荧光素0.1g溶于乙醇lOOml；Ⅱ．5％溴的四氯化碳溶液。

方法：先喷(I)，然后置含溴蒸气容器内，荧光素转变为四溴荧光素(曙红)，荧光消失，不饱和烃斑点由于溴的加成，阻止生成曙红而保留荧光，多数不饱和烃在粉红色背景上呈黄色。

③四氯邻苯二甲酸酐检出物：芳香烃。

溶液：2％四氯邻苯二甲酸酐的丙酮与氯代苯(10：1)的溶液。

方法：喷后置紫外光下观察。

④甲醛／硫酸检出物：多环芳烃。

溶液：37％甲醛溶液O.2ml溶于浓硫酸l0ml。

(2)醇类①3，5一二硝基苯酰氯检出物：醇类。

溶液：I．2％本品甲苯溶液；Ⅱ．0.5％氢氧化钠溶液；Ⅲ．O.002％罗丹明溶液。

方法：先喷(I)，在空气中干燥过夜，用蒸气薰2min，将纸或薄层通过试液(Ⅱ)30s，喷水洗，趁湿通过(Ⅲ)15s，空气干燥，紫外灯下观察。

②硝酸铈铵检出物：醇类。

溶液：I．1％硝酸铈铵的0.2mol／L硝酸溶液；Ⅱ．N,N-二甲基-对苯二胺盐酸盐1.5g溶于甲醇、水与乙酸(128m1+25m1+1．5m1)混合液中，用前将(I)与(Ⅱ)等量混合。

喷板后于105oC加热5min。

③香草醛／硫酸检出物：高级醇、酚、甾类及精油。

溶液：香草醛1g溶于硫酸lOOml。

方法：喷后于120oC加热至呈色最深。

④二苯基苦基偕肼’检出物：醇类、萜烯、羰基、酯与醚类。

溶液：本品15mg溶于氯仿25ml中。

方法：喷后于110oC加热5～lOmin。

结果：紫色背景呈黄色斑点。

(3)醛酮类①品红／亚硫酸检出物：醛基化合物。

溶液：I．0.01%品红溶液，通入二氧化硫直至无色；Ⅱ．0.05mol／L氯化汞溶液；Ⅲ．O.05mol／L硫酸溶液。

方法：将I、Ⅱ、Ⅲ以1：1：10混合，用水稀释至l00ml。

②邻联茴香胺检出物：醛类、酮类。

溶液：本品乙酸饱和溶液。

③2，4-二硝基苯肼检出物：醛基、酮基及酮糖。

溶液：I．0.4％本品的2mol／L盐酸溶液；Ⅱ．本品O.1g溶于乙醇l00ml中，加浓盐酸lml。

方法：喷溶液I或Ⅱ后，立即喷铁氰化钾的2mol／L盐酸溶液。

结果：饱和酮立即呈蓝色；饱和醛反应慢，呈橄榄绿色；不饱和羰基化合物不显色。

④绕丹宁检出物：类胡萝卜素醛类。

溶液：I．1%～5%绕丹宁乙醇溶液；Ⅱ．25%氢氧化铵或27%氢氧化钠溶液。

方法：先喷溶液I，再喷溶液Ⅱ，干燥。

(4)有机酸类①溴甲酚绿检出物：有机酸类。

溶液：溴甲酚绿0.1g溶于乙醇500ml和0.1mol/L氢氧化钠溶液5ml。

方法：浸板。

结果：蓝色背景产生黄色斑点。

②高锰酸钾／硫酸检出物：脂肪酸衍生物。

溶液：见通用显色剂酸性高锰酸钾。

③过氧化氢检出物：芳香酸。

溶液：0.3%过氧化氢溶液。

方法：喷后置紫外光(365nm)下观察。

结果：呈强蓝色荧光。

④2，6-二氯苯酚-靛酚钠检出物：有机酸与酮酸。

溶液：0.1%本品的乙醇溶液。

方法：喷后微温。

结果：蓝色背景呈红色。

(5)酚类①Emerson 试剂(4-氨基安替比林／铁氰化钾(Ⅲ))检出物：酚类、芳香胺类及挥发油。

溶液：I．4-氨基安替比林1g溶于乙醇100ml；Ⅱ．铁氰化钾(Ⅲ)4g溶于水50ml，用乙醇稀释至100ml。

方法：先喷溶液I，在热空气中干燥5min，再喷溶液Ⅱ，再于热空气中干燥5min，然后将板置含有氨蒸气(25％氨溶液)的密闭容器中。

结果：斑点呈橙-淡红色。

挥发油在亮黄色背景下呈红色斑点。

②Boute 反应检出物：酚类、氯、溴、烷基代酚。

方法：将薄层置有NO2蒸气(含浓硝酸)的容器中3～10min，再用NH2蒸气(浓氨液)处理。

③氯醌(四氯代对苯醌)检出物：酚类。

溶液：1％本品的甲苯溶液。

④DDQ(二氯二氰基苯醌)试剂检出物：酚类。

溶液：2％本品的甲苯溶液。

⑤TCNE (四氰基乙烯)试剂检出物：酚类、芳香碳氢化物、杂环类、芳香胺类。

溶液：0.5%～1%本品的甲苯溶液。

⑥Gibb’s(2，6-二溴苯醌氯亚胺)试剂检出物：酚类。

溶液：2%本品的甲醇溶液。

⑦氯化铁检出物：酚类、羟酰胺酸。

溶液：1%～5%氯化铁的0.5mol／L盐酸溶液。

结果：酚类呈蓝色、羟酰胺酸呈红色。

(6)含氮化合物①FCNP(硝普钠／铁氰化物)试剂检出物：脂肪族含氮化物，如氨基氰、胍、脲与硫脲及其衍生物，肌酸及肌酐。

溶液：10％氢氧化钠溶液、10％硝普钠溶液、10％铁氰化钾溶液与水按1：1：1：3混合，在室温至少放置20min，冰箱保存数周，用前将混合液与丙酮等体积混合。

②Dragendorff(碘化铋钾试剂)试剂检出物：芳香族含氮化合物，如生物碱类、抗心律不齐药物。

溶液：I．碱式硝酸铋0.85g溶于10ml冰醋酸及40ml水中；Ⅱ．碘化钾8g溶于水20ml中。

将上述溶液I及Ⅱ等量混合，置棕色瓶中作为储备液，用前取储备液lml、冰醋酸2ml与水l0ml混合。

结果：呈橘红色斑点。

③4-甲基伞形酮检出物：含氮杂环化合物。

溶液：本品0.02g溶于乙醇35ml，加水至100ml。

方法：喷板后置25％氨水蒸气的容器中,取出后于紫外灯(365nm)下观察。

④碘铂酸钾检出物：生物碱类及有机含氮化物。

溶液：10％六氯铂酸溶液3ml与水97ml混合，加6％碘化钾溶液，混匀。

临用前配制。

⑤硫酸高铈铵／硫酸检出物：生物碱及含碘有机化物。

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tlc荧光显色原理

tlc荧光显色原理

tlc荧光显色原理TLC荧光显色是一种常用于分离和分析化合物的技术，其原理基于化合物在光线照射下发出荧光。

TLC是薄层色谱法（Thin Layer Chromatography）的简称，荧光显色则是用荧光试剂或荧光激发光源对TLC上的化合物进行显色和检测。

TLC荧光显色的原理主要包括两个方面：化合物的分离和化合物的荧光检测。

首先是化合物的分离。

TLC荧光显色在分离上具有很大的优势。

其操作简单，快速，且需要的样品量较少。

TLC将要分离的化合物溶解在合适的溶剂中，然后将溶液施加在薄层色谱板上。

薄层色谱板多用硅胶/活性炭，或者硅胶/膨润土混合物制成。

然后将薄层色谱板放置在合适的条件下，溶剂会沿着薄层色谱板上升，一步步带着样品分离向上移动。

根据不同溶剂的极性和化合物的亲水性或疏水性，化合物会在沿程分离，达到分离和纯化的目的。

这种方法特别适用于天然产物提纯过程中。

其次是化合物的荧光检测。

在TLC分离出化合物后，就需要进行荧光检测。

荧光显色的原理是当化合物处于荧光试剂波长的激发光下时，化合物分子处于激发态，并吸收光子能量。

经过短暂激发时间后，化合物分子返回到基态，释放荧光光子。

荧光光子的颜色与化合物的结构和环境有关，所以可以通过荧光光子的波长和强度来判断化合物的存在和含量。

在TLC荧光显色中，有很多常用的荧光试剂，例如：二氧化硅涂层TLC（TLC-SiO₂），可以使用针对特定化合物的荧光试剂进行显色检测。

例如，使用紫外光照射可以使有机化合物在荧光试剂的激发光下发射荧光，进而可通过荧光强度和波长来测定化合物的含量和结构。

此外，也可以使用特定的荧光染料或荧光标记的探针来对分离的化合物进行检测。

这些荧光试剂具有选择性地与化合物发生化学反应，生成可观测的荧光信号。

TLC荧光显色广泛应用于药物分析、环境监测、化学分析、天然产物提取与分离等领域。

TLC在荧光显色中特别适用于复杂体系的分析和定性/定量分析。

它具有操作简便、快速、分离效果好等优点，同时还可以用于有效地检测微量的化合物，并可以通过比对荧光强度和波长来进行定量分析。

TLC跟踪反应

TLC跟踪反应

En 8.3. 薄层色谱（TLC）的使用指南综述：薄层色谱（TLC）是一种非常有用的跟踪反应的手段，还可以用于柱色谱分离中合适溶剂的选择。

薄层色谱常用的固定相有氧化铝或硅胶，它们是极性很大（标准）或者是非极性的（反相）。

流动相则是一种极性待选的溶剂。

在5.301中以及大多数实验室实验中，都将使用标准硅胶板。

将溶液中的反应混合物点在薄板上，然后利用毛细作用使溶剂（或混合溶剂）沿板向上移动进行展开。

根据混合物中组分的极性，不同化合物将会在薄板上移动不同的距离。

极性强的化合物会“粘”在极性的硅胶上，在薄板上移动的距离比较短。

而非极性的物质将会在流动的溶剂相中保留较长的时间从而在板上移动较大的距离。

化合物移动的距离大小用Rf值来表达。

这是一个位于0～1之间的数值，它的定义为：化合物距离基线（最先点样时已经确定）的距离除以溶剂的前锋距离基线的距离。

薄层色谱（TLC）实验步骤：1) 切割薄板。

通常，买来的硅胶板都是方形的玻璃板，必需用钻石头玻璃刀按照模板的形状进行切割。

在切割玻璃之前，用尺子和铅笔在薄板的硅胶面上轻轻地标出基线的位置（注意不要损坏硅胶面）。

借助锋利的玻璃切割刀和一把引导尺，你便可方便地进行玻璃切割。

当整块玻璃被切割后，你就可以进一步将其分成若干独立的小块了。

（开始的时候，也许你会感到有一些难度，但经过一些训练以后，你便会熟练地掌握该项技术。

2) 选取合适的溶剂体系。

化合物在薄板上移动距离的多少取决于所选取的溶剂不同。

在戊烷和己烷等非极性溶剂中，大多数极性物质不会移动，但是非极性化合物会在薄板上移动一定距离。

相反，极性溶剂通常会将非极性的化合物推到溶剂的前段而将极性化合物推离基线。

一个好的溶剂体系应该使混合物中所有的化合物都离开基线，但并不使所有化合物都到达溶剂前端，Rf值最好在0.15~0.85之间。

虽然这个条件不一定都能满足，但这应该作为薄层色谱分析的目标（在柱色谱中，合适的溶剂应该满足Rf在0.2~0.3之间）。

TLC技术原理与经验分享

TLC技术原理与经验分享

TLC（硅胶板薄层色谱）被广泛的称为“化学家的眼睛”，当“眼睛”看不清楚的时候，才会借助放大镜或者近视镜（HPLC，GC等等）。

熟练准确快速的使用TLC技术对提高化学工作的效率至关重要新药研发合成部分，在平时工作中，很多时候是靠TLC进行快速检测，如果仅靠紫外灯这种手段，会忽略掉很多有用的信息，导致重复劳动，或者武断放弃一种合成思路。

一下为常用显色原理，均为个人理解整理，进攻参考。

TLC展开剂的显色原理介绍与讨论一、显色原理硫酸乙醇溶液喷洒10%硫酸乙醇溶液而显色，是利用硫酸的碳化效果。

一般用来薄层层析分离的都是有机化合物，展开，溶媒挥发干以后，有机物就留在板上。

浓硫酸理论上可以对任何有机物碳化。

喷洒10%硫酸乙醇溶液，待烘干之后并继续加热，有机物就因为碳化而现实偏黑色。

乙醇挥发很快，留下硫酸使得有机物脱水，看到的颜色可能是褐色、灰色、偏蓝色，所以我前面写了偏黑色，实际可能要淡一点的，有些扩散的样子。

任何有机物都用可以用10%硫酸乙醇溶液。

溴甲酚绿（pKa≤5.0，与pH区别）方法一：溴甲酚绿指示液：取溴甲酚绿0.1g，加0.05mol/L氢氧化钠溶液2.8ml使溶解，再加水稀释至200ml，即得。

变色范围pH3.6～5.2（黄→蓝）方法二：溴甲酚绿指示液(1 g／L) ：称取0．1 g溴甲酚绿，溶于乙醇(95％)，用乙醇(95％)稀释至100 mL。

The acid dissociation constant (p K a) of this reaction is 4.82,4-二硝基苯肼碘碘为广谱可逆显色试剂，尤其对具有不饱和键，共轭体系（芳烃），含有孤电子对的杂原子官能团（羟基、氨基、巯基等等）有明显效果。

原理解释（仅供参考）为碘吸附作用，放置一段时间解吸附消失。

可以理解为碘的较高极化性，是的带形式正电荷的碘正离子生成，对具有孤电子对、可极化的π电子产生亲电性吸附作用。

茚三酮对α-氨基酸的显色机理：对氨基（伯胺和仲胺）的显色机理：三氯化铁络合物为紫色化合物高锰酸钾：含还原性基团化合物，比如羟基，氨基，醛。

TLC显色试剂及配方大全

TLC显色试剂及配方大全

TLC显色试剂及配方大全3(6)含氮化合物①FCNP(硝普钠／铁氰化物)试剂检出物：脂肪族含氮化物，如氨基氰、胍、脲与硫脲及其衍生物，肌酸及肌酐。

溶液：10％氢氧化钠溶液、10％硝普钠溶液、10％铁氰化钾溶液与水按1：1：1：3混合，在室温至少放置20min，冰箱保存数周，用前将混合液与丙酮等体积混合。

②Dragendorff(碘化铋钾试剂)试剂检出物：芳香族含氮化合物，如生物碱类、抗心律不齐药物。

溶液：I．碱式硝酸铋0.85g溶于10ml冰醋酸及40ml水中；Ⅱ．碘化钾8g溶于水20ml中。

将上述溶液I及Ⅱ等量混合，置棕色瓶中作为储备液，用前取储备液lml、冰醋酸2ml与水l0ml混合。

结果：呈橘红色斑点。

③4-甲基伞形酮检出物：含氮杂环化合物。

溶液：本品0.02g溶于乙醇35ml，加水至100ml。

方法：喷板后置25％氨水蒸气的容器中,取出后于紫外灯(365nm)下观察。

④碘铂酸钾检出物：生物碱类及有机含氮化物。

溶液：10％六氯铂酸溶液3ml与水97ml混合，加6％碘化钾溶液，混匀。

临用前配制。

⑤硫酸高铈铵／硫酸检出物：生物碱及含碘有机化物。

溶液：硫酸铈1g混悬于4ml水中，加三氯乙酸1g，煮沸，逐滴加入浓硫酸直至混浊消失。

方法：喷后薄层于1l0oC加热数分钟。

结果：阿朴吗啡、马钱子碱、秋水仙碱、罂粟碱、毒扁豆碱与有机碘化物均能检出。

⑥Ehrlich (对二甲氨基苯甲醛／盐酸)试剂检出物：吲哚衍生物及胺类。

溶液：1％本品的浓盐酸溶液与甲醇按1：1混合。

方法：喷后板于50oC加热20min。

结果：呈不同颜色的斑点。

(7)胺类①硝酸／乙醇检出物：脂肪族胺类。

溶液：50滴65％硝酸于乙醇100ml中。

方法：需要时120oC加热。

②2，6-二氯醌氯亚胺检出物：抗氧剂、酰胺(辣椒素)、伯、仲脂肪胺、仲、叔芳香胺、芳香碳氢化物、药物、苯氧基乙酸除草剂等。

溶液：新鲜制备的0.5％～2％本品乙醇溶液。

方法：喷后薄层于110oC加热10min，再用氨蒸气处理。