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研究报告一种基于巯基化聚丙烯胺自组装膜的免疫传感器固定方法陈 慧1,2 吴朝阳1 王 桦1 沈国励31 俞汝勤11(湖南大学化学Π生物传感与计量学国家重点实验室,化学化工学院,长沙410082)2(湖南中医学院,长沙410004)摘 要 提出了一种基于巯基自组装的新型蛋白质固定化方法。
应用偶联试剂碳二亚胺(E DC )和N 2羟基琥珀酰亚胺(NHS )使聚丙烯胺盐酸盐(PAH )与32巯基丙酸(MPA )偶合,在石英晶振表面自组装,形成一带多氨基的巯基自组装膜。
应用该方法成功地固定了羊抗人IgM 抗体,并用于人血清免疫球蛋白M (IgM )的测定。
详细考察了自组装条件、抗体包被和免疫反应的主要实验条件以及传感器的响应性能。
与MPA 法比较,应用该方法可在传感器表面固定更多的抗体分子,传感器的响应灵敏度亦更好。
在优化的实验条件下,反应的线性范围0.66～26.4mg ΠL ;回归方程Y =92.44+12.40X ;相关系数r =0.9920。
关键词 巯基自组装膜,固定化方法,压电免疫传感器 2002209205收稿;2003204207接受本文系国家自然科学基金(N o.20075006,20205004)和高等学校博士点基金(N o.20010532008)资助项目1 引 言生物分子的固定化技术是压电免疫传感器研制的一个关键步骤1。
通常将生物分子固定于石英晶体电极表面的方法主要有戊二醛交联法2,硅烷化连接法3,聚合物膜连接法4,自组装技术及LB 膜技术5等。
在许多情况下,可联合使用这些方法。
自组装膜是近些年来发展的一种新型有机超薄膜6,7。
巯基自组装膜基于硫原子与金属的强相互作用、成膜容易、制备简单、稳定性和有序性高,而且分子另一端可以带上不同的活性功能团以适用不同的修饰电极的要求。
因此自组装膜的研究工作多集中于此。
在压电免疫传感器的研究中,金电极表面上以硫醇分子的自组装应用较多,用于抗原抗体固定的免疫传感器已有不少文献报道8～10。
自组装单分子膜成膜形貌及其缓蚀性能刘琳;楚茂阳;邢锦娟;钱建华【摘要】新工艺方法在玻璃基体表层及银片表面制备出3-巯基丙基三甲氧基硅烷自组装单分子膜(MPS-SAM),并利用扫描电子显微镜(SEM)观察了玻璃基体薄膜形貌,使用自动椭圆偏振测厚仪SCC-2测出其膜厚;运用金相显微镜观测出银片表面形貌变化并结合触针式粗糙度测量仪得出其膜厚范围;同时通过塔菲尔曲线(Tafel)对银片电极的电化学性能进行了对比分析.结果表明:组装溶液的成膜形貌与致密性受组装时间的影响很大且在金属与非金属表面的成膜时间大不相同;银片表面组装膜形貌的变化决定其缓蚀性能、稳定性和致密性等条件.%Self-assembled monolayer was fabricated on glass substrates and Ag substrates by molecular self-assembly new process.Scanning electron microscope (SEM) and Auto Ellipsometer SGC-2 were used to characterize the thin films on glasses.Metallographic microscope and the roughness measuring instrument of stylus were used to characterize the thin films on glasses.Meanwhile, electrochemical properties of silver films were evaluated by Tafel curves.The results show that morphology and density of the MPS-SAM greatly influenced by the assembly time, and the surface of the metal and nonmetal film were formed at different times.Surface morphology of silver assembled monolayer determine their corrosion performance, stability and density.【期刊名称】《科学技术与工程》【年(卷),期】2011(011)013【总页数】4页(P3059-3062)【关键词】防护效能;自组装单分子膜;3-巯基丙基三甲氧基硅烷【作者】刘琳;楚茂阳;邢锦娟;钱建华【作者单位】渤海大学辽宁省功能化合物的合成与应用重点实验室,锦州,121003;渤海大学辽宁省功能化合物的合成与应用重点实验室,锦州,121003;渤海大学辽宁省功能化合物的合成与应用重点实验室,锦州,121003;渤海大学辽宁省功能化合物的合成与应用重点实验室,锦州,121003【正文语种】中文【中图分类】TB304巯基化合物形成的自组装单分子膜(SAM)是本世纪研究的新式超薄有机膜制备技术，成膜后具有很好的稳定性、有序性、韧性等优点，成当今材料科学与腐蚀防护技术等领域的研究热点［1—4］。
纳米金/巯基化合物修饰金电极的制备及电化学行为研究汪海燕彭贞秦国旭【摘要】在裸金电极上分别自组装1,2-二（4-巯基苯）乙烯（MPE）、4,4'-二甲基联苯硫醇(MTP)，再在6nm纳米金溶胶中修饰纳米金，得纳米金巯基修饰金电极。
研究了两巯基纳米金修饰金电极的电化学行为和阻抗行为。
【期刊名称】巢湖学院学报【年(卷),期】2011(013)003【总页数】3【关键词】硫醇；修饰电极；交流阻抗谱金基底上的硫醇自组装单分子层膜（Selfassembled monolayers,SAMs）具有良好的稳定性和有序性[1]。
硫醇通过一端的巯基在金电极表面自组装，另一端巯基在纳米金溶胶中可修饰纳米金，即可制得NG/SAMs/Au修饰电极。
应用交流阻抗及循环伏安方法比较了经1，2-二（4-巯基苯）乙烯（MPE）、4，4′-二甲基联苯硫醇(MTP)修饰的金电极的电化学行为，发现巯基化合物在电极表面的修饰效果是由其本身的结构决定的。
1 实验部分1.1 仪器与试剂电化学系统（CHI604），电化学实验采用三电极体系：金电极（Φ=2mm）、纳米金修饰电极为工作电极，Ag/AgCl为参比电极，铂丝为对电极，文中所有电位均相对于参比电极。
阻抗测试条件：交流微扰幅度10mV，直流电压固定在240mV（[Fe（CN）6]4-/3-的式电位），频率范围为0.01～100000HZ。
所用溶液为 2.0 mmol/L[Fe（CN）6]4-/3-+0.5mol/LKCl+10mol/L磷酸缓冲溶液（PBS7.0)。
HAuCl4(上海试剂厂)；4，4′-二甲基联苯硫醇（MTP）和1，2-二（4-巯基苯）乙烯（MPE），以及6nm金溶胶（NG）均为实验室合成；铁氰化钾,亚铁氰化钾（分析纯，徐州试剂厂）；其余试剂为分析纯，实验用水为二次石英重蒸水。
1.2 修饰电极的制备按文献[2]处理好Au盘电极，依次用无水乙醇和二次蒸馏水超声波清洗，然后在室温下分别浸泡于 1mmol/L MPE（a）、1mmol/L MTP（b）乙醇混合溶液中6小时。
心脏生物标志物肌红蛋白的生物传感检测方法余文;刘灵芝;谢国明【摘要】急性心肌梗死(AMI)有极高的发病率和病死率.心肌损伤标志物肌红蛋白在心肌梗死后1小时内便开始升高,是AMI发生后最早可检测的标志物之一.本文重点综述了基于纳米增强比色、局域表面等离子共振、荧光和电化学分析构建的肌红蛋白检测生物传感新方法,探讨了各类方法的优缺点及其在AMI即时检测和早期诊断中的应用.【期刊名称】《分析仪器》【年(卷),期】2016(000)001【总页数】8页(P1-8)【关键词】急性心肌梗死;肌红蛋白;生物传感【作者】余文;刘灵芝;谢国明【作者单位】重庆医科大学检验医学院,重庆400016;重庆医科大学检验医学院,重庆400016;重庆医科大学检验医学院,重庆400016【正文语种】中文综述急性心肌梗死(Acute myocardial infarction，AMI) 起病急，病情凶险，死亡率高。
心电图是经典的用于诊断心脏疾病的方法，但心电图诊断AMI的阳性率仅为80%，灵敏性不够高，而且心肌梗死早期不会发生心电图特征性改变。
另外，心电图不能诊断出非ST段抬高型心肌梗死，易导致临床抢救不及时，造成严重后果。
因此，为克服心电图的局限性，心肌损伤标志物被广泛用于心肌梗死的诊断。
肌红蛋白(myoglobin，Mb)作为AMI发生后最早可检测的标志之一，在AMI发生后1小时内便开始释放入血，是目前应用最早的心肌损伤标志物。
虽然Mb的特异性不高(如肌肉损伤时，Mb也会升高)，但从病史和临床表现以及与其他指标联合诊断，能很好地鉴别出AMI，并且AMI患者Mb 的阳性率为92%[1]。
此外，Mb的阴性预测价值达100%，即在疑似发生AMI的病人中，2h内Mb在正常范围，基本可以排除AMI。
另外，Mb还可用于判断再梗死[2]。
因此检测Mb具有重要的临床意义。
一般将血清Mb浓度100ng/mL作为医学临界值。
传统的Mb的检测方法如ELISA、荧光免疫分析、化学发光分析等操作繁琐，分析费时，且需要大型分析仪器，多需要将样本送到实验室或检验科进行检测，耗时，容易延误病情(表1)。
基于巯基自组装膜的乙肝电化学免疫传感器王锐;戴小锋;白燕;刘仲明【期刊名称】《暨南大学学报（自然科学与医学版）》【年(卷),期】2009(030)005【摘要】The immunosensor was prepared by co-immobilizing thionine and Hepatitis B surface anti-body (HBsAb) on the gold electrode through covalently binding them to Au with a cysteamine/glutaral-dehyde linkage. Hepatitis B surface antigen (HBsAg) was detected qualitatively and quantificationally by the peak current decrease percentage (△/p%) of the thionine and horseradish peroxidase (HRP) in the PBS solution. The cyclic voltammngrams of the immunosenor displayed a couple of redox peaks current of the thionine. The peak current decreased after the HBsAg reacted with the HBsAb. Further more, the se-lectivity of the sensor was also studied, there's no peak current decrease while detecting the Hepatitis C antigen. The △/p% was linening relationship with the quality concentration of the HBsAg ranging from0.85×10~(-2)～5.12×10~(-2.)μg/mL and 0. 32 ～1.28μg/mL with the correlation coefficient of 0. 9815 and 0. 9906, respectively. The immunosensor was used in the clinical laboratory of human serum, which was in good agreement with the ELISA.%研制了以乙肝表面抗原(HBsAg)为检测对象的电化学免疫传感器.在金电极表面自组装半胱胺,戊二醛进行醛基化,最后通过竞争组装在自组装膜上同时固定乙肝表面抗体和硫堇,在PBS底液中以硫堇和辣根过氧化物酶(HRP)的还原峰电流的下降[△/p(%)]对乙肝表面抗原进行定性和定量的检测.结果表明,传感器具有良好的选择性,丙肝阳性对照血清对其无干扰△/p随HBsAg的质量浓度(P)的增加而增大.HBsAg的质量浓度在0.85×10~(-2)～5.12×10~(-2)μg/mL时,线性方程为△/p=5.19+1.56×ρ,相关系数为0.981 5;HBsAg的质量浓度在0.32～1.28μg/mL 时,线性方程为△/p=17.05+0.075×ρ,相关系数为0.990 6.并取临床血清进行检测,探索该传感器应用于临床检验的可行性.【总页数】5页(P543-547)【作者】王锐;戴小锋;白燕;刘仲明【作者单位】暨南大学化学系,广东,广州,510632;暨南大学化学系,广东,广州,510632;暨南大学化学系,广东,广州,510632;广州军区广州总医院,广东,广州,510010【正文语种】中文【中图分类】O646【相关文献】1.基于巯基丁二酰肼铜(Ⅱ)单层修饰电极的HIV-p24电化学免疫传感器 [J], 干宁;李天华;雷建平;王鲁雁;杨欣2.基于硫堇衍生化自组装膜的丙肝电化学免疫传感器 [J], 李敏健;戴小锋;刘仲明;蔡沛祥;白燕3.基于巯基乙酸自组装膜传感器的应用研究 [J], 屈晶;连靠奇;康维钧;牛凌梅4.基于巯基自组装单层膜的植物生长激素吲哚乙酸电化学免疫传感器的研究 [J], 李春香;李劲;萧浪涛;沈国励;俞汝勤5.基于巯基和聚电解质双层自组装膜的压电免疫传感器检测小鼠IgG气溶胶 [J], 左伯莉;郭钊;张金芳;李善茂因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
