肠杆菌科及检验
● 考点
概述
概念；命名与分类原则；共同特点；自然与人体内的分布；微生物学检查方法；临床意义。
埃希菌属、沙门菌属、志贺菌属、变形杆菌属、耶尔森菌属及其他肠杆菌科细菌。
生物学性状；微生物学检验；临床意义。
【内容讲解】
一、概述（共性）
肠杆菌科是由多个菌属组成，G-杆菌，生物学性状相似。
大多数肠道杆菌属于正常菌群。当机体免疫力降低或侵入肠道外组织时成为条件致病菌而引起疾病。
部分为致病性细菌。
（一）分类
肠杆菌科细菌的种类繁多。主要根据细菌的形态、生化反应、抗原性质以及核酸相关性进行分类。根据《伯杰系统细菌学手册》（1984年）将肠杆菌科的细菌分为20个属即埃希菌属、志贺菌属、沙门菌属、枸橼酸杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属、沙雷菌属、哈夫尼亚菌属、爱德华菌属、普罗威登斯菌属、变形杆菌属、摩根菌属、耶尔森菌属等。
（二）生物学特性
1.形态与染色
G-，杆菌，大小为（1.0～6.0）μm×（0.3～1.0）μm。
多数有周鞭毛（除志贺菌属、克雷伯菌属、鼠疫耶尔森菌和EIEC），无芽胞，少数菌属细菌可形成荚膜。
2.培养
需氧或兼性厌氧；营养要求不高；
普皿和麦康凯培养基：中等大小、表面光滑的菌落；
液体培养基：混浊生长。
3.生化反应
发酵葡萄糖产酸、或产酸产气；
乳糖发酵试验：非致病菌 +，致病菌 -（除外变形杆菌）。触酶阳性；氧化酶阴性；硝酸盐还原为亚硝酸盐。
4.抗原构造
表面抗原（如Vi抗原、K抗原）：包绕在O抗原外的不耐热的多糖抗原，可阻断O抗原与相应抗体之间的反应，加热处理能破坏其阻断作用。
5.变异
菌落S～R变异
鞭毛H～O变异
耐药性变异
生化反应性质的改变
6.抵抗力
不强。加热60℃，30分钟即被杀死。不耐干燥，对一般化学消毒剂敏感。对低温有耐受力，能耐胆盐。
7.肠杆菌科的初步分类
（三）致病性
1.致病性肠道杆菌：以肠内感染为主，腹泻为共显症状，引起急慢性肠道感染、食物中毒、旅游者腹泻及肠热症等。
2.条件致病菌：为医院感染主要病原菌，出现移位感染。大肠埃希菌、变形杆菌及克雷伯菌等条件致病菌可引起泌尿生殖道、伤口等部位的感染。
（四）微生物检验
1.分离培养
2.鉴定
（1）初步鉴定：
①确定肠杆菌科的细菌，应采用葡萄糖氧化-发酵试验及氧化酶试验与弧菌科和非发酵菌加以鉴别；
②肠杆菌科细菌的分群，多采用苯丙氨酸脱氨酶和葡萄糖酸盐试验，将肠杆菌科的细菌分为三个类群；
③选择生化反应进行属种鉴别。KIA和MIU将细菌初步定属。
（2）最后鉴定：
根据生化反应的结果初步定属、种，再用诊断血清做凝集反应才能作出最后判断。
二、埃希菌属
5个种：大肠埃希菌、蟑螂埃希菌、弗格森埃希菌、赫尔曼埃希菌和伤口埃希菌。
临床最常见的是大肠埃希菌。
（一）生物学性状
1.形态与染色
G-，短杆菌，（1.0～3.0）μm× （0.4～0.7）μm。多数有周鞭毛，有菌毛，有荚膜或微荚膜。
2.培养特性
兼性厌氧菌；营养要求不高。
普通营养肉汤：浑浊生长。
普通营养琼脂：圆形，凸起，边缘整齐，灰白色的S型菌落，直径2～3mm。
血琼脂平板：少数菌株产生β-溶血环。
伊红亚甲蓝琼脂：菌落呈蓝紫色并有金属光泽（发酵乳糖）。
麦康凯和SS琼脂：粉红色菌落。
3.生化反应
发酵葡萄糖、乳糖、麦芽糖和甘露醇产酸产气，分解蔗糖因菌株而异，尿素酶试验阴性。
吲哚、甲基红、V-P、枸橼酸盐试验（IMViC试验）为+ + - -。
克氏双糖铁琼脂（KIA）：斜面和底层均产酸产气，H2S（-）。
动力-吲哚-尿素（MIU）培养基为+ + -。
4.抗原结构
菌体抗原（O）、表面抗原（K）和鞭毛抗原（H）三种构成。
现已知有171种O抗原，100种K抗原和56种H抗原。
一个菌株的抗原类型由特殊的O、K和H抗原的代码表示，其血清型别的方式是按O：K：H排列，例如O111：K58：H2。
（二）致病性
致病物质：主要是侵袭力、内毒素、肠毒素等。
所致疾病：
1.肠道外感染以泌尿系统感染常见，还有菌血症，胆囊炎，腹腔脓肿。
2.肠道感染（致病性大肠埃希菌）
肠产毒型大肠埃希菌（ETEC）：引起霍乱样肠毒素腹泻（水泻）。
肠致病型大肠埃希菌（EPEC）：主要引起婴儿腹泻。
肠侵袭型大肠埃希菌（EIEC）：可侵入结肠黏膜上皮，引起痢疾样腹泻（黏液脓血便）。
肠出血型大肠埃希菌（EHEC）：又称产志贺样毒素（VT）大肠埃希菌（SLTEC或UTEC），其中O157：H7可引起出血性大肠炎和溶血性尿毒综合征（HUS）。
临床特征为严重的腹痛、痉挛，反复出血性腹泻，伴发热、呕吐等。严重者可发展为急性肾衰竭。
肠黏附型大肠埃希菌（EAggEC）：新近报道能引起腹泻。
3.CDC将大肠埃希菌O157：H7列为常规检测项目
在北美许多地区，O157；H7占肠道分离病原菌的第二或第三位，是从血便中分离到的最常见的病原菌。
6、7、8三个月O157：H7感染的发生率最高。
O157是4岁以下儿童急性肾衰的主要病原菌。
（三）微生物检验
1.标本采集
肠道感染可采集粪便；
肠道外感染可根据临床感染情况采集中段尿液、血液、脓汁、胆汁、脑脊液、痰、分泌液等。
2.检验方法及鉴定
