食用菌实验-菌种分离

食用菌菌种质量的几种检验鉴定方法优质菌种的标准食用菌的种类虽然繁多，但从总体上看，每一个优良菌种均有"纯、正、壮、润、香"的共性。

其标准是：1、菌种的纯度要高，不能有杂菌感染，也不能有其他类似的菌种。

2、菌丝色泽要纯正，多数种类的菌丝应纯白、有光泽，原种、栽培种菌丝应连结成块，无老化变色现象。

3、菌丝要粗壮，分枝多而密，接种到培养基吃料块，生长旺盛。

4、培养体要湿润，与试管（瓶）壁紧贴而不干缩，含水适宜。

5、具有每品种特有的清香味，不可有霉、腐气味。

菌种质量的检验方法1、外观直接观察鉴定：对引进菌种，先观察包装是否合乎要求，棉塞有无松动，试管、玻璃瓶和塑料袋有无破损，棉塞和管、瓶或袋中有无病虫侵染，菌丝色泽是否正常，有无发生变化。

然后在瓶塞边作深吸气，闻其是否具备特有的香味。

原种和栽培种可取出小块菌丝体观察其颜色和均匀度，并用手指捏料块检验含水量是否符合标准。

如果菌丝浓白、粗壮、富有弹性，则生命力强；如果菌种菌丝萎缩，干燥无色泽，或菌丝体自溶产生了多量红褐色液体，则生活力已变弱，不宜再用；木块菌种如仍保持硬实，则属于生活力强的菌种，如若木块变得软化松散，则已老化，不宜使用。

2、培养观察鉴定：对于分离、选育和引进的菌种，通过培养，观察菌丝体对干、湿度和温度等方面的适应特性。

如将菌丝体置于偏干、偏湿和干湿相宜的条件下培养，若菌丝在前两种条件下能良好生长，而在干湿相宜的条件下生长最佳，则说明是好菌种。

3、观察菌丝长速：将供测的菌种接入新配制的试管斜面培养基上，置于最适宜的温、湿度条件下进行培养，如果菌丝生长迅速、整齐浓密、健壮有力，则表明是优良菌种，否则即是劣质菌种。

4、液体培养鉴定：配制2％糖水溶液，经常规灭菌消毒，挑取黄豆粒大的菌块，放入100毫升上述溶液中，置于25-28℃温度下培养3-7天后，若液面出现气泡，产生“油皮”，发生浑浊现象，说明菌种本身有杂菌；如果苗块下沉，或迟迟才长出很薄的菌丝层，则说明菌种生活力弱；如若液面四周的菌丝生长快，且浓白呈棉絮状，则表明菌种生命力强。

食用菌液体菌种的几种实用检测方法随着人们对食用菌的重视，食用菌的种植和生产得到了越来越多的关注。

液体菌种是食用菌生产中必不可少的一环，因此对其质量的检测也显得尤为重要。

本文将介绍几种实用的液体菌种检测方法。

一、显微镜检测法显微镜检测法是一种最基本的液体菌种检测方法。

通过显微镜观察液体菌种中的菌丝和孢子，可以判断液体菌种是否纯净，是否存在杂菌污染等情况。

具体操作步骤如下：1、取液体菌种样品，放入显微镜检查盘中。

2、在显微镜下观察，根据形态特征判断是否存在杂菌污染。

3、对菌丝和孢子进行计数，以确定液体菌种的浓度。

二、菌落计数法菌落计数法是一种常用的液体菌种检测方法，适用于检测液体菌种中的细菌数量。

具体操作步骤如下：1、取一定量的液体菌种样品，用无菌蒸馏水稀释至一定浓度。

2、将稀释液均匀涂布在含有营养物质的琼脂平板上。

3、将琼脂平板放入恒温培养箱中，培养一定时间后，统计出平板上的菌落数量。

4、根据菌落数量，计算出液体菌种中的菌落形成单位（CFU）。

三、PCR检测法PCR检测法是一种基于DNA分子生物学技术的液体菌种检测方法，可以快速、准确地检测出液体菌种中的特定菌种。

具体操作步骤如下：1、取一定量的液体菌种样品，提取其中的DNA。

2、利用PCR技术扩增目标菌种的DNA片段。

3、将扩增产物进行电泳分析，根据不同的DNA片段长度，判断是否存在目标菌种。

四、生化鉴定法生化鉴定法是一种基于菌种代谢特征的液体菌种检测方法，可以判断液体菌种中存在的菌种种类。

具体操作步骤如下：1、取一定量的液体菌种样品，进行生化鉴定实验。

2、根据不同菌种代谢特征，进行生化试剂反应。

3、根据反应结果，判断液体菌种中存在的菌种种类。

综上所述，液体菌种的检测方法可以根据需要选择不同的方法进行。

通过合理的检测方法，可以保证液体菌种的质量，提高食用菌生产的效率和质量。

实训一食用菌的形态特征观察（2学时）一、实验目的1．弄清食用菌生活史的基本过程。

孢子---菌丝体---子实体---孢子2．掌握孢子印及孢子的收集方法。

3．观察菌丝体的形态特征。

4．观察和掌握常见食用菌子实体的形态特征。

二、实验材料1．各种干、鲜食用菌子实体，液浸标本，干制标本。

品种有：平菇、香菇、双孢磨菇、金针菇、草菇、鸡腿菇；银耳、黑木耳、毛木耳；猴头、竹荪、灵芝；紫陀螺菌、松乳菇。

2．各种食用菌菌丝体（菌种）。

三、实验内容与方法（一）识别各种食用菌子实体的形态特征首先观察各种食用菌子实体的组成部分及其形态特征。

然后用解剖刀纵切子实体观察其菌盖组成，菌肉的颜色、质地，菌褶形状和着生情况（离生、延生、直生、弯生）等。

再观察其菌柄的组成，菌柄的质地，中实或中空等。

（二）观察双核菌丝及其锁状联合的形态构造1．将清洁的载片中央滴半滴水。

2．用接种针（或解剖针）于试管斜面或培养料内挑取少许菌丝体置于载玻片液滴中，并用接种针或解剖针将菌丝体挑开使之分散。

3．用镊子加盖玻片，注意避免产生气泡。

4．用高倍镜观察双核菌丝体及锁状联合的形态构造。

四、实验报告1．根据实验情况填写下列表格：2．学习体会。

实训二、三食用菌一级菌种的制作技术（6学时）备注：一级菌种制作分两次实验完成，第一次实验主要配制培养基并灭菌、检验灭菌效果，占用4学时；第二次实验主要进行菌种分离、转管及培养。

占用2学时。

（时间不够利用课外时间补）食用菌又名母种，多用试管作为容器，因此又称试管种，是指经组织分离、孢子分离或基内菌丝分离而得到的菌丝体。

一级菌种培养基常用于菌种的分离、纯化、扩大、转管和菌种保藏。

一级菌种的制作过程可分培养基的制作、灭菌、接种和培养等几个主要阶段。

一、实验目的通过实验，使同学们掌握培养基的制作、消毒与灭菌、菌种分离（组织分离）、转管、培养等操作技术和方法。

二、实验材料手提式高压灭菌锅、接种箱或超净工作台、电热恒温培养箱、玻璃漏斗、漏斗架、止水夹、铝锅、电炉、1000mL量杯、纱布、棉花、18mm×180mm试管、细线绳、防潮纸或牛皮纸、刀、马铃薯、葡萄糖或蔗糖、琼脂、2cm厚长形木条、pH试纸、1mol／L Na0H溶液、1mol／L HCl溶液、酒精灯、75％酒精消毒瓶、75％酒精消毒棉球瓶、无菌培养皿、镊子、解剖刀、接种针、待分离的菇种、待移接的菌种、火柴、记号笔等。

食用菌育种技术的研究进展作者：桂明英等来源：中国食用菌，2006（5）随着人们对食用菌营养价值和药用价值认识的提高以及食用菌生产所带来的经济效益的增加。

食用菌育种工作也成为食用菌科技工作者关注的热点之一。

现对食用菌育种工作的研究进展进行综述，以期为食用菌的育种工作提供参考。

一、野生食用茵驯化育种野生食用菌驯化栽培．是食用菌育种的重要内容．栽培的食用菌品种绝大部分是由野生食用菌驯化而来的。

例如：阿魏蘑的驯化工作．是中国科学院新疆生物土壤沙漠研究所于1983年开始的．当时曹玉清、牟川静、陈忠纯等在研究驯化分布于新疆托里地区的野生阿魏侧耳fP／eurotu~retainel时，对其形态特征、分类地位、氨基酸含量、生活条件(包括营养、pH值、温度、湿度、光照和通风)、菌丝培养特征、驯化栽培等进行了研究。

观察到分离的野生菌株K001、K002与K005在培养特征上的差异。

1986年他们又在新疆木垒采集到Kill标本．在进一步研究中发现．K005、Klll在子实体外部形态与菌丝培养特征上与阿魏侧耳显著不同。

经研究定名为阿魏侧耳托里变种[Pieurotus ervngii(DC．ex． Fr)0ueI．var．tuolie nsis Mou．n var]。

他们1983年对 K001、K002、K005菌株驯化栽培中．发现在有无寄主植物阿魏根屑添加在培养基中的情况下．用棉籽壳、云杉木屑、麸皮等原料组成的培养基上都相继长出了子实体．阿魏侧耳及托里变种自此得到推广．首先在新疆开始人工栽培。

已成为近年来大面积进行商业性栽培的一种食用菌新品种。

其菇体肥大、颜色洁白、菌肉细腻、质地脆嫩、久炖不绵、清爽滑润、味美可口、营养丰富．投入市场后深受人们的青睐。

目前我国引进和驯化栽培成功的食用菌已达80多个种。

二、孢子分离育种单孢分离就是将采集到的孢子群单个分开培养，让其单独萌发成菌丝而获得纯培养的方法。

曹裕汉通过对草菇有性分离选育种研究．表明草菇孢子分离菌株在菌丝形态、生长速率、产厚垣孢子能力、出菇、产量等性状上存在较大的差异。