IVC笼盒常用两种消毒剂毒性比较[1]
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经观察计算骨髓嗜多染红细胞微核率 , 二氯异 氰尿酸钠各剂量组与过氧乙酸组比较差异无显著性 ( P > 0105) ; 二氯异氰尿酸钠各剂量组 、过氧乙酸各 剂量 组 与 阴 性 对 照 组 比 较 差 异 无 显 著 性 ( P > 0105) ;二氯异氰尿酸钠各剂量组 、过氧乙酸各剂量 组与阳性对照组比较差异显著 ( P < 0101) ; 环磷酰
[ 作者简介 ]邱泽文 (1967 - ) ,男 ,学士 ,实验师 ,主要研究方向 :实验动物科学 。E2mail : qiuzewens @1631com [ 通讯作者 ]王靖宇 (1964 - ) ,男 ,博士 , 实验动物科学教授 。电话 :0411284720013 E2mail : wangjingyus @1631com
2007 年 8 月 第 17 卷 第 8 期
中国比较医学杂志 CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE
August , 2007 Vol . 17 No. 8
研究报告
IVC 笼盒常用两种消毒剂毒性比较
邱泽文1 ,詹红微1 ,梁桂英2 ,陈 军1 ,高文婷1 ,王靖宇1
QIU Ze2wen1 , ZHAN Hong2wei1 , LIANG Gui2Ying2 , CHEN J un1 , GAO Wen2ting1 , WANGJing2yu1
(11 Laboratory Animal Center , Dalian Medical University , Dalian 116027 , China ; 21 Changchun Normal University , Changchun 130032 , China)
对细菌繁殖体 、芽孢 、真菌 、病毒等都有很强的杀灭 作用[6] 。本试验使用过氧乙酸为二元包装消毒剂 , 用前将 A 、B 液混合 ,于室温下放置 48 h 后 ,配成相 关浓度备用 ;二氯异氯尿酸钠是异氰尿酸的氯化衍 生物 ,为白色固体 , 带有刺激性氯气味 ,有效氯含量 为质量分数 56 % ;在实验室对二者毒性和使用安全 性进行试验[6 - 7] ,现将结果报告如下 。
2 结果
211 急性经口毒性试验结果 试验观察期间 ,高 、中剂量组动物出现四肢无
力 ,呼吸困难 ,被毛竖立 、静卧等症状 ,3～72 h 内有 动物死亡 。根据死亡数计算 ,过氧乙酸对小鼠急性 经口 LD50 为 1 983 mgΠkg 体重 ,属于低毒级 。二氯 异氰尿酸钠以有效氯计对雌性小鼠经口 LD50 为 1 454 mgΠkg 体重 。 212 小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验结果
S4
中国比较医学杂志 2007 年 8 月第 17 卷第 8 期 Chin J Comp Med , August 2007 ,Vol . 17. No. 8
பைடு நூலகம்
1 材料和方法
111 实验动物 本试验所使用动物均由大连医科大学实验动物
中心提供 ,生产许可证号 : SCXK(辽) 2004 - 0017 ,使 用许可证号 :SYXK(辽) 2004 - 0029 。动物实验室温 度 (20～22) ℃,自由进食饮水 、12 h 昼夜 。 112 仪器与试剂
中国比较医学杂志 2007 年 8 月第 17 卷第 8 期 Chin J Comp Med , August 2007 ,Vol . 17. No. 8
【 Key words】 Peracetic acid ; Sodium dichloroisocyanurate ; Acute toxicity ; Subacute toxicity ; irritability ; Guinea pig
IVC(individually ventilated cage) 笼盒是一种微环 境净化屏障笼具之一 ,是传统动物实验屏障净化系 统的代替型设备 ,具有节能 、环保 、操作简便 、占地面 积小特点 , 笼盒内环境优越及安全性能高[1 - 5] , 近 年 ,在小型动物饲养及动物实验中 ,被大量使用 。过 氧乙酸和二氯异氰尿酸钠两种消毒剂是 IVC 笼盒表 面消毒常用高效消毒剂 ,具有杀菌谱广 , 杀菌力强 ,
(11 大连医科大学实验动物中心 ,大连 116027 ; 21 长春师范学院 ,长春 130032)
【摘要】 目的 对常用过氧乙酸和二氯异氰尿酸钠两种消毒剂毒性进行毒理学评价 ,检验其使用的安全性 。 方法 采用急性 、亚急性动物毒性试验方法 ,对一些毒理学试验结果进行比较 。结果 过氧乙酸和二氯异氰尿酸 钠半数致死量 (LD50) 试验均属低毒 ;2 gΠL 过氧乙酸对动物皮肤无刺激 ,对眼睛有轻度刺激 ; 以 112 mgΠL 有效氯溶 液对豚鼠皮肤有轻度刺激性 ;3 种剂量诱导小鼠骨髓嗜多染红细胞 ( PCE) 微核细胞率与阴性对照组比较差异无显 著性 ( P > 0105) ,对小鼠 PCE 无诱变作用 ;对小鼠精子无致畸作用 ( P > 0105) 。结论 过氧乙酸和二氯异氰尿酸钠 两种消毒剂属于低毒级物质 ,在一般消毒使用浓度下具有较好的使用安全性 。
整 。用含有效氯 112 gΠL 二氯异氰尿酸钠和过氧乙 酸 2 gΠL 水溶液 015 mL 分别滴于 215 cm × 215 cm 小的两层纱布上并敷贴于一侧皮肤表面 ,然后用一 层无刺激塑料膜覆盖 ,再用无刺激胶布固定 。另一 侧用生理盐水作为对照 。敷药 4 h 后 ,用温水除去 残留受试物 。分别于去除受试物后的 1 h 、24 h 和 48 h 观察皮肤局部反应 ,进行刺激反应评分和刺激 强度评价 ,按皮肤刺激指数评定刺激强度的级别 。 11315 急性眼刺激试验 : 选择双眼正常的大耳白 兔 8 只 ,分成过氧乙酸 2 gΠL 和有效氯 112 gΠL 二氯 异氰尿酸钠 2 组 ,每组 4 只家兔 。将药液 2 滴滴入 家兔一侧眼睛结膜囊内 ,立即使眼睛被动闭合4 s , 用生理盐水冲洗 5 min 。另一侧作对照 ,滴入等量生 理盐水 ,于滴眼后 1 h 、24 h 、48 h 、4 d 、7 d 观察眼结 膜 、虹膜和角膜的损伤和恢复情况 。根据《消毒技术 规范》的评价规定进行评分 ,并判断刺激强度 。 11316 亚急性毒性试验 : 取体重为 (200 ±20) g SD 大鼠 70 只 ,随机分为 7 组 ,每组 10 只 ,雌雄各半 。 依据急性毒性试验所得 LD50 值 ,设 170 、75 、20 mgΠ kg 体重 3 个剂量组 ,阴性对照组给蒸馏水 。采用经 口灌胃给药 ,按 10 mLΠkg 体重 ,每日 1 次 ,连续灌胃 30 d 。实验期间 ,动物自由摄食和饮水 ,每天观察并 记录动物的中毒症状和死亡情况 ,每周称 1 次体重 , 并按体重调整受试物给予量 。第 30 天取血测定血 液常规 ;禁食 12 h ,取血进行肝功 、肾功 、血脂和血液 蛋白等生化指标测定 。解剖观察动物肝 、脾和肾等 脏器并计算脏体比 ;进行组织病理学检查 。
NIKON 显微镜 (南京) ,姬姆萨 ( Giemsa) 染色剂 (自配) , 二 氯 异 氯 尿 酸 钠 ( 河 北) , 过 氧 乙 酸 ( 辽 宁) ,环磷酰胺 (上海) 。 113 方法 11311 小鼠急性经口毒性试验 : 选取 ICR 种小鼠 80 只 ,体重 20～22 g ,每组 10 只 ,雌雄各半 ,过氧乙 酸和二氯异氰尿酸钠各分 4 个剂量组 ,给药前禁食 12 h 。过氧乙酸和二氯异氰尿酸钠试验分别设 464 、 1 000 、2 150 和 4 640 mgΠkg 4 个剂量组 ,灌胃给药 , 染毒后记录动物的中毒症状和死亡情况 ,连续观察 14 d ,按霍恩氏法计算 LD50 ,确定急性毒性分级 。 11312 小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验 : 选 ICR 小鼠 80 只 ,体重 25～30 g ,随机分成 8 组 ,每组 10 只 ,雌雄各半 。过氧乙酸和二氯异氰尿酸钠两种受 试物各分成 147 、294 和 735 mgΠkg 体重 3 个剂量组 , 按 012 mLΠ10 g 体重灌胃给药 ;以 30 mgΠkg 环磷酰胺 为阳性对照组 ;蒸馏水为阴性对照 。采用 30 h 染毒 法 ,分别于 0 和 24 h 各给药 1 次 ,第 2 次给药后 6 h , 将动物脱椎处死 ,取股骨骨髓制片 、固定 、Giemsa 染 色 。每只动物观察 1 000 个形态完整的骨髓嗜多染 红细胞 ( PCE) , 计算微核发生率 ( ‰) , 同时观察 PCE 与正染红细胞 (NEC) 的比例 ( PCEΠNCE) 。数 据处理用卡方检验 。 11313 小鼠精子畸形试验 : 取体重 25～35 g 雄性 ICR 小鼠 25 只 ,随机分 5 个组 ,每组 5 只 。根据本试 验 LD50 值 ,两种受试物设 4 500 、1 200 和 450 mgΠkg 体重 3 个组 ,阳性对照组给环磷酰胺 (30 mgΠkg) ,阴 性对照组给蒸馏水 。每天灌胃 1 次 ,阳性对照组腹 腔注射环磷酰胺每天 1 次 ,采用连续 5 d 方法染毒 , 选择染毒后第 35 天采样 ,每只动物计数 1 000 个精 子中的畸形精子数 。计算各组精子畸形率 ,进行统 计学分析 。 11314 皮肤刺激性试验 : 选用豚鼠 6 只 , 均为雄 性 ,体重 200～250 g ,每组 3 只 。实验前 24 h ,将背部 两侧去毛 ,去毛范围为 (3 ×3) cm 区域 ,皮肤保持完
【Abstract】 Objective In order to evaluate the safety of use of per acetic acid( PAA) and sodium dichloroisocyanurate (ACL260) toxicity. Method To Ccompare the results of acute and subacute toxicity test. Result The results of acute oral LD50 showed that PAA and ACL260 are of low toxicity grade. PAA and ACL260 disinfectants could cause moderate irritation to animal skin and eye , and 2 gΠL peracetic acid was non2irritative to animal skin and slightly irritative to the eye. 112 mgΠL ACL260 could cause moderate irritation to Guinea pig skin. The rates of PCE micronuclear cells induced by 3 dosage were not significantly different from that of negative control group ( P > 0105) . Conclusion peracetic acid and sodium dichloroisocyanurate are mildly toxic and can be considered as safe disinfectant commonly used at low concentration.
[ 作者简介 ]邱泽文 (1967 - ) ,男 ,学士 ,实验师 ,主要研究方向 :实验动物科学 。E2mail : qiuzewens @1631com [ 通讯作者 ]王靖宇 (1964 - ) ,男 ,博士 , 实验动物科学教授 。电话 :0411284720013 E2mail : wangjingyus @1631com
2007 年 8 月 第 17 卷 第 8 期
中国比较医学杂志 CHINESE JOURNAL OF COMPARATIVE MEDICINE
August , 2007 Vol . 17 No. 8
研究报告
IVC 笼盒常用两种消毒剂毒性比较
邱泽文1 ,詹红微1 ,梁桂英2 ,陈 军1 ,高文婷1 ,王靖宇1
QIU Ze2wen1 , ZHAN Hong2wei1 , LIANG Gui2Ying2 , CHEN J un1 , GAO Wen2ting1 , WANGJing2yu1
(11 Laboratory Animal Center , Dalian Medical University , Dalian 116027 , China ; 21 Changchun Normal University , Changchun 130032 , China)
对细菌繁殖体 、芽孢 、真菌 、病毒等都有很强的杀灭 作用[6] 。本试验使用过氧乙酸为二元包装消毒剂 , 用前将 A 、B 液混合 ,于室温下放置 48 h 后 ,配成相 关浓度备用 ;二氯异氯尿酸钠是异氰尿酸的氯化衍 生物 ,为白色固体 , 带有刺激性氯气味 ,有效氯含量 为质量分数 56 % ;在实验室对二者毒性和使用安全 性进行试验[6 - 7] ,现将结果报告如下 。
2 结果
211 急性经口毒性试验结果 试验观察期间 ,高 、中剂量组动物出现四肢无
力 ,呼吸困难 ,被毛竖立 、静卧等症状 ,3～72 h 内有 动物死亡 。根据死亡数计算 ,过氧乙酸对小鼠急性 经口 LD50 为 1 983 mgΠkg 体重 ,属于低毒级 。二氯 异氰尿酸钠以有效氯计对雌性小鼠经口 LD50 为 1 454 mgΠkg 体重 。 212 小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验结果
S4
中国比较医学杂志 2007 年 8 月第 17 卷第 8 期 Chin J Comp Med , August 2007 ,Vol . 17. No. 8
பைடு நூலகம்
1 材料和方法
111 实验动物 本试验所使用动物均由大连医科大学实验动物
中心提供 ,生产许可证号 : SCXK(辽) 2004 - 0017 ,使 用许可证号 :SYXK(辽) 2004 - 0029 。动物实验室温 度 (20～22) ℃,自由进食饮水 、12 h 昼夜 。 112 仪器与试剂
中国比较医学杂志 2007 年 8 月第 17 卷第 8 期 Chin J Comp Med , August 2007 ,Vol . 17. No. 8
【 Key words】 Peracetic acid ; Sodium dichloroisocyanurate ; Acute toxicity ; Subacute toxicity ; irritability ; Guinea pig
IVC(individually ventilated cage) 笼盒是一种微环 境净化屏障笼具之一 ,是传统动物实验屏障净化系 统的代替型设备 ,具有节能 、环保 、操作简便 、占地面 积小特点 , 笼盒内环境优越及安全性能高[1 - 5] , 近 年 ,在小型动物饲养及动物实验中 ,被大量使用 。过 氧乙酸和二氯异氰尿酸钠两种消毒剂是 IVC 笼盒表 面消毒常用高效消毒剂 ,具有杀菌谱广 , 杀菌力强 ,
(11 大连医科大学实验动物中心 ,大连 116027 ; 21 长春师范学院 ,长春 130032)
【摘要】 目的 对常用过氧乙酸和二氯异氰尿酸钠两种消毒剂毒性进行毒理学评价 ,检验其使用的安全性 。 方法 采用急性 、亚急性动物毒性试验方法 ,对一些毒理学试验结果进行比较 。结果 过氧乙酸和二氯异氰尿酸 钠半数致死量 (LD50) 试验均属低毒 ;2 gΠL 过氧乙酸对动物皮肤无刺激 ,对眼睛有轻度刺激 ; 以 112 mgΠL 有效氯溶 液对豚鼠皮肤有轻度刺激性 ;3 种剂量诱导小鼠骨髓嗜多染红细胞 ( PCE) 微核细胞率与阴性对照组比较差异无显 著性 ( P > 0105) ,对小鼠 PCE 无诱变作用 ;对小鼠精子无致畸作用 ( P > 0105) 。结论 过氧乙酸和二氯异氰尿酸钠 两种消毒剂属于低毒级物质 ,在一般消毒使用浓度下具有较好的使用安全性 。
整 。用含有效氯 112 gΠL 二氯异氰尿酸钠和过氧乙 酸 2 gΠL 水溶液 015 mL 分别滴于 215 cm × 215 cm 小的两层纱布上并敷贴于一侧皮肤表面 ,然后用一 层无刺激塑料膜覆盖 ,再用无刺激胶布固定 。另一 侧用生理盐水作为对照 。敷药 4 h 后 ,用温水除去 残留受试物 。分别于去除受试物后的 1 h 、24 h 和 48 h 观察皮肤局部反应 ,进行刺激反应评分和刺激 强度评价 ,按皮肤刺激指数评定刺激强度的级别 。 11315 急性眼刺激试验 : 选择双眼正常的大耳白 兔 8 只 ,分成过氧乙酸 2 gΠL 和有效氯 112 gΠL 二氯 异氰尿酸钠 2 组 ,每组 4 只家兔 。将药液 2 滴滴入 家兔一侧眼睛结膜囊内 ,立即使眼睛被动闭合4 s , 用生理盐水冲洗 5 min 。另一侧作对照 ,滴入等量生 理盐水 ,于滴眼后 1 h 、24 h 、48 h 、4 d 、7 d 观察眼结 膜 、虹膜和角膜的损伤和恢复情况 。根据《消毒技术 规范》的评价规定进行评分 ,并判断刺激强度 。 11316 亚急性毒性试验 : 取体重为 (200 ±20) g SD 大鼠 70 只 ,随机分为 7 组 ,每组 10 只 ,雌雄各半 。 依据急性毒性试验所得 LD50 值 ,设 170 、75 、20 mgΠ kg 体重 3 个剂量组 ,阴性对照组给蒸馏水 。采用经 口灌胃给药 ,按 10 mLΠkg 体重 ,每日 1 次 ,连续灌胃 30 d 。实验期间 ,动物自由摄食和饮水 ,每天观察并 记录动物的中毒症状和死亡情况 ,每周称 1 次体重 , 并按体重调整受试物给予量 。第 30 天取血测定血 液常规 ;禁食 12 h ,取血进行肝功 、肾功 、血脂和血液 蛋白等生化指标测定 。解剖观察动物肝 、脾和肾等 脏器并计算脏体比 ;进行组织病理学检查 。
NIKON 显微镜 (南京) ,姬姆萨 ( Giemsa) 染色剂 (自配) , 二 氯 异 氯 尿 酸 钠 ( 河 北) , 过 氧 乙 酸 ( 辽 宁) ,环磷酰胺 (上海) 。 113 方法 11311 小鼠急性经口毒性试验 : 选取 ICR 种小鼠 80 只 ,体重 20～22 g ,每组 10 只 ,雌雄各半 ,过氧乙 酸和二氯异氰尿酸钠各分 4 个剂量组 ,给药前禁食 12 h 。过氧乙酸和二氯异氰尿酸钠试验分别设 464 、 1 000 、2 150 和 4 640 mgΠkg 4 个剂量组 ,灌胃给药 , 染毒后记录动物的中毒症状和死亡情况 ,连续观察 14 d ,按霍恩氏法计算 LD50 ,确定急性毒性分级 。 11312 小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验 : 选 ICR 小鼠 80 只 ,体重 25～30 g ,随机分成 8 组 ,每组 10 只 ,雌雄各半 。过氧乙酸和二氯异氰尿酸钠两种受 试物各分成 147 、294 和 735 mgΠkg 体重 3 个剂量组 , 按 012 mLΠ10 g 体重灌胃给药 ;以 30 mgΠkg 环磷酰胺 为阳性对照组 ;蒸馏水为阴性对照 。采用 30 h 染毒 法 ,分别于 0 和 24 h 各给药 1 次 ,第 2 次给药后 6 h , 将动物脱椎处死 ,取股骨骨髓制片 、固定 、Giemsa 染 色 。每只动物观察 1 000 个形态完整的骨髓嗜多染 红细胞 ( PCE) , 计算微核发生率 ( ‰) , 同时观察 PCE 与正染红细胞 (NEC) 的比例 ( PCEΠNCE) 。数 据处理用卡方检验 。 11313 小鼠精子畸形试验 : 取体重 25～35 g 雄性 ICR 小鼠 25 只 ,随机分 5 个组 ,每组 5 只 。根据本试 验 LD50 值 ,两种受试物设 4 500 、1 200 和 450 mgΠkg 体重 3 个组 ,阳性对照组给环磷酰胺 (30 mgΠkg) ,阴 性对照组给蒸馏水 。每天灌胃 1 次 ,阳性对照组腹 腔注射环磷酰胺每天 1 次 ,采用连续 5 d 方法染毒 , 选择染毒后第 35 天采样 ,每只动物计数 1 000 个精 子中的畸形精子数 。计算各组精子畸形率 ,进行统 计学分析 。 11314 皮肤刺激性试验 : 选用豚鼠 6 只 , 均为雄 性 ,体重 200～250 g ,每组 3 只 。实验前 24 h ,将背部 两侧去毛 ,去毛范围为 (3 ×3) cm 区域 ,皮肤保持完
【Abstract】 Objective In order to evaluate the safety of use of per acetic acid( PAA) and sodium dichloroisocyanurate (ACL260) toxicity. Method To Ccompare the results of acute and subacute toxicity test. Result The results of acute oral LD50 showed that PAA and ACL260 are of low toxicity grade. PAA and ACL260 disinfectants could cause moderate irritation to animal skin and eye , and 2 gΠL peracetic acid was non2irritative to animal skin and slightly irritative to the eye. 112 mgΠL ACL260 could cause moderate irritation to Guinea pig skin. The rates of PCE micronuclear cells induced by 3 dosage were not significantly different from that of negative control group ( P > 0105) . Conclusion peracetic acid and sodium dichloroisocyanurate are mildly toxic and can be considered as safe disinfectant commonly used at low concentration.
