糖醛酸含量测定

实验二十五 细胞中糖类化合物的提取及成分鉴定糖类是一类多羟基的醛或酮及其缩合物或衍生物的总称，可分为单糖、寡糖、多糖、复合糖及糖的衍生物如糖胺、糖酸等。

糖类是生物界分布极广，含量十分丰富的一类有机化合物，几乎所有的动物、植物、微生物体内都含有糖类，其功能也是多样的。

过去认为糖类在生物体内的作用主要是作为能量来源及结构物质，但近20年以来发现糖的复合物在细胞识别、细胞间物质的运输和免疫调节等方面有重要的作用。

糖复合物的信息量非常大，是生物的另一类重要生物大分子化合物。

因此糖的分离、纯化、结构测定、结构与功能的研究也受到科学家广泛的关注。

糖的提取分离方法很多，主要是依据不同糖分子的物理化学性质、溶解度的差异进行 分离提取。

近年也发展了许多新的分离、纯化方法，如薄层层析法、各种柱层析法、气相色 谱及高效液相色谱法等。

糖的定量分析方法也很多，有化学计量法如次亚碘酸法和非化学计量法如铜试剂法、 硝基试剂法等方法可供选择。

本实验主要介绍单糖、蔗糖及淀粉的分离提取、鉴定和测定的一般原理和方法。

实验原理1．单糖及多糖的提取单糖：凡不能水解为更小分子的糖即为单糖。

单糖种类很多，其中以葡萄糖分布最为广泛，存在于各种水果、谷类、蔬菜和动物血液中。

由于单糖分子中有多个羟基，增加了它的水溶性，尤其在热水中溶解度很大；在乙醇中也有很好溶解性，但不溶于乙醚、丙酮等有机溶剂中。

而蔗糖等双糖分子也易溶于水和乙醇中。

因此单糖和双糖一般可用热水或乙醇将之提取出来。

多糖是由多个单糖分子失水缩合而成的大分子化合物。

在自然界中分子结构复杂而多种多样，有不溶性的结构多糖如植物纤维素、半纤维素，动物的几丁质等；另有一些为贮存物质如淀粉、糖原等；还有一些多糖具有更复杂的生理功能，在动植物的生理活动中起重要作用。

多糖中的淀粉不溶于冷水及乙醇，但可溶于热水中形成胶体溶液。

因此可以用乙醇提取单糖及低聚糖，然后提取淀粉等多糖。

样品中的蛋白质、色素等杂质可通过加入醋酸铅、氢氧化钡、铁氰化钾等清洁剂将之除去。

多糖含量测定的几种不同方法比较系别:信息学院专业:生物工程学号:姓名:指导教师:指导教师职称: 讲师多糖含量测定的几种不同方法比较摘要：本文综述了多糖含量测定的几种常用方法，主要有苯酚-硫酸法、3, 5-二硝基水杨酸法(简称DNS法)、蒽酮-硫酸法、色谱法、红外光谱定量分析多糖法等。

并对这些方法的优缺点进行了分析和比较。

这些方法可为多糖含量测定提供一定的参考，并为多糖含量测定的更深入研究提供一定的理论基础。

关键词：多糖；含量；测定；方法A review of different methodsto the determination of polysaccharidesAbstract: Paper reviewed some different methods to the determination of polysaccharides, in it phenol-vitriol method, 3, 5-two nitro salicylic acid (DNS) method, anthrone-vitriol method, chromatography, infrared spectrum quantitative analysis and etc had been dealed with. And the advantages and disadvantages of these methods are analyzed and compared. It provided some related information and based theories to the determination of polysaccharides content.Key words：polysaccharides; content; determination; methods目录中文摘要 (I)英文摘要 (II)1前言 (1)2化学法测定多糖含量 (1)2.1苯酚-硫酸法 (1)2.2 3, 5-二硝基水杨酸法(简称DNS法) (2)2.3蒽酮-硫酸法 (2)3色谱法测定多糖含量的研究 (3)3.1气相色谱法(GC) (3)3.2 液相色谱法(HPLC) (3)3.3薄层色谱法(TLC) (4)4其他方法 (4)4.1红外光谱定量分析多糖法 (4)4.2生物传感器法 (5)5结论 (5)6展望 (6)参考文献 (6)致谢 (9)1前言多糖(polysaccharides，PS)是由10个以上的单糖聚合而成的生物高分子[1]。

第二讲糖的分析方法一、中性糖的测定1．还原糖的次亚碘酸盐定量法适用：各种醛糖；适用于测定淀粉酶解时糖苷键水解的百分率，也可测定淀粉酶产物的寡聚糖链长。

基本反应：CH2OH(CHOH)n CHO+I2+3NaOH→CH2OH(CHOH)nCOONa+2NaI+2H2O (氧化)I2+2Na2S2O3→Na2S4O6+ NaI (滴定) 2．3,5-二硝基水杨酸（DNS）比色法原理：在碱性溶液中，3,5-二硝基水杨酸与还原糖共热后被还原成棕红色氨基化合物，在一定范围内还原糖的量与反应液的颜色强度呈比例关系，利用比色法可测定样品中的含糖量。

注意：该法不是化学计量反应，戊糖、已糖和双糖与DNS反应的生色度A500/μmol糖的值分别是：戊糖（木糖、阿拉伯糖）：0.42；已糖（葡萄糖、半乳糖、甘露糖）：0.46；双糖（麦芽糖、乳糖）：0.65。

有人认为还原糖的醛基被氧化为羧基，但当量不准确，不同的糖类产生不等等量的色度，表明它的化学反应是较复杂的。

3．Somogyi-Nelson法还原糖将铜试剂还原成氧化亚铜，在浓硫酸存在下与砷钼酸生成蓝色溶液，在560nm下的光密度与还原糖浓度呈比例关系。

注意：比方法重复性较好，产物稳定，测定范围10-180μg/mL。

4．苯酚-硫酸法苯酚-硫酸试剂可与游离的或寡糖、多糖中的已糖、糖醛酸（或甲苯衍生物）起显色反应，已糖在490nm处，戊糖及糖醛酸在480nm处有最大吸收，吸收值与糖含量呈线性关系。

注意：（1）该法颜色持久，较稳定；（2）每种糖的显色值不同，故不宜直接用于杂多糖的定量测定；分析杂多糖时，可根据各种单糖的组成比及主要组分单糖的标准曲线的校正系数加以校正计算。

（3）有颜色的样品，测定值偏高；（4）此法较适于检测凝胶柱部分收集样品中相对糖量的分析。

5．蒽酮-硫酸法糖类遇浓硫酸脱水生成糠醛或其衍生物，可与蒽酮试剂缩合产生颜色物质，反应后溶液呈蓝绿色，于620nm处有最大吸收，显色与多糖含量呈线性关系。

乙基葡萄糖醛酸苷的检测及其在法医毒理学
中的应用
乙基葡萄糖醛酸苷（EGA）是一种重要的天然产物，具有多种生物活性。

其在法医毒理学中的检测和应用备受关注。

本文将从EGA的化学结构和生物活性、检测方法以及在法医毒理学中的应用等方面进行详细的论述。

一、乙基葡萄糖醛酸苷的化学结构和生物活性
乙基葡萄糖醛酸苷是一种有机化合物，化学结构为C14H24O9。

它是由葡萄糖和醛酸通过醚键连接形成的，是一种糖苷化合物。

EGA具有多种生物活性，包括抗氧化、抗炎、抗肿瘤、抗菌等。

研究表明，EGA 对生物体具有一定的保护作用，具有较好的药用潜力。

二、乙基葡萄糖醛酸苷的检测方法
1.色谱法
色谱法是一种常用的分析方法，包括气相色谱（GC）和液相色谱（HPLC）等。

通过将样品分离并利用检测器进行定量检测，可以准确
地测定样品中EGA的含量。

色谱法具有分离效果好、准确性高的特点，是EGA检测的重要手段。

2.质谱法
质谱法是一种高灵敏度的分析方法，可以直接测定化合物的分子
量和结构。

通过质谱法可以对EGA进行准确的定性和定量分析，具有
较高的检测灵敏度和准确性。

3.生物传感器法
生物传感器是一种新兴的检测技术，可以利用生物分子对特定化
合物的选择性识别来实现对目标物的检测。

利用生物传感器可以实现
对EGA的快速、灵敏的检测，具有良好的应用前景。

三、乙基葡萄糖醛酸苷在法医毒理学中的应用
1.毒物检测
在法医毒理学中，EG...。

白芍多糖的制备、理化性质及抗肿瘤活性研究汪芸;陶移文;田庚元【摘要】目的:研究中药白芍中多糖的制备、理化性质及对小鼠路易斯肺癌和S180肉瘤的抗肿瘤活性.方法:采用水提醇沉方法提取白芍中多糖(BSEP),测定其糖和糖醛酸含量、元素组成、单糖组成；同时采用小鼠路易斯肺癌足趾皮下接种模型和S180肉瘤腋皮下接种模型考察BSEP的抗肿瘤活性.结果:BSEP的提取率分别为1.56％,糖含量为80.56％,糖醛酸含量为3.33％,单糖组成分析为91.7％的葡萄糖,4.19％的半乳糖以及2.83％的阿拉伯糖.生物活性表明BSEP样品分别以200,100mg·kg-1剂量ip×10qd的治疗方案,对小鼠体内路易斯肺癌足趾接种模型的肿瘤抑制率分别为54.58％和43.33％,对小鼠S180肉瘤皮下接种模型的肿瘤抑制率分别为47.08％和38.98％.结论:BSEP是主要以葡萄糖组成,且含有少量糖醛酸的多糖,具有一定的抗肿瘤活性,对小鼠路易斯肺癌的疗效稍优于S180肉瘤模型.【期刊名称】《中国现代中药》【年(卷),期】2013(015)008【总页数】5页(P645-649)【关键词】白芍;多糖;理化性质;抗肿瘤活性【作者】汪芸;陶移文;田庚元【作者单位】广东省食品药品检验所,广东广州 510180;广州医科大学,广东广州510182;中国科学院上海有机化学研究所,上海200032;中国科学院上海有机化学研究所,上海200032【正文语种】中文近十多年来，植物多糖和糖缀合物大量的活性研究发现，植物多糖及糖缀合物具有免疫调节、抗肿瘤、降血脂、降血糖、抗病毒等作用[1]。

因此，中药来源的多糖类化合物研究具有重要的科学意义及良好的应用开发价值。

白芍为毛茛科植物芍药Paeonia lactiflora Pall.的干燥根，为著名的“浙八味”之一，具有养血调经，敛阴止汗，柔肝止痛，平抑肝阳的功能[2]。

总糖含量的测定苯酚硫酸法
总糖含量的测定苯酚-硫酸法的实验原理为：苯酚-硫酸试剂可与游离的或寡糖、多糖中的己糖、糖醛酸（或甲苯衍生物）起显色反应，己糖在490nm处（戊糖及糖醛酸在480nm）有最大吸收，吸收值与糖含量呈线性关系。

实验材料包括葡萄糖试剂、试剂盒、浓硫酸、苯酚等，实验步骤如下：
1. 材料处理：将0.5～1g所测的材料捣碎，用适量蒸馏水、玻璃碾磨器碾磨并分次抽提，混合液离心得抽提液即样品液。

2. 标准曲线制作：取50μg/ml的己糖标准溶液0ml，0.1ml，0.2ml，0.3ml，0.4ml，0.5ml于试管中，用水补足到0.5ml，加0.3ml 5%酚溶液，混匀后快速加入1.8ml浓硫酸，振荡混匀，室温放置20min即可出现橙黄色，以第一管调零点，可于490nm处比色测定读OD值。

以糖含量为横坐标，相应的OD值为纵坐标，绘制标准曲线。

3. 样品含量测定：取0.5ml内含2～25μg糖量，同样加入0.3ml 5%酚溶液，混匀后立刻沿管壁加入浓硫酸1.8ml，振荡混匀，达室温后，可测490nm处的OD值，从标准曲线上查相应糖含量。

该方法不需要沸水浴加热，且蛋白质的存在对显色反应影响不大，故也可用于糖蛋白中的己糖测定，还可用于己糖甲基化衍生物和6-脱氧核糖、戊糖的测定。

除此之外，该方法的热量来自浓硫酸与水的混合，因此加浓硫酸时反应快，且应立即混匀，试管应大一些，以免烫手。

多糖含量测定的方法综述作者：何佩娟张宇洁来源：《现代食品·下》2019年第01期摘要：多糖是生命科学中不可缺少的生物大分子，具有复杂、多方面的生物活性和功能，但由于其分子量大、结构复杂，而且缺少易于检测的发光基团，成为困扰人们对多糖进行进一步研究的一个大问题。

现结合近年文献，对多糖的含量测定进行综述。

关键词：多糖;含量测定;综述Abstract：Polysaccharides are indispensable biological macromolecules in life science， which have complex and multifaceted biological activities and functions. It has been a problem with the research of polysaccharides because of its intricate structur. In conjunction with recent literature， a review of polysaccharides has been determined.Key words：Polysaccharides; Content determination; Review中图分类号：Q53多糖（polysacharides，PS）是由糖苷键结合的糖链，至少要超过10个的单糖组成的聚合糖高分子碳水化合物，可用通式（C6H10O5）n表示。

多糖在自然界分布极广，亦很重要：有的是构成动植物细胞壁的组成成分，如肽聚糖和纤维素;有的是作为动植物储藏的养分，如糖原和淀粉;有的具有特殊的生物活性，如人体中的肝素有抗凝血作用，肺炎球菌细胞壁中的多糖有抗原作用。

多糖的结构单位是单糖，多糖相对分子质量从几万到几千万。

多糖在自然界高等植物、藻类、微生物（细菌和真菌）与动物体内均普遍存在。

摘要：为探讨不同种植年限和设施菜地番茄细胞壁果胶Cd 累积的关系，以种植年限为2年和14年设施菜地番茄为研究对象，测定了不同种植年限下番茄茎、叶细胞壁果胶含量，并对细胞壁果胶含量、果胶甲酯酶（PME ）活性与种植年限及Cd 累积量之间的相关性进行了分析。

结果表明，随着种植年限的增加，番茄植株各器官Cd 累积量均有所增加；种植14年设施菜地番茄茎中Cd 累积量比种植2年的增加了24.55%，叶片中Cd 累积量增加了45.96%；种植14年设施菜地番茄茎细胞壁Cd 累积量增加了61.86%，叶片细胞壁Cd 累积量增加了57.46%；不同种植年限设施菜地番茄茎和叶细胞壁果胶Cd 含量也存在极显著差异（P <0.05）。

另外，随着种植年限的增加，番茄茎、叶细胞壁果胶含量和PME 活性随之升高：与种植2年相比，种植14年设施菜地番茄茎中果胶含量提高了104.51%，叶片果胶含量提高了127.45%；种植14年设施菜地番茄茎中PME 活性提高了10.56%，叶片PME 活性提高了9.39%。

果胶含量及PME 活性和细胞壁Cd 累积量呈正相关。

研究发现不同年限设施菜地土壤全Cd 和有效Cd 含量有所不同，影响着番茄不同器官果胶含量及PME 活性，说明细胞壁果胶在缓解番茄Cd 毒害中起着一定的作用。

关键词：设施菜地；番茄；细胞壁；果胶；果胶甲酯酶；镉中图分类号：X503.231文献标志码：A 文章编号：1672-2043（2018）01-0045-07doi:10.11654/jaes.2017-1007Accumulation of Cd in cell wall pectin of tomato plants grown in greenhouse soil of different planting yearsGUO Jun-kang,ZHOU Ran,REN Xin-hao,WEI Ting,XU Hui-hui,LI Yan-ping,L ÜXin（School of Environmental Science and Engineering,Shaanxi University of Science &Technology,Xi ′an 710021,China ）Abstract ：Total and available Cd content in soil is known to increase with increase in the number of planting years;therefore,the pectin content,pectin methyl esterase （PME ）activity,and Cd content in pectin from different organs in tomato plants （Lycopersicon esculentum ）will also be affected.To investigate the effects of greenhouse soil of different planting years on Cd accumulation in pectin of tomato plants,a field study was performed using tomato plants that were grown in soil aged for 2and 14planting years.The pectin contents in stem and leaf cell walls were determined,and the correlations between cell wall pectin content,PME activity,planting years,and Cd content were ana -lyzed.The results showed that Cd accumulation in all organs increased with the increase in planting pared to plants that were grown in greenhouse soil of 2planting years,Cd accumulation increased by 24.55%in stems and 45.96%in leaves of plants that were grown in soils of 14planting years.In addition,Cd accumulation increased by 61.86%and 57.46%in stem cell walls and leaf cell walls,respec -tively.Therefore,Cd accumulation in the pectin of cell walls was significantly different owing to different planting years （P <0.05）.In addi -tion,with the increase of planting years,pectin content and PME activity in cell walls also increased.Pectin content increased by 104.51%in stems and 127.45%in leaves,and PME activity increased by 10.56%in stems and 9.39%in leaves.Both pectin content and PME activity were positively correlated with cell wall Cd accumulation.Overall,results from the present study demonstrated that total and available Cd content in soil were influenced by different planting years,which affected pectin content and PME activity in different organs of tomato plants.This indicates that cell wall pectin plays a key role in alleviating Cd toxicity in tomato plants.Keywords ：greenhouse soil;tomato;cell wall;pectin;pectin methyl esterase;Cd收稿日期：2017-07-18录用日期：2017-09-27作者简介：郭军康（1980—），男，陕西扶风人，教授，主要从事土壤重金属污染修复研究。

分析检测糕点中总糖的测定及分析罗春燕，张芳芳，张　慧（镇原县食品药品检验检测中心，甘肃庆阳 744500）摘　要：糖分作为人体中必不可少的成分，它的生理功能众多，但是摄入过多也会引起诸多潜在危害，本文总结了糖分的生理功能、生活中常见的食物血糖生成指数、糖分的参考摄入量、主要食物来源，综合分析了糕点中总糖的测定方法及方法改进措施，为人们在膳食上的选择提供科学依据。

关键词：糕点；总糖；含量测定；分析。

Determination and Analysis of Total Sugar in PastryLUO Chunyan, ZHANG Fangfang, ZHANG Hui(Food and Drug Inspection Center of Zhenyuan County, Qingyang 744500, China) Abstract: Sugar as an essential component in the human body, its physiological functions, but excessive intake can cause many potential harm, this paper summarizes the physiological function of sugar, common food glycemic index, sugar reference intake, main food source, comprehensive analysis of the pastry total sugar measurement method and method improvement, provide scientific basis for the choice of diet.Keywords: pastries;total sugar;content determination;analysis糖分是人体所需能量的主要来源，但是摄入过多会有诸多潜在危害。