亮氨酸氨基肽酶

癌时 升高 幅度最 大 ， 阳性 率 也最 高 。结 论 ： Ａ对肝 硬 化有 较好 的诊 断价 值 ，Ａ ＡＤ Ｌ Ｐ对 肝癌 有较好 的诊断 价值 。
ｆ 键 词 １ 苷 脱 氨 酶 ； 氨 酸 氨 基 肽 酶 ； 病 关 腺 亮 肝
ｆ 中图分 类号】 ５ ５ Ｒ ７
ｆ 文献标 识码】Ｂ
织 中 ． 以肝 、 、 含 量 丰 富 。 本 文通 过 对 血 清 中这 两 项 尤 胆 胰
指 标 的检 测 。 了解 它 们 在 不 同 肝 病 的诊 断 意 义 和 应用 价 以
值。 １对 象 与 方 法 １ ． 究 对 象 １研 ’
与 对 照 组 比较 ．Ｐ ＯＯ Ａ ＜ ．１
化失 代偿 期 Ａ Ａ 活性显 著 高于代 偿期 【 Ｄ ３ Ｉ 。
Ｌ Ｐ位于 细 胞 的 微粒 体 内 ， 膜结 合 性 ． 肝 脏 主要 定 Ａ 有 在 位于 毛细 胆管 上 皮 细胞 血 清 中 Ｌ ＡＰ的 升高 仅 见 于肝胆 疾 病 和 妊娠期 。 病 患者 Ｌ Ｐ普遍 升高 ． 同 的肝病 Ｌ Ｐ活性 肝 Ａ 不 Ａ 增 高 程度 不 同 ， 高至 低为 肝 癌 、 性 肝 炎 、 硬 化 、 由 急 肝 慢性 肝 炎 ， 中肝癌 阳性 检 出率最 高 。另外 Ｌ Ｐ的 活性 与肝病 的部 其 Ａ 分酶 类成 正 相关 ，在 急性 肝 炎 中 Ｌ Ｐ与 ＡＬ Ａ Ｔ、谷 草转 氨酶 （ｓ ） Ａ Ｔ 以及 血 清乳 酸 脱 氨酶 （ Ｄ 呈 正 相 关 ． 肝 硬 化 中 Ｌ Ｈ） 在 Ｌ ＡＰ与谷 氨 酸 转 肽 酶 （ Ｔ 呈 正 相 关 ， Ｉ ＧＧ ） 但 Ｐ比 Ｇ Ｔ反 映 Ｇ
合 ２０ ０ ０年 ９月 西 安 会 议 修 订 的 病 毒 性 肝 炎 防 治 方 案 的 诊 断

土壤亮氨酸氨基肽酶（S-LAP）活性检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

货号：BC4025规格：100T/48S产品内容：试剂一：液体30mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×1瓶，4℃避光保存；临用前加入3mL丙酮溶解。

产品说明：S-LAP是一类能水解肽链N-末端为亮氨酸的酶，由土壤微生物分泌。

S-LAP活性变化与机体某些病理状态密切相关。

S-LAP分解L-亮氨酸对硝基苯胺生成对硝基苯胺，后者在405nm有最大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算S-LAP活性。

自备实验用品及仪器：天平、离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、甲苯、丙酮、30目筛（或更小）。

操作步骤：一、样本处理土样自然风干，过30-50目筛。

二、测定步骤1、分光光度计/酶标仪预热30min以上，波长调至405nm，蒸馏水调零。

2、加样表：测定管对照管土样（g）0.030.03甲苯（μL）1515震荡混匀，室温静置15min。

试剂一（μL）255255试剂二（μL）30-30℃水浴反应1h后立刻煮沸5min。

流水冷却至室温。

试剂二（μL）-3014000g常温离心10min，取200μL上清于405nm处测定吸光值，分别记为A测定管、A对照管，计算ΔA=A测定管-A对照顾管。

三、酶活计算公式（1）按微量比色皿计算：酶活性定义：每克土壤每分钟生成1nmol对硝基苯胺为一个酶活力单位。

S-LAP活性（U/g）=△A÷(ε×d)×109×V反总÷W÷T=0.507×△A÷W。

ε：对硝基苯胺摩尔消光系数：9.87×103L/mol/cm；d：比色皿光径，1cm；V反总：反应总体积，300μL=3×10-4L；W：土样质量，g；T：反应时间，60min；109：单位换算系数，1mol=109nmol。

进行测定 ； 试 剂 开 口稳 定 性 实 验 通 过将 试 剂 定 标 后 ， 开 口放 置
ｔ ｕ ｔ ｅ ， Ｃ Ｉ Ｓ Ｉ ） 制 订 的评 价 方 案 对 自主 研 发 的 Ｌ Ａ Ｐ试 剂 在 分 析 性 能 方 面 进行 了评 价 ， 旨在 为 临 床 检 测应 用 提供 数 据 参 考 。
１ 材 料 与 方 法
１ ． １ 材 料 日立 ７ １ ８ ０全 自动 生 化 分 析 仪 ： 购 于 日本 日立 公
司； 岛津 ２ ４ ５ ０分 光 光 度 计 ， 购 于 日本 岛 津 公 司 ； 游 离 胆 红 素 及 结 合胆红素 ： 购 于 百 灵 威 科 技 有 限公 司 ， 批号 分别为 Ｌ Ｋ５ ０ Ｌ １ ９ 和Ｊ Ｈ１ ０ — ４ ２ ８ ６ ； 血红蛋 白： 购 于 上海 瑞 齐 生 物 科 技 有 限公 司 ， 批
沃燕波 ， 邹继 华 ， 黄 幸 雷， 张桂春 （ 宁波 美康 生物科技 股 份有 限公 司 ， 浙 江宁波 ３ １ ５ １ ０ ０ ）
摘 要 ： 目的 参 照 Ｃ Ｌ Ｓ Ｉ Ｅ Ｐ方 案 对 自主 研 发 的 亮 氨 酸 氨基 肽 酶 （ Ｌ Ａ Ｐ ） 试剂分析性能进行评价 ， 了解 其 是 否 满 足 临 床 需 求 。 方法 参 照 文件 测 定 试 剂 空 白吸 光 度 、 检测 度、 线性 范 围 、 干扰 试 验 和 稳 定 性 等 技 术 指标 。结 果 试
线性 评 价 按 Ｅ Ｐ 一 ６ Ａ文件评 价【 Ｊ ： 取 Ｉ Ａ Ｐ高 、 低 值 血 清 标 本 各 一 份 。将 高值 和低 值 血 清 分 别 按 不 同 比 例 昆合 稀 释 成 不 同浓 度 梯 度 的 样 本 ， 并 将 这 些 样 本 随机 排 列 进 行 测 定 ， 各 个 浓 度 重 复 测 定 ３次 ， 取 其 均 值 为 测 定值 ， 与 预 期值 做 线 性 对 比 。 干扰实验按照 Ｃ Ｌ Ｓ Ｉ Ｅ Ｐ 一 ７ Ａ ２文 件 评 价 ［ ７ ］ ： 测 定 加 入 干 扰 物的混合血清 。 试 剂 热 稳 定性 通过 将 试 剂 置 于 ３ ７ ｃ水 浴 ， 分 别 于 水 浴 前 及水浴 １ 、 ３ 、 ７ ｄ后 对 高 、 低 浓度 的 Ｌ Ａ Ｐ标 本 及 试 剂 线 性 范 围

原 发性 肝癌 诊 断 文献标 识码 Ａ
Ｇ Ｔ一Ⅱ对肝 癌有 互补诊 断价 值 ， Ｇ 联合检 测 可提 高肝 癌 的诊 断敏 感性 。
关键 词 亮氨 酸氨基 肽酶 同工酶 中图分类号 Ｑ ５ ’ ６ Ｒ ３ ． ５ ５ ． ７ ５ ７
Ｓ ＴＵＤＹ ｏＮ ｎｏ ｇＵ ｉ ｒ ｔ Ａｆｉ ｅ ｏｐｔ ｆ ｉ ｓｖ ｎ ｒａ ｍ ｄｃ ｅ ． ａｔｎ ｎｖ ｓｙ ｆｌ ｔ Ｈ ｓｉ ｌ ｇ ｔ ｅｉ ｅｎ ｌ ｅ ｉｉ ） ｅ ｉ ｉａ ｄ ａｏｄ ｅｉ ｔ ｎ Ａ ｓ ａｔ Ｏｂｅｔ ｅ Ｔ ｔｄ ｅｖｌｅｏ Ｌ Ｐｉ ｅｚｍ ｓＩ ｉ ｔｅｄａｎｓ ｆ ｒ ａｙｈｐ ｔ ａ ｉｏ ａ ｂｔ ｃ ｒ ｊｃｉ ｏｓ ｙｔ ａ ｆ Ａ ｏｎｙ ｅ ｉ ｏｉ ｏ ｉ ｒ ｅａｉ ｃｒ ｎｍ ｖ ｕ ｈ ｕ ｓ Ｉｎｈ ｇ ｓ ｐｍ ｃ ｃ
维普资讯
第２ ８卷
第 ４期
青 海 医 学 院 学 报
Ｊ Ｒ Ｌ ＯＦ ＱＩ ＯＵ ＮＡ ＮＧＨ Ｄ Ｃ Ｌ Ｃ Ｌ ＧＥ ＡＩ ＭＥ Ｉ Ａ ＯＬ Ｅ
Ｖｏ． ８ Ｎｏ ４ １２ ． ２ ７ ｏｏ
２ ０７ 丘 ０
血 清 亮 氨 酸 氨 基 肽 酶 同工 酶 Ⅱ 对 原 发 性 肝 癌 的 诊 断 价 值
＞ ．５ ； Ｆ ≥５ ￣ ／ ０ ０ ） Ａ Ｐ ０ ｇ Ｌ及 Ａ Ｐ＜５ Ｉ／ Ｆ ０ｘ Ｌ肝 癌 患者 Ｌ Ｐ一 Ⅱ阳性 率 分 别为 ７ ％ （ ９ ７ ） ６ ％ ｇ Ａ ０ ４ ／０ 和 ４ （ ６ ２ ） Ｇ Ｔ一Ⅱ阳性及 Ｇ Ｔ一Ⅱ阴性 肝癌 患者 Ｌ Ｐ一Ⅱ阳性率 分别 为 ７ ． ％ （ ７ ６ ） ５ ． ％ １／５ ； Ｇ Ｇ Ａ ５８ ４ ／２ 和 ４ ５
（８３ ） 单 项 Ｌ Ｐ一Ⅱ、Ｆ 、 Ｇ １／３ ； Ａ Ａ Ｐ Ｇ Ｔ一Ⅱ诊 断肝 癌 的敏 感性 分 别 为 ６ ．％ 、３７ 、５３ ；Ａ ８ ４ ７ ．％ ６ ．％ Ｌ Ｐ一 １、Ｆ Ｉ Ａ Ｐ及 Ｇ Ｔ～Ⅱ联合检 测诊 断敏 感性 分别增 至 ８ ．％ 和 ８ ．％ ； 项指 标 同步 检测诊 断敏 感 Ｇ ９５ ４２ 三 性 达９ ．％ 。结论 ５８ Ｌ Ｐ一Ⅱ为 肝 癌 相 对 特 异 性 标 志物 ， 助 于肝 癌 的诊 断 。Ｌ Ｐ一 Ⅱ、 Ｆ Ａ 有 Ａ Ａ Ｐ和