第二章水生生物监测
本章基本要求
1. 掌握环境污染生物监测的基本原理与技术；
2. 掌握环境污染生物监测的基本监测项目及分析方法；
3. 了解水生生物监测采样布点原则，样品采集、样品处理、样品保存基本要求，按照监测方案正确完成监测项目的采样，样品处理、分析。执行一般质量保证措施。
4. 熟练配制生物监测实验中常用的试剂、指示剂。熟练掌握水生生物材料的实验室技术（生物制片、生物标本制作技术、生物材料前处理技术、微生物无菌操作、培养基配制）。
5.了解显微镜及常用分析仪器设备构造、工作原理及技术性能，并能熟练使用、排除一般故障。
6. 掌握监测数据的处理方法，能够判断项目监测结果的正确性，对分析过程中出现的误差能找出原因，提出解决措施。
7. 正确填写监测报告。
第一节水中微生物样品的采集和分析
A类试题及答案
一、填空题
1.细菌学监测实验室内部质量控制包括、、、、、。答案：对实验室要求对实验室业务负责人要求实验室器材设备的校验实验室供应晶的质量控制分析工作的质量控制
2. 细菌学监测对玻璃器皿的要求是：所用的玻璃器皿应是玻璃制品，必须
不附着任何，应剔除已、有的、有的器皿。
答案：硼硅洁净残渍破损划痕气泡
3. 细菌采样玻璃瓶洗涤干燥后，要在℃干热灭菌h或高压蒸汽℃灭菌min。答案：160～170 2 121（98066.5Pa）20
4.用于细菌监测的试剂必须使用的试剂，以免试剂中的抑制或促进细胞
的生长，购入或应用试剂要标明，配制好的试液要标明、、
及，对任何系列培养试验或生化试验要同时做和对照培养。
答案：纯度合格不纯物质日期名称浓度配制人日期阳性阴性5.用于细菌学监测的染料或着色剂，要求具有和，在染色前，宜先对至
少和的对照培养试行染色，并。
答案：适当的强度稳定性一种阳性阴性记录结果
6.配制培养基应注意事项：①；②；③；④。
答案：①含有可被迅速利用的碳源、氮源、无机盐及其他成分
②含有适量水分
③调至适合微生物生长的pH
④具有合理的物理性能（透明度、固化性等）
7.配制培养基的主要程序为：、、、、、、等步骤。答案：调配溶化调整pH 澄清过滤分装灭菌检定
8.无菌性试验就是每次试验时要以为水样，检查、、、
和其它器具的。如检查结果表明有杂菌污染，则应，重取水样检验。如检验结果仍为阳性，则表明无菌水、培养基滤膜、稀释水或玻璃器皿有可能已被污染。
答案：无菌水培养基滤膜稀释水冲洗用水玻璃器皿无菌性弃去水样试验结果
9.对受细菌污染严重的水体样品，在进行大肠菌群检验时，如果在初发酵试验中未发现产气，
则应h，然后再进一步证实。
答案：继续培养到48 有无大肠菌类细菌
10.玻璃器皿灭菌一般采用和方法。
答案：高压蒸汽灭菌干热灭菌
11.大肠菌群在伊红美蓝培养基上的菌落特征是，具有；，不带或略
带；色，较深的菌落。
答案：深紫黑色金属光泽的菌落紫黑色金属光泽的菌落淡紫红中心色12.总大肠菌群是指能在37℃48h内的、、的无芽孢杆菌，主要
包括有、、、等菌属的细菌。
答案：发酵乳糖产酸产气需氧及兼性厌氧的革兰氏阴性埃希氏菌属柠檬酸杆菌属肠杆菌属克雷伯氏
二、判断题（正确的判√，错误的判×）
1. 新购置的玻璃器皿，用自来水冲洗干净，再用蒸馏水中1～2次沥干后就能使用。（）
答案：（×）
2. 培养细菌的玻璃器皿，应先经高压蒸汽灭菌，趁热倒出培养基，用热肥皂水或洗涤剂刷洗
残渍，再用清水冲洗干净，最后用蒸馏水冲洗1～2次沥干。（）
答案：（√）
3. 洗涤吸管时，可选取3%的来苏液浸泡30min，再用洗涤剂洗涤，用清水及蒸馏水冲洗干净。
（）
答案：（√）
4. 洗涤染色瓶时，按常规方法洗涤干净。（）
答案：（×）
5. 含油脂的玻璃器皿，应单独高压灭菌洗涤，趁热倒出污物，置100℃干燥箱烘烤0.5h，再
放入5%碳酸氢钠水中煮沸，先去脂再行常规洗涤。（）
答案：（√）
6.对新购置的洗涤液，可能因含有抑制或促进细菌生长的化学物质，而影响洗涤质量，须进
行洗涤效果检查。（）
答案：（√）
7.恒温培养箱须每天检查两次，温度变异不可超过±1℃。（）
答案：（×）
8.显微镜使用后，用擦镜纸清洁光学玻璃部分和载物台，并罩好套子。（）
答案：（√）
9.采集加氯处理的水样时，不影响水样真正细菌含量，因此无需经去氯处理。（）
答案：（×）
10.采样时不需用水清洗采样瓶，采样后在瓶内要留20%的空间，以便检查时充分混匀样品。答案：（√）
三、选择题（选择正确的答案）
1. 采集加氯处理的水样时，须经去氯处理。在灭菌前在500ml采集瓶中加入足量的硫代硫酸
钠，加入的浓度和体积为：。
①3ml，10%Na2S2O3溶液②0.3ml，10%Na2S2O3溶液③lml，10%Na2S2O3溶液
答案：②
2. 对受污染严重的水体，可选择方法测定其总大肠菌群数。
①滤膜法②多管发酵法③延迟培养法
答案：②
3. 我国生活饮用水的细菌总数标准为：。
①每升水样小于100个②每升水样小于或等于3个③每毫升水样≤100个菌落
答案：③
4. 我国生活饮用水的总大肠菌群标准是。
①每升水样小于等于100个②每l00ml水样检出3个以下③每升水样小于等于三个答案：③
5. 我国环境监测技术规范中规定了一些必测和选测项目，其中Ames实试验是监测项目
之一。
①细菌学②毒性测定③致突变
答案：③
6. 在细菌监测中，菌落数大于100时采用报出结果。
①按实数报出②两位有效数字，用10的指数表示
答案：②
7. 在报出细菌总数计数结果时，若所有的稀释度的平均菌落数均大于300，则应报出。
①按稀释倍数最小的平均菌落数乘以稀释倍数②按稀释倍数最大的平均菌落数乘以稀
释倍数③任选一个稀释倍数的平均菌落数乘以稀释倍数
答案：②
8. 总大肠菌群测定过程的复发酵试验中，接种完1～3个典型菌落后，应将发酵管置于℃，
培养。
