诱变技术及其在辣椒育种中的研究进展
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湖南农业科学(HUNAN AGRICULTURAL SCIENCES)
IX)I:10.164988.cnki.hnnykx.2015.05.049
诱变技术及其在辣椒育种中的研究进展
周书栋,杨博智,欧立军,梁成亮,马艳青
(湖南省农业科学院蔬菜研究所,湖南省蔬菜工程技术研究中心,湖南长沙410125)
摘要:诱变技术作为一种增加遗传基因变异率的育种技术,在辣椒育种中有较大的应用潜力。介绍了辐射诱变、航天诱变和化学诱变技术的 特点及作用机理,重点综述了co 射线、航天诱变和EMS诱变的机理及在辣椒育种中的研究进展,并对其发展前景进行了展望。 关键词:诱变;辣椒;育种;综述 中图分类号:¥603.6 文献标识码:A 文章编号:1006-060X(2015)05-0138—04
Progress of Mutagenesis Breeding in Pepper
ZHOU Shu—dong,YANG Bo—zhi,OU Li ̄un,LIANG Chen-liang,MA Yan-qing
(Hunan Vegetable Research Institute,Hunan Vegetables Research Institute,Changsha 410125,PRC)
Abstract:Mutagenesis,as a breeding technique to increase the gene mutation,has shown a great potential in pepper breeding.The characteristics and mechanism of irradiation mutagenesis,space mutation and chemical mutagenesis were introduced.The research progresses of Co^y—ray,space mutation and EMS mutagenesis in pepper breeding were emphatically reviewed and the development prospects were also presented. Key words:pepper;mutagenesis;breeding;review
诱变育种指采用人工方式对植物体(种子、植株、
器官、组织、细胞等)进行诱发突变,使其产生遗传变
异,并从中直接或间接地选育出在生产上有利用价值
的新品种的育种方法【”。该方法通过改变染色体结构
或基因结构获得突变体,丰富物种的遗传变异范畴,
在新品种选育及分子生物学研究中具有重要作用。目
前,创造突变体的手段主要有物理手段、化学手段和 生物手段等。笔者介绍了辐射诱变、航天诱变和化学
诱变等技术的特点及作用机理,重点综述了Co^y射
线、航天诱变和EMS诱变的机理及其在辣椒育种应
用中的研究进展,并对其发展前景进行了展望。
1 诱变方式及特点
1.1 辐射诱变
典型的物理诱变为辐射诱变,是指在人工控制的
条件下,利用中子、质子或者射线等物理辐射诱变因
素对种子或植株进行辐照,诱发其染色体数量和结构
的变异,从而得到可供利用的突变体一种诱变方式[21。
常见的辐射源包括紫外线、X射线、 射线、粒子辐射
(中子、带电粒子辐射)以及其他物理诱变剂(电子束、
收稿日期:2015—04—30 基金项目:公益性行业科研专项(2014) 作者简介:周书栋(1982一),男,湖南醴陵市人,助理研究员,主要 从事辣椒栽培与育种研究。 通讯作者:马艳青 激光和离子注入)。
辐射诱变一般具有以下特点:(1)大部分突变为
隐性突变,突变性状在第2代才表现出来,因而必须
将M2代作为选择突变性状的起始世代;(2)突变频
率与突变性状有关,叶色、株型、产量、熟性等突变易
发生,抗性突变频率较低,故不同的突变育种性状应
该构建不同大小的M2群体以供选择;(3)育种周期 短,突变性状通常经过3 ̄4代的选择IIii达到稳状
态,便于短时间内新品种的选育。
1.2航天诱变
航天诱变是将需诱变的材料(通常为作物种子)
送往太空,在微重力、空间强辐射以及太空环境中空
气密度、地磁强度、环境温度等诸多未知因素的协同
或单一作用下诱导材料产生可遗传性变异的一种诱
变方式L3J。
航天诱变特点如下:(1)航天诱变育种具有诱变
的广谱性,比人工诱变幅度更大,范围更广,更易出现
特异性变异;(2)变异率高,变异幅度大、变异类型十
分丰富,且有益突变较多;(3)育种周期短,通常3-4
代的选择即可稳定遗传性状,可比常规育种周期缩短
1~2代。
1.3化学诱变
化学诱变是指人为地利用化学药剂对作物的植 株、种子、花粉、花药、合子或单细胞组织培养物等不
同部位进行处理,使其产生遗传变异获得突变体,
再 周书栋等:诱变技术及其在辣椒育种中的研究进展
根据育种目标从中筛选出新品系、特用品种或新种质
的一种人工诱变方式[4]。化学诱变剂种类较多,按其诱
变机制可分为烷化剂(如硫酸二乙酯、甲基磺酸乙酯
等)、碱基类似物及其有关化合物(如5一溴尿嘧啶、水
合肼、氨基嘌呤等)、叠氮化物(如叠氮化钠、叠氮化钾 等)以及其他种类的化学诱变剂如抗生素、羟胺、吖
啶、秋水仙素等嘲。
化学诱变的特点如下:(1)操作方法简易,成本低
廉,可短时间内对供试材料进行大规模诱变;(2)产生
点突变的比例高,突变谱稳定性好,引起的突变范围
广,但后代选择需要足够大的群体;(3)受组织结构限
制,穿透性不如辐射诱变强,染色体畸变比例相对较
少,发生致死型突变的几率小;(4)具有迟效作用,诱 变后的部分染色体并不立即断开。
2诱变机理
2.1辐射诱变
辐射诱变机理通常从从细胞水平和分子水平两 方面进行阐述。
从细胞水平上分析,辐射诱变造成染色体畸变,
高能量和强穿透力的射线易使染色体断裂、结构重
排,导致单倍体及非整倍体类型的材料出现。研究发
现,经 射线辐射处理后的实验材料,其细胞在进行有
丝分裂和减数分裂时可观察到染色体数量发生变化
以及结构发生变异的现象【叫。
从分子水平上分析,射线诱变能诱导处理材料的
DNA断裂、损伤或碱基缺失等多种生物学效应,从而
促使其产生大的突变,引发的DNA突变具有随机I生嘞。
另有研究表明,射线促使细胞染色体发生改变的同
时,还会引起生物体与细胞质有关的遗传性核外变
异,促成辐射育种中材料的特性变异。
2.2航天诱变
由于空间环境的特殊性和复杂性,目前对空间诱 变机理的研究较少,作物性状变异的机理尚未清楚,
通常认为导致遗传变异有以下几个方面原因。 2.2.1 微重力 生物体在宇宙空间中所受重力仅为
地球的百万分之一到十万分之一,微重力环境使细胞 分裂不正常、染色体畸变、核小体数目发生变化等,使
植物生长发育与信号传递等生理生化过程出现紊乱,
极大地影响了生物体生长发育[9]。此外,微重力有可能
会干扰到细胞中DNA损伤修复系统的正常操作,
DNA损伤后的修复功能可加剧生物变异,提高变异
率【Ⅻ。
2.2.2空间强辐射太空中存在的强辐射射线主要
有重粒子、太阳粒子、银河系宇宙射线及其他高能电
磁辐射,其中以高能量的重粒子射线诱变效应最强【“】。
这些射线作用于太空中的生物材料后,可轰击细胞 DNA,使DNA双链发生断裂。
2.2_3 转座子假说科学家们提出了航天诱变的一
种新的诱变机制一转座子假谢 ,该假说认为太空环
境能活化生物体中潜伏的转座子,活化的转座子通过
插入、移位和丢失,导致基因变异或染色体畸变。
2.2.4其他因素的复合效应 该理论认为航天诱变
是太空环境中大气结构、压力、密度以及地磁强度、环
境温度等诸多因素综合作用的结果。这些因素与微重
力、空间强辐射等协同作用,可在一定程度上引起生
物体内遗传物质的结构发生改变而产生变异。
2.3化学诱变
不同的化学诱变剂具体作用机制不同,总的来
讲,化学诱变机理为诱变剂与核苷酸中的磷酸、嘌呤
和嘧啶等分子发生反应引发诱变,且化学诱变剂具有
选择性特性,只作用于特定的基因和核酸。在蔬菜育
种中应用较广泛的是秋水仙素、甲基磺酸乙酯
(EMS)、叠氮化钠(NaN3)和平阳霉素(PYM)等。
2-3.1 EMS诱变机理EMS烷化作用发生于DNA
的鸟嘌呤N一7位置上,烷基取代H离子成为一个带正
电荷的季铵基团,产生2种遗传效应:一种为转换型
突变,即烷化的鸟嘌呤代替胞嘧啶,与胸腺嘧啶发生
配对;另一种为鸟嘌呤的N一7烷基在活化时由于糖苷
键断裂,导致鸟嘌呤的DNA分子被脱去,在进行进一 步复制时,原来的鸟嘌呤的位置成了一个空位,与鸟
嘌呤互补位置上的碱基就不受严格的配对限制,4种
碱基均有机会进人,造成置换现象。具体过程为鸟嘌
呤的06位置被烷基化,大部分经烷基化的碱基被修
复时,在DNA复制过程中会导致配对错误产生突变,
烷基化鸟嘌呤与胸腺嘧啶配对,导致碱基替换,即
G:C变为A:T。
2.3.2 NaN 诱变机理NaN 属于呼吸抑制剂的一
种,作用于复制过程中的DNA,引起基因突变和染色
体畸变,通常以碱基替换方式使DNA正常合成无法
进行。NaN,在酸性环境中对形态突变非常有效,当溶
液pH值为3时产生的HN3分子很容易透过细胞膜
进人细胞中,通过碱基替换,干扰DNA正常合成,导
致点突变产生。 2I3I3 PYM诱变机理PYM属于抗生素中的一种,
主要诱发移码突变,其诱变机制与EMS相近,是一种
新型的诱变剂,且安全、高效、诱变率高,具有较高的
开发应用前景。 2.3.4秋水仙素诱变机理秋水仙素属于生物碱的
一种,它能以碱基替换方式影响细胞中DNA的正常
合成,使正处于有丝分裂的植物细胞的纺锤体形成受
抑制,使细胞一直处于分裂中期,复制的染色体不能
向两极移动。此后,细胞再进行分裂就形成了多倍体。
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诱变技术在辣椒育种中的应用