漂移
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1.什么叫基线漂移?
基线噪声:由于各种因素所引起的基线波动。
基线漂移:基线随时间定向的缓慢的移动; 基线在某段时间内,信号增大或减小
的现象; 当流量和温度设置值改变时,可能会发生基线的波动或者漂移。
液相:在实际工作中,我们经常能遇到基线的漂移的情况。关于基线漂移(或上
下波动)的原因,可能有以下几种:
1、 柱子的平衡时间长。一般来说,新柱子的平衡时间要短。有些老柱子的平衡是时间长。
当然,柱子的平衡是时间也和它使用的流动相有关系。如果使用了离子对试剂,那么
比普通的简单的流动相(例如 二元流动相:甲醇:水,乙腈:水)
2、 系统存在漏点。如果系统存在漏点,那么出现基线向下漂移。需要检漏
3、 PUMP头有气泡。PUMP头的气泡会导致基线的漂移和波动。如果怀疑是PUPM头有
气泡导致基线不稳,只需要看仪器的压力是否稳定就好。
4、 流动相脱气。如果流动相没有脱气,基线肯定是不稳的。
5、 柱后气泡。在柱子后有气泡产生,导致检测器中的读数有波动。
6、 PUMP密封不好。密封不好,也会导致PUMP头的气泡(好象不可能)和漏夜,基线
当然不稳定了。
7、 系统的环境。仪器的使用,如温度的变化,流速的变化以及梯度洗脱,当然基线漂移。
8、 单向阀睹塞或污染。单向阀的睹塞和污染,能造成流量不准确,压力 波动。故也会
波动,漂移。
9、 检测器污染或有杂质
气相:气相色谱小知识(很全面)
A 所有组分峰变小 可能原因和建议措施:
1、进样针缺陷 使用新针或无缺陷的针
2、进样后漏夜 判断漏夜点,维修之
3、MAE UP过大:分流比过大 调整气体流速和分流比
4、分析物质分子量过大,底挥发样品时 提高INJ。OVEN(主要柱子的最高使 样品的汽
化温度过低,或柱温度低 用温度)
5、NPD被污染物(二氧化硅)覆盖 更换铷珠
6、NPD温度过高(使用或环境温度),气体不纯 更换铷珠:避免高温使用
7、不分流进样,分流阀关闭快:初始OVEN温高
8、检测器与样品不匹配
9、样品的挥发 调整样品的的浓度或选择合适的溶剂
B 峰伸舌
峰伸舌多为色谱柱过载 减小进样量(可能需提高仪器的sensitivty: 使用
大容量柱子;提高OVEN,INJ温度;增大气体流速)
C 峰高峰面积不重复
1、进样不重复,偏差大 自动进样器;加强手动进样的练习
2、其他峰型变化引起的峰错位,干扰
3、基线的干扰 仪器系统参数设定的改变 :参数标准化,规范化
D 负峰
1、Detector有数据处理系统信号极性接反:信号连接倒置
2、TCD中,样品导热系数大于载气导热系数,选择数据处理中的“负峰处理” 3、ECD
被污染,可能在正峰后跟随负峰,清洗ECD,更换之(若有必要)
E样品的检测灵敏度下降
1、 色谱柱,衬管被污染,使活性物质灵敏度小将,清洗衬管:用溶剂(优级纯甲醇)清洗
色谱柱,更换之(如有必要)
2、 进样时样品渗漏(对易挥发物质更甚)查找渗漏点
3、 在splite汽化进样中,OVEN初始温度过高,用低于样品溶剂的初始温温度;致使样品汽
化后扩散加剧,导致撕沸点样品灵敏度下降,使用高沸点溶剂
F峰分叉
1、 进样过激,不稳定,形成二次进样,练习手动进样,使用自动进样器
2、 色谱柱安装失败,重新安装
3、 spliteless或柱头进样,样品溶剂的混合,使用相同的溶剂
4、 柱子温度波动,修理稳控系统
5、 spliteless进样,量大,时间长。希望用溶剂 在毛细管色谱柱前端安装5米的去效应“谱
带浓缩”时,溶剂的固定相的湿润性差 活化,未覆盖固定液的毛细管,溶剂将在柱子
中形成几米长,厚度不等的溶剂带,破坏正常的浓缩,使峰拉宽分叉
G 峰拖尾
1、衬管,色谱柱被污染;有活性点 清洗,更换之 (如有必要)
2、衬管,色谱柱安装不党,存在死体积 注射甲烷,峰若拖尾,则重新安装
3、色谱柱柱头不平 用金刚砂切割,使之平
4、固定相的极性指标与样品分析不匹配 换匹配的柱子
5、样品流通路线中有冷井 消除路线中的过低温度区
6、衬管或色谱柱中有堆积切割碎屑 清洗更换衬管;切除柱头10cm
7、 进样时间过长 缩短之
8、分流比低 增大分流比(至少大于20/1)
9、进样量过高 减小进样体积或稀释样品
10、 醇胺,伯胺,叔胺和羧酸类易拖尾 用极性大的色谱柱;样品衍生处理
H保留时间漂移
1、 温度变化 检查柱温箱的温度
2、 气体流速变化 注射甲烷,测定载气线速度
3、 进样口泄露 检查进样垫;判断其他泄露处
4、 溶剂条件变化 样品,标准品使用相同的溶剂
5、 色谱柱被污染 切除柱头10cm;高温老化,清洗
I分离度下降
1、色谱柱被污染 方法同上
2、固定相被破坏(柱流失) 更换之
3、进样失败 检查泄露,维修之检查吹扫时间; 检查温度的适应性;检查衬管
4、样品浓度过高 稀释;减少进样量;用高分流比
J溶剂峰拉宽
1、 色谱柱安装失败
2、 进样渗漏
3、 进样量高 提高汽化温度
4、 分流比低 提高分流比
5、 OVEN低
6、 分流进样时,初始OVEN过高 降低初始柱温,使用高沸点溶剂
7、 吹扫时间过长(不分流进样) 定义短时间的吹扫程序
色谱工作者应具备的良好习惯
1、按仪器说明书的规程操作 验收仪器时,不仅要清点所有零部件是否齐全,
还要检查仪器说明书是否齐备,并妥善保存这些资料。在独立操作仪器之前,一
定要认真阅读有关说明书,并严格按规程操作。这是做好仪器分析的前提条件,
而且一旦仪器出了问题,也好与厂商交涉。
2、准备一份色谱柱测试标样 色谱柱性能是保证分析结果的关键。新买的
色谱柱,首先要用测试样品评价其性能。如果用色谱柱厂商提供的测试条件测试
而结果不合格时,就可要求退货或换货。更重要的是,此后的使用过程中色谱柱
性能会变化,当分析结果有问题时,可以用测试标样测试色谱柱,并将结果与前
一次测试结果相比较,这有助于确定问题是否出在色谱柱,以便于采取相应的措
施排除故障。
3、及时更换色谱柱密封垫 石墨密封垫漏气是GC最常见的故障之一。一
定不要在不同的柱上重复使用同一密封垫,即使同一根柱卸下重新安装时,最好
也要换新密封垫,这样能保证更高的工作效率。如果装上色谱柱后发现漏气而再
更换密封垫,就要花费更多的时间,即使旧垫仍能使用,也要比原来多拧紧一些,
弄得不好就会拧断毛细管色谱柱。
4、使用纯度合乎要求的载气 载气一定要用高纯级的,以避免干扰分析和
污染色谱柱或检测器。要知道一根色谱柱的价格是一瓶高纯氮气或氢气价格的
20倍以上。如果因为要省钱而用普通气体作载气,可能是丢了西瓜拣了芝麻。
检测器用辅助气体最好也用高纯级的。虽然在灵敏度要求不高时,可用普通气体,
但其代价可能是检测器被污染。
5、定期更换气体净化器填料 变色硅胶可据颜色变化来判断其性能,但分子
筛等吸附有机物的净化器就不好用肉眼判断了。所以须定期更换,最好3个月更
换一次。如果硅胶与分子筛装在一起,则更换硅胶时也要更换分子筛。
6、使用性能可靠的气体减压器 新的减压器在使用时一定要试漏,在长期
的使用过程中也要经常检漏,这是发现问题的一个好习惯。如果不注意这个问题,
轻则造成气体浪费,重则出现安全问题,到时悔之晚矣。
7、定期更换进样衬垫 进样口衬垫漏气是GC常见故障之一。另外,衬垫的
老化降解也会给分析带来干扰。比如其碎屑掉进汽化室内也可能导致鬼峰。至于
多长时间换一次衬垫,则要看所分析的样品性质和分析条件而定。常规实验室一
般每天更换一个进样衬垫。无论如何,一个衬垫的连续使用时间不要超过一周。
8、及时清洗注射器 保持注射器清洁能避免样品记忆效应的干扰。更换样品
时要清洗,用同一样品多次进样时也要用样品本身清洗注射器。一支注射器暂时
不用时(比如下班),更要彻底清洗,否则残留其中的样品可能将针芯粘牢,造
成注射器报废。使用自动进样器的用户也应注意此问题,最好是经常更换和清洗
注射器。
9、定期检查并清洗进样衬管 仪器长期使用后,进样衬管内会有焦油状物质,
这是样品中的不挥发成分造成的。此外还会有颗粒状物质积存(隔垫碎屑,样品
中的固体物质)这些都会干扰分析的正常进行。因此要定期检查,及时清洗。注
意,在衬管中填充一些经硅烷化处理的石英玻璃毛,既可提高样品的汽化效率,
又能防止隔垫碎屑进入色谱柱造成堵塞。
10、更换零部件要逐一进行 修理仪器时,不要一次更换多个部件,那样会
造成故障原因的判断失误。应该一次更换一件,经测试后再更换另一件。这样可
能更便于准确地判断故障原因,同时避免不必要的开支。
11、做好仪器使用和分析记录并定期归档 这是仪器的履历,应逐日记录,
包括操作者、分析样品及条件、仪器工作状态等等。一旦仪器出现问题,这是查
找原因的重要资料。