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厦门大学遗传与分子生物学实验期末考试试卷及参考答案
一、填空题（每题2分，共50分）
1.果蝇具有丰富的外表型态差异，包括______、_____、_____，_______与
______。
2.FISH技术的全称是____________________________。
3.细菌转导实验中所用的菌株分别是：____________和_____________ ,用的
培养基是__________培养基。
4.转座子引起的插入突变实验中所用的菌株分别是：_________ 和
_________。
5.在提基因组DNA时，为保证DNA的完整性应该采取的步骤
有，，。
6.DNA凝胶电泳可以以和为凝胶介质，当DNA为＞ bp时,
用作为介质，当DNA为＜ bp时，用作为介质。
7.抽提DNA纯化时，一般采用抽提，采用体积；沉淀DNA
用，体积；洗涤沉淀时用。
8.DNA纯度一般用比值来衡量，当比值在表示DNA很纯，当表
示不干净，当表示含过多。
9.衡量DNA得率或浓度时应该用值来进行计算，公式表示为。
10.进行电泳加样时，要将DNA样品与混合，其主要成分为，如要
加样10µlDNA要加µl混合。
11.在提取DNA时，酚∕氯仿的作用是，其比例应为，可选择使用酚
︰氯仿︰异戊醇，酚的饱和是用，在使用酚时应注意，一般用的酚需要酚，要用瓶子来装。
12.酚是蛋白变性剂，用酚抽提细胞 DNA时，具有两方面的作用：(1) (2) 。
13.提质粒DNA时，加入STE的作用是；加入溶液Ⅰ的作用是，现
象；加入溶液Ⅱ作用，现象，成分主要为，提供环境；加入溶液Ⅲ作用是，现象，成分主要是，目的是。
14.质粒DNA有以下状态、、、，进行电泳时
跑的最快在最前面，其次为、，最后为。
15.实验过程中常用的枪头有以下几种：µl用色枪头，µl用
色枪头，µl用 __色枪头。
16.转化时用的感受态细菌需要用处理，转化细菌时需要进行，时间
为秒，目的是。
17.胶回收DNA时需注意，，应尽量将足够小彻底，其
中加入与，质量比应为。洗涤液中含有，洗脱液可以用代替。
18.酶切DNA时，如DNA不纯可通过，，进行克服。
19.连接反应时，外源DNA与质粒DNA的摩尔比例应为，连接反应时体
系常用。
20.在酶切反应管加完各种反应物后，需要离心2秒钟，其目的
是 _______________和_______________。
21.用乙醇沉淀 DNA时，通常要在DNA溶液中加入单价的阳离子，如 NaCl
和 NaAc，其目的是。
22.PCR反应过程分为三个步骤，即，和。
23.PCR反应受，，，，等因素的影响。
24.部分酶切可采取的措施有：(1) (2)
(3) 等。
25.限制性内切核酸酶通常保存在浓度的甘油溶液中。
二、简答题（每题5分，共40分）
26.请列出雌雄果蝇主要特征。
27.简述染色体组型分析的分组排队原则。
28.噬菌体效价和转导频率如何计算？如何计算Tn5易位插入突变总频率？
29.为了选择下面两种突变型，应对只含有葡萄糖、硫酸铵以及无机离子的基本
培养基作何调整?①leu—，亮氨酸营养缺陷型；②gal—，不能以半乳糖作为唯一碳源的突变型。
30.请你用HindⅢ设计一个质粒的DNA酶切反应体系。
31.简述一个完整外源DNA的克隆过程。
32.一个携带有氨苄和卡那霉素抗性基因的质粒被仅在卡那霉索基因中有识别
位点的Eco RⅠ消化。消化物与酵母 DNA连接后转化对两种抗生索都敏感的E coli菌株。
(l)利用哪一种抗生素抗性选择接受了质粒的细胞?
(2)怎样区分接受了插入酵母 DNA的质粒的克隆?
33.你打算扩增下图所示的两段序列之间的 DNA，请设计一对引物序列。
5’-GACCTGTGGAAGC-----CATACGGGATTG-3’
3’-CTGGACACCTTCG-----GTATGCCCTAAC-5’
三、实验设计（10分）
种子在储藏过程中发生了某种变化，使得长成的水稻很容易被一种病原菌感染。据推测可能是某一化学诱导的突变导致一个具有抗菌功能的关键酶丢失。请设计一个实验验证这种推测是否正确，如何使种子重新获得对这种病的抗性?
提示：根瘤农杆菌(Agrobacterium tumefaciens)具有通过其 Ti质粒将细菌 DNA带入植物基因组的独特功能。
附加题：谈谈你对该门实验课的建议或意见。
参考答案：
一、填空题
1．眼色、眼形、翅形、刚毛的形状和数目
2．荧光原位杂交技术
3．gal+、gal-、 EMB
4．Tn5、 FD1006
5．低温、动作轻柔、抑制酶活
6．琼脂糖、聚丙烯酰胺，100、琼脂糖、100、聚丙烯酰胺
7．苯酚、一倍、无水乙醇、两倍、70%乙醇
8．OD260/OD280、1.8-2.0、〈1.8、DNA、〈1.6、蛋白质
9．OD、DNA浓度（μg/ml）=（OD260-OD330）×50μg/ml×稀释倍数（100）10．上样缓冲液、溴酚兰、1
11．蛋白质变性、24：1、25：24：1、Tris、防止氧化、饱和、棕色12．蛋白质变性、细胞破壁
13．缓冲液、溶菌、溶液浑浊、细胞破壁蛋白变性、溶液变粘稠、SDS、碱性、中和、絮状沉淀、乙酸、使染色体和蛋白质变性沉淀，使质粒DNA析出14．ccc、oc、lc、l、ccc、oc、lc、l
15．1000、蓝、200、黄、10、白
16．CaCl2、42℃热激、90、使质粒DNA转化入细胞
