鸡基因组研究新进展
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影响家禽繁殖性状相关基因的研究进展朱志明 福建省农业科学院畜牧兽医研究所 福州 350013中图分类号:S81418 文献标识码:A 文章编号:1003-4331(2007)07-0018-03 繁殖性状是用于衡量家禽生产性能高低的最主要经济性状之一。
但由于家禽繁殖性状是受微效多基因控制的数量性状,受多种因素的影响,如遗传、营养、环境、疾病等,遗传力较低,常规的育种方案已经使家禽的生产性能几乎达到了极限,遗传进展缓慢,现行的育种措施又很难有突破性进展。
近期,随着分子生物学、生物技术的迅猛发展,用分子生物学手段研究繁殖性状的主效基因、侯选基因及有关遗传标记,一开始就引起了广大研究者们的极大兴趣。
研究人员分离了大量与繁殖性状相关的侯选基因,并对其结构、功能、表达及控制等进行了较为深入的研究。
迄今为止,报道得较多影响家禽繁殖性状的侯选基因有:矮小基因(dw)、裸颈基因(N a)、催乳素(PR L)、类胰岛素生长因子1(IG F-1)基因、促性腺激素释放激素(G nRH)基因等。
本文综合国内外的研究成果,就影响家禽繁殖性状的主效基因或可能的候选基因的研究进展加以阐述,为今后家禽育种工作提供一定的参考价值。
1 矮小基因(dw)鸡性连锁矮小基因(sex-linked dw ar f gene,简称dw基因),来源于自然鸡群中的突变个体。
至今,在鸡中已发现8种矮小基因,其中dw基因是已知的唯一对鸡体健康无害,而对人类有利的隐性突变基因[1]。
1959年Hutt发现,dw基因位于Z染色体上,呈伴性隐性遗传,因而只有矮小型纯合子的公鸡与携带矮小型基因的母鸡才表现为矮小[2]。
从目前研究结果来看,dw基因的分子基础是由生长激素受体(G H R)基因的缺失所造成。
对鸡基因组G HR基因进行限制性内切酶长度多态性(RF LP)分析,矮小型鸡和正常鸡的G HR基因存在明显的差异。
有学者认为,dw基因能影响甲状腺机能,抑制促黄体素的分泌和肝脏中卵黄蛋白的合成,使卵黄发生率降低而不影响蛋的后期形成,使排卵同期化,促使鸡产蛋率提高[3]。
南方农业学报 Journal of Southern Agriculture 2023,54(11):3340-3348ISSN 2095-1191; CODEN NNXAABDOI:10.3969/j.issn.2095-1191.2023.11.020利用iCaspase9特异性诱导鸡原始生殖细胞消除的研究孙玲玲,黄振文,田奎,张嘉乐,郑基坛,濮黎萍,陆阳清*(广西大学动物科学技术学院/广西畜禽繁育与疾病防控重点实验室,广西南宁530004)摘要:【目的】制备在生殖细胞特异表达iCaspase9的鸡原始生殖细胞系(PGCs),提升外源性PGCs的生殖传递效率,为生产诱导不育的雄性或雌性受体鸡胚打下基础。
【方法】利用piggyBac转座子将iCaspase9片段整合到鸡基因组中,构建稳定转染iCaspase9片段的CAG-iCaspase9-mCherry DF-1细胞系,通过荧光微显镜观察鉴定其在iCaspase9系统诱导底物B/B二聚化配体作用下的细胞消除效果;再利用CRISPR/Cas9技术将iCaspase9片段定点插入DAZL基因第11外显子之后构建Dazl-iCaspase9-EGFP PGCs,经iCaspase9片段插入鉴定和PGCs生殖特性鉴定后,通过荧光微显镜观察鉴定其在B/B二聚化配体诱导下的消除效果。
【结果】成功建立的CAG-iCaspase9-mCherry DF-1细胞系与野生型DF-1细胞(WT DF-1)的生长增殖无显著差异(P>0.05,下同);CCK-8法测定发现,0.25~5.00 nmol/L B/B二聚化配体对WT DF-1细胞生长数量无显著影响,但CAG-iCaspase9-mCherry DF-1细胞在添加B/B二聚化配体后,细胞数量较空白对照组极显著降低(P<0.01,下同),且失去正常的细胞形态,逐渐变圆甚至凋亡。
成功建立的DAZL-iCaspase9-EGFP PGCs仍特异性高表达Cvh、Nanog、PouV、DAZL、Cdh和Ddx4等生殖细胞相关基因,在蛋白水平上也能鉴定出DAZL、SSEA1和CVH等蛋白,说明插入iCaspse9片段后并没有改变生PGCs的殖细胞特异性;在0.25 nmol/L B/B二聚化配体诱导作用下,DAZL-iCaspae9-EGFP PGCs数量显著减少,几乎全部消除,说明iCaspase9系统可诱导细胞凋亡而有效消除内源性PGCs。