微生物检验实验室军团菌属检验标准操作规程
1. 概述
军团菌属细菌是一群病死率较高的急性呼吸道传染病的病原菌，该菌属包括45个种（60多个血清型），已从人体分离出的有嗜肺军团菌、米克戴德军团菌、波兹曼军团菌等20种。嗜肺军团菌是军团菌属的代表种。
2. 标本类型
痰等标本。
3. 鉴定
3.1 形态与染色革兰阴性纤细小杆菌。荧光显微镜下可见被荧光抗体包被的发亮菌体。
3.2 培养特性在缓冲活性炭酵母提取物琼脂（BCYE）培养基上，本菌生长缓慢，应每日观察生长情况，在BCYE 上需要3~5日方可见菌落，数日后增大到4~5mm，菌落呈灰白色，有光泽。
3.3 生化反应大部分菌株氧化酶试验阳性，不分解糖类，动力、明胶、马尿酸钠试验阳性，触酶试验阳性，多数菌株产生β-内酰胺酶。
3.4 鉴别要点
3.4.1 本菌属特征革兰阴性细小杆菌，有多形性，苏丹黑染色可显蓝黑色或蓝灰色脂肪滴。在BCYEα平板上3~5日形成蓝灰色、有光泽的菌落。普通琼脂平板上不生长。
3.4.2 根据在BCYEα琼脂上生长的菌落，在紫外线365nm灯光照射下产生红色荧光可推断为红色军团菌；产生蓝白色荧光，如氧化酶阳性，则为博氏和其他军团菌，如氧化酶阴性，则为杜氏、戈氏、彻氏、图森山军团菌；产生无色荧光，则根据马尿酸水解、氧化酶及其他生化反应进一步鉴定。
3.5 操作步骤
3.5.1 涂片、染色革兰阴性杆菌。
3.5.2 鉴定直接荧光抗体染色，生化反应。
4.药敏
参见《药物敏感性试验标准操作规程》及CLSI M100-S20最新版本文件。
5.质量控制
见《质量管理程序》。
6.检验结果解释与分析
本菌虽然营养要求和培养环境要求严格，但在外环境分布较广，并可长期存活，致使通过污染水源空气而传播致病。从临床或环境标本中分离军团菌时，需先对标本作酸处理（军团菌耐酸而其他杂菌则易被酸杀灭），并使用选择性琼脂平板（在BCYEα琼脂平板上加入抗生素等抑制杂菌），以提高军团菌的检出率。军团菌对多种抗菌药物敏感，包括红霉素、利福平、氨基糖苷类抗生素、β-内酰胺抗生素、复方
磺胺甲恶唑、多西环素和福喹诺酮类等。
7.临床意义
军团菌是一种以肺部感染为主的全身性疾病，嗜肺军团菌是军团菌病的病原菌，可通过空气传播进入肺脏，临床表现多种多样。易于侵犯患有慢性器质性疾病、免疫功能低下的病人。也可从河水、空调的冷却水、浴室和雾化器等处分离到，为医院感染的主要致病菌之一。
8.鉴定流程
参考文献
[1]周庭银编著.临床微生物学诊断与图解，第二版，上海：上海科学技术出版社，2007
[2]叶应妩，王毓三，申子瑜主编，全国临床检验操作规程，第三版，南京：东南大学出版社，2006
[3]中国合格评定国家认可委员会，CNAS-GL23:2008医学实验室质量和能力认可准则在临床微生物学检验领域的指南，2008
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