常数、麦氏常数
固定液选择：①按“相似相溶”原理选择固定液。
非极性组分——非极性固定液——沸点低（小分子物质）的物质先流出；
极性物质——极性固定液——极性小的物质先流出；
各类极性混合物——极性固定液——极性小的物质先流出；
氢键型物质——氢键型固定液——不易形成氢键的物质先流出；
复杂混合物——两种或以上混合固定液
极性：正己烷＜环己烷＜苯＜甲苯
②按化学基团相似原则选择；③按组分主要性质差别选择
HPLC的流动相：HPLC流动相为溶剂（其极性、粘度、PH值、浓度等均可改变，可调节样品在两相间分配的差异），它既有运载作用，又和固定相一样，参与对组分的竞争，因此溶剂的选择对分离十分重要。
理想的溶剂应有下列特性：
1）对待测物具一定极性和选择性；
2）使用UV 检测器时，溶剂要匹配 ；使用折光率检测器，溶剂的折光率要与待测物的折光率有较大差别；
3）高纯度。否则基线不稳或产生杂峰； 4）化学稳定性好；
5）适宜的粘度。粘度过高，柱压增加；过低，易产生气泡。
为防止固定相的流失，流动相与固定液应尽量不互溶，或者说二者的极性相差越大越好。
固定相（P77 ,70色谱法）
HPLC 通常按固定相的不同分为多种类型——各种色谱方法
如液液色谱法、液固色谱法、离子交换色谱法、离子对色谱法等 1、液液分配色谱—— 根据各待测物在互不相溶的两溶液中的溶解度不同，因而具不同的分配系数。在色谱柱中，随着流动相的移动，这种分配平衡需进行多次，造成各待测物的迁移速率不同，从而实现分离的过程。
2、离子交换色谱——原理：利用不同待测离子对固定相的亲和能力（或离子交换能力）的差别来实现分离的。
3、离子对色谱法（IPC ）
将与待测物离子A 电荷相反的离子B （称为对离子或反离子）加入到流动相中，使待测离子与对离子形成离子对AB ，该AB 离子对的性质与A 离子或B 离子的性质不同，即间接改变了待测离子的保留特性。 4、尺寸排阻色谱法
固定相为化学惰性的多孔凝胶，它类似于分子筛，但孔径更大。凝胶内有一定大小的空穴，分子体积大的待测物不能渗入孔穴中而被排阻，较早地被淋洗出来，中等的部分渗透，小分子则完全渗透，最后流出色谱柱。即待测物分子按分子大小(分子量大小)先后从柱中流出。
一、色谱分析的基本原理：借在两相间分配原理而使混合物中各组分分离。
根据组分与固定相与流动相的作用力不同，当两相做相对移动时，各组分在两相中反复多次
分配（/吸附解吸）而相互分离，依次流出色谱柱，进入检测器进行检测
二、气相色谱的理论基础：色谱的分离行为应从热力学和动力学两方面进行研究、解释。
1.试样中各组分在两相间的分配情况，由组分在两相间的分配由分配系数（热力学性质）、
各物质（试样中的组分、固定相、流动相）的分子结构和性质决定，它使得各组分在不同时间流出——峰间距，由各个色谱峰在柱后出现的时间（保留值）反映；
2.各组分在色谱柱中的运动（分散）情况，由传质和扩散（动力学性质）决定，它使得各组
分峰有一定的宽度——峰宽，由峰宽反映。
描述分配过程的参数： 1.分配系数m
s
c c =
=
溶质在流动相中的浓度溶质在固定相中的浓度K K 与组分和两相的性质、柱温、柱压有关，与两相体积、柱管特性和所用仪器无关。
2. 分配比 m m s
s V c V c k ===
m
s m m 组分在流动相中的质量组分在固定相中的质量
反映了组分在
