水杨酸脂质体凝胶剂的制备工艺研究

１５Ｏ　西北药学杂志２０１２年４月　第２７卷第２期　

水杨酸脂质体凝胶剂的制备工艺研究　

张　扬　，赵晶丽。，肖振晶。，董卫权。，周鸿立Ｈ（１．吉林化工学院化学与制药工程学院药学系，吉林１３２０２２；２．吉林工业职　

业技术学院，吉林１３２０１３；３．中国石油吉林石化矿区服务事业部医疗服务中心，吉林１３２０２２）　

摘要：目的制备水杨酸脂质体凝胶并优化制备工艺。方法采用逆相蒸发法制备水杨酸脂质体，以卡波姆为凝胶基质制备水　

杨酸脂质体凝胶。采用离心法测定脂质体包封率、渗透率，正交实验法优化水杨酸脂质体凝胶剂的刺备工艺。结果　水杨酸脂　

质体的包封率为７５．８６　，渗透率为１．３７　；脂质体凝胶的最佳工艺为：卡波姆３　ｇ、甘油１５　ｇ、搅拌温度４Ｏ℃、搅拌时间１５　ｍｉｎ。　

结论逆相蒸发法制备水杨酸脂质体，包封率较高，性质稳定；优化后所得产品性状稳定、均一，该法制备水杨酸脂质体凝胶可行。　

关键词：水杨酸；脂质体；包封率；凝胶荆　

ｄｏｉ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００４—２４０７．２０１２．０２．０２２　中图分类号：Ｒ９４４　文献标志码：Ａ　文章编号：１００４－２４０７（２０１２）０２—０１５０—０３　

Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｏｆ　Ｓａｌｉｃｙｌｉｃ　Ａｃｉｄ　Ｌｉｐｏｓｏｍｅ　Ｇｅｌｓ　

ＺＨＡＮＧ　Ｙａｎｇ　，ＺＨＡＯ　Ｊｉｎｇｌｉ。，ＸＩＡＯ　Ｚｈｅｎｊｉｎｇ　。ＤＯＮＧ　Ｗｅｉｑｕａｎ　，ＺＨＯＵ　Ｈｏｎｇｌｉ“（１．Ｓｃｈｏｏｌ　ｏｆ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　ａｎｄ　Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ。Ｊｉｌｉｎ　Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ　ｏｆ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ。Ｊｉｌｉｎ　１３２０２２，Ｃｈｉｎａ；２．Ｊｉｌｉｎ　Ｖｏｃａｔｉｏｎａｌ　Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｉｎｄｕｓｔｒｙ　ａｎｄ　ＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙＩ　

Ｊｉｌｉｎ１３２０１３，Ｃｈｉｎａ；３．ＭＳＣ　ｏｆ　Ｊｉｌｉｎ　Ｐｅｔｒｏｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｂｒａｎｃｈ　Ｍｉｎｉｎｇ　Ａｒｅａ　Ｓｅｒｖｉｃｅ　Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ，Ｊｉｌｉｎ　１３２０２２，Ｃｈｉｎａ）　

Ａｂｓｔｒａｃｔ：０ｂｊｅｃｔｉｖｅ　Ｔｏ　ｏｐｔｉｍｉｚｅ　ｔｈｅ　ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｏｆ　Ｓａｌｉｃｙｌｉｃ　Ａｃｉｄ　Ｌｉｐｏｓｏｍｅ　Ｇｅｌｓ．Ｍｅｔｈｏｄ　Ｓａｌｉｃｙｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｌｉｐｏｓｏｍｅ　ｗａｓ　ｐｒｅ—　ｐａｒｅｄ　ｂｙ　ｒｅｖｅｒｓｅ　ｅｖａｐｏｒａｔｉｎｇ　ｍｅｔｈｏｄ，ａｎｄ　ｌｉｐｏｓｏｍｅ　ｇｅｌｓ　ｗａｓ　ｐｒｅｐａｒｅｄ　ｕｓｉｎｇ　ｃａｒｂｏｍｅｒ　ａｓ　ｔｈｅ　ｍａｔｒｉｘ．Ｔｈｅ　ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｏｎ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ　

ａｎｄ　ｌｅａｋｉｎｇ　ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ　ｏｆ　ｓａｌｉｃｙｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｌｉｐｏｓｏｍｅ　ｗｅｒｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎｅｄ　ｗｉｔｈ　ｔｈｅ　ｃｅｎｔｒｉｆｕｇａｌ　ｍｅｔｈｏｄ。ａｎｄ　ｔｈｅ　ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｏｆ　ｌｉｐｏ—　

ｓｏｍｅ　ｇｅｌｓ　ｗａｓ　ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ　ｗｉｔｈ　ａ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｔｅｓｔ．Ｒｅｓｕｌｔｓ　Ｔｈｅ　ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｏｎ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ　ｏｆ　ｓａｌｉｃｙｌｉｃ　ａｃｉｄ　ｌｉｐｏｓｏｍｅ　ｗａｓ　７５．８６％。ｌｅａ—　

ｋｉｎｇ　ｐｅｒｃｅｎｔａｇｅ　ｗａｓ　１．３７　．Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍａｌ　ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｗａｓ　ｃａｒｂｏｍｅｒ　３　ｇ，ｇｌｙｃｅｒｏｌ　１５　ｇ，ｍｉｘｉｎｇ　ｔｅｍｐｅｒａｔｕｒｅ　４０℃，ａｎｄ　ｍｉｘ—　

ｉｎｇ　ｔｉｍｅ　１　５　ｍｉｎ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ　Ｔｈｅ　ｒｅｖｅｒｓｅ　ｅｖａｐｏｒａｔｉｎｇ　ｍｅｔｈｏｄ　ｗａｓ　ａ　ｇｏｏｄ　ｍｅｔｈｏｄ　ｔｏ　ｐｒｅｐａｒｅ　ｓａｌｉｃｙｌｉｃ　ａｃｉｄ　１ｉｐｏｓｏｍｅ　ｗｉｔｈ　ｈｉｇｈｅｒ　ａｎ—　

ｃａｐｓｕｌａｔｉｏｎ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ　ａｎｄ　ｂｅｔｔｅｒ　ｓｔａｂｉｌｉｔｙ．Ｔｈｅ　ｏｐｔｉｍｉｚｅｄ　ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ　ｐｒｏｃｅｓｓ　ｏｆ　ｌｉｐｏｓｏｍｅ　ｇｅｌｓ　ｗａｓ　ｄｅｓｉｒａｂｌｅ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｐｒｏｄｕｃｔ　ｗａｓ　ｓｔａｂｌｅ　ａｎｄ　ｕｎｉｆｏｒｍ．　

Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｓａｌｉｃｙｌｉｃ　ａｃｉｄ；ｌｉｐｏｓｏｍｅ；ｅｎｃａｐｓｕｌａｔｉｏｎ　ｅｆｆｉｃｉｅｎｃｙ；ｇｅｌ　

水杨酸（ｓａｌｉｃｙｌｉｃ　ａｃｉｄ）是常见的精细化工原料，　

在美容护肤领域亦有广泛应用，对轻、中度痤疮具有　

良好的疗效。水杨酸软膏剂是医院常用制剂，除治疗　

痤疮外，还可用于治疗体股癣、手足癣等ｒ】］。但水杨　

酸的治疗质量浓度不好控制，质量浓度过高对皮肤有　

刺激性。脂质体（１ｉｐｏｓｏｍｅ）可以将药物粉末或溶液　

包埋在直径为纳米级的微粒中，这种微粒具有类细胞　

结构［２］，与皮肤具有较好的相容性，具有靶向、缓释、　

降低毒性等作用。本研究以水杨酸为主药，脂质体为　

经皮给药的载体，制成水杨酸脂质体凝胶剂。　

１仪器与试药　

１．１仪器紫外可见分光光度计（山东高密彩虹分　

析仪器有限公司，ＵＶ一７５４型）；超声仪（上海科导超　

声仪器有限公司，ＳＫ２５０ＬＨ）；旋转蒸发器（上海亚荣　

生化仪器厂，ＲＥ　５２Ａ）；循环水式真空泵（巩义市英峪　

予华仪器厂，ＳＨＺ—Ｄ（ｍ））；透射电子显微镜（日本日　

立公司，Ｈ一６００）；激光粒度分析仪（济南微纳颗粒仪　

器股份有限公司，Ｗｉｎｎｅｒ　２０００ＺＤ）；超级恒温浴槽　

（江苏省金坛市正基仪器有限公司，６０１）；旋转式黏度　

计（北京友谊四方科技发展有限公司，ＮＤＪ－１）；电子　

天平（沈阳龙禧电子称量仪表有限公司）。　

基金项目：吉林省教育厅“十二五”科学技术研究项目（吉教　科合字（２０１ｉ）第４６２号）　作者简介：张扬，男，在读博士，助教　诵信作者：周鸿立，女，博士，教授　１．２试药水杨酸对照品（上海研域化学试剂有限　

公司，批号２０１００７１２，含量９９．８％）；水杨酸原料药　

（ｇｇ前程药业南京有限公司，药用级别）；大豆卵磷脂　

（江苏曼氏生物科技有限公司，生化试剂）；胆固醇（江　

苏曼氏生物科技有限公司，生化试剂）；无水乙醇（天　

津市大茂化学试剂厂）；乙醚（深圳华宇化工商行）；卡　

波姆一９４０（廊坊市聚通化工有限公司）；甘油（深圳市　

华亚化工有限公司）；三乙醇胺（天津市大茂化学仪器　

供应站）；其他试剂均为分析纯。　

２方法与结果　

２．１　制备工艺　

２．Ｉ．１水杨酸脂质体的制备　精密称取水杨酸０．３　

ｇ、卵磷脂０．９　ｇ、胆固醇０．３　ｇ，置于圆底烧瓶中，加入　

三氯甲烷１４　ｍＬ使其全部溶解。减压蒸除溶剂至成　

膜（控制水浴温度在６Ｏ℃左右），加入乙醚１４　ｍＬ使　

膜全部溶解，然后加入ＰＢＳ缓冲溶液（ｐＨ一７．４）１０　

ｒｎＬ，间断超声５　ｒａｉｎ使其分层，静置３０　ｒａｉｎ。蒸除溶　

剂得乳白色混悬液，依次过中速滤纸和０．４５　ｍ的　

微孔滤膜，即得水杨酸脂质体＿３。］。　

２．１．２凝胶剂的制备　取处方量的卡波姆－９４０分　

散于适量纯化水中，静置过夜，充分溶胀后加三乙醇　

胺调ｐＨ至６～７，得无色透明的空白凝胶基质Ｌｓ］。在　

４０℃水浴条件下将处方量的脂质体缓慢加入到空白　

凝胶基质中，边加边搅拌，研和均匀，即得水杨酸脂质　

ｈｔｔｐ：＇／／ＸＢＹＺ．ｃｂｐｔ．ｃｎｋｉ．ｎｅｔ

　西北药学杂志２０１２年４月　第２７卷第２期　

体凝胶，使其中水杨酸的含量为２　。　

２．２脂质体包封率的测定　

２．２．１线性方程的确定［６　精密称取置干燥器中干　

燥２４　ｈ的水杨酸对照品１００　ｍｇ，置１００　ｍＬ量瓶中，　

以适量乙醇溶解后加纯化水至刻度，摇匀。分别精密　

吸取上述溶液０．３，０．６，０．９，１．２，１．５，１．８，２．１，２．４　

和２．７　ｍＬ，置１００　ＨｌＬ量瓶中，依次加纯化水至刻度，摇　

匀。以纯化水为空白，在２９８　ｎｍ处测定吸光度，以吸　

光度Ａ对质量浓度ｃ进行线性回归，得水杨酸回归　

方程：Ａ一０．０２８　２Ｃ＋０．００７　５，ｒ＝０．９９９　９（　一９），线　

性范围为３～２７　ｐ－ｇ・ｍＬ＿。。　

２．２．２测定方法及结果　采用离心法测定水杨酸脂　

质体包封率［７］，精密吸取等量水杨酸脂质体和空白脂　

质体于离心管中，转速４　０００　ｒ・ｍｉｎ～，离心３０　ｍｉｎ。　

取上清液，定容至２５　ｍＬ，以离心后的空白脂质体作　

为对照，于２９８　ｎｍ处测定其吸光值，代入回归方程，　

得未包入脂质体中药物量（ｗ游离）。精密吸取等量的　

水杨酸脂质体和空白脂质体于试管中，分别加入无水　

乙醇破乳，移至离心管中，其他操作步骤同前，得总药　

物量（ｗ总）。包封率（　）一（Ｗ总一Ｗ游离）／ｗ总×　

１００　，３批脂质体的包封率的平均值为７５．８６　。　

２．３脂质体稳定性的初步考察　以室温下放置的水　

杨酸脂质体的渗透率为指标，考察至渗透率基本不变　

为止，初步考察其稳定性。由下式计算渗透率：　

渗透率（　）一（ｗ　一Ｗ　）／ｗ　Ｘ１００　

ｗ　为新鲜制备的脂质体包封率；Ｗ。为放置后的　

脂质体包封率。　

实验表明，室温静置２４　ｈ后的脂质体渗透率基　

本不变，为ｌ＿３７　。　

２．４脂质体的形态及粒径大小的测定将制备好的　

样品用水稀释后，取１滴置碳铜网上，４　磷钨酸溶液　

（ｐＨ一７．Ｏ）负染，干燥，于透射电镜下观察脂质体形　

态，脂质体呈大单室，外观呈圆球形或类圆形，结构较　

完整。　

用激光粒度测定仪测定样品的粒径，分布在２１３　

～３７５　ｎｍ之间。　

２．５凝胶剂的最佳工艺考察在单因素考察的基础　

上，对凝胶剂的制备工艺进行考察，依据Ｌ。（３　）正交　

实验表设计因素与水平表，如表１所示。　

表１正交实验因素与水平表　

Ｔａｂ．１　Ｆａｃｔｏｒｓ　ａｎｄ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｔｅｓｔｓ　

因素　水平　Ａ，—＿Ｂ。　卡波姆／ｇ・ｇ　甘油／ｇ・ｇ　按照正交设计表中的用量配制各１００　ｇ的样品，　

置于１００　ｍＬ小烧杯中密封，于一１Ｏ℃、室温和６０℃　

放置２４　ｈ，观察样品的性状、涂展性、稳定性、黏度和脂　

质体的稳定性等，综合评分［８＿９］（１Ｏ分为满分，其他介于　

Ｏ～１０分之间），得出结果并处理数据如表２所示。　

表２正交实验结果　

Ｔａｂ．２　Ｒｅｓｕｌｔｓ　ｏｆ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｔｅｓｔｓ　

序号　Ａ　Ｂ　ｃ　Ｄ　一１０℃室温　６０℃　综合分值　

由表２结果可知，因素Ａ影响最显著，因素Ｃ次　

之，因素Ｂ再次之，因素Ｄ影响最小（Ａ＞Ｃ＞Ｂ＞Ｄ），　

由ｋ平均值确定最佳工艺为Ａ。Ｂ。Ｃ。Ｄ　，即卡波姆３　

ｇ、甘油１５　ｇ、搅拌温度４Ｏ℃、搅拌时间１５　ｍｉｎ。　

３讨论　．　

①水杨酸在高温下容易升华，对照品不宜于１０５　

℃干燥至恒质量，本实验采用将其贮存于干燥器中　

２４　ｈ备用。另外，水杨酸遇金属离子易变色，在制备　

中应避免使用含金属材料的器皿。　

②在逆相蒸发法制备脂质体中，温度的影响较　

大。温度越高，时间越短，有机溶剂蒸出速度越快，在　

一定时间内会有水分随有机溶剂一同蒸出，对药品的