薄层色谱法测定苏丹红

苏丹红等油溶性非食用色素的快速纸层析测定法方法编号：CDC-20411 适用范围：本方法适用于苏丹红（1、2、3、4号）等油溶性非食用色素的现场快速检测。

2 方法原理：依据苏丹红等油溶性非食用色素的化学极性不同，通过绽开剂在试纸上的绽开距离不同来确定确定组分的存在。

3 检测试材（试剂盒组成）：快速层析纸，Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ号系列苏丹红对比液，绽开剂，毛细管。

4 样品处理：取约1g样品于容器中，加入2～4 mL乙酸乙酯，充分混匀，提取1min，静置3min以上。

5 点样：取一张层析纸，在端底向上约1cm处、平行相隔约1cm、用铅笔画出将要点样的+字线或五个小点。

取1支毛细管沾取样品溶液的上层液，将其分别点在五个+字线上（样品溶液颜色较浅时，可在每次点样斑点挥干后重复点样），斑点直径掌握在5毫米以内。

另取四支毛细管分别沾取苏丹红1、2、3、4号对比液少许分别点在样品的原点上。

6 绽开：取一个250mL以上的烧杯，加入约5mL绽开剂，将层析纸（样品端朝下）插入绽开剂中靠在杯壁上，待绽开剂延层析纸向上平行绽开至层析纸顶端约1厘米处时取出层析纸，观看结果。

7 结果推断7.1在本试验条件下，假如样品在绽开轨迹中消失斑点，其斑点绽开（向上跑）的距离与某一对比液绽开后的斑点距离相等、颜色相同或颜色虽浅却相近时，即可推断样品中含有这一色素。

7.2我国允许使用的色素除自然色素外没有油溶性色素，自然色素的化学极性往往很小，样品中即使含有自然色素，绽开后的色斑会在前沿之处消失淡色斑点或淡色条带。

7.3假如对比物已经绽开，而样品色斑在原处未动或绽开的距离很小，表明这一色素为水溶性色素，可用水溶性色素检测试剂来推断其是食用的还是非食用的。

8 留意事项：8.1本方法检出限为点样量10 L,0.08g 目视可见；最低检出浓度8g/mL。

精确定量需要采纳高效液相色谱仪。

8.2 检测的样品数量较多时，不必每张层析纸上都点对比液，可一次点几个样品，当绽开过程中消失斑点后，再做加入对比液试验。

(VOL.45,No.04April.2020~l--------------------------------------------Grain science and technology and economy I粮食科技与经济丨101高效液相色谱法测定辣椒油中苏丹红的含量许秦，唐一秋,郑世妍（昆明市食品药品检验所，云南昆明650000）［摘要］本文对国家标准《食品中苏丹红染料的检测方法高效液相色谱法》（GB/T19681—2005）中利用高效液相色谱法测定辣椒油中苏丹红含量的方法进行优化,使方法更加简便快捷，且满足实验要求。

以正己烷为提取溶剂，提取液经ProElut SDH固相萃取柱净化，经高效液相色谱柱分离，外标法定量。

优化后的方法中，苏丹红I〜N在0.16~2.56g g/mL的浓度范围内线性关系良好，苏丹红I〜N的检出限分别为0.0107p g/kg、0.0111p g/kg、0.0119p g/kg、0.0110p g/kg,加标回收率为89.21%〜95.69%。

优化后的实验方法易于操作，能够缩短实验时间，有良好的回收率，更适合检测辣椒油中苏丹红的含量。

［关键词］高效液相色谱法;辣椒油；苏丹红中图分类号：0657.72;TS264文献标识码：A DOI：10.16465/431252ts.20200431苏丹红是亲脂性偶氮化合物，它的化学成分中含有一种叫萘的化合物,此物质具有偶氮结构，这种化学结构决定了它的致突变性和致癌性，对人体的肝肾器官具有明显的毒性作用，在人类肝细胞研究中显现出可能致癌的特性。

苏丹红属于化工染色剂,主要用于石油、机油和其他一些工业溶剂中，目的是使其增色,在我国禁止应用于食品加工。

食品中苏丹红含量的检测方法主要有薄层色谱法、高效液相色谱法、近红外光谱、凝胶渗透色谱、液相色谱-质谱联用法，该方法有机试剂用量大、操作过程烦琐、耗时长。

本文对此方法进行了优化，使操作过程简单直观,减少了有机试剂用量，缩短了实验时间，提高了实验效率，更适合用于辣椒油中苏丹红含量的检测［1-4］。

苏丹红的检测中华人民共和国国家标准食品中苏丹红染料的检测方法高效液相色谱法1 范围本标准适用于食品中苏丹红染料的检测。

本标准规定了食品中苏丹红?、苏丹红?、苏丹红?、苏丹红?的高效液相色谱测定方法。

方法最低检测限:苏丹红?、苏丹红?、苏丹红?、苏丹红?均为10ug/kg. 2 术语和定义2.1 苏丹红属偶氮系列化工合成染料。

3 方法要点样品经溶剂提取、固相萃取净化后，用反相高效液相色谱——紫外可见光检测器进行色谱分析，采用外标法定量。

4 试剂与标准品4.1 乙腈色谱纯4.2 丙酮色谱纯、分析纯4.3 甲酸分析纯4.4 乙醚分析纯4.5 正己烷分析纯4.6 无水硫酸钠分析纯4.7 层析柱管:1cm(内径)×5cm(高)的注射器管。

4.8 层析用氧化铝(中性100目~200目):105?干燥2h，与干燥器中冷至室温，每100g中加入2mL水降活，混匀后密封，放置12h后使用。

注:不同厂家和不同批号氧化铝的活度有差异，须根据具体购置的氧化铝产品略做调整，活度的调整采用标准溶液过柱，将1ug/mL的苏丹红的混合标准溶液1mL加到柱中，用5%丙酮正己烷溶液60mL完全洗脱为准，4种苏丹红在层析柱上的流出顺序为苏丹红?、苏丹红?、苏丹红?、苏丹红?，可根据每种苏丹红的回收率作出判断。

苏丹红?、苏丹红?的回收率较低表明氧化铝活性偏低，苏丹红?的回收率偏低时表明活性偏高。

4.9 氧化铝层析柱:在层析柱管底部塞入一薄层脱脂棉，干法装入处理过的氧化铝至3cm高，轻敲实后加一薄层脱脂棉，用10mL正己烷预淋洗，洗净柱中杂质后，备用。

4.10 5%丙酮的正己烷液:吸取50mL丙酮用正己烷定容至1L。

4.11 标准物质:苏丹红、苏丹红、苏丹红、苏丹红;纯度?95%/4.12 标准储备液:分别称取苏丹红、苏丹红、苏丹红及苏丹红各10mg(按实际含量折算)，用乙醚溶解后用正己烷定容至250mL。

4 仪器与设备5.1 高效液相色谱仪(配有紫外可见光检测器)5.2 分析天平:感量0.1mg5.3 旋转蒸发仪5.4均质机5.5 离心机5.6 0.45um有机滤膜6 样品制备将液体、浆状样品混合均匀，固体样品需磨细。

２５８　—Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ａｂｓｔｒａｃｔ—ｓ（Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｅｄｉｔｉｏｎ）２００８　Ｖｏ１．１４，Ｎｏ．１０　

关键词：服装；品牌形象；维度；权重　５５０食品科学技术　０８１０１８５３　５５０・１０食品科学技术基础学科　辣椒制品中苏丹红色素的快速检测方法＝Ｒａｐｉｄ　ｄｅｔｅｃｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　Ｓｕｄａｎ　ｐｉｇｍｅｎｔｓ　ｉｎ　ｃｈｉｌｉ　ｐｒｏｄｕｃｔｓ［刊，中］／吴超（中国　农业大学食品科学与营养工程学院，北京１０００８３），陈敏∥中　国农业大学学报．一２ｏ０７，１２（５）．—４８～５１　提出快速定性、定量测定辣椒制品中苏丹红色素的薄层色谱一　扫描法．试验确定展开剂成分比例，在　石油醚）：　丙　酮）：　乙酸乙酯）＝１００：３：４的条件下，利用薄层色谱法可使　辣椒制品中的天然色素与苏丹红色素在高效硅胶板上完全分　离，比较检测样品与苏丹红色素标准品的风值和斑点颜色即可　定性判断食品中是否含有苏丹红色素．用扫描仪扫描展开后　的样品获得色素斑点图像，应用ＢａｎｄＳｃａｎ软件测定苏丹红Ｉ、　ＩＩ、ＩＩＩ、Ⅳ标准样品的总灰度，以苏丹红点样量（　ｇ）为横坐标　，　总灰度值为纵坐标Ｙ，进行线性回归，定量测定辣椒制品中的　苏丹红含量．试验结果表明，苏丹红Ｉ、ＩＩ、ＩＩＩ、Ⅳ扫描值的　相对标准差分别为１．０１％、１．９１％、０．６８％￣Ｉ　２．５９％，说明该方　法精密度很好．该方法分离效果好、灵敏度高，且经济、操作　简便，适用于辣椒及其制品中苏丹红色素的定性定量测定．图　２表２参１１　关键词：薄层色谱；苏丹红；辣椒色素；扫描　０８１０１８５４　５５０・１０　牛乳中乳果糖含量测定的快速酶法＝Ｒａｐｉｄ　ｅｎｚｙｍｅ　ｄｅｔｅｒｍｉｎａ－　ｔｉｏｎ　ｏｆ　ｌａｃｔｕｌｏｓｅ　ｉｎ　ｍｉｌｋ［刊，中］／黄萌萌（中国农业科学院北京　畜牧兽医研究所动物营养国家重点实验室，北京１０００９４），王　加启，卜登攀，魏宏阳，李树聪，许晓敏，于建国∥中国农业　大学学报．—２ｏ０７，１２（５）．一５７～６０　提出的牛乳乳果糖含量测定的快速酶法，在ＩＳＯ标准酶法基础　上改变了乳果糖水解步骤，即培养时间１　ｈ，培养温度５０￣Ｃ，　口．半乳糖苷酶添加量３００　Ｕ．试验结果表明，该法牛乳乳果糖　平均回收率９８．６％，相对标准偏差＜５％，且将乳果糖含量测定　周期缩短至６　ｈ（ＩＳＯ标准酶法为１５　ｈ）．对３５种市场随机采购　的ＵＨＴ灭菌乳进行的快速酶法与ＩＳＯ标准酶法对比试验结果　表明，牛乳乳果糖含量测定结果差异不显著（Ｐ＝０．３３）；带菌条　件下（未使用无菌工作台，实验室及试验器皿未进行紫外消毒），　快速酶法测定的乳果糖质量浓度比ＩＳＯ标准酶法高４％～２０％　（Ｐ＜０．０１），说明ＩＳＯ标准酶法测定过程中样品受微生物影响，　而快速酶法没有受到微生物影响．对生鲜牛乳、奶粉、巴氏杀　菌乳及ＵＨＴ灭菌乳中乳果糖含量的测定结果表明，快速酶法　适于不同加工工艺牛乳乳果糖含量的测定．快速酶法测定周　期短、结果准确，适于批量样品测定．该法降低了微生物污染　的几率，在操作环境不能达到无菌要求时应采用快速酶法．图　１表１参１３　关键词：乳果糖；牛乳：酶法：　．半乳糖苷酶　０８１０１８５５　５５０・１０　氯霉素ＥＬＩＳＡ检测试剂盒的研制及其性能测试＝Ｄｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔ　ａｎｄ　ｐｅｒｆｏｒｍａｎｃｅ　ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ　ｏｆ　ｃｈｌｏｒａｍｐｈｅｎｉｃｏｌ　ＥＬＩＳＡ　ｔｅｓｔ　ｋｉｔ　［刊，中］／郭逸蓉（浙江大学农药与环境毒理研究所，杭州　３１００２９），桂文君，王姝婷，朱国念∥中国食品学报，一２ｏ０７，　７（６），一１　１８～１２３　采用包被多克隆抗体直接竞争ＥＬＩＳＡ法建立了氯霉素残留的　酶联免疫分析方法，并构建了氯霉素残留ＥＬＩＳＡ检测试剂盒．　研究结果表明，所选用的抗体对氯霉素亲合力强、特异性高，　试剂盒对氯霉素残留检测的线性范围为０．２４￣２５０　ｎｇ／ｍＬ，检　测限（ＩＣ１ｏ）Ｏ．４７　ｎｇ／ｍＬ，样品的加标回收率７０％　１３０％之间．　试剂盒性能测试结果表明，其准确性和重现性较好，保存期至　少６个月，可用于虾肉、鸡肉、蜂蜜、鲜奶样品中氯霉素残留　的批量快速、廉价检测．图７表４参９　关键词：氯霉素；酶联免疫吸附分析；试剂盒　０８１０１８５６　５５０・２０食品加工技术　超声波强化逆流提取机及提取试验＝Ｓｔｕｄｙ　ｏｎ　ｕｌｔｒａｓｏｎｉｃ　ｗａｖｅ