组织蛋白质提取
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RIPA裂解液提取组织蛋白质
1、将组织从-80℃低温冰箱/液氮中取出放入无菌研磨器内;
2、在裂解液中加入适量PMSF,使用前数分钟加入,使PMSF的最终浓度为1 mmol/L;
3、吸取混合液1ml(250mg组织))加入研磨器中冰上充分研磨组织并静置1h;
4、4℃,14000r/min,离心15min,取上清置于1.5mlEP管中;
5、保存于-80℃低温冰箱中或按4:1的比例加入5X上样缓冲液,煮沸10min,-20℃保存。