微生物问答题部分

四、问 答 题

（仅供参考）

1、 什么是微生物？主要特点，举例说明。

微生物是一切肉眼看不见或看不清的微小生物的总称。

特点：a.体积小，面积大：典型的菌株体积仅1μm3左右，比面积却有6ⅹ104

b.吸收多，转化快：发酵乳糖的细菌1小时可分解其自重1000-10000倍的乳糖

c.生长旺，繁殖快：大肠杆菌每分裂1次时间为12.5-20.0分中，每昼分裂72次，后代4722366500亿万个。

d.适应强，易变异：某些硫细菌可在250℃甚至300℃高温下生存。

e.分布广，种类多：人体肠道中聚居着100-400种不同微生物，个数大于100万亿。

2、 试述G+菌和G-菌细胞壁的特点，并说明革兰氏染色的机理及重要意义？

G-菌细胞壁的特点是厚度较G+菌薄，层次较多，肽聚糖层很薄（仅2-3nm），故机械强度较G+菌弱。

机理：通过结晶紫液初染和碘液媒染后，在细菌的细胞膜内可形成不溶与水的结晶紫与碘的复合物。G+菌由于其细胞壁较厚，肽聚糖网层次多和交联致密，故遇脱色剂乙醇处理时，因失水而使网孔缩小，再加上它不含类脂，故乙醇的处理不会溶出缝隙，因此能把结晶紫和碘的复合物牢牢留在壁内，使其保持紫色。而G-菌因其细胞壁薄，外膜层类脂含量高，肽聚糖层薄和较联度差，遇脱色剂乙醇后，以类脂为主的外膜迅速溶解，这时薄而松散的肽聚糖网不能阻挡结晶紫与碘的复合物的溶出，因此细胞退成无色，这时，再经沙黄等红色染料复染，就使G-菌呈红色，而G+菌仍为紫色。

意义：通过这一染色过程，可把几乎所有细菌分为G+和G-两类，是分离鉴定菌种的重要指标。同时证明了G+和G-主要由于其细胞壁化学成分的差异而引起了物理特性（脱色能力）的不同，正由于这一物理特性的不同才决定了最终染色反应的不同。

3、 试比较G+和G-在一系列生物学特性上的差异。

比较项目 G+细菌 G-细菌

革兰氏染色反应 能阻留结晶紫而染成紫色 可经脱色而复染成红色

肽聚糖 厚，层次多 薄，一般单层

磷壁酸 多数含有 无

外膜 无 有

脂多糖（LPS） 无 有

类脂和脂蛋白含量 低（仅抗酸性细菌含有类脂） 高

鞭毛结构 基体上着生两个环 基体上着生4个环

产毒素 以外毒素为主 以内毒素为主

对机械力的抗性 强 弱

细胞壁抗溶菌酶 弱 强

对青霉素和磺胺 敏感 不敏感

对链霉素、氯霉素、四环素 不敏感 敏感

碱性染料的抑菌作用 强 弱

对阴离子去污剂 敏感 不敏感

对叠氮化钠 敏感 不敏感

对干燥 抗性强 抗性弱

产芽孢 有的产 不产

4、 细胞芽孢有何实践重要性，产芽孢的细菌有哪几类？ 芽孢是某些细菌在其生长发育后期，，在细胞内形成的一个圆形或椭圆形、壁厚、含水量低、抗屈性强的休眠构造。无繁殖功能，芽孢有极强的抗热抗辐射，抗化学药物和抗静水压等特性。芽孢具有极强的休眠能力，可以保存几年至几十年而不死亡，芽孢的有无、形态和位置，在细菌分类和鉴定中是重要的形态学指标，实践上芽孢的存在亦利于菌种的筛选与保藏，有利于对各种消毒、杀菌措施优劣的判断等。

产芽孢的菌有：革兰氏阳性菌：芽孢杆菌属，梭菌属，芽孢八叠球菌属

革兰氏阴性菌：脱硫肠状菌属

5、 如何理解“放线菌是介于细菌与丝状真菌间而更接近细菌的一类微生物”？

放线菌是一类主要呈菌丝状生长和以孢子繁殖的陆生性较强的原核生物，它与细菌十分接近。①细胞壁主要为肽聚糖，②菌丝直径与细菌相仿，③革兰氏呈阳性，④都属于原核生物，⑤都是单倍体，多核。而其细胞呈丝状分枝，形成基内菌丝，气生菌丝，气生菌丝有分化为孢子丝，与丝状真菌的基本单位“菌丝”类似，但是它们差异很大，①真菌的菌丝比放线菌粗，②细胞壁的成分完全不同，丝状真菌的细胞壁由几个质层，蛋白质层，葡聚糖蛋白网层等构成，③菌丝体分化不同，丝状真菌菌丝体分化成营养菌丝体和气生菌丝体，④繁殖方式不同，丝状真菌的气生菌丝体回转化成子实体，孢子在其里面或外面产生，放线菌则通过气生菌丝分化成孢子丝，并通过横割分裂方式，产生成串分生孢子。

6、如何理解“菌落特征与菌体细胞结构、生长行为及环境条件有关”？

菌落特征取决与组成菌落的细胞结构，生长行为及个体细胞形态的差异，都会密切反映在菌落形态上，如有些细菌有荚膜，在其细胞壁外就会有一层厚度不定的透明胶状物质，而有些细菌有鞭毛，也会反映与它的菌落特征上，同时菌落在不同环境条件下的形态特征也有差异，在利于生长和不利生长的情况下，细菌的形态有差异，有些细菌在恶劣的条件下能形成芽孢等休眠体结构，培养基的种类不同也会形成菌落形态的不同，使用固体，半固体，液体培养基培养同一种细菌时，其菌落特征不尽相同。

7、列表比较细菌、放线菌、霉菌、酵母菌细胞结构、群体特征及繁殖方式的异同点。

细胞结构 群体特征 繁殖方式

细菌 单细胞原核生物，细胞由细胞壁，细胞膜。细胞质和内含物，核区组成，少数含有特殊结构，如鞭毛、荚膜等。革兰氏染色有G+、G- 菌落一般呈现湿润较光滑，较粘稠，易挑起，质地均匀，菌落正反面及边缘中心部位颜色一致 主要为裂殖

少数为牙殖

放线菌 单细胞多核原核生物，革兰氏染色显阳性，细胞壁的成分主要为肽聚糖，细胞呈丝状分枝，形成基内菌丝，气生菌丝 干燥、不透明、表面呈致密的丝绒状，上有一层彩色“干粉”难挑起，菌落正反面颜色不一致 多数进行孢子繁殖，少数以基内菌丝分裂，形成孢子状细胞进行繁殖

霉菌 由菌丝构成，直径3-10μm，与酵母菌细胞类似，细胞壁主要有几丁质构成，少数含有维生素 菌落的形态较大，质地疏松，外观干燥，不透明，呈现或松或紧的蛛网状、绒毛状、棉絮状，与培养基结合紧密，不易挑起 气生菌丝转化成各种子实体，子实体上或里面产生无性或有性孢子，进行繁殖。

酵母菌 细胞直径为细菌10倍，是典型的真核微生物细胞主要由细胞壁，细胞膜，细胞核构成。细胞壁分为三层，成分为酵母维生素 较湿润，较透明，表面较光滑，容易挑起，菌落知底均匀，正反面以及边缘与中央部位的颜色一致。 无性繁殖：

牙殖，裂殖，无性孢子

有性繁殖：

产生子囊孢子

8、为什么霉菌菌落的中央边缘、正面与反面在外形、颜色、构造等方面常有明显差别？放线菌、细菌和酵母菌呢？ 霉菌菌落正反面颜色呈现明显差别，是气生菌丝尤其是由它分化出来的子实体颜色比分散在固体基质内的培养菌丝颜色深；而菌落中心与边缘颜色及结构不同，是因为越接近中心的气生菌丝其生理年龄越大，发育分化和成熟也越早，颜色一般也较深，这样它与菌落边缘尚未分化的气生菌丝比起来，自然存在明显的颜色和结构上的差异。

9、如何获得细菌（G+、G-）、放线菌、酵母菌、霉菌的原生质体？

G+菌原生质体获得：青霉素、溶菌酶

G-菌原生质体获得：EDTA鳌合剂处理，溶菌酶

放线菌原生质体获得：青霉素、溶菌酶

霉菌原生质体获得：纤维素酶

酵母菌原生质体获得：蜗牛消化酶

10、列表比较微生物的四大营养类型。

营养类型 能源 氢供体 基本碳源 实例

光能无机营养型

（光能自养型） 光 无机物 CO2 蓝细菌、紫硫细菌、绿硫细菌、藻类

光能有机营养型

（光能异养型） 光 有机物 CO2及简单有机物 红螺菌科的细菌（即紫色无硫细菌）

化能无机营养型

（化能自养型） 无机物 无机物 CO2 硝化细菌、硫化细菌、铁细菌、

氢细菌、硫磺细菌等

化能有机营养型

（化能异养型） 有机物 有机物 有机物 绝大多数细菌和全部真核生物

11、试分析麦康开培养基的各组分的主要作用是什么？该培养基属于什么培养基？

A 功能

蛋白胨 氮源

乳糖 碳源

NaCl 无机物

牛胆酸盐 生长因子

PH7.4 适宜菌生长

1%中性红 指示剂

发酵管 判断是否产气

属于半组合培养基

12、列表比较有氧呼吸、无氧呼吸、发酵三种能量代谢的异同点

13、如何使微生物合成比自生所需更多的产物？

① 酶活调节：

② 酶合成调节： ③ 膜通透性调节：

④ 发酵条件的调节：C，N，无机盐，通风量，PH值等。

利用微生物代谢调控能力可使微生物合成比自生所需更多的产物。

微生物细胞的代谢调节方式很多，例如可调节营养物质透过细胞膜而进入细胞的能力，通过酶的定位以限制它与相应底物的接近，以及调节代谢流等，其中以调节代谢流的方式最为重要，它包括调节酶的合成和调节现成酶分子的催化能力，两者密切配合，以达最佳效果。

14、试列表比较单纯扩散、促进扩散、主动运输、基团移位四种不同营养物质运送方式。

比较项目 特意性载体蛋白 运送速度 溶质运送方式 平衡时内外浓度 运送分子 能耗 运送前后溶质分子

单纯扩散 无 慢 由浓至稀 内外相等 无特异性 不需 不变

促进扩散 有 快 由浓至稀 内外相等 特异性 不需 不变

主动运输 有 快 由稀至浓 内外高 特异性 需要 不变

基团移位 有 快 由稀至浓 内外高 特异性 需要 改变

15、是否所有的微生物都需要生长因子？如何满足微生物对生长因子的需要？

生长因子是一类调节微生物正常代谢所必须，但不能用简单的碳源、氮源自行合成的有机物。但并非任何微生物都需要从外界吸收生长因子。如：多数真菌、放线菌和不少细菌。E.Coli等都是不需要外界提供生长因子的生长因子自养微生物。生长因子异养微生物，如乳酸菌，各种动物致病菌、原生动物、支原体等。

在配置微生物培养基时，如配置天然培养基，可加入富含生长因子的原料——酵母膏、玉米浆、肝浸液、麦芽汁等；如配置组合培养基，可加入复合维生素溶液。

16、营养要素与配置培养基的某一营养物是否同一概念？举例说明。

非同一概念。

17、测定微生物的繁殖数常用那些方法？比较它们的优缺点？

（一）、直接法：在显微镜下直接观察细胞并进行计数的方法，所的结果包括死细胞。

①比例计数法：很粗的计算方法

②血球计数板法：可以数出死菌和活菌的数目较精确，但亦有一定误差。

（二）、间接计数法：活菌计数法

①液体稀释法（MPN）：不准确

②平板菌落计数法：不能全面反映样品中的活菌数，技术要求较高。

18、测定微生物的生长量有那些方法？比较优缺点？

（一）、直接法：

a.测体积：很粗的方法，用于初步比较用。

b.称干重：可用离心法或过滤法测定。