实验动物(大鼠、小鼠、兔)原代卵巢颗粒细胞
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人卵巢颗粒细胞原代培养方法的比较李佳琪;何远桥;汪璇;胡佳;何林生【期刊名称】《广东医学》【年(卷),期】2017(0)z1【摘要】目的对比5种不同方法分离人卵巢颗粒细胞的效果,并选择出高效、稳定的分离纯化、体外培养的有效方法.方法收集不孕症患者行体外受精-胚胎移植(IVF-ET)穿卵时的卵泡液,采用裂解法、裂解+胰酶法、密度梯度离心法(包括Precoll+胰酶、Precoll+Ⅰ型胶原酶、Precoll+透明质酸酶)分离颗粒细胞后进行活细胞计数,卵泡生成素免疫组化染色鉴定,MTT法检测细胞增殖能力,检测颗粒细胞体外分泌雌激素含量.结果在使用不同方法分离颗粒细胞时,Precoll+胰酶、Precoll+Ⅰ型胶原酶、Precoll+透明质酸酶3种方法得到细胞数量多于裂解法及裂解+胰酶法(P<0.05).各种分离方法的细胞生长趋势并无明显差异.裂解法、裂解+胰酶法雌激素含量高于Precoll+胰酶、Precoll+Ⅰ型胶原酶、Precoll+透明质酸酶(P<0.05).结论 5种方法均成功分离得到颗粒细胞,但每种方法各有优缺点,根据实验目的不同需选择不同的方法.【总页数】5页(P14-18)【作者】李佳琪;何远桥;汪璇;胡佳;何林生【作者单位】南昌大学第一附属医院妇产科江西南昌 330006;南昌大学医学院江西南昌 330031;南昌大学第一附属医院妇产科江西南昌 330006;南昌大学第一附属医院妇产科江西南昌 330006;南昌大学第一附属医院妇产科江西南昌 330006【正文语种】中文【相关文献】1.人黄韧带细胞体外原代培养方法的比较 [J], 张宇;吴少鹏;夏雄智;许学猛;钟招明;陈建庭2.人牙龈成纤维细胞原代培养方法的比较研究 [J], 冷斌;刘洪臣;鄂玲玲;刘宇;吴霞3.两种人鼻咽癌活检组织上皮细胞原代培养方法比较 [J], 王瑢;何英;梁莉;曾芳芳;李仑4.人肾癌细胞原代培养方法比较及其生长特性观察 [J], 吴迪;李妍;姜申易;孟凡东;隋承光;姜又红5.人牙龈成纤维细胞原代培养方法比较 [J], 刘鹏;徐全臣;许晓燕;杨建军;徐敏华因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞编号名称规格北京派瑞金GK1003大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞5×105cells/瓶为能尽快开展实验,派瑞金发货的原代细胞均处于对数生长期,且每次发货为汇合率达到70%的细胞,收到细胞后即可开展实验。
派瑞金提供的大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞取自新鲜的组织,按照标准操作流程分离培养。
研发的大鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞完全培养基能提供细胞最佳的生长条件,降低杂细胞污染,保证不同批次间细胞质量的稳定。
同时,派瑞金还建立了严格的细胞鉴定流程,所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测,保证细胞纯度在90%以上;同时也需经过微生物检测,保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。
大鼠II型肺泡上皮细胞简介:1、名称:大鼠II型肺泡上皮细胞2、组织来源:正常大鼠3、规格:25cm2培养瓶4、细胞简介:肺泡上皮细胞由肺泡I型(AECI)上皮细胞和肺泡Ⅱ型(AECII)上皮细胞构成,其比例约为1:2,这两类细胞在功能上和形态上明显不同。
AEC II在数量上比AECI 多,但是即使将AECⅡ顶部的微绒毛计算在内,其所占的肺泡上皮表面面积的比例也不足10%。
AECⅡ呈立方形,胞浆里面含有板层小体是其基本特征,是鉴别AECⅡ的主要依据。
肺泡Ⅱ型上皮细胞是肺泡上皮组织干细胞,在正常的细胞更新和修复过程中,它既可以分化为AECⅡ,也可以通过有丝分裂来维持自身细胞群。
本公司生产的大鼠II型肺泡上皮细胞采用胰酶和胶原酶消化制备而来,细胞总量约为5X105个/瓶,细胞纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
5、培养基信息:1)培养基类型:M1992)添加因子:FBS、Penicillin、Streptomycin等大鼠II型肺泡上皮细胞使用方法:收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1.取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜,以稳定细胞状态。
胚胎干细胞的制备及研究进展摘要:胚胎干细胞(ES细胞)是从动物早期胚胎的内细胞团或原始生殖细胞分离出来的具有发育全能性的一种未分化的无限增殖细胞系。
ES细胞在动物克隆、转基因动物生产、细胞工程、组织工程、临床克隆治疗和发育生物学等方面的研究应用中起着重要的作用。
引言近年来,随着科学技术的不断发展,世界各国对胚胎干细胞的研究不断深入,取得了许多突破性的进展[1]。
科学证明小鼠ES细胞可以分化为心肌细胞、造血细胞、卵黄囊细胞、骨髓细胞、平滑肌细胞、脂肪细胞、软骨细胞、成骨细胞、内皮细胞、黑色素细胞、神经细胞、神经胶质细胞、淋巴细胞、胰岛细胞、滋养层细胞等。
人类ES细胞也可以分化为滋养层细胞、神经细胞、神经胶质细胞、造血细胞、心肌细胞等。
ES细胞不仅可以作为体外研究细胞分化和发育调控机制的模型,而且还可以作为一种载体,将通过同源重组产生的基因组的定点突变导入个体[2]。
这意味着ES细胞将在动物克隆、转基因动物生产、细胞工程、组织工程、临床克隆治疗和发育生物学等方面发挥重要作用,为人类攻克癌症等疑难杂症开辟新的道路。
1胚胎干细胞胚胎干细胞是由哺乳动物附植前早期胚胎的内细胞团细胞或附植后胚胎的原始生殖细胞(Primordial germ cells,PGCs)通过体外分离培养而建立的克隆细胞系。
它具有与早期胚胎细胞相似的形态,即胞体小、核大、胞浆少且具有正常的二倍体核型。
ES细胞最突出的特点是只生长不分化,且保持早期胚胎发育的全能性,在饲养层上或含有白血病抑制因子(leukemia inhibitory factor,LIF)的培养基中,可稳定传代,长期培养。
体外诱导分化可形成3个胚层的分化细胞。
另外,ES细胞还具有种系传递功能和具有培养细胞所有的特征[3]。
胚胎干细胞不但可用于研究哺乳动物胚胎早期发育和细胞谱系分化,还可对它的基因组进行操作,通过基因打靶、突变和转基因等技术,建立各种实验模型,研究发育、肿瘤、免疫以及人类遗传病等有关问题,大大推动和发展了哺乳动物生物学的研究。
小鼠肝窦内皮细胞小鼠肝窦内皮细胞产品说明:为使客户能尽快开展实验,派瑞金发货的原代细胞均处于对数生长期,且每次发货为汇合率达到70%的细胞,收到细胞后即可开展实验。
派瑞金提供的小鼠肝窦内皮细胞取自新鲜的组织,按照标准操作流程分离培养。
研发的小鼠肝窦内皮细胞完全培养基能提供细胞最佳的生长条件,降低杂细胞污染,保证不同批次间细胞质量的稳定。
同时,派瑞金还建立了严格的细胞鉴定流程,所提供的原代细胞均需经过细胞类型特异性标记物、细胞形态学等检测,保证细胞纯度在90%以上;同时也需经过微生物检测,保证不含有HIV、HBV、HCV、支原体、真菌及其他类型的细菌。
小鼠肝窦内皮细胞注意事项:1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。
培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件;建议使用派瑞金的完全培养基。
4. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态。
5. 该细胞只能用于科研,不得用于临床应用。
小鼠肝窦内皮细胞产品简介:产品名称:小鼠肝窦内皮细胞(Mouse liver sinusoidal endothelial cells, LSEC)组织来源:小鼠肝组织产品规格:5×105cells / 25cm2培养瓶小鼠肝窦内皮细胞细胞简介:小鼠肝窦内皮细胞细胞分离自正常小鼠肝组织,肝窦内皮细胞是肝非实质细胞的主要细胞群,具有物质转运、吞噬、抗原提呈、免疫耐受等功能。
肝在遭到多种病原侵袭时,肝窦内皮细胞窗孔逐渐减少或消失,内皮下基膜形成,产生类似于连续型毛细血管的结构,这一过程称为肝窦毛细血管化。
它由多种因素引起,其过程极复杂,在多种肝病的发病前期阶段均有出现,近年来受到广泛关注。
miR-132在卵泡刺激素介导的颗粒细胞孕酮合成中的作用郑盼盼;姚楠;高小博;骆海燕;邵馨妍;陆彩玲【摘要】目的:探讨miR-132在卵泡刺激素(FSH)介导的颗粒细胞孕酮合成中的作用.方法:FSH暴露处理原代颗粒细胞,利用实时定量RT-PCR检测miR-132的表达,放射免疫法测定P水平,用重组腺病毒感染颗粒细胞进行miR-132的过表达,Western Blot法检测Foxo3a的表达变化.结果:原代颗粒细胞经50ng/ml FSH 暴露处理后,miR-132的表达水平显著上调,48h时表达量最高;感染Ad-miR132组的miR-132表达水平高于空白对照组和感染对照重组腺病毒组(P<0.001);感染Ad-miR132后颗粒细胞合成P水平高于空白对照组和感染对照重组腺病毒组(P<0.001);在FSH暴露处理后,Foxo3a表达呈现逐渐下降的趋势,提示miR-132对Foxo3a的表达有负调控作用.结论:miR-132促进FSH介导的颗粒细胞合成孕酮.【期刊名称】《中国计划生育学杂志》【年(卷),期】2019(027)005【总页数】4页(P552-555)【关键词】miR-132;卵泡刺激素;颗粒细胞;孕酮【作者】郑盼盼;姚楠;高小博;骆海燕;邵馨妍;陆彩玲【作者单位】国家卫生健康委科学技术研究所北京,100081;北京协和医学院研究生院;国家卫生健康委科学技术研究所北京,100081;北京协和医学院研究生院;国家卫生健康委科学技术研究所北京,100081;国家卫生健康委科学技术研究所北京,100081;国家卫生健康委科学技术研究所北京,100081;国家卫生健康委科学技术研究所北京,100081;北京协和医学院研究生院【正文语种】中文卵泡发育的机制复杂,涉及多种基因、激素、生长因子的相互作用[1]。
卵泡刺激素(FSH)刺激颗粒细胞分化,是促卵泡发育成排卵前卵泡的主要信号[2]。
颗粒细胞在FSH和黄体生成素(LH)的刺激下产生甾体激素雌激素和孕酮(P),在月经周期以及卵泡发育、排卵和妊娠等起着关键的调节作用[3-4]。
实验动物(大鼠、小鼠、兔)原代卵巢颗粒细胞
产品编号:RAT/MIC/RAB-iCELL-f004
产品规格:>5×105细胞数
产品价格:4050/4050/4500
包装规格:1ml冻存细胞悬液或T-25培养瓶
细胞详述:
卵巢是雌性动物的生殖器官。
卵巢的功能是产生卵以及类固醇激素。
它的外表有一层上皮组织,其下方有薄层的结缔组织。
卵巢的内部结构可分为皮质和髓质。
皮质位于卵巢的周围部分,主要由卵泡和结缔组织构成;髓质位于中央,由疏松结缔组织构成,其中有许多血管、淋巴管和神经。
卵巢是分泌雌激素的主要器官。
卵巢分泌的雌激素主要是雌二醇。
卵巢中颗粒细胞是合成雌激素的场所。
其产生过程是使雄烯二酮转变成雌激素:内膜细胞在LH的作用下,使胆固醇转变为雄烯二酮;颗粒细胞在FSH的作用,发育过程中产生芳香化酶,它使雄烯二酮转变成雌激素。
形成的雌激素分泌到卵泡液和血液中。
细胞特性:
1)组织来源于实验动物的正常卵巢组织。
2)细胞鉴定:卵泡刺激素受体(FSHR)免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:不规则细胞,贴壁培养。
产品的运输和保存:
视天气状况和运输距离远近,公司与客户协商后选择下述方式中的一种进行。
1)1mL冻存细胞悬液装于1.8ml的冻存管中,置于装满干冰的泡沫保温盒中进
行运输;收到细胞后请尽快解冻复苏细胞进行培养,如无法立刻进行复苏操作,冻存细胞可在-80℃的条件下保存1个月。
2)T-25培养瓶充满完全培养基后进行常温运输;收到细胞后请镜下观察细胞生
长状态,如铺瓶率超过85%请立即进行传代操作,如悬浮的细胞较多,请将培养瓶至于培养箱中静置过夜以帮助未死亡的悬浮细胞能够再次贴壁。
推荐培养基:
我们推荐使用iCell原代肾系膜细胞培养体系(产品编号:PriMed-iCELL-021)作为体外培养原代卵巢颗粒细胞的培养基。
产品使用:
1)本产品仅能用于科研
2)本产品未通过直接用于活体动物和人的审核
3)本产品未通过用于活体诊断的审核。