重楼总皂苷对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用

重楼总皂苷对H22荷瘤小鼠的抑瘤作用

发表时间：2014-07-16T15:50:57.187Z 来源：《中外健康文摘》2014年第16期供稿作者：吴殿斌陶萍[导读] 荷瘤小鼠模型血清IL-2值比正常组低，而重楼总皂苷组小鼠IL-2水平明显升高。

吴殿斌陶萍（辽宁大连大学附属中山医院药剂科辽宁大连 116001）【摘要】目的探讨重楼总皂苷对小鼠H22移植瘤的生长抑制作用。方法将建立的H22荷瘤小鼠模型分为模型组，重楼总皂苷高、低剂量组和环磷酰胺组，总皂苷组连续给药10d，环磷酰胺组隔日给药。结果与模型组相比，重楼总皂苷能显著抑制肿瘤生长，脾脏指数和胸腺指数与模型组比较升高，血清TNF-α和IL-2的水平提高，血清T-AOC水平提高和血清MDA的水平降低。结论重楼总皂苷对H22移植瘤具

有明显的抑制作用，其作用机制可能与提高小鼠免疫功能和增强抗氧化能力有关。【关键词】重楼 H22 抗肿瘤

【中图分类号】R96 【文献标识码】A 【文章编号】1672-5085（2014）16-0007-02 【Abstract】Objectives The objective of this paper was to investigate the effects of extracting total flavonoids from Paris Polyphylla Smith on the antitumor action in a sample of H22 tumor bearing mice.Methods The H22 tumor bearing mice were divided into 4 groups: control group, high dose and low dose of Paris Polyphylla Smith, and the Endoxan group. The 2 Groups were continuously adminatrated Paris Polyphylla Smith on a daily basis for ten days, the Endoxan group was adminatrated drug every other day.Results Compare to the control group, the extracting total flavonoids from Paris Polyphylla Smith has been proved to have great effects on anti tumor. serum TNF-a and IL-2 level have been improved, while serum T-AOC and MDA level have been decreased.Conclusions The extracting total flavonoids from Paris Polyphylla Smith has signifant effects on controlling the development of H22 tumor, probably the antitumor effects were as a result of enhancing the system immune function and antioxidant effects. 【Key words】total flavonoids from Paris Polyphylla Smith H22 antitumor 重楼，为百合科植物[1]。重楼主要有效成分是甾体皂苷，约占总化合物数目的80%，按苷元的不同主要有两类，一类为薯蓣皂苷元的糖苷，一类为偏诺皂苷元的糖苷[2]，此外还含有皂草苷A～D、蚤休皂苷A,B、七叶一枝花皂苷、重楼甾酮[3]。其他有效成分有植物蜕皮激素[4]，植物甾醇，黄酮[5]等。药理研究发现其有效成分具有止血作用[6]，抗肿瘤作用[7]，抗菌作用，抗炎作用，大脑与肾脏的保护作用，抗氧化作用，子宫收缩等作用。

1 材料与方法

1.1材料

昆明种小鼠，体重18-22g，雌雄各半，由大连医科大学动物中心提供；肝癌（H22）细胞株由大连医科大学附属医院提供；重楼（大连百度医药公司）；环磷酰胺（江苏恒瑞医药股份有限公司）；小鼠白细胞介素2（IL-2）试剂盒、肿瘤坏死因子（TNF-α）试剂盒、总抗氧化活力（T-AOC）测试盒和丙二醛（MDA）测试盒（南京建成生物技术研究所）。

1.2 方法

1.2.1 重楼总皂苷的制备

参考朱丽丽的方法[8]，以10倍量的70%乙醇浸泡过夜，88℃加热回流提取，提取时间4小时，提取三次，滤液合并回收乙醇，真空干燥得重楼总皂苷。

1.2.2 H22荷瘤小鼠模型的制备

在无菌条件下抽取接种7d后生长良好的H22荷瘤小鼠的腹水，观察细胞形态及细胞计数，肿瘤细胞数为97%以上方可使用，无菌生理盐水稀释密度为1.5 ×107个/mL，腹腔接种，0.3ml/只，制成实体瘤模型。

1.2.3 动物分组及处理

接种后第2天将小鼠随即分为模型组，重楼总皂苷高、低剂量组和环磷酰胺组，每组10只，重楼总皂苷高、低剂量组分别灌胃给药100mg/kg、50mg/kg，每日一次。环磷酰胺组按20mg/kg剂量隔日腹腔注射一次，模型组以等量生理盐水灌胃，另取10只正常的小鼠设为正常组，每天生理盐水灌胃，各组小鼠均给药10天。最后一次给药后24h，处死。

1.2.4 H22荷瘤小鼠的抑瘤率和免疫器官指数

颈椎脱臼处死小鼠后剥离瘤块，取脾脏、胸腺并称质量。按下列公式计算抑瘤率和脏器指数。抑瘤率= (阴性对照组平均瘤质量-实验组平均瘤质量) /阴性对照组平均瘤质量×100%。脏器指数 = 相应脏器质量(mg) /小鼠体重(g)。

1.2.5血清中TNF-α和IL-2含量的测定

实验组和对照组小鼠在处死前眼球取血，3000r/min离心20min，收集血清，按试剂盒说明书测定各组血清中TNF-α和IL-2的含量。

1.2.6比色法检测血清T-AOC和MDA 水平

按测试盒中说明书检测各组血清中T-AOC和 MDA水平。

1.2.7 统计分析

所有数据采用SPSS11.0统计软件进行统计处理，实验数据用x-±s表示，多组间均数比较采用单因素方差分析，方差齐，组间两两比较采用LSD法;方差不齐的采用秩和检验。P＜0.05为有统计学意义。

2 结果

2.1 重楼总皂苷对荷瘤小鼠肿瘤生长的影响

重楼总皂苷高、低剂量组小鼠肝癌H22移植瘤的生长明显受到抑制，与模型组相比，环磷酰胺组和重楼总皂苷高、低剂量组荷瘤小鼠瘤质量显著减轻，重楼总皂苷各剂量组抑瘤率低于环磷酰胺组，分别为51.20%和34.34%。结果见表1。表1 重楼总皂苷对荷瘤小鼠肿瘤生长的影响（x-±s）

组别剂量mg/(kg?d) 平均瘤重（g）抑瘤率（%）模型组 - 1.66±0.38 -