临床微生物学检验

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1.临床微生物学的概念是什么?

临床微生物学是研究微生物的形态、结构、分类、生命活动规律的一门科学,包括细菌学、病毒学、真菌学等。是临床医学的基础之一,指导感染性疾病的诊断、治疗和预防。2.临床微生物学实验检查大概分几步骤?

①从患者标本分离培养微生物。②对标本中分离到的微生物进行培养、鉴定。

③进行药物敏感性试验,解释和预报结果。④阶段性分析药物敏感性实验,预测耐药趋势,监控和指导临床合理用药。

3.什么是感染性疾病及影响因素?

凡是由病原微生物引起的疾病统称为感染性疾病,而感染性疾病的发生主要与病原体的侵袭力及宿主的抵抗力密切相关。别外,临床上抗生素的大量滥用,引起了正常菌群失调和大量耐药菌株的出现,从而加重了机体的内源性感染机率,这一定程度又加重了感染性疾病的发生。

4.临床医师主要需要从临床微生物学实验室得到什么?

①能为临床提供医学决策的相关信息。②指导临床正确收集标本的原则。③安全及时的送检标本。④微生物的正确鉴定和药物敏感性试验结果。⑤能快速地报告实验结果,并做出相关的结果解释。⑥能及时反馈医院内细菌感染分布、耐药状况和流行趋势等。

5.临床医师应如何避免感染性疾病的爆发流行?

①遵循病原学诊断,避免无指症用药。②正确及时的采集标本,按要求及时送检微生物实验室检查。③重视实验室的鉴定及药敏结果,结合临床患者病情合理使用抗生素。④注意经验性治疗与靶向治疗相结合,依据病原学诊断及时调整治疗方案,改为针对性治疗。⑤加强同临床微生物实验室交流沟通,积极配合实验室做好院内感染监测、预防和控制工作。

6.临床标本采集的一般原则是什么?

①在最适宜的时间收集标本,最好在使用抗生素之前或感染急性期采集。②采集标本要有代表性和针对性,不同情况应区别对待,适宜地采取相应的方法收集标本,如尿液标本疑为厌氧菌感染时,应行耻骨上缘穿刺术取膀胱尿培养。③采集标本必须来自实际感染的部位,严格无菌操作尽可能避免外源性污染。④收集标本应当使用合适的收集器材、容器和培养基,以保证最大限度的发现微生物。

⑤标本采集、运送过程中要有专人负责,避免人为操作失误。⑥采集标本不仅要防止被污染,同时也要注意安全,防止传播和自身感染。

7.采集过程中需要加抗凝剂的标本应注意什么?

对任何容易形成凝块的标本都应使用抗凝剂,因为如微生物被已凝固的物质包围,生长较困难。另外,像胸水、腹水等液体标本一旦凝固,很难接种培养,直接影响微生物的培养鉴定。目前,微生物学标本最常用的抗凝剂是多聚茴香脑磺酸钠SPS(Sodium polyanethol sulfonate),但其浓度不得超过0.025%(W/V),否则会抑制一些奈瑟菌和厌氧性链球菌的生长。肝素也是常用抗凝剂之一,主要用于病毒培养,因为它能抑制革兰氏阳性菌和酵母菌的生长。柠檬酸盐和乙二胺四乙酸通常不用于微生物学标本。

8.标本运送过程中应注意些什么?

标本采集后,除了要及时送检外,另外在运送过程中要注意尽量保持标本的原有性状。对于不能及时送检的要用专用运送培养基运送,而对一些含有脆弱细菌的标本,需加入特别的保存剂。例如,尿液中加入硼酸能有效地抑制细菌生长,较好的保持尿液中菌落的数量;粪便中加入磷酸盐缓冲液有助于保持粪便中像志

贺菌、沙门菌等的脆弱细菌。此外,甲醛溶液、绍丁溶液有助于保存寄生虫的滋养体和包囊,使其维持便于识别的形态。

9.如何采集血液标本及注意事项?

疑为菌血症或败血症时,一般情况下应在病人发热初期或发热高峰时采集,原则上应在抗菌治疗前尽早取血做细菌培养。若已用抗菌药物或疗效不佳时,在可能条件下停药24小时后再做血培养。连续做血培养3次,各次采血应在不同部位的血管穿刺,禁从静脉插管内抽血。当骨髓炎时或长期使用抗菌药物患者,抽取骨髓培养阳性率会远高于血液培养。对成人每瓶血培养应采血8~10ml,婴儿为1~2ml,儿童3~5 ml,骨髓为1~2 ml。如不能及时送检,应将已注血的培养瓶在室温存放,并不得超过12小时。注意事项:①不能用碘酒消毒瓶盖,只需70%酒精消毒瓶盖。②严格作好患者抽血部位的无菌操作。③同时作厌氧和需氧培养时应先将标本接种到厌氧瓶中,然后再注入需氧瓶,严格防止将空气注入厌氧瓶中。④如不能及时送检应于室温存放,切勿放冰箱存放。

10.采集痰标本时应注意些什么?

当疑为呼吸道感染性疾病时,应让患者取晨痰送检。取痰前用清水反复漱口后用力自气管咳出第一口痰于灭菌容器内,立即送检。对于痰量少或无痰的患者可采用支气管镜或气管穿刺法取得。为了避免污染菌的干扰,最好连查3次。注意事项:①采集标本以清晨为佳,为减少口腔正常菌群污染标本,采集前应充分漱口。②取痰标本应是深部的痰液而不是唾液,否则会影响检查结果。③作结核分枝杆菌检查,痰量要多或留取24小时痰液,婴儿肺结核要用胃管取痰。④约有1/4~1/2肺部感染患者可能发生菌血症,应同时作血培养。⑤对一些特殊患者可采用支气管镜采集法及气管穿刺法取痰。

11.如何采集尿液标本及注意事项?

临床上有泌尿系统感染、肾结核、结石和无症状性菌尿等疾病指征时,通常应采集晨起第一次尿液(中段尿)送检。原则上应选择在抗菌治疗前采集,若已用药应停药一周后采集尿液送检。采集标本前,女性先以肥皂水清洗外阴部,再以灭菌水或1:1000高锰酸钾水溶液冲洗尿道口,然后排尿弃去前段尿,留取中段尿10ml左右于无菌容器内,立即加盖送检。男性先用肥皂水清洗尿道口,后用清水冲洗,就可采集中段尿。包皮过长者,为防止污染,可将包皮翻开冲洗,再取中段尿。疑为尿道炎时,可将最初3~4ml尿收集在灭菌容器中。如反复检查为同一细菌,也应考虑为病原菌。必要时可采用膀胱穿刺术取尿。注意事项:①尿液标本的采集和培养中最大的问题是污染杂菌,故应严格进行无菌操作。②尿液标本采集后应尽快送检(1-2小时内),否则会影响细菌检查的正确性。③多数药物均通过尿液排泄,因此,无论用何种方法采集尿液均宜在用药之前进行。

④尿液中不得含有防腐剂或消毒剂。⑤疑为结核分枝杆菌时,可用清洁容器,留24小时尿取其沉渣10~15 ml送检。

12.穿刺液包括哪些?采集中应注意些什么?

穿刺液主要包括脑脊液、胆汁、胸水、腹水、心包液、关节液及鞘膜液等。在正常人体中,上述体液均是无菌的,有感染的情况下检出的细菌,应视为病原菌,应给予及时正确的治疗。怀疑为脑膜炎的病人,用腰穿方法采集脑脊液2 ml左右,在常温下15分钟内送检。标本不可置冰箱内保存,否则会使病原菌死亡。胆汁及其它穿刺液采集到无菌针管或无菌试管内立即送检。注意事项:①标本采集应在用药之前。②严格无菌操作,避免污染。③作脑脊液培养时,建议同时作血培养。④为防止穿刺液的凝固,最好在无菌试管中先加入灭菌肝素。