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Intracellular Copper Does Not Catalyze the Formation of Oxidative DNA Damage in Escherichia coli

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Published Ahead of Print 22 December 2006. 2007, 189(5):1616. DOI: 10.1128/JB.01357-06. J. Bacteriol. Lee Macomber, Christopher Rensing and James A. Imlay Escherichia coliFormation of Oxidative DNA Damage in Intracellular Copper Does Not Catalyze the

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0021-9193/07/$08.00ϩ0doi:10.1128/JB.01357-06

Copyright©2007,AmericanSocietyforMicrobiology.AllRightsReserved.

IntracellularCopperDoesNotCatalyzetheFormationofOxidative

DNADamageinEscherichiacoliᰔ

LeeMacomber,1ChristopherRensing,2andJamesA.Imlay1*

DepartmentofMicrobiology,UniversityofIllinois,Urbana,Illinois61801,1andDepartmentofSoil,Water,and

EnvironmentalScience,UniversityofArizona,Tucson,Arizona857212

Received26August2006/Accepted12December2006

BecausecoppercatalyzestheconversionofH2O2tohydroxylradicalsinvitro,ithasbeenproposedthat

oxidativeDNAdamagemaybeanimportantcomponentofcoppertoxicity.Eliminationofthecopperexport

genes,copA,cueO,andcusCFBA,renderedEscherichiacolisensitivetogrowthinhibitionbycopperand

providedforcingcircumstancesinwhichthishypothesiscouldbetested.Whenthecellsweregrowninmedium

supplementedwithcopper,theintracellularcoppercontentincreased20-fold.However,thecopper-loaded

mutantswereactuallylesssensitivetokillingbyH2O2thancellsgrownwithoutcoppersupplementation.The

kineticsofcelldeathshowedthatexcessiveintracellularcoppereliminatediron-mediatedoxidativekilling

withoutcontributingacopper-mediatedcomponent.MeasurementsofmutagenesisandquantitativePCR

analysisconfirmedthatcopperdecreasedtherateatwhichH2O2damagedDNA.Electronparamagnetic

resonance(EPR)spintrappingshowedthatthecopper-dependentH2O2resistancewasnotcausedbyinhi-

bitionoftheFentonreaction,forcopper-supplementedcellsexhibitedsubstantialhydroxylradicalformation.

However,copperEPRspectroscopysuggestedthatthemajorityofH2O2-oxidizablecopperislocatedinthe

periplasm;therefore,mostofthecopper-mediatedhydroxylradicalformationoccursinthiscompartmentand

awayfromtheDNA.Indeed,whileE.colirespondstoH2O2stressbyinducingironsequestrationproteins,

H2O2-stressedcellsdonotinduceproteinsthatcontrolcopperlevels.Theseobservationsdonotexplainhow

coppersuppressesiron-mediateddamage.However,itisclearthatcopperdoesnotcatalyzesignificant

oxidativeDNAdamageinvivo;therefore,coppertoxicitymustoccurbyadifferentmechanism.

Highconcentrationsofintracellularcopperaretoxicfor

botheukaryoticandprokaryoticcells.Thehumandiseases

IndianchildhoodcirrhosisandendemicTyroleaninfantile

cirrhosisbothresultfromhighdietarylevelsofcopper(44,

62),whereasWilsondiseaseoccursduetoageneticmuta-

tionthatpreventstheliverfrompumpingcopperintothe

bile.Wilsondiseasepatientshaveadefectivecopyof

ATP7b,anATP-drivencoppereffluxpump,andhepatocytes

aredamagedbythehighcopperlevelsthatresultfromthis

defect(7,58,63,64).

EscherichiacolicontainsahomologofhumanATP7b,

CopA,with31%proteinidentity(54).CopApumpsexcess

copperoutofthecytosolintotheperiplasm(54).Onceinthe

periplasm,copperissubjecttotwoothersystems,CueOand

CusCFBA,thatassistCopAincontrollingintracellularcopper

levels(23,33,45).CueOisamulticopperoxidasethatcoverts

Cu(I)toCu(II),aless-toxicform(23,33,60).TheCusCBA

systemisacationdiffusionpumpthatisbelievedtopump

periplasmiccopperacrosstheoutermembraneandoutof

thecell(17,45).CusFisaperiplasmicCu(I)andAg(I)

bindingproteinthatmaydelivermetalstotheCusCBA

system(4,34,40).E.colimutantsthatlackCopA,CueO,

andCusCFBAcannotgrowinmediumthatcontainslarge

amountsofcopper(24).

Themechanismsbywhichcopperinhibitsorkillsoverloadedcellsarenotknown.Instudiesofeukaryoticcellstreated

withexcesscopper,workersdetectedelevatedlevelsof

DNAlesions,proteinoxidation,lipidperoxidation,andre-

activeoxygenspeciesgeneration(3,36,53,55,59).Invitro

studiesshowedthatcopperiscapableofgeneratinghydroxyl

radicalsfromH2O2andtherebyfacilitatesoxidativeDNA

damage(26):

XredϩCu(II)3XoxϩCu(I)

Cu(I)ϩH2O23Cu(II)ϩOHϪϩHO⅐

HO⅐ϩDNA3damage

Infact,therateconstantsforCu(II)reductiontoCu(I)by

sulfhydryls(21)andforoxidationofCu(I)byH2O2(27)indi-

catethatthisFenton-likeprocesscouldoccurataphysiologi-

callyrelevantrate.Theseobservationshaveledtothetheory

thatDNAdamagemaybeanimportantcomponentofcopper

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2023年第37届中国化学奥林匹克决赛第一场化学试题及答案

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第37届中国化学奥林匹克决赛第一场试题

第1题（11分，6%）铜的配位化学

1-1掺杂一些特定元素的铜氧化物常被用作高温超导材料，镧锶铜氧()

2xx4LaSrCuOLSCO

−的单胞结构如右

图所示，具有典型的钙钛矿结构。已知c

轴方向上CuO−

之间的距离大于a

轴和b

轴方向上CuO−

之间的距

离，画出LSCO

中2

Cud+

轨道的简并和电子填充情况。

1-2过渡金属离子(

2

MMCu+

=或)

2

Zn+

可与席夫䂸

2HL

反应生成单核配合物ML，ML又可作为配体通过

2µ

-酳氧桥联其他M形成多核眍合物。2

L−

的结构如下图所示：

1-2-1已知高氯酸铜与ZnL反应形成多核配合物()()

4

n2CuZnLClO

，其中的配离子存在一对旋光异构体，

西出该配离子的结构。

1-2-2计算上述配离子的理论磁矩（玻尔磁子用

0µ

表示）。

1-3两个平面型()

2CuOHCuµ−

双核铜簇骼单元（结构如下图所示）可通过四个()

CuOH−

键形成立方烷

型()

43

4CuOHµ−

四核铜筷骼单元A，也可通过()

CuOH−

键二聚形成阶梯型()()

423

22CuOHOHµµ−−

四核铜族骼各单元B。以上述两种方式继续组装，可以得到具有更多核数的簇骼单元。

()

2CuOHCuµ−

1-3-1画出A和B的结构。

1-3-2以碱式碳酸铜、2,2′−联吡啶（bpy）与己二酸()

6104CHO

反应，可以得到含有阶梯型六核铜簇骼单元的

配合物()()()()

626842

6623CuOHbpyHOCHO23HO⋅

，其中的配离子呈中心对称，每个铜离子均处于

23CuNO

四方锥配位环境中。画出该配离子的结构。（用

N N

代表bpy配体）

第2题（15分，8%）钪的元素化学

2-1依照元素物理和化学性质的特点，以下三种元素离子半径最大的是（ ）。

A.Sc B.Y C.Lu

2-2常压下，Sc

可与

2O

反应生成

23ScO

。X-射线晶体衍射分析发现，

23ScO

的晶体结构属立方晶系，晶胞参

清华大学本科生考试试题专用纸(B)

清华大学本科生考试试题专用纸(B)

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清华大学本科生考试试题专用纸 (B)

考试课程 Biochemistry II 2008 年 1 月 20 日

考场纪律：

一、 学生应试时必须携带学生证，以备查对，学生必须按照监考教师指定的座位就坐。

二、 除答卷必须用的笔、橡皮及教师指定的考试用具外，不得携带任何书籍、笔记、草稿纸等。

三、 答卷时不准互借文具（包括计算器）。题纸上如有字迹不清等问题，学生应举手请监考老师解决。

四、 学生应独立答卷，严禁左顾右盼、交头接耳、抄袭或看别人答卷等各种形式的作弊行为，如有违反，当场取消其考试资格，答卷作废。

五、 在规定的时间内答卷，不得拖延。交卷时间到，学生须在原座位安静地等候监考教师收卷后，方可离开考场。

系别_________ 班号_________ 学号_________ 姓名________ 成绩__________

阅卷教师________

题号 一 二 三 四 五 六 七 八 九 十 总分

成绩

试题说明：

1. 选择题单选题的正确答案只有一个，每题1分; 多选题的正确答案可能是两个或多个，每题1.5分, 请将正确答案填在适当的横线处；

2. 问答题的分数标在题目后面，请将答案写在所提供的答题纸上；

3. 本卷满分为100。

I. Multiple choice questions with only one correct answer (单选题):

1. Carbon fixation involves a condensation reaction between CO2 and:

A. 3-phosphoglycerate.

B. phosphoglycolate.

C. ribulose 1, 5-bisphosphate.

D. fructose 6-phosphate.

E. ribose 5-phosphate.

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1、将RNA转移到硝基纤维素膜上的技术称为()。

A、Southern印迹

B、Northern印迹

C、Western印迹

D、Dot印迹

答案：B

:印迹技术是将在凝胶中分离的生物大分子转移(印迹)或直接放在固定化介质上并加以检测分析的技术,其中DNA印迹技术即Southern印迹,RNA印迹技术即Northern印迹,蛋白质印迹技术即Western印迹。

2、关于原核生物DNA聚合酶的叙述,下列哪项是错误的?()

A、包括DNA-polⅠ、Ⅱ、Ⅲ

B、DNA-polⅢ的活性高于DNA-polⅠ

C、DNA-polⅢ在复制链的延长中起主要作用

D、三种DNA-pol均无5'→3'核酸外切酶活性

答案：D

:原核生物DNA聚合酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ均具有5'→3'聚合酶活性与3'→5'外切酶活性。

3、下列关于TATA盒的叙述,正确的是()。

A、是与RNA-pol稳定结合的序列

B、是蛋白质翻译的起始点

C、是与核糖体稳定结合的序列

D、是DNA复制的起始点

答案：A

:A项,TATA盒是指真核生物转录起始前的-25bp区段典型的TATA序列,又称Hogness盒,是启动子的核心序列,是存在于DNA分子上的序列,其主要作用是与多种转录因子、RNA-pol结合形成转录起始前复合物,并开始转录。B项,蛋白质翻译的起始点是起始密码子AUG在转录起始点下游,即翻译起始点出现于转录起始点之后,而TATA盒在转录起始点之前,且翻译起始点是指mRNA上的序列。C项,与核糖体结合的序列是指在蛋白质生物合成过程中处于mRNA上的序列。D项,复制有固定的 复制起始点,碱基序列上可能有特异,但不是TATA序列,如大肠杆菌的oriC,酵母DNA的自主复制序列。

4、框移突变与遗传密码的下列哪项特性有关?()

A、连续性

B、方向性 C、通用性

D、简并性

答案：A

:A项,连续性是指遗传密码中编码蛋白质氨基酸序列的三联体密码连续阅读,密码间既无间断也无交叉,若基因损伤引起mRNA可译框架内的碱基发生插入或缺失,将导致框移突变,造成下游翻译产物氨基酸序列的改变。B项,方向性是指遗传密码均是从5'→3'方向阅读。C项,通用性是指蛋白质生物合成的整套密码从原核生物到人类都通用。D项,简并性是指除了甲硫氨酸和色氨酸只对应一个密码子以外,其他氨基酸都有多个密码子。

三氧化二砷对MPTP所引发之经毒性效应

三氧化二砷对MPTP所引发之经毒性效应

󰎟󰨼󰏯󰎒󰪈󱃹MPTP󰜌󰐇󰸧󰏐神󰿶󰢥󰜄󰨏󱔈󰀡󰀡󰀡󰀡Effects of Arsenite on MPTP-induced neurotoxicity in CNS 󰣴󰘲󰒓󰇺李󰜃󰞹󰈐Yi-Fen Lee󰈑 󰡰󱏤󰯲󰯤󰇺林󱅈󰒏󰈐Anya Maan-Yuh Lin, Ph.D.󰈑 󰭯立󰻚󰜴󰎵󱏢 󱙴󱏢󰬣 󰒓理󱏢󰣴󰘲󰜌 󱅺󰎳論󰐎 National Yang-Ming University School of Medicine Institute of Physiology Master Thesis 󰏍󰹮󰒇󰭯󰎐󰎜󰎟年六󰐔 June 2004 󰤠󱖴󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󱅺󰎳󰩤󰞑󰣴󰘲󰒓󰰱󱡣󰗚了󱀾󰚉󱏢󰳌󰳭󰰚路󰙈來󱖑󰙌󰇴󰕠󰮵林老󰧣󱃹󱏢󰳌󰞑󰭺󰹱󱆶󰑳󰐒󱃹󱃴󱡍󱁸󰸳󰞑󱝄󱙣󰇴󱡣󰗚󱃹老󰧣󰽣󰎢󰮖󰬯󰞑󰽣󰙵󱆶󰵧󰮖󰇴󰮵󰘒󰔖󰽃說󰤾󰭦󰣴󰘲󰜌󰞑󰗚󰓧󰳭兩年󰐰󰲃󰎒年󱏢󰲞󰴨󰓭󰇴󱖴󱖴老󰧣󰑳󰐒󰞑󰶩󰶩󰯲󱇧󰇶󰀡󰔜󰑦󰇴󰏍󰭯󱙴󱛰󰣴󰘲󰜌󰞑󰪶󰞼󰞱老󰧣󰇴󱖴󱖴󰮾󰞑󱃴󱡍󰚐󰕷󰇴󱡣󰗚󰎞󱏢󰲞󰚉󰎋󰻨󱃴󱡍󰗞󰳌󰇴󰮾󰞑󱃴󱡍󰠻󰎻󱅜󰥺都󰡐󰑑󰽄󰇴󰘂󰔛󰗚󰑐󰮾都󰽮󱡣󰗚󰜤󰣮󰣮󰇴󰛌󰎓󰡐󰓳󰎨󱅆亮󰴽󰀢󰀡更󰽂󱖴󱄪󱕴󰣬󱜢󱃴󱡍󰠻󰞑老󰧣󰥺󰇴󰐀󰚁󰢂󰽥󰴋󰐶󱖴󱃴󱡍󰠻󰞑󱏢󰟏󰛊󰇴󱡣󰗚󰖹󰔋󰳽󰏩󰞑󱃴󱡍󰇴󱗋󰔖󰱥󰽰󰞑󰜲󰕤󱏢󰟏󰚩󰓼󰼿󱏢󰛊󰇴󰞊󱑣󰇵󰙵󰣑󰇵󰲹󰹩󰇵󰨦󰞹󰇵󰪨󰞹󰏷󰎻北󰇴󱆶󰕣󰥺󰑳󰐒󰶻󰎴󰣬󰳀󰞑󰨔󰻔󰴨󰓭󰇴󰩿󰞑󱝺󰮳󰡐󱆂󰐈󰇹󰩤󰎢󰞑󰽣󰙖󰇵󰐎󰒇󰇵林󲩷󰇵󰭀󰪏󰇵󰏔󰚃󰇵󰶁󰻥󰇵󰰲󰏓󰇴󰓕󰨔󰎨󰢂󰠻󰏶󰞑󰙺󱓉󰇵󰾷龍󰚩󰒅󰹮󰇴󰳾󰒅󰚂老󰧣󰧎󰞑󰜃󰓵󰇴󱀾󰦓󰜌󰞑󱉽󰓵󰇴󰩵󰗚󰞑󰮭󰪨󰤍󰀮󰮭󰛆󰇴󱗋󰔖󰎵󰧎󰟏󰀮󰟋󱌰󱍣󰟋󰜌󰟏󰇴󰽂󱖴󰎵󰧎󰑳󰐒󰒓󰢲󰎢󰞑󱂴勵󱆶󰐍󰡭󰇴󱡣󰗚󰓧󱅺󰎳󰩤󰳭兩年󰔖󰳚󰓭󰤍󰓳󰞑󰓣󱏫󰇶󰀡󰴨󰡕󰇴󰻻󰮒󰒁論󰐎󱝘󰹏󰾭󰾭󰇵󰑪󰑪󰇵󰑦󰮇󰇵󰝿󰝿󰇵󰼰󰼰󰇵󰛂󰛂󰥺󰚩󰓳󰏶󰟷󰹮󰇴󱡣󰗚󰸄󰡕󱟝󰏐󱊁󰞑󰻩利󱏢󰽰󰇶󰔜󰑦󰇴󰙗󰙤󱃹󰒁論󰐎󰔖󰜌󰬅󱝘󰞑󰎻󱂵󰥺󰇴󰓢󰣁󰔖󰕣󰥺󰞑󱞴󰣊󰇴󰒁論󰐎󰏉󰫈󰻩利󰖹󰔋󰇴󰓧󰔜󱝘󰎢󰎜󰎒󰿤󰏩󰞑󰽣󰽀󰇶󰤓󰀢󰗚󰤾󰓣󰬯󰻢了󰀢󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡 󰒞錄󰀡󰀡󰐬󰤾󰓜󰺒󰏍󰤮󰐎󱃹󰾣󰟄󰏷󱕭󱉪󰟄󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡1󰀡󰏍󰐎󱄔󰤾󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡3 󰤮󰐎󱄔󰤾󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡4󰀡󱆣論󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡6 󰣴󰘲󰒞󰞑󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡14 󰗷料󱆶󰐑󰝤󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡15󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰹈󰝀󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡25 󰫸論󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡 29 󰹈論󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡35󰀡參󰔵󰐎󱝘󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡36 󱃙󰟄󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡 50 󰟕󱃙󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡 60 󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡󰀡 󰀡󰀡󰀡