鸡传染性贫血免疫对肝微粒体抗氧化酶活性的影响
- 格式:pdf
- 大小:344.18 KB
- 文档页数:4
2人参研究GINSENG RESEARCH 2022年第2期《()》,,,,、,、、。
、、、,,,Cocktail ,CYP1A2,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6,CYP2E1,。
1实验材料1.1、、、。
、、、,、(98%)、II 。
BCA (:03415,),QSCR TransGen 。
1.2();LC-l0A 、UV 、N-2000();(())。
1.3Wistar 30,180~220g,SCXK()2020-0002;、、、、、。
2方法2.12.1.1《》(·),5g,10g, 2.5g,1g,2g/mL。
《》,, 1.9g/kg,0.5g/kg、1g/kg、0.3g/kg、0.1g/kg、,14d ,。
2.1.2、、、5,,(10μmol/L)、(25μmol/L)、(25μmol/L)、(5μmol/L)、(50μmol/L)[1]。
∶(1∶1),100μg/mL。
2.2:,,,,,,。
:,基金项目:(2020051);(2018ZC031);(202010199022);(S202110199090)。
作者简介:,,,,。
*通信作者:,,,,。
E-mail:baohuiwei@.CYP450张亚杰,贾旭爽,李丽静,陈宇杨,鲍慧玮*(长春中医药大学·吉林长春·130117)摘要:CYP450,。
14d,(CYP1A2)、(CYP2C19)、(CYP2D6)、(CYP2E1)、(CYP2C9),5。
,(P <0.05),(P <0.05),CYP1A2;CYP2C9。
关键词:;;CYP450;Cocktail DOI:10.19403/ki.1671-1521.2022.02.00732,,40.25mol/L ,,,。
,9000g 15min,,;,12500g 20min,,,。
:88mmol/L CaCl 20.1mL 1mL ,CaCl 2(CaCl 28mmol/L ),,5min,,,27000g 15min,,。
螺旋藻的功效与作用 [螺旋藻]螺旋藻(Sp)是举世公认的当前含养分最丰富的自然植物性保健食品,并被联合国粮食组织推举为21世纪最抱负的开发资源;缘由是Sp不仅含有60%以上的优质蛋白,八种人体必需的氨基酸具全而搭协作理;还有丰富的微养分素,包括具有清除自由基作用的多种维生素,β―胡萝卜素,人体必需的微量元素;Se、Zn、Mn、Fu、Fe,多糖和藻蓝蛋白等。
这些微养分素单体各具其独特的抗氧化机制促进正常生理的功能,并通过不同途径产生协同效应,在体内形成强大的抗过氧化系统,特别有效地爱护了各种组织细胞免受自由基的损伤,延缓年轻,防止癌变和防治多种慢性退行性疾患等一系列的功能。
正如齐伯力教授在健康学问讲座中指出,“Sp可满意人体需要的42种以上的养分素;可以防治四类重要的退行性疾患和传染病;提高机体免疫功能,使病毒不能复制,并供应大量氨基酸使受损害的器官细胞及其生理功能得到恢复.这些功能对治愈疾病,使病人快速恢复健康,以及提高身体抗病力量都是特别重要的”。
本文重点介绍Sp中几种重要微养分素的抗过氧化和免疫应答机制。
一、胡萝卜素。
众所周知,β―胡萝卜素,维生素E和维生素C是医学上公认的三大抗氧化高效养分素。
Sp含胡萝卜素类(合计)高达4000mg/kg,其中β―胡萝卜素占1700mg/kg,按中国科学院汇编的《食物成分表》记载,以七省分析红胡萝卜素含量为13.5~37.0mg/kg作比较,则1克Sp干粉含的β―胡萝卜素就相当于100克鲜红胡萝卜素的总量。
抗过氧化和提高机体免疫力是β―胡萝卜素对人体保健最令人关注的功能。
大量试验表明,大鼠服用适量β―胡萝卜素不仅生长发育好,可以预防各种器官的感染,明显降低肿瘤发生率。
还有试验表明,β―胡萝卜素对免疫应答具有独特作用,它通过粹灭单线态氧和其他活性自由基,促进免疫功能增加,主要表现在爱护吞噬细胞免受过氧化损伤,促进T、B淋巴细胞的增殖,刺激效应T 细胞的功能,增加巨噬细胞,细胞毒性T细胞和自然杀伤细胞杀伤肿瘤及其他病原体的力量,促进某些白介素的产生(Bendich A,Jnutr.1989,119:112115)。
雷公藤制剂致肝毒性、生殖毒性和血液系统毒性不良反应回顾性分析张玉萌;朱丽萍【摘要】目的:了解雷公藤制剂所致肝毒性、生殖毒性、血液系统毒性不良反应发生的特点和规律,为促进其安全使用提供参考。
方法:检索中国生物医学文献数据库、中国期刊全文数据库及中文科技期刊数据库,收集雷公藤制剂引起生殖毒性、肝毒性、血液系统毒性的病例,对其不良反应发生的特点进行归纳总结。
结果:共检索到32篇文献,涉及病例43例。
其中,致生殖毒性文献6篇,病例8例,主要临床表现为:闭经伴性欲减退,性激素水平下降,功能失调性子宫出血,卵巢、子宫萎缩等;致肝毒性文献7篇,病例10例,主要临床表现为:纳差、乏力、恶心、尿黄、黄疸、全身皮肤黏膜黄染、巩膜黄染、皮疹、发热等;致血液系统毒性文献19篇,病例25例,主要临床表现为:全身不适,腹痛,腹泻,伴发热,重度贫血、鼻出血、皮肤瘀斑等,严重者可致急性再生障碍性贫血,纯红再生障碍性贫血及粒细胞缺乏症、骨髓抑制、类白血病反应等。
结论:雷公藤制剂具有肝毒性、生殖毒性和血液系统毒性,应严格掌握其适应证和禁忌证,控制合理的给药时间,小剂量、短期用药,关注配伍减毒和禁忌,选用新剂型如缓释片、双层栓剂等可以在一定程度上减少其不良反应的发生。
%Objective: To investigate the characteristics and rules about liver injury, reproductive toxicity, and hematotoxicity caused by the tripterygium wilfordii herb and its preparations, in order to provide references for the safety use in clinic. Methods:The case reports on reproductive toxicity, liver injury and hematotoxicity caused by tripterygium wilfordii herb and its preparations were collected from China Biology Medicine disc, The Chinese Journal Full-text Database, and the VIP Chinese Scientific and Technical Periodicals Database. The characteristics of these ADR cases were analyzed. Results:There were 43 ADR cases reported in 32 articles. The main clinical manifestations of eight reproductive toxicity cases reported in six articles were amenorrhea with hypaphrodisia, decline of sex hormones level, dysfunctional uterine bleeding, atrophy of ovary and uterus. The main clinical manifestations of ten liver injury cases reported in seven articles were jaundice, icteric sclera, erythra, fever, and so on. The main clinical manifestations of twenty-ifve hematotoxicity cases reported in nineteen articles were general malaise, anemia, hemorrhinia, skin ecchymosis, acute aplastic anemia, pure red cell aplasia, etc. Conclusion:Tripterygium wilfordii preparations can induce the damage of reproductive system, liver and blood system, which can be alleviated by complying with its indication and contraindication, choosing rational medication time, small dose and short-time medication, paying more attention to the compatibility, selecting the new preparations, and so on.【期刊名称】《中国药物应用与监测》【年(卷),期】2014(000)003【总页数】4页(P173-176)【关键词】雷公藤;肝毒性;生殖毒性;血液毒性;药品不良反应【作者】张玉萌;朱丽萍【作者单位】解放军总医院药品保障中心,北京 100853;海南医学院药学院,海南海口 571101【正文语种】中文【中图分类】R969.3雷公藤是卫矛科雷公藤属植物雷公藤Tripterygium wilfordii Hook. f.的根,具有祛风除湿、活血通络、消肿止痛的功效,临床用于治疗类风湿性关节炎等免疫系统疾病。
免疫检验技术模拟题+答案1、临床中AB0血型鉴定最常采用的方法为A、正向间接凝集反应B、反向间接凝集反应C、玻片凝集法D、间接凝集抑制反应E、试管凝集法答案:C2、由肾细胞产生的是A、G-CSFB、M-CSFC、CM-CSFD、EpoE、UF答案:D3、厂家生产的抗IgG制剂一般的保存方法为A、室温保存B、液氮冻存C、真空干燥保存D、-20℃保存E、加叠氮钠保存答案:C4、下列哪个不是制备胶体金常用的还原剂A、枸橼酸钠B、鞣酸C、维生素CD、白磷E、氢氧化钠答案:E5、类风湿因子主要是A、IgG类自身抗体B、IgM类自身抗体C、IgD类自身抗体D、IgA类自身抗体E、IgE类自身抗体答案:B6、免疫应答过程不包括A、APC对抗原的处理和呈递B、T淋巴细胞在胸腺内分化成熟C、免疫活性细胞对抗原的特异性识别D、T淋巴细胞和B淋巴细胞的活化E、效应细胞和效应分子的产生和作用答案:B7、结核菌素试验属于A、I型超敏反应B、II型超敏反应C、III型超敏反应D、Ⅳ型超敏反应E、以上均不是答案:D8、参加沉淀反应的抗原可以是多糖、蛋白质、类脂等,但其物理性状必须是A、颗粒状的B、可溶性的C、脂溶性的D、不溶性的E、长条形的答案:B9、抗原抗体反应最适PH为A、6.2~7.4B、7.2~7.4C、6.2~8.4D、7.2~8.4E、6.0~9.0答案:E10、AIDS的特征性免疫学异常是A、选择性T细胞缺乏,CD4/CD8比值下降B、迟发性皮肤超敏反应减弱或丧失C、血清IgG、IgA升高D、补体降低E、以上都不对答案:A11、诊断支气管哮喘时做皮肤试验的目的是A、预防药物或疫苗过敏B、寻找变应原C、评价宿主细胞免疫状态D、诊断传染病E、以上都不是答案:B12、ELISA双抗原夹心法检测抗体时,固相载体包被物是A、酶标记的抗原B、酶标记的抗体C、未标记的已知抗原D、未标记的已知抗体E、未标记的抗抗体答案:C13、能够定量测定待检标本的免疫学试验是A、间接凝集试验B、协同凝集试验C、单向扩散试验D、双向扩散试验E、对流免疫电泳答案:C14、SPA协同凝集试验中的抗体类别是A、IgMB、IgGC、IgAD、IgEE、IgD答案:B15、下列说法错误的是A、TMB是ELISA中应用最广泛的底物。
初级临床医学检验技士基础知识模拟试卷27(总分:200.00,做题时间:90分钟)一、 A1型题(总题数:88,分数:176.00)1.尿液隐血试验检测呈阳性,且出现游离Hb,这种尿液称(分数:2.00)A.脂肪尿B.乳糜脓尿C.血尿D.胆红素尿E.血红蛋白尿√解析:解析:尿液中出现游离血红蛋白时即为血红蛋白尿;乳糜液进入尿液形成乳糜尿;尿液中出现脂肪小滴称脂肪尿;乳糜尿若合并泌尿道感染,可出现乳糜脓尿;胆红素尿振荡后产生的泡沫呈黄色。
2.日本血吸虫虫卵的形态(分数:2.00)A.椭圆形,大多数不对称,卵壳厚薄不均匀,虫卵最宽处近卵盖端B.长椭圆形,淡黄色,卵壳较薄,前端有一不明显小盖C.椭圆形,淡黄色,卵壳较薄,无卵盖,卵内有一个毛蚴√D.不规则椭圆形,卵盖大,卵壳厚薄不均匀,内有1个卵细胞和10多个卵黄细胞E.灯泡状,黄褐色,卵壳厚,内含一成熟毛蚴解析:解析:成熟日本血吸虫虫卵为椭圆形,淡黄色,卵壳较薄,无卵盖,卵内有一个毛蚴。
A为斯氏肺吸虫;B为布氏姜片吸虫;D为卫氏并殖吸虫;E为华支睾吸虫。
3.淋巴细胞和中性粒细胞随年龄变化比例基本相等的时间为(分数:2.00)A.8~14天和4~6岁B.4~8天和2~5岁C.6~9天和4~5岁√D.1~3天和3~5岁E.9~14天和6~8岁解析:解析:新生儿中性粒细胞占绝对优势,一周内降至5×10 9/L,第6—9天减至与淋巴细胞大致相等,随后淋巴细胞逐渐增多,婴儿期以淋巴细胞为主,2—3岁后,淋巴细胞逐渐减低,中性粒细胞逐渐升高,4~5岁两者基本相等。
4.以下哪种检测可用于糖尿病的诊断与治疗(分数:2.00)A.尿酸碱度B.尿蛋白C.尿糖√D.尿酮体E.尿胆红素解析:解析:尿糖检查主要是作为糖尿病的筛检和病情判断的检测指标。
5.下列关于白血病的叙述,正确的是(分数:2.00)A.急性白血病患者骨髓增生明显活跃,原始和早期幼稚细胞显著增多√B.急性白血病患者骨髓红细胞系和巨核细胞系增多C.急性白血病少于慢性白血病D.急性白血痛外周血白细胞计数一定增高E.急性粒细胞白血病不会出现白血病“裂孔”现象解析:解析:急性白血病患者骨髓象:骨髓增生明显活跃,原始细胞和早期幼稚细胞显著增多;骨髓红细胞和血小板进行性减少;大多数患者外周血中白细胞数量增多,也有部分患者白细胞数正常或减少;我国急性白血病患者多于慢性白血病患者;当原始细胞≥30%的时候,可出现白血病“裂孔”现象。
药理学●监测血药浓度在临床上有什么意义(22)1.保证最大的疗效,同时防止药物在体内浓度过高,而产生相应的毒副作用;2.血液浓度是指药物吸收后在血浆的总浓度,包括与血浆蛋白结合或在血浆游离的药物,也可泛指药物在全血中的浓度,体内的浓度随时间变化,可以通过光谱法,色谱法,免疫法来监测血药浓度;3.同样剂量的药物对于同种病症的不同患者,其疗效相差较大,有的疗效一般,有的疗效甚好,其毒副作用表现也不同。
4.测定血药浓度可以防止药物在体内浓度过高而产生毒副作用。
●药物体内代谢对药理作用影响,各举一例(21)1.吸收:吸收是药物发挥药效的前提,如片剂进入体内要崩解、溶出后才可以吸收进入血液循环,发挥作用2.分布:药物进入体循环达到病灶起作用,如左旋多巴能通过血脑屏障进入中枢神经系统,经脑内的多巴胺脱羧酶催化转化为多巴胺而产生治疗作用。
3.代谢:有些药物会经代谢失活,有些会生成活性代谢物,使发挥疗效或毒性增强,如服用普罗加比需经代谢后起效,释放出氨基丁酸;4.排泄:将药物排出体外便不再对人体起作用,有些会以原形药物排出,有些以代谢产物排出,如硝苯地平在肝脏内转化为无活性的代谢产物,约80%肾脏排泄,约20%随粪便排出,肾功能不全的患者,硝苯地平的排泄速率降低。
●从药代动力学方面考虑,药物相互作用可能在那些环节上产生1.吸收:抑制胃排空的药物如阿托品或阿片类麻醉药可延缓合并应用药物的吸收;2.分布:血浆蛋白结合率的药物可被同时应用的另一血浆蛋白结合率高的药物所置换,导致被置换药物的分布加快,作用部位药物浓度增高,毒性反应或临床效应增强;3.代谢:酶诱导剂和酶抑制剂可使肝药酶的活性增强或减弱,如利福平,乙醇,卡马西平等,合并使用其他药物会使后述药物代谢加快或减慢,从而影响药物的作用时间;4.排泄:近曲小管细胞能以主动方式将药物自血浆分泌入肾小管内,同一机制分泌的药物可竞争转运载体而发生竞争性抑制,通常分泌速度较慢的药物能更有效地抑制分泌速度较快的药物,丙磺舒竞争性抑制青霉素的排泄。
儿童自身免疫性肝病董漪;朱世殊;张敏【摘要】儿童自身免疫性肝病是一种由自身免疫反应介导的慢性进行性肝脏疾病,包括自身免疫性肝炎、自身免疫性硬化性胆管炎、肝移植后新发自身免疫性肝炎.近年来儿童自身免疫性肝病的发病率逐渐上升,但临床表现缺乏特异性,有不同于成人的临床特点,现有的IAIHG积分系统并不适合儿童患者,故临床上容易误诊或漏诊.及时应用免疫抑制剂治疗至关重要,可明显改善预后.本文主要对该病的诊治研究进展进行综述.【期刊名称】《传染病信息》【年(卷),期】2019(032)002【总页数】6页(P97-102)【关键词】儿科;自身免疫性肝病;自身免疫性肝炎;自身免疫性硬化性胆管炎;儿童【作者】董漪;朱世殊;张敏【作者单位】100039 北京,中国人民解放军总医院第五医学中心青少年肝病诊疗与研究中心;100039 北京,中国人民解放军总医院第五医学中心青少年肝病诊疗与研究中心;100039 北京,中国人民解放军总医院第五医学中心青少年肝病诊疗与研究中心【正文语种】中文【中图分类】R725.7近年来,儿童肝脏疾病谱正逐渐发生变化。
一方面,随着乙型肝炎疫苗的广泛接种和儿童丙型肝炎被不断治愈,病毒性肝炎发病率呈下降趋势。
另一方面,随着儿童自身免疫性肝病发病率的上升和对其认识的提高,该病确诊的病例数逐年增加,越来越多的研究也证实了这一情况[1-3]。
儿童自身免疫性肝病有其自身特点,与成人明显不同。
儿童自身免疫性肝病分为3种:自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis, AIH)、自身免疫性硬化性胆管炎(autoimmune sclerosing cholangitis,ASC)、肝移植后新发自身免疫性肝炎,以AIH最常见。
1 自身免疫性肝炎儿童AIH是一种自身免疫反应介导的进行性肝脏炎症性疾病,发病机制目前并不十分清楚。
儿童AIH比成人AIH更有侵袭性。
典型的特点是女性儿童多见(占3/4),血清转氨酶升高,高免疫球蛋白G(IgG)和/或高γ-球蛋白血症,血清自身抗体阳性,肝组织学呈界面性肝炎。
24 中国兽医杂志2011年(第47卷)第8期 Chinese Journal of Veterinary Medicine
鸡传染性贫血免疫对肝微粒体抗氧化酶活性的影响 周 建 ,孙素玲 (1.安徽农业大学,安徽合肥230001;2.安徽科技学院动物科学学院,安徽凤阳233100)
摘要:目的是观察鸡传染性贫血多次免疫对肝微粒体中抗氧化酶活性的影响。对2O只SPF鸡随机分为2组,每组1O 只,免疫组鸡用鸡传染性贫血弱毒苗免疫4次,每次间隔2周,对照组鸡注射同剂量的生理盐水。最后一次免疫后10 d取肝 脏制备微粒体,利用测试盒测定肝微粒体中的GSH—Px活性、SOD活性、CAT活性和MDA含量。结果与对,N ̄ft相比,免疫组 肝微粒体中GSH—Px活性、SOD活性和CAT活性都显著提高(P<o.05),MDA含量显著减低(P<O.05)。结论为鸡传染性 贫血多次免疫可提高鸡体抗氧化能力。 关键词:鸡传染性贫血;免疫;肝微粒体;抗氧化酶活性
中图分类号:¥852.23 文献标识码:A 文章编号:0529—6005(2011)08—0024—02 Effects of vaccinating chickens against chicken infectious anemia immunity on the antioxidant enzyme activity in liver microsomes of chickens
ZHOU Jian ,SUN Su—ling (1.Anhui Agricultural University,Hefei 230001,China; 2.Anhui Scinece and Technology University,Fengyang 233100,China)
收稿13期:2010—12—2O 基金项目:安徽省教育厅重点项目“鸡传染性贫血胶体金快速诊 断试纸条的研制”(KJ2008A32ZC) 作者简介:周建(1986一),女,助理兽医师,学士,研究方向为动物 疫病防控 通讯作者:孙素玲,E mail:ssll95710@sohu.corn
o <) (>●<>●(>●<>●<>●<>●<>●<>●<)●<>●(>●<>●<>… ●<>●<>●<>●<>●<>●<>●<> ㈨●<>●<>●<>●<>●C>●<>“Ⅵ <>●(>●<>●<>●0●<>●<> <)● 菌对庆大霉素和环丙沙星的耐药水平并未降低,说 明其耐药机制不由该质粒介导而是其他质粒或者染 色体介导;另外此质粒并不介导耐药性。 3.2抗菌药物必须通过大肠杆菌外膜才能进入细 菌细胞内发挥抗菌作用。ompC与ornpF是大肠杆 菌的两个主要外膜蛋白[6]。文献报道缺失ompF显 著提高对氟诺沙星、四环素、头孢菌素、先锋霉素和 头孢西丁的耐药性,缺失ompC则增强对头孢菌素 和头孢西丁的耐药性。ompA是大肠杆菌表达量最 大的主要外膜蛋白,同时也是孔蛋白,试验证明om pA形成的通道可以通过一些小分子溶质 ],缺失 ompA的E.coli菌株可以提高对喹诺酮类药物的 MIC[8]。因此这些外膜蛋白直接影响细胞外膜对抗 菌药物的渗透性及耐药性,表达量降低甚至不表达 就会导致多重耐药性的发生。本试验中,对1号和 2号大肠杆菌提取外膜蛋白,SDS—PAGE电泳分析, 1号菌株缺少ompA;2号菌株缺少ompF和ompA, 可见ompA、ompF的缺少是两株大肠杆菌多重耐药 的原因之一;经中药作用后,1号菌株ompA恢复表 达;2号菌株ompF恢复表达;但经过两菌株中药作 用前后对环丙沙星和庆大霉素的MIC测定,其耐药 水平并没有变化,表明ompA、ompF的缺少并不是 大肠杆菌对环丙沙星和庆大霉素耐药的主要原因, 香芪口服液能够恢复大肠杆菌某些外膜蛋白的表 达,但不能恢复其对抗生素的敏感性。
3.3本试验中,香芪口服液虽不能消除大肠杆菌 的耐药性,但通过对其消除大肠杆菌部分质粒以及 对外膜蛋白的恢复表达的研究,为今后耐药抑制剂 的研发提供理论基础,为国内外兽医临床、医学临 床解决日趋严重的耐药菌感染提供新理论、新方 法,同时为有效遏制人源性和动物源性细菌耐药性 的交互传播提供试验依据。 参考文献: [1] 曾春兰,钟振国.中药抗菌作用的研究进展FJ3.广西中医学院 学报,2006,9(1):51-53. [23 刘立新.中药消除细菌耐药性的研究进展[J].畜牧兽医科技 信息,2008(5):15 16. [3]雷连成,韩文瑜,段艳.大肠杆菌耐药性抑制剂作用机制的初 步研究[J].中国兽药杂志,2004,38(2):18—21. [4] 邬苏晓,肖正中,周建超.中西药联用对猪大肠杆菌体外抗菌 活性分析[J].甘肃畜牧兽医,2009(1):9 11. [5]CLSI.Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing;Nineteenth Informational Supplement.CLSI doeu— ment MIO0一S19[s].Wayne,PA:Clinical and Laboratory Standards Institute,2009:卜135. [6]Batchelor E,Walthers D,Kenney L J,et a1.The Escherichia coli CpxA CpxRenvelope stress response system regulates ex— pression of the porins OmpF and OmpC[J].J Bacteriol,2005, l87 1 5723-5731. r7] Sugawara E,Nikaido H.Pore—forming activity of OmpA pro—
tein of Escherichia coli[J].J Biol Chem,1992,267:2507—2511. [8] Chapman J S,Georg。papadak0u N H.Routes of quinolone per— meation in Escherichia coli[J].Antimicrob Agents Chemother, 1988,32:438—442. 中国兽医杂志2011年(第47卷)第8期 25 Abstract:To investigate the effect of vaccinating chickens against chicken infectious anemia(chicken infectious anemia,CIA)on the antioxidant enzyme activity in liver microsomes of chickens,20 chickens Were randomly divided into two groups with 10 chickens each.The chickens in immunized group were vac— cinated with CIA attenuated vaccine 4 times at an interval of 2 weeks.The chickens in control group were in eeted by NS.The liver microsomes were prepared 10 d after the last immunization.GSH—PX activity, SOD activitv,CAT activity and MDA contention in liver microsomes were determined by test—box. Corn— pared with the control group.GSH—PX activity。SOD activity and CAT activity in liver microsomes signifi— cantly improved in immunization group(P<0.05).MDA contents in 1iver microsomes wres significantly reduced in immunization group(P<0.O5).The conclusion is that the antioxidant capacity are increased by multiple CIA several immunizations. Key words:chicken infectious anemia;immune;liver microsomes;antioxidant enzyme activity Corresponding author:SUN Su—ling
鸡传染性贫血(cIA)是一种鸡免疫抑制性传染 病。CIA是由鸡传染性贫血病毒(CIAV)感染引起 的,以再生障碍性贫血和淋巴器官萎缩为主要特征 的幼龄鸡的免疫抑制性传染病。cIAV导致鸡群的 死亡增加、存活率和体增重降低,因免疫器官损伤引 起严重的免疫抑制,降低鸡群对各种常规疫苗免疫 接种效果,增加鸡群对各种病原的易感性,引起继发 感染,给养鸡业带来很大的经济损失。由于CIAV 的传播已呈全球蔓延趋势,近几年的流行病学调查 表明,CIAV在我国鸡群中的感染非常普遍,感染 率高达4O ~96 { ,目前,还没有安全、有效、适 用的商品化CIA疫苗可用,由于CIAV对理化因 子的抵抗力极强,依靠非免疫接种的综合防制措施, 难以对其传播进行有效控制。国内外关于CIA活 疫苗免疫的研究文献不少,但未见CIA活疫苗免疫 对鸡体抗氧化酶影响的文献,尤其是在亚细胞水平 上。为此,进行了此项试验,以观察cIA免疫对肝 微粒体抗氧化功能的影响,为CIA免疫的研究提供 参考。 1材料与方法 1.1 试验动物 2O只7O日龄SPF自来航蛋鸡,安 徽科技学院SPF动物房提供。 1.2 主要仪器及试剂 DY89一I型电动玻璃匀浆 机,宁波新芝科器研究所;722型可见光分光光度 计,上海精密科分析仪器总公司制造;鸡传染性贫血 弱毒苗,德国罗曼动物保健有限公司,批号 8034811;卡介苗,上海生物制品研究所,批号 2009031202;谷胱甘肽过氧化物酶(GSH—P )测试 盒,南京建成生物工程研究所,批号2009] 217;超氧 化物歧化酶(SOD)测试盒,南京建成生物工程研究 所,批号20091013;丙二醛(MDA)测试盒,南京建 成生物工程研究所,批号20090907;过氧化氢酶 (CAT)测试盒,南京建成生物工程研究所,批号 A005。 1.3试验动物的分组和鸡体免疫2O只SPF鸡随 机分为2组,每组10只,试验组首次免疫含福氏完 全佐剂的抗原乳剂2 mL/只,两侧胸部皮下分点注 射,以后每隔2周加强免疫1次,注射含福氏不完全 佐剂抗原乳剂1 ml /只,共免疫4次;对照组注射同 剂量的生理盐水。 1.4肝微粒体的制备 最后一次免疫后10 d,鸡 停食不停水24 h,处死,放尽血液,迅速剖开腹腔取 出肝脏,用预冷的生理盐水洗净血污,用滤纸吸干肝 脏表面的水分。称重后置于烧杯中,用手术剪剪碎, 按每克肝脏3 mL的比例加入蔗糖Tris—HC1缓冲 液,用玻璃匀浆机制备匀浆,转速600 r/min,研杵上 下移动8次,将匀浆液倒人量简中,用缓冲液洗涤匀 浆管并将其倒入量筒中,最后缓冲液加至约5 mI /g 组织,再以6 000 r/rain离心5 rain,弃去沉淀部分 (细胞碎片和细胞核),取上清液以12 000 r/rain离 心10 rain,弃上清液,沉淀部分即为线粒体。量取 去除线粒体的上清液的总体积,加入CaC1。溶液2 mL,以14 000 r/min离心15 min,弃取上清液,沉 淀部分即为粉红色、半透明的微粒体。将微粒体沉 淀,混悬于KC1一Tris—HC1缓冲液中,并用玻璃匀浆 器充分混均匀,再以14 000 r/rain离心15 min,其 沉淀即为经清洗的微粒体。最后将制备所获得的微 粒体悬混于KC1~Tris—HC1缓冲液(缓冲液用量约为 l mL/g组织)中,用玻璃匀浆器充分混合均匀,超声 波破膜后待用。使用前按双缩脲法测定微粒体蛋白 的含量。 1.5肝微粒体中蛋白质含量测定(双缩脲法)fis3 取6支试管,分别加入0,0.2,0.4,0.6…0 8,1.0 mL 的标准酪蛋白质溶液,再分别加入0,0.2,0.4,0.6, 0.8,1.0 mL的蒸馏水,然后各加入4 mI 双缩脲试 剂,在室温下放置30 min,波长540 nm处,1 cm光 径比色杯,蒸馏水调零,比色。以酪蛋白的含量为 Y,光密度为X,计算出回归方程一。 吸取1 mL微粒体样本,加入1.0 mL蒸馏水和