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农药残留量测定法标准操作规程

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农药残留量测定法标准操作规程目的：建立农药残留量测定法的操作规程，以规范操作过程，确保检验结果准确可靠。

适用范围：饮片中的农药残留量测定责任人：质量管理部主任，检验员内容：一、有机氯类农药残留量测定1、简述有机氯类农药是农药史中使用量最大，使用历史最长的一类农药，其中化学性质稳定，脂溶性强，残效期长（可达30~50年之久），易在脂肪组织中蓄积，造成慢性中毒，严重危及人类健康。

本法通过提取、净化和富集等步骤制备供试品溶液，采用气相色谱法，电子捕获检测器测定。

2、仪器与用具2.1、气相色谱仪，带有63Ni—ECD电子捕获器，载气为高纯氮（纯度>99.9999%），必须安装脱氧管。

2.2、超声仪。

2.3、离心机。

2.4、旋转蒸发仪。

2.5、色谱柱：SE-54或DB-1701弹性石英毛细管柱（30m×0.32mm×0.25um）2.6、具塞刻度离心管（10ml），刻度浓缩瓶，具塞锥形瓶（100ml），移液管等。

3、试药与试液3.1、丙酮、石油醚（60~90℃）和二氧甲烷均为分析纯，且全部经过全玻璃整流装置重蒸馏，经气象色谱法确认，符合农残检测的要求。

（或使用进口的农残级的试剂）3.2、无水硫酸钠和氯化钠均为分析纯，硫酸为优级纯。

3.3、农药对照品：六六六（BHC）[包括α-BHC、β-BHC、γ-BHC、δ-BHC四种异构体]，滴滴涕（DDT）[包括PP’-DDE,PP’-DDD,OP’-DDT和PP’-DDT四种异构体]及五氯硝基苯（PCNB），由国家标准物质研究中心提供标示含量（浓度）的农药标准品，也可以采用国际认可的用药标准品自行配置。

4、色谱条件与系统适用性试验4.1、SE-54色谱柱：进样口温度：230℃，检测温度：300℃，不分流进样。

程序升温；初始温度100℃，每分钟10℃升至220℃，再以每分钟8℃升至250℃，保持10分钟。

4.2、DB-1701色谱柱：进样口温度：220℃，检测器温度：300℃，不分流进样。

程序升温：初始温度140℃，保持1分钟，每分钟10℃升至210℃，再以每分钟20℃升至260℃，保持4分钟。

按上述条件操作，理论板数以α—BHC峰计算应不低于1×106，两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5.5、操作方法5.1对照品储备液的制备精密称取六六六（BHC）、滴滴涕（DDT）及五氧硝基苯（PCNB）农药对照品适量，用石油醚（60~90℃）分别制成每1ml约含4~5ug的溶液，即得。

5.2混合对照品储备液的制备精密量取上述各对照品储备液0.5ml，置10ml量瓶中，用石油醚（60~90℃）稀释至刻度，摇匀，即得。

5.3混合对照品溶液的制备精密量取上述混合对照品储备液，用石油醚（60~90℃）制成每1L分别含0ug、1 ug 、5 ug、10 ug、50 ug、100 ug、250 ug 的溶液，即得。

5.4供试品溶液的制备5.4.1药材或饮片取供试品于60℃干燥4小时，粉碎成细粉，取约2g，精密称定，置100ml具塞锥形瓶中，加水20ml浸泡过夜，精密加丙酮40ml，称定重量，超声处理30分钟，放冷，再称定重量，用丙酮补足减失的重量，再加氯化钠约6g，精密加二氯甲烷30ml，称定重量，超声处理15分钟，再称定重量，用二氯甲烷补足减失的重量，静置（使分层），将有机相迅速移入装有适量无水硫酸钠的100ml具塞锥形瓶中，放置4小时。

精密量取35ml，于40℃水浴上减压浓缩至近干，加少量石油醚（60~90℃）如前反复操作至二氯甲烷及丙酮除净，用石油醚（60~90℃）溶解并转移至10ml具塞刻度离心管中，加石油醚（60~90℃）精密稀释至5ml，小心加入硫酸1ml，振摇1分钟，离心（3000转/分）10分钟，精密量取上清液2ml，置具刻度的浓缩瓶中，接旋转蒸发仪，40℃下（或用氮气）将溶液浓缩至适量，精密稀释至1ml，即得。

5.4.2制剂取供试品，研成细粉（蜜丸切碎，液体直接量取），精密称取适量（相当于原药材2g），以下按上述供试品溶液制备法制备，即得供试品溶液。

5.5测定法分别精密吸取供试品溶液和与之相对应的混合对照品溶液各1ul，分别连续进样3次，取3次平均值，按外标法计算供试品中9种有机氯农药残留量。

6 注意事项6.1 本实验所用器皿应严格清洗（不能残存卤离子）6.2供试品溶液制备时，有机相减压浓缩务必至近干，避免待测成分损失。

6.3为防止假阳性结果，可选择不同极性的色谱柱进行验证，有条件的可采用气质联用予以确认6.4如样品中有其他成分的干扰，可适当的改变色谱条件，但需要进行空白验证。

二、有机磷类农药残留量测定法1、简述很多有机磷类农药具有毒性，其残留严重危及人体健康。

中国药典（2010版一部）收载了有机磷类农药（对硫磷、甲基对硫磷、乐果、氧化乐果、甲胺磷、久效磷、二嗪弄、乙硫磷、马拉硫磷、杀扑磷、敌敌畏、乙酰甲胺磷）的测定方法本法通过提取、净化和富集等步骤制备供试品溶液，采用气相色谱法，氮磷检测器测定2 仪器与用具2.1、气象色谱仪，带有氮磷检测器（NPD），载气为高纯氮（纯度>99.9999%）。

2.2、超声仪2.3、旋转蒸发仪2.4、多功能真空样品处理器、2.5、活性炭小柱（120~400目，石墨碳填料0.25g，内径0.9cm）2.6、氮吹仪2.7、色谱柱：DB—17MS或HP—5弹性石英毛细管柱（30m×0.25mm×0.25um）或类似极性的毛细管柱2.8具塞锥形瓶、250ml平底烧瓶、棕色量瓶、移液管等3、试药与试液3.1、无水硫酸钠为分析纯3.2、乙酸乙酯、正己烷（农残级或分析纯试剂经过全玻璃蒸馏装置重蒸馏，经气相色谱法确认，符合农残检测的要求）。

3.3、农药对照品硫磷、甲基对硫磷、乐果、氧化乐果、甲胺磷、久效磷、二嗪弄、乙硫磷、马拉硫磷、杀扑磷、敌敌畏、乙酰甲胺磷，由国家标准物质研究中心及农业部环境保护科研检测所提供，其纯度大于99%；也可以使用国际认可的、纯度要求等符合规定的进口标准物质。

4 色谱条件与系统适用性试验进样口温度220℃，检测器温度300℃，不分流进样。

程序温度：初始120℃，每分钟10℃升至200℃，每分钟5℃升至240℃，保持2分钟，每分钟20℃升至270℃，保持0.5分钟，理论板数按敌敌畏峰计算应不低于6000，两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5。

5操作方法5.1、对照品储备液的制备精密称取硫磷、甲基对硫磷、乐果、氧化乐果、甲胺磷、久效磷、二嗪弄、乙硫磷、马拉硫磷、杀扑磷、敌敌畏、乙酰甲胺磷农药对照品适量，用乙酸乙酯分别制成每1ml含100ug的溶液，即得。

5.2、混合对照品储备液的制备精密量取上述各对照品储备液1ml，置20ml棕色量瓶中，加乙酸乙酯稀释至刻度，摇匀，即得。

5.3、混合对照品溶液的制备精密量取上述混合对照品储备液，用乙酸乙酯制成每1ml分别含0.1ug、0.5ug、1ug、2ug、5ug的溶液，即得。

5.4、供试品溶液的制备药材取供试品粉末（过二号筛）约5g，精密称定，加无水硫酸钠5g，加入乙酸乙酯50~100ml，冰浴超声处理3分钟，放置，取上层滤液，药渣加乙酸乙酯30~50ml，冰浴超声处理2分钟，放置，滤过，合并两次滤液，用少量的乙酸乙酯洗涤滤纸及残渣，与上述滤液合并。

取滤液与40℃下减压浓缩至近干，用乙酸乙酯转移至5ml量瓶中，并稀释至刻度，精密量取1ml，置活性炭小柱（120~400目，0.25g，内径0.9cm，用乙酸乙酯5ml预洗）上，置多功能真空样品处理器上，用正己烷—乙酸乙酯（1：1）的混合溶液5ml 洗脱，收集洗脱液，置氮吹仪上浓缩至近干，精密加入乙酸乙酯1ml使溶解，即得。

同法制备空白样品。

5.5 测定法按上述色谱条件操作，分别精密吸取供试品溶液和与之相对应浓度的混合对照品溶液各1ul分别连续进样3次，取3次平均值，按外标法计算供试品中12种有机磷农药残留量。

6、注意事项6.1、所用玻璃仪器不能用含磷洗涤剂洗涤，应用洗液浸泡洗涤，使用前用丙酮荡洗并挥干溶剂。

6.2、乙酸乙酯提取液减压浓缩时，水浴温度不能高于40℃，且减压浓缩务必至近干，避免待测成分损失。

6.3、为防止假阳性结果，可选择不同极性的色谱柱进行验证，有条件的可采用气质联用予以确认。

6.4、本项方法的加样回收率应为70%—110%。

6.5、如由于具体实验要求对本操作规程的色谱条件及操作步骤进行了修改，应在原始记录上予以记录.三、拟除虫菊酯类农药残留量测定法1、简述拟除虫菊酯类农药与DDT同属轴突毒剂，其引起的中毒征象十分相似。

拟除虫菊酯类农药的毒理作用迅速，比DDT复杂，严重危及人体健康。

中国药典2010年版一部收载了拟除虫菊酯类农药（氯氰菊酯，氰戊菊酯，溴氰菊酯）残留量的测定方法。

本法通过提取、净化和富集等步骤制备供试品溶液，采用气相色谱法，电子捕获检测器测定。

2、仪器与用具2.1、气象色谱仪，带有63Ni—ECD电子捕获器。

载气为高纯氮（纯度>99.9999%）。

，必须安装脱氧管。

2.2、超声仪2.3、离心机2.4、旋转蒸发仪2.5、色谱柱SE—54或DB—5弹性石英毛细管柱（30m×0.32mm×0.25um）2.6、具塞锥形瓶、圆底烧瓶、量瓶、移液管等。

3、试药与试液3.1、丙酮、石油醚（60~90℃）和乙醚均为分析纯，且全部经过玻璃蒸馏装置重蒸馏，经气相色谱法确认，符合农残检测的要求（也可使用进口的农残级的试剂）。

3.2、无水硫酸钠氧化铝（80—100目）微晶纤维素为分析纯3.3、弗罗里硅土3.4、农药对照品：氯氰菊酯，氰戊菊酯，溴氰菊酯对照品（由农业部农药检定所提供），纯度大于98%。

4、色谱条件与系统实用性试验进样口温度220℃，检测器温度300℃，分流进样或不分流进样。

分流比：20：1：5：1.程序温度：初始160℃，保持1分钟，每分钟10℃升至278℃，保持0.5分钟，每分钟1℃升至290℃，保持5分钟，理论板数按敌敌畏峰计算应不低于1×105，两个相邻色谱峰的分离度应大于1.5。

注：操作中可根据样品实际情况，选择1分钟后分流进样，初始50℃（低于溶剂沸点10℃），以每分钟30℃升至160℃，保持1分钟，以每分钟10℃升至178℃保持0.5分钟，再以每分钟1℃升至290℃，保持5分钟。

5、操作方法5.1、对照品储备液的制备精密称取氯氰菊酯，氰戊菊酯，溴氰菊酯对照品适量，用石油醚（60~90℃）分别制成每1ml含20~25ug的溶液，即得。

5.2、混合对照品储备液的制备精密量取上述各对照品溶液储备液1ml，置10ml 量瓶中，用石油醚（60~90℃）稀释至刻度，摇匀，即得。

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2341农药残留量测定法

2341农药残留量测定法

2341 农药残留量测定法第五法药材及饮片（植物类）中禁用农药多残留测定法1. 气相色谱-串联质谱法色谱条件用(50%苯基)-甲基聚硅氧烷为固定液的弹性石英毛细管柱（柱长为30m，柱内径为0.25mm，膜厚度为0.25μm）。

进样口温度250℃，不分流进样。

载气为高纯氦气（He）。

进样口为恒压模式，柱前压力为146kPa。

程序升温：初始温度60℃，保持1分钟，以每分钟10℃的速率升温至160℃，再以每分钟2℃），％监测离子对、碰撞电压（CE）见附表2。

为提高检测灵敏度，可根据保留时间分段监测各农药。

3. 对照溶液的制备3.1 混合对照品溶液的制备精密量取禁用农药混合对照品溶液（已标示各相关农药品种的浓度）1ml，置20ml量瓶中，用乙腈稀释至刻度，摇匀，即得。

3.2气相色谱-串联质谱法分析用内标溶液的制备取磷酸三苯酯对照品适量，精密称定，加乙腈溶解并制成每1ml含1.0mg的溶液，即得。

精密量取适量，加乙腈制成每1ml含0.1µg的溶液。

3.3 空白基质溶液的制备取空白基质样品，同供试品溶液的制备方法处理制成空白基质溶液。

3.4 基质混合对照溶液的制备分别精密量取空白基质溶液1.0ml（6份），置氮吹仪上，40℃水浴浓缩至约0.6ml，分别加入混合对照品溶液10μl、20μl、50μl、100μl、150μl、200μl，加乙腈稀释至l ml，涡旋混匀，即得。

4. 供试品溶液的制备4.1 直接提取法取供试品粉末（过三号筛）5g，精密称定，加氯化钠1g，立即摇散，再加入乙腈50ml，匀浆处理2分钟（转速不低于每分钟12000转），离心（每分钟4000转），分取上清液，沉淀再加乙腈50ml，匀浆处理1分钟，离心，合并两次提取的上清液，减压浓缩至约3~5ml，放冷，用乙腈稀释至10.0ml，摇匀，即得。

4.2 快速样品处理法（QuEChERS）法取供试品粉末（过三号筛）3g，精密称定，置50ml聚苯乙烯具塞离心管中，加入1%冰醋酸溶液15ml，涡旋使药粉充分浸润，放置30分钟，精密加入乙腈15ml，涡旋使混匀，置振荡器上剧烈振荡（每分钟500次）5分钟，加入无水硫酸镁与无水乙酸钠的混合粉末（4：1）7.5g，立即摇散，再置振荡器上剧烈振荡（每分钟500次）3分钟，于冰浴中冷却10分钟，离心（每分钟4000转）5分钟，取上清液9ml，置预先装有净化材料的分散固相萃取净化管[无水硫酸镁900mg，N-丙基乙二胺300mg，十八烷基硅烷键合硅胶300mg，硅胶300mg，石墨化碳黑90mg]中，涡旋使充分混匀，置振荡器上剧烈振荡（每分钟500次）5分钟使净化完全，离心（每分钟4000转）5分钟，精密吸取上清液5ml，置氮吹仪上于40℃水浴浓缩至约0.4ml，加乙腈稀释至1.0ml，涡旋混匀，滤过，取续滤液，即得。

有机氯类农药残留量检查标准操作规程

有机氯类农药残留量检查标准操作规程

有机氯类农药残留量检查标准操作规程1 编制依据：《中华人民共和国药典》2005年版（一部）2 原理：本法系用气相色谱法测定中药材和中成药制剂中部分有机氯类农药，除另有规定外，按下列方法测定。

3 检验操作方法3.1 仪器及用具气相色谱仪电子天平电阻炉超声波清洗器水浴锅离心器1ml移液管3个10ml容量瓶5个100ml具塞锥形瓶2个50ml量筒1个3.2 化学试剂：丙酮、氯化钠、二氯甲烷、无水硫酸钠、石油醚、硫酸3.3 操作方法3.3.1 色谱条件与系统适用性试验3.3.1.1 弹性石英毛细管柱（30m×0.32mm×0.25um）SE-54(或DB-1701)63Ni-BCD电子捕获检测器。

3.3.1.2 进样口温度：230℃；检测器温度：300℃。

不分流进样。

3.3.1.3 程序升温：初始100℃，每分钟10℃升至220℃，每分钟8℃升至250℃，保持10分钟。

3.3.1.4 理论板数按α-BHC计算，不低于106，两个相邻色谱的分离度应大于1.5。

3.3.2 对照品储备液制备3.3.2.1 对照品：六六六（BHC）［α-BHC，β-BHC，γ-BHC，δ-BHC］，滴滴涕（DDT）［PP’-DDE，PP’-DDD，OP’-DDT，PP’-DDT］及五氯硝基苯（PCNB）3.3.2.2 精密称取六六六（BHC）［α-BHC，β-BHC，γ-BHC，δ-BHC］，滴滴涕（DDT）［PP’-DDE，PP’-DDD，OP’-DDT，PP’-DDT］及五氯硝基苯（PCNB）农药对照品适量，用石油醚（60～90℃）分别制成每1ml约含4～5ug的溶液，即得。

3.3.3 混合对照品储备液的制备3.3.3.1 精密量取上述各对照品储备液0.5ml置10ml量瓶中，用石油醚（60～90℃）稀释至刻度，即得。

3.3.4 混合对照品溶液的制备3.3.4.1 精密量取上述混合对照品储备液，用石油醚（60～90℃）制成每1L含0ug、1ug、5ug、10ug、50ug、100ug、500ug浓度系列，即得。

农药残留试验标准操作规程(建议稿)

农药残留试验标准操作规程(建议稿)

农药残留试验标准操作规程（建议稿）农药残留试验标准操作规程（Standard Operating Procedures, SOPs）是以文件形式法定的操作程序，也是对良好实验室规范的补充与细化，涉及到技术与管理多个层面，主要描述在研究计划或试验指导中没有详细说明的部分。

包括如何正确进行试验、开展活动和技术监督检查等。

第一节有关农药残留试验的术语为适应中国加入WTO后的国际贸易形势，保证农药残留专业术语与毒物控制法（Toxic substances control Act, TSCA）、联邦农药、兽药法（Federal Insecticide, Fungicide, and Rodenticide ACT, FIFRA）、以及良好实验室规范（Good Laboratory Practices ,GLP）的标准原则专业术语保持一致，对部分术语的内涵作了界定。

1.1试验装备（Test facility）：是指对于非临床健康和环境安全研究所需要的职员（个体、合作者），附属建筑以及执行单位。

对于多地研究还包括研究主任所在地，以及全部试验点，均视为试验装备。

1.2试验场所（Test site）：是指进行研究阶段涉及的所有地点。

1.3质量保护程序（Quality Assurance Programme）是一个法定的体系，包括独立于研究工作以外的全体职员，以及根据良好实验室规范原则而制定的确保试验设备正常运转的管理措施。

1.4试验体系(Test system)：是指用于一项研究的任何生物、化学或物理的体系或其组合。

1.5原始资料(Raw Data)：是指所有原始试验设备的记录。

如文献资料或复印件等。

包括照片、缩微胶卷、胶片复印件、计算机媒体、仪器自动记录，以及其它任何提供的信息资料。

1.6样本（Specimen）：是指为检测分析和保存从试验体系中收集的任何资料。

1.7最大残留限量（Maximum Residue Level, MRL）：类似美国的允许限量(Tolerance)，作为食物中农药残留的强制标准已被多国认可。

蔬菜农药残留速测操作规程

蔬菜农药残留速测操作规程

蔬菜农药残留速测操作规程一、实验器材和试剂准备1.酶抑制率检测试剂盒：包括试剂盒、标准品、储存液等。

2.离心管、小磨牙棒、移液枪等实验器材。

3.待检样品：新鲜蔬菜样品。

二、样品处理1.取新鲜蔬菜样品，去除外皮、叶片等不需要的部分，只保留主要部分，务必保持新鲜度。

2.将样品切碎，使用小磨牙棒研磨成细碎的样品提取物。

3.将提取物加入适量的提取液中，使用移液枪混合均匀。

4.离心提取液，收集上清液备用。

三、样品检测1.打开试剂盒，取出标准品和样品孔板。

将标准品和样品分别加入对应的孔中。

2.利用孔板盖密封，轻轻摇晃使标准品和样品充分混合。

3.将孔板放入试剂盒中，开始计时。

4.在规定时间内（通常为30分钟），观察偶氮酚比色液的变化情况，记录下标准品和样品孔的颜色。

四、数据处理1.分别计算标准品孔和样品孔的OD值。

2.根据标准品孔和样品孔的OD值，计算出酶抑制率(%)，公式为：(1-样品孔OD值/标准品孔OD值)×100%。

3.将酶抑制率与标准曲线进行对照，确定蔬菜样品中农药残留的浓度。

五、结果分析1.根据样品中农药残留浓度的分析结果，判断样品的安全性。

2.若样品中的农药残留浓度超过安全标准，则该样品被认定为不合格。

3.若样品中的农药残留浓度在安全标准范围内，则该样品被认定为合格。

六、注意事项1.操作过程中，避免任何可能的污染，如手套、实验器材等。

2.严格按照操作规程进行操作，避免误操作导致结果不准确。

3.注意实验室安全，避免化学品接触皮肤、吸入或误食。

4.样品的收集和处理应当迅速进行，避免样品变质导致结果不准确。

以上是蔬菜农药残留速测(酶抑制率法)的操作规程，通过这种方法可以快速检测蔬菜中农药残留的情况，确保蔬菜的安全性。

在进行实验操作时需要注意安全和准确性，以保证检测结果的可靠性。