生化需氧量的测定
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生化需氧量的测定
1 实验目的
通过本实验，熟悉生化需氧量(BOD5)的测定过程。
2 原理
生化需氧量是指在好氧条件下，生物分解有机物质的生物化学过程中所需要的溶解氧量。
生物分解有机物是一个缓慢的过程，要把可分解的有机物全部分解掉常需要20天以上的时间，目前国内外普遍采用20℃下5天培养时间所需要的氧作为指标，以氧的mg／L表示，称为BOD5。
取两份水样分别置于溶解氧瓶中，其中1份放人20℃培养箱中培养5天后，测定溶解氧，另1份当天测定溶解氧，按公式计算BOD5。
3 仪器
（1）恒温培养箱(20℃ 1℃)。
（2）20L细口玻璃瓶。
（3）1000mL量筒。
（4）其他仪器和碘量法测定溶解氧相同。
4 试剂
除需要测定溶解氧的全部试剂外，尚需配制下列试剂。
（1）氯化钙溶液称取27.5g无水氯化钙，溶于水中，稀释到1000mL。
（2）三氯化铁溶液称取0.25g三氯化铁(FeCl3·6H2O)溶于水中，稀释到1000mL。
（3）硫酸镁溶液称取22.5g硫酸镁(MgSO4·7H2O)溶于水中，稀释到1000mL。
（4）磷酸盐缓冲液称取8.5g磷酸二氢钾(KH2PO4)、21.75g磷酸氢二钾(K2HPO4)、33.4g 磷酸氢二钠(NaH2PO4·7H2O)和1.7g氯化铵(NH4C1)溶于500mL水中，稀释到1000mL。
此溶液的pH值应为7.2。
（5）稀释水在20L大玻璃瓶内装入一定量的蒸馏水。
其中每1L蒸馏水加入上述4种试剂。
各1mL，用水泵均匀连续通人经活性炭过滤的空气1～2天，使水中溶解氧接近饱和，然后用清洁的棉塞塞好，静置稳定1天。
稀释水本身的5天生化需氧量必须小于0.2mg／L 方可使用。
5 步骤
（1）水样的稀释首先要根据水样中有机物含量来选择适当的稀释比。
如果对水样性质不了解，需要做3个以上稀释比。
对清洁地面水可不必稀释，直接培养测定。
受污染的河水的稀释倍数约为1～4倍，普通和沉淀过的污水约为20～30倍，严重污染的水样约为100～1000倍。
也可通过COD值求得参考稀释倍数，将酸性高锰酸钾法测得的COD值除以4，或重铬酸钾法测得的COD除以5，其商即为应稀释的倍数(稀释倍数指稀释后体积与原水样体积之比)。
按照选定污水和稀释水比例，用虹吸法先把一定量污水引入1000mL量筒中，再引入所需要量的稀释水，用特制的搅拌器(一根粗玻璃棒底端套上一个比量筒口径略小的约2mm厚的橡皮圆片)在水面以下缓缓搅匀(不应产生气泡)。
然后用虹吸管将此溶液引入两个同一编号的溶解氧瓶中，到充满后溢出少许，盖严，加上封口水。
注意瓶内不应有气泡，如有气泡需轻轻敲击瓶体，使气泡逸出。
用同样方法配制另外两个稀释比的水样。
（2）另取两个同一编号的溶解氧瓶加入稀释水，作为空白。
（3）每个稀释比各取一瓶测定当时的溶解氧，另一瓶放人培养箱中，在20℃ 1℃培养5天，在培养过程中需要每天添加封口水。
（4）从开始放人培养箱算起，经过5昼夜后，取出水样测定剩余的溶解氧。
6 计算
（1）不经过稀释而直接培养的水样。
BOD 5(mg ／L)＝D l —D 2
式中 B 1——稀释水在培养前的溶解氧，mg/L ；
B 2——稀释水在培养后的溶解氧，mg/L ；
D 1——培养液在培养将的溶解氧，mg ／L ；
D 2——培养液在培养五天后的溶解氧，mg ／L 。
（2）稀释后培养的水样：根据上述3个稀释比，分别按下式计算出水样的耗氧率。
耗氧率＝()()2
12121f f B B D D --- 式中 B 1——稀释水在培养前的溶解氧，mg ／l ；
B 2——稀释水在培养后的溶解氧，mg ／L ：
f 1——稀释水在培养液中所占比例；
f 2——水样在培养液中所占比例。
f 1、f 2的计算：例如培养液的稀释比为3％，即3份水样97份稀释水，则f 1=97%=0.97，f 2=3%=0.03。
如果有2个和3个稀释比培养水样的耗氧率均在40％～70％范围内，则取其测定计算结果的平均值为BOD 5数值。
如3个稀释比培养的水样其耗氧率均在40％～70％以外，则应调整稀释比后重做。
7 注意事项
（1）稀释水应在20℃左右，冬季低于20℃时应预热，夏季高于20℃时应冷却。
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（2）样中若有游离的碱和碘，应预先中和再进行稀释培养。
可用麝香草酚蓝作为指示剂，用lmol ／L 盐酸和c(21
Na 2CO 3)为1mol ／L 的碳酸钠中和。
（3）本方法测定酚的pH 值控制在10.0±0.2。
