多重免疫组化临床应用
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免疫组化技术在血管疾病中的应用血管疾病是一类十分常见的疾病,在人群中有广泛的分布。
由于各种原因引起的血管疾病会导致一系列的临床问题,在现代医学发展中引起了关注。
免疫组化技术是一种能够对组织和细胞进行特异性的免疫染色的技术,其在血管疾病的研究和诊疗中已经得到了广泛的应用。
免疫组化技术的原理是使用一种或多种特异性抗体对组织或细胞进行染色,以便检测它们内部的分子和结构,为肿瘤等疾病的诊断、治疗以及药物研发等提供了便捷的途径。
在血管疾病中,免疫组化技术可用于检测血管的内皮细胞功能、细胞增殖、产生细胞因子的能力以及血管周围细胞的增生等方面的信息。
首先,在血管疾病的防治中,免疫组化技术可以帮助医生判断血管内皮细胞的功能,这是因为血管内皮细胞是位于血管内壁的一层细胞,它们对维持血管的正常功能和物质交换起着重要作用。
当发生各种疾病或不良刺激时,血管内皮细胞会发生异常变化,易导致血管内皮机能发生紊乱,引发各种血管病变。
免疫组化技术中使用的内皮标志物E-selectin,ICAM-1和VCAM-1等抗体能够帮助医生检测血管内皮细胞的异常变化,且对于血液中还原性血小板聚集素的检测也有一定的应用价值。
其次,免疫组化技术在血管疾病的研究中还有着重要的应用。
由于细胞增殖被大多数血管疾病所伴随,研究增殖特征成为了目前血管疾病研究的热点之一。
在此方面,PCNA (proliferating cell nuclear antigen)作为一种增殖标记物已广泛应用于血管疾病的DNA含量及增殖状况的测定。
此外,免疫细胞化学染色还可以帮助研究血管内皮细胞和血管平滑肌细胞的增殖,从而确定它们在血管病变过程中的相对贡献。
此外,在研究血管疾病的发生机制和治疗中,细胞因子也起了非常重要的作用。
免疫组化技术可以测定单个或多个细胞因子的存在和分布,并进一步揭示它们对疾病发生发展的影响。
尤其在血管炎性疾病中,免疫组化技术可以快速、准确地检测出内皮细胞和白血细胞的细胞因子的增加以及T细胞和巨噬细胞的聚集程度,从而更好地研究疾病发生机制和寻找相应的治疗方法。
免疫组化检查在病理诊断中的应用及其意义(一)作者:联合病理转贴自:本站原创点击数:3833一、病理外检中常用抗体标记上皮类标记·AE1/AE3最常用胞浆阳性着色,细丝状与低、中分子量角蛋白反应肝细胞为阴性,而胆管细胞阳性用于确定肿瘤为上皮源性·CAM 5.2胞浆阳性着色,细丝状包含CK8 和CK18,主要染色神经内分泌细胞和腺上皮,正常鳞状上皮阴性用于染小细胞癌用于胸腺瘤和梭形细胞癌用于肝细胞癌:AE1/AE3 - CAM5.2 +用于乳腺外的Paget’s病·CK34BE胞浆阳性着色鳞状上皮和鳞状细胞癌阳性用于染前列腺的基底层细胞,鉴别浸润癌用于染涎腺肿瘤的肌上皮用于染Mallory 小体·EMA细胞膜/细胞浆阳性着色上皮标记的替代品浆细胞阳性,很好的内对照用于染滑膜肉瘤 EMA +用于大细胞分化不良性淋巴瘤 EMA +用于L&H 富于淋巴细胞的结节状何杰金用于脑膜瘤 EMA+ AE1/AE3 –用于浆细胞瘤常常 EMA +·CK7 和CK20胞浆阳性着色两者联合应用可鉴别很多种癌的原发部位CK7 常常在胃肠道的癌为阴性CK20 只有胃肠道癌和Merkel 细胞癌阳性间皮细胞标记·Calretinin细胞核和细胞浆阳性着色,核阳性着色为必需间皮强阳性,Sertoli和肥大细胞阳性用于鉴别间皮瘤(+)和腺癌(-),常加CEA用于鉴别梭形细胞间皮肉瘤(+)和其他的浆膜腔肉瘤(-)用于鉴别胸、腹水中的癌细胞和间皮细胞确定为间皮细胞,如大网膜内陷入的一团细胞或腺瘤样瘤神经元分化标记,如中枢神经细胞瘤帮助确诊心脏粘液瘤,几乎全为(+)白细胞标记·非何杰金淋巴瘤大致分类CD20 (L26),CD3怀疑T 细胞淋巴瘤者加UCHL-1(CD45RO)怀疑浆细胞瘤者LCA(CD45RB),CD79a, CD138小B 细胞淋巴瘤者,CD79a, CD43(MT1)·LCA (CD45RB)几乎所有的白细胞(+ )有些淋巴母细胞淋巴瘤、大细胞分化不良性淋巴瘤、外周T 细胞淋巴瘤(- )经典Hodgkin 的R-S 细胞(-)以往浆细胞瘤(-),现(+)HE 下明确的淋巴瘤不必要染LCAB细胞相关标记·CD20 (L26)胞膜阳性着色,浆阳者不可判为阳性各阶段B 细胞阳性,除了原始的前B 和非常成熟的浆母、浆细胞用于染B 细胞淋巴瘤,除了小细胞、淋巴母细胞(不恒定)和浆细胞瘤(常-)梭形细胞胸腺瘤(+)·CD79a胞浆阳性着色,有/无核周聚集全B 细胞标记,包括浆母和浆细胞标记滤泡中心比mantle和滤泡间B要弱比CD20 贵得多用于鉴别淋巴母细胞淋巴瘤/白血病弥漫性小B 细胞淋巴瘤/白血病浆细胞瘤(常CD20–而CD79a >50% +T细胞相关标记·CD3 (polyclonal)胞浆阳性着色,核周凝聚,有时高尔基体也阳性极好的T 细胞标记,与CD43 不同,髓系细胞和组织细胞不着色极好的T 细胞和NK 淋巴瘤标记,虽然有些大细胞型T 细胞淋巴瘤阴性·CD43 (MT1)只有膜阳性才能判为阳性T 细胞、T 细胞淋巴瘤、真性组织细胞肿瘤、粒细胞肉瘤阳性一部分浆细胞瘤阳性小B 细胞淋巴瘤阳性,这一特点可辅助表明增生的小淋巴细胞为肿瘤性!EBV 感染的B 细胞阳性·UCHL-1(CD45RO)细胞膜阳性着色,有时Golgi 阳性,弥漫性胞浆阳性者非真阳性阳性:正常/ 反应性的T 细胞,组织细胞、粒细胞肉瘤和T 细胞淋巴瘤罕见情况下B 细胞淋巴瘤阳性·CD5细胞膜阳性着色T 细胞阳性,但极少B 细胞也阳性尤其用于慢性淋巴细胞性白血病和Mantle 淋巴瘤,而MALToma 和Marginal Zone 淋巴瘤阴性用于鉴别胸腺癌(CD5+)和其他癌瘤与激活相关的标记·CD30 (Ki-I,Ber-H2)只有膜染色和Golgi体染色才是真阳性正常淋巴滤泡周单个的大细胞为阳性激活的淋巴细胞阳性:如传单、弓浆虫感染、Kikuchi淋巴结炎等、浆细胞也阳性用于大细胞分化不良性淋巴瘤用于一些传统的大细胞淋巴瘤外周T和B细胞淋巴瘤中的一些单个大细胞经典何杰金病中的R-S细胞,但非L&H细胞淋巴瘤样丘疹病等皮下CD30+的淋巴增生疾病一些浆细胞瘤胚胎性癌组织细胞标记·CD68(PGM1)胞浆内颗粒状阳性着色较好的组织细胞和单核细胞(包括浆样单核细胞)及其肿瘤的标记有些非组织细胞也可阳性,包括:肾小管、粒细胞肉瘤、恶黑、血管瘤样恶纤组等髓系细胞标记·Myeloperoxidase胞浆阳性着色,常呈颗粒状髓系细胞及其肿瘤的高度特异且敏感的标记奇怪的是在Kikuchi 淋巴结炎和狼疮性坏死性淋巴结炎中,其中的组织细胞myeloperoxidase 也为阳性与淋巴瘤相关的标记·ALK-1(Anaplastic lymphoma kinase-1)胞核+ 胞浆阳性着色用于大细胞分化不良性淋巴瘤,不能证实ALK1+ 与良好预后有关用于一种罕见的大B 细胞细胞瘤,ALK1 阳性而CD20 阴性,但IgA 阳性·Bcl-2在核周围区阳性着色在正常淋巴结,生发中心阴性,但mantle 和滤泡间细胞强阳性在滤泡性淋巴瘤,(>80% 病例)生发中心强阳性,阴性不能排除滤泡性淋巴瘤也用于鉴别单核样B 细胞增生(- )和单核样B 细胞淋巴瘤(+ )有人用于诊断孤立性纤维性肿瘤·Cyclin-D1核阳性着色主要用于Mantle 区淋巴瘤,几乎所有病例均为阳性,有些可能为弱阳性与分化阶段相关的标记·Tdt细胞核阳性着色不成熟的T 或B 淋巴细胞标记,前T/ 前B 细胞用于诊断淋巴母细胞淋巴瘤/ 白血病诊断胸腺瘤(富于不成熟的T 细胞)肌原性标记·Desmin胞浆阳性着色平滑肌/ 骨骼肌及其肿瘤的良好标记,肌纤维母细胞有时也阳性,但肌上皮阴性一些间皮瘤阳性desmoplastic small cell tumor·MSA(Muscle-specific actin)胞浆阳性着色极好的肌源性标记用于·平滑肌、骨骼肌及其肿瘤·肌纤维母细胞及相关肿瘤(恶纤组、结节性筋膜炎等)·肌上皮及其肿瘤·血管周细胞肿瘤·一些间皮瘤血管原性标记·CD31细胞膜阳性着色内皮细胞、巨核系细胞/ 血小板阳性有时浆细胞/ 浆细胞瘤阳性主要用于诊断血管性肿瘤:特异且敏感用于识别骨髓中不正常的巨核细胞用于巨核细胞系白血病·CD34细胞膜+/-细胞浆阳性着色血管内皮/巨核细胞/血小板 +很好的血管标记,但特异性差多种肿瘤CD34阳性,包括:CD34阳性的肿瘤·a) Some myeloid leukemias (especially the primitive ones). ·b) Vascular tumors·c) Solitary fibrous tumor; angiomyofibroblastoma·d) Hemangiopericytoma·e) Dermatofibrosarcoma protuberans·f) Gastrointestinal stromal tumor·g) Mammary myofibroblastoma·h) Epithelioid sarcoma·i) Spindle cell lipoma·j) Scattered cells in peripheral nerve sheath tumors·k) Megakaryoblastic leukemia血管原性标记·Factor VIII related antigen (F-VIII)胞浆阳性着色,常为颗粒状内皮细胞、巨核系细胞/ 血小板阳性主要用于血管原性肿瘤特异性好,敏感性差神经、神经内分泌及神经外胚层细胞浆阳性着色是神经和神经内分泌细胞很好的标记特异性和敏感性均好·Paraganglioma ·Pheochromocytoma ·Neuroblastoma·Olfactory neuroblastoma ·Ganglioneuroma ·Ganglioneuroblastoma·PNET·Parathyroid tumor·Medullary thyroid carcinoma ·Islet cell tumor·Pituitary tumor·Carcinoid tumor·Small cell carcinoma·Merkel cell carcinoma ·Thyroid follicular cell tumor ·Adrenocortical tumor·CgA胞浆内颗粒状着色染神经内分泌细胞的分泌小泡,因此神经元和神经节细胞阴性神经内分泌非常特异性指标,敏感性较差,阳性信号取决于瘤细胞内神经内分泌颗粒的多少小细胞癌:信号少类癌、Merkel细胞癌、甲状旁腺腺瘤等强阳性神经性肿瘤可阳可阴·GFAP (Glial fibrillary acidic protein )胞浆阳性着色星形细胞、室管膜细胞阳性,一些肌上皮阳性星形细胞瘤、多形性胶质母细胞瘤、室管膜瘤和脉络丛乳头状瘤阳性,少突胶质细胞瘤常阴性;一些外周神经鞘瘤可阳性涎腺多形性腺瘤常可阳性乳腺的肌上皮有时也可阳性·S-100细胞核+/-细胞浆阳性着色,核阳性着色为必需用处非常多:·glial cells, Schwann cells (astrocytoma, schwannoma, neurofibroma, malignant peripheral nerve sheath tumor). In benign nerve sheath tumors, almost all the tumor cells are positive; while in malignant peripheral nerve sheath tumor, usually only a fraction of the neoplasticcells are S100 positive. Note that S-100 protein antibody can also highlight the sustentacular cells that envelope the islands of tumor cells in paraganglioma and olfactory neuroblastoma.S-100·Melanocytes and nevus cells (Melanocytic nevus, malignant melanoma, malignant melanoma of soft parts/clear cell sarcoma of tendons and aponeurosis)·Myoepithelial cells·Fat cells (Lipoma, liposarcoma)· Cartilage cells (Chondroma, chondroblastoma, chondrosarcoma·Histiocytes of sinus histiocytosis with massive lymphadenopathy (Rosai-Dorfman disease)·Interdigitating dendritic cells and Langerhans cells (Langerhans cell histiocytosis, interdigitating dendritic cell sarcoma). Juvenile CML is often S-100 positive·HMB45胞浆内颗粒状着色恶性黑色素瘤和交界痣,而正常的痣细胞常为阴性肾和肝的血管平滑肌脂肪瘤、肾被膜瘤肺的淋巴管肌瘤病、糖瘤·Melan-A胞浆内颗粒状着色阳性表达的细胞包括:黑色素细胞、肾上腺皮质、性索(Leydig, granulosa)用于:·黑色素瘤·支持- 间质细胞瘤和颗粒细胞瘤·血管周细胞瘤·肾上腺皮质肿瘤与乳腺癌相关的抗体·ER细胞核阳性着色·PR细胞核阳性着色·Ki-67细胞核阳性着色G1, S, G2 and M phases of the cell cycle 阳性Ki-67 index: 阳性细胞所占比例·P53细胞核阳性着色正常细胞因P53蛋白很快降解故阴性,而恶性肿瘤中因突变或存在使P53稳定的因素,故可阳性·C-erBb2细胞膜阳性着色分级Herceptine 治疗还用于鉴别乳腺内/外的Paget’s病和恶黑用于乳腺内/外Paget’s病和表皮的一些透明细胞(Toker cell)用于显示Paget’s病切缘是否干净激素类抗体·Thyroglobulin胞浆阳性着色极好的甲状腺滤泡上皮及肿瘤的标记,分化极差的甲状腺癌可阴性·Calcitonin胞浆阳性着色极好的C细胞及髓样癌的标记,如CgA+则更支持髓样癌个别喉的类癌+·PTH (parathyroid hormone)胞浆阳性着色甲状旁腺细胞及其肿瘤的标记·垂体腺瘤类激素胞浆阳性着色GH,PRL,TSH,FSH,ACTH,LH·HCG胞浆阳性着色极好的滋养叶细胞及肿瘤的标记:绒癌、胚胎性癌等一些胃和膀胱的癌也可阳性·PSA胞浆阳性极好的前列腺癌标记有时膀胱和尿道周的癌也可阳性·TTF-1(thyroid transcription factor-1)单纯的核阳性着色正常情况下只有甲状腺和肺泡上皮细胞阳性,大的支气管上皮阴性在肿瘤中:主要用于确定肿瘤来源于肺或甲状腺·AFP胞浆+/- 核阳性成熟组织中阴性,而胚胎性肝、胃肠道、神经上皮成分中+用于诊断肝细胞癌和肝母细胞瘤用于诊断胚胎性癌和卵黄囊瘤用于显示不成熟畸胎瘤中的神经上皮成分其他抗体·CD99细胞膜阳性着色正常存在于不成熟T细胞(胸腺细胞)和胰岛细胞用于T淋巴母细胞淋巴瘤/白血病胸腺瘤(淋巴组织成分+)尤文氏肉瘤和PNET间叶性软骨肉瘤颗粒细胞瘤和支持细胞(Sertoli)瘤孤立性纤维性肿瘤其他:滑膜肉瘤、血管周细胞瘤、脑膜瘤等·CD117 (c-Kit)胞膜阳性着色+/- 胞浆阳性,胞膜为必需正常时胃肠道的Cajal 细胞、黑色素细胞、肥大细胞阳性用于诊断GIST用于诊断mastocytosis用于诊断精原细胞瘤/ 无性细胞瘤·Inhibin胞浆内,常呈颗粒状着色用于诊断性索间质肿瘤:颗粒细胞瘤、Sertoli-Leydig细胞瘤用于诊断肾上腺皮质肿瘤·BRST-2(Gross cystic disease fluid protein-15, GCDFP-15)用于确定肿瘤来源于乳腺少部分汗腺、涎腺或其他肿瘤也可+·CEA细胞膜+/- 细胞浆阳性着色几乎所有的腺癌为阳性用于诊断乳腺/ 乳腺外的Paget’s 病,+ 而恶黑-显示涎腺或汗腺肿瘤中的腺体成分用于鉴别腺癌和间皮瘤用于诊断甲状腺髓样癌,尤其是小细胞型用于诊断肝细胞癌前列腺癌的免疫组化表型·AE1/AE3 +·PSA +·P504S +·CK34BE -·P63 –免疫组化检查在病理诊断中的应用及其意义(二)作者:联合病理整理转贴自:中杉生物公司交流资料点击数:4071二、免疫组化在病理诊断中的应用(一)免疫组织化学在外科病理诊断中的重要性免疫组织化学染色技术发展到今天,已经成为外科病理诊断中必不可少的手段,如同组织化学染色一PAS、网染等一样,同时也是提高诊断水平、为临床提供诊疗依据,预测治疗效果和预后,减少医疗纠纷的重要手段。
免疫组化在病理诊断中的应用自1854年德国病理学家Rudolf Virchow(1821~1902)创立“细胞病理学”,百余年来病理学进展很快,但在应用和解释形态学标准时仍有困难,单靠组织切片检查有时并不能作出全面的诊断,随之发展了特殊染色和各种组化技术,为病理诊断提供了新的参考依据。
其中,免疫组化技术在病理诊断中发挥着极为重要作用。
免疫组化是免疫组织化学(immunohistochemistry, IHC)的简称,它是利用抗原抗体的特异性反应来定位组织和细胞中某种化学成分的一种组织化学方法。
免疫组化能将形态学改变与功能和代谢变化结合起来,一方面保持了传统形态学对组织和细胞的观察客观、仔细的优点;另一方面克服了传统免疫学反应只能定性和定量,而不能定位的缺点。
免疫组化技术以其特异性强、灵敏度高、定位准确等特点,已被广泛地应用于生物学和医学研究的许多领域。
那么,免疫组化在临床病理诊断中有哪些应用呢?我们下面加以详细说明:1、对“未分化”恶性肿瘤的分类如在HE切片上由于肿瘤的“未分化”而缺少肿瘤细胞起源的特征,不能分类,但临床上又必须根据肿瘤的种类作出治疗与预后判断,这种情况下需要应用免疫组化技术。
通过特定抗体标记出细胞内相应抗原成分,以确定细胞类型。
如角蛋白是上皮性标记,前列腺特异性抗原仅见于前列腺上皮,甲状腺球蛋白抗体是甲状腺滤泡型癌的敏感标记,而降钙素抗体是甲状腺髓样癌的特有标记。
在进行免疫组化前病理医生应根据肿瘤发生部位、组织学的蛛丝马迹及临床特征正确地选择抗体。
有时这些抗体用于这种目的诊断中并不完全理想,如分化差的癌可显示Vimentin或S-100蛋白,有时淋巴瘤可以表达上皮膜抗原,一些黑色素瘤表现出角蛋白,除黑色素瘤以外的一些肿瘤有时也可以表达HMB-45,这就强调了在肿瘤诊断中应使用一组抗体而不是单个抗体。
2、辨认细胞产物利用某些细胞产物为抗原制备的抗体,可作为相应产物的特殊标记,如内分泌细胞产生的各种激素,大多数可用免疫组化技术标记出来,据此可对内分泌肿瘤作功能分类,检测分泌异位激素的肿瘤等。
13、意义:标记物--作用--阳性部位--临床意义耐药性越强:阿霉素、柔红霉素、表阿霉素、米托蒽醌、长春花碱、长春新碱、紫彬醇、泰素帝。
性越强:阿霉素、顺铂、氮芥、环磷酰胺、瘤可宁。
蒽环类抗生素和鬼臼毒素类,如VP16、替尼泊苷、玫瑰树碱、新霉素、柔红霉素、表阿霉素、阿霉素、VM26。
阳性率高者对VP16尤其有效。
预后越好。
预后越好。
C-erbB-2--癌基因产物--胞浆--阳性率越高,肿瘤恶性程度越高。
ER、PE阳性而C-erbB-2也阳性者,用三苯氧胺治疗效果不好。
Ki-67为细胞增值的一种标记,在细胞周期G1、S、G2、M期均有表达,G0期缺如,其和许多肿瘤分化程度、浸润、转移、预后密切相关。
PCNA(增埴细胞核抗原)。
P53在免疫组化中均为突变型,阳性率越高,预后约差。
野生型半衰期很短于乳腺癌、非小细胞肺癌、胃癌、大肠癌、肝癌、喉癌等多种恶性肿瘤的检测。
几乎所有的研究都表明,nm23蛋白高表达患者淋巴结转移率相对较低,存活期相对较长。
胞之间连接的破坏,主要用于肿瘤侵袭和转移方面的研究。
判断的指标之一。
CK18,低分子量角蛋白,主要标记各种单层上皮包括腺上皮,而复层鳞状上皮常阴性,主要用于腺癌诊断。
阳性反应弱阳性或阴性。
乳腺癌、肺癌、子宫内膜和卵巢非黏液性肿瘤常阴性。
道上皮细胞、胰腺和胆管上皮细胞以及肾实质的上皮细胞中(特别是近曲小管)。
Villin在胃肠道癌、胰腺癌、胆囊癌和胆管癌组织中有很高的表达率,具有明显腺样结构的肿瘤上没有villin表达,则这个肿瘤为胃肠道、胰腺、胆囊或胆管来源的可能性极低。
乳腺癌也经常成为女性患者未知原发部位转移癌要鉴别排除的一种疾病。
因为在转移癌组织上观察到明显的villin免疫组化阳性染色,则这个肿瘤就极不可能为乳腺来源。
其他villin免疫组化染色通常为阴性表达的肿瘤还有:如卵巢浆液性癌、尿道移行细胞癌和前列腺癌。
间皮瘤也经常为villin阴性表达,因此在一些情况下Villin还可以作为鉴别间皮瘤和腺癌使用抗体的一种。
免疫组化项目及意义
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目录
1.免疫组化项目的定义
2.免疫组化的意义
3.免疫组化项目的应用
4.免疫组化项目的发展前景
正文
1.免疫组化项目的定义
免疫组化是一种实验室技术,它通过检测组织或细胞中特定蛋白质的表达,帮助研究人员了解这些蛋白质在生物体内的功能和作用。
免疫组化项目是通过这一技术来研究蛋白质在疾病发生、发展和治疗中的角色。
2.免疫组化的意义
免疫组化在生物医学研究中有着重要的意义。
首先,它可以帮助研究人员了解蛋白质的功能和作用,为疾病的诊断和治疗提供新的思路和靶点。
其次,免疫组化可以用于疾病标志物的发现和验证,为疾病的早期诊断和预后评估提供依据。
最后,免疫组化还可以用于药物筛选和药效评估,为新药研发提供支持。
3.免疫组化项目的应用
免疫组化项目在临床医学、基础研究和药物研发等领域有着广泛的应用。
在临床医学中,免疫组化主要用于疾病诊断、预后评估和疗效监测。
在基础研究中,免疫组化可以用于研究蛋白质的功能和作用,揭示疾病的发病机制。
在药物研发中,免疫组化可以用于药物筛选和药效评估,提高药物研发的成功率。
4.免疫组化项目的发展前景
随着生物医学研究的深入,免疫组化技术也在不断发展和完善。
肿瘤病理诊断新技术一、免疫组化技术免疫组化技术现已广泛应用于病理诊断,不仅在解决疑难病例诊断方面起着重要作用,随着人们医疗风险意识的增强,许多普通的病例也常常需要免疫组化进一步证实,因此成为病理科医生常规工作中不可缺少的重要工作、常规手段。
在小活检病理检查中免疫组化技术能明确地显示癌细胞的存在(如胃粘膜活检中的印戒细胞癌),可使微小癌、微小转移灶(淋巴结及骨髓)、甚至不易察觉的病变得以确诊。
通过乳腺癌激素受体(ER、PR)的检测,免疫组化技术在指导临床治疗方面已起到了重要的作用。
通过检测针对肿瘤基因产物(C-erbB2、P53、ALK、CD117等)的抗体还将进一步为分子靶向治疗提供重要的参考依据。
细胞增殖核抗原(Ki-67)等免疫组化染色可为肿瘤的预后提供依据。
免疫组化技术的局限性:至今无绝对特异的抗体!相当多的肿瘤缺乏特异的抗原表达;同一种抗原常常可在多种肿瘤中表达,不少肿瘤又由于分化太差或细胞分子结构改变而不表达相关的抗原。
不同抗体滴度有不同的阳性结果;内源性生物素造成假阳性,如肝细胞癌等;缺乏免疫组化的标准化(同一实验室及不同实验室间结果的一致性);定量结果的判断等还存在不少的问题尚待解决,如ER受体,有的实验室只要有阳性肿瘤细胞就视为阳性,而有的实验室则要至少20%细胞阳性才视为阳性,阳性标准往往是随意确定的,未经临床病理研究证实。
如何正确应用免疫组化呢? 要得到正确、有价值的免疫组化结果,免疫组化实验室规范、合适的技术操作(包括组织固定、抗原修复、检测系统、各类试剂的质量保证、染色技术等)是最重要的基础保证,但病理科医生在组织块的选择、抗体的选择、结果的判断等方面也起着不容忽视的作用。
二分子病理学这是继电镜、免疫组化之后的第三个浪潮。
其优点是反应特异、敏感,检测靶信号本质上不同,DNA检测温度固定影响小。
采用的方法包括PCR、滤膜杂交(斑点、印迹转移),原位杂交、荧光原位杂交(FISH)、显微切割技术、比较基因组杂交、生物芯片(基因芯片、蛋白质芯片、组织芯片)等。
免疫组化科普
免疫组化是一种用于检测组织切片中特定蛋白质表达的技术。
通过免疫组化技术,我们可以了解到组织切片中特定蛋白质的表达情况,从而帮助我们进行疾病的诊断和治疗。
在免疫组化中,我们常用的是抗体。
抗体是一种能够特异性地结合到目标蛋白质的分子。
在免疫组化中,我们通常会选择与目标蛋白质结构相似的抗体,将其标记上荧光素或酶等物质,再加入到组织切片中,经过反应后用显微镜观察标记物的分布情况。
免疫组化技术有着广泛的应用,例如在癌症诊断中,我们可以通过检测肿瘤组织中特定蛋白质的表达情况来判断病情的严重程度和预后。
在药物研发中,我们可以通过检测药物对特定蛋白质的影响来评估药物的疗效和毒性。
在病理学研究中,我们可以通过检测疾病组织中特定蛋白质的表达情况来了解疾病的发生机制和病理变化。
但是,在进行免疫组化检测时,我们也需要注意一些问题。
首先,抗体的选择非常重要,必须选择与目标蛋白质结构相似的抗体,否则可能会出现假阳性或假阴性的情况。
其次,免疫组化的结果受到许多因素的影响,例如组织处理的方法、抗体的浓度和反应时间等,因此需要进行严格的控制实验。
最后,免疫组化检测结果还需要结合临床病史和其他检测结果进行综合分析,才能得出准确的诊断和治疗方案。
总的来说,免疫组化是一种非常重要的检测技术,在医学研究和临床应用中都有着广泛的应用。
我们需要注意抗体的选择和实验的严格控制,以获得准确的检测结果,为疾病的诊断和治疗提供科学依据。
多重免疫组化临床应用
随着生物医学研究的飞速发展,免疫组化技术在我国临床诊断和研究中发挥着越来越重要的作用。
多重免疫组化技术是免疫组化的一种重要分支,通过同时检测多种抗原或抗体,为临床诊断、病情评估和治疗方案制定提供了更为精准的依据。
本文将对多重免疫组化技术的原理、应用领域及临床意义进行简要概述。
一、多重免疫组化技术原理
多重免疫组化技术是指在同一张组织切片上,同时使用多种抗体或抗原进行染色,从而实现对目标分子的多重检测。
该技术通过依次或同时暴露组织切片上的抗原或抗体,利用抗原抗体反应的原理,检测出目标抗原或抗体的表达情况。
相较于单一免疫组化技术,多重免疫组化技术具有更高的检测效率和准确性,能够为临床提供更为全面的信息。
二、多重免疫组化技术应用领域
1.肿瘤诊断与分期:多重免疫组化技术在肿瘤诊断中具有广泛应用,可通过检测肿瘤相关抗原或受体表达情况,协助临床医生进行肿瘤类型鉴别、病情评估和治疗方案制定。
2.感染性疾病诊断:多重免疫组化技术在感染性疾病诊断中也具有重要作用,可同时检测病原体抗原或抗体,提高病原体检测的准确性和敏感性。
3.自身免疫性疾病诊断:多重免疫组化技术可应用于自身免疫性疾病的诊断,如类风湿关节炎、系统性红斑狼疮等,通过检测患者体内多种自身抗体,有助于疾病的诊断和病情评估。
4.遗传代谢病诊断:多重免疫组化技术在遗传代谢病诊断中具有一定的应用价值,如检测遗传性凝血因子缺陷病、氨基酸代谢病等。
5.神经生物学研究:多重免疫组化技术可用于研究神经系统疾病的发生机制,如阿尔茨海默病、帕金森病等,为临床诊断和治疗提供理论依据。
三、多重免疫组化技术的临床意义
1.提高诊断准确性:多重免疫组化技术能够同时检测多种抗原或抗体,有助于临床医生全面了解患者的免疫状态,提高诊断准确性。
2.指导治疗方案:通过多重免疫组化技术检测患者体内多种抗原或抗体的表达情况,可以为临床医生制定针对性的治疗方案提供有力依据。
3.病情监测:多重免疫组化技术可用于病情监测,评估治疗效果,及时调整治疗方案。
4.预后评估:部分肿瘤患者术后易发生转移和复发,多重免疫组化技术可通过检测患者术后组织中相关抗原的表达情况,评估患者预后。
总之,多重免疫组化技术在临床诊断和研究中具有广泛的应用前景。
随着技术的不断优化和普及,多重免疫组化技术将为我国临床诊疗工作提供更为精准、全面的指导,助力患者得到更好的治疗。
然而,多重免疫组化技术在实际应用中也存在一定的局限性,如检测成本较高、操作复杂等,未来研究应着力于克服这些问题,进一步提升多重免疫组化技术在临床应用中的普及程度。