微生物的生长繁殖

每ml活菌数＝同一稀释度平均数×稀释倍数×5
注意：要三个以上重复平板平均计数；不适合丝状菌
C，比浊法 在一定波长下，测定菌悬液的光密度，以光密度 (optical density, 即O.D.)表示菌量。 注意： 测量应在菌浓度与O.D.成正比的线性范围内，否则不准
2.重量法 测定多细胞及丝状真菌生长情况的有效方法。 以干重（105℃）、湿重直接衡量微生物群体
P146
1.个体计数法 A.直接法
利用血球 计数板， 在显微镜 下计算一 定容积里 样品中微 生物的数 量。
缺点：
不适于1对m运m动2 细菌2的5（计1数6）；中格 需要相对高1的6（细2菌5浓）度小；格， 个体小的细共菌4在00显小微格镜下难以观察；
B.简接法
原理是每个活细菌在适宜的培养基和良好的生长条件下可 以通过生长形成菌落。
• 高密度培养常用于重组蛋白质药物的生产; • 主要的优势:节约成本.
六、微生物培养法概论
• 实验室培养法; • 生产实践中微生物培养法;
实验室培养法
固体培养法
好氧菌：斜面、琼脂平板等
厌氧菌：高层琼脂柱、、厌氧 培养皿、厌氧罐等
液体培养法
试管液体培养 三角瓶液体培养 摇瓶培养 台式发酵罐
生产实践中微生物培养法
μ ：比生长速率，每单位数量细菌
在单位时间增加的量 t：培养时间
重要参数:
（1）繁殖代数（n）
x2=x1·2n 以对数表示： lgx2=lgx1+nlg2
n= 3.322 (lgx2-lgx1)
（2）比生长速率常数（μ）
lgNt - lgN0) μ=
t - t0
（3）代时（G）:在群体生长里,细菌数量增加一

细菌生长繁殖的条件
细菌是微生物界中最为常见的一类生物，其生长和繁殖是微生物学研究的重要内容之一。

细菌生长繁殖需要一定的条件，下面我们将逐一介绍。

1. 营养物质
细菌生长繁殖需要一定的营养物质，包括碳源、氮源、矿物质元素和水等。

其中碳源是细菌生长所必需的主要营养物质，可分为有机碳源和无机碳源两类。

有机碳源包括糖类、脂肪酸、氨基酸等，无机碳源包括二氧化碳、碳酸盐等。

氮源也是细菌生长所必需的营养物质之一，主要包括蛋白质、氨基酸等。

此外，细菌还需要一定量的矿物质元素，如钾、钙、镁、铁等。

2. 适宜的温度
细菌生长繁殖的适宜温度范围因不同种类而异，一般来说，细菌的最适生长温度为20°C-40°C。

过高或过低的温度都会影响细菌的生长和繁殖。

当温度过高时，细菌的生长和繁殖速度会增加，但同时也会增加细菌死亡的风险;而当温度过低时，细菌的生长和繁殖速度会减缓，甚至停止。

3. pH 值
细菌生长繁殖的适宜 pH 值范围通常为 6.5-7.5。

不同的细菌对 pH 值的适应范围也有所不同。

当 pH 值过低或过高时，都会影响细菌的生长和繁殖。

过低的 pH 值会导致细菌失去活性，过高的pH 值则会使细菌的生长和繁殖受到抑制。

4. 氧气需求
细菌的生长繁殖与氧气需求密切相关。

一些细菌需要氧气进行呼吸代谢，称为需氧菌;而另一些细菌则在缺氧环境下生长繁殖，称为厌氧菌。

需氧菌通常在空气中生长繁殖，而厌氧菌则在缺氧环境下生长繁殖，如肠道内。

综上所述，细菌生长繁殖需要一定的营养物质、适宜的温度、pH 值和氧气需求等条件。

微生物的最适生长温度也就是积累代谢产物的最适温度微生物的生长与繁殖需要在一定的环境条件下进行，其中温度是最重要的因素之一。

不同种类的微生物有其不同的最适生长温度，有的适应在低温下生长，有的在中温下生长，还有的在高温下生长。

微生物在其最适生长温度下，代谢活动最为旺盛，能够有效地利用周围的资源进行生长和繁殖。

同时，这个温度也是微生物积累代谢产物的最适温度。

代谢产
物是微生物进行生命活动的结果，包括各种有机物、无机物、能量和细胞结构成分等。

在最适温度下，微生物的代谢活动进行得最为有效，代谢产物的生产和积累也最为明显。

代谢产物的积累对微生物自身的生命活动有很大的影响，一方面，某些代谢产物是微生物生存的必需品，对其生长发育起到关键作用；另一方面，过多的代谢产物的积累可能会对微生物的生命活动产生不利影响。

因此，微生物需要通过调节其代谢活动，以适应环境的变化，维持其生命活动的正常进行。

总的来说，“微生物的最适生长温度也就是积累代谢产物的最适温度”，这是因
为在这个温度下，微生物的生命活动进行得最为旺盛，代谢产物的产生和积累也最为明显。

然而，也应注意到微生物需要通过调节其生命活动，以适应环境的变化，保持其生存和发展。

恒化连续培养
随着细菌的生长，限制性因子的浓
度降低，致使细菌生长速率受限，但同 时通过自动控制系统来保持限制因子的 恒定流速，不断予以补充，就能使细菌 保持恒定的生长速率。 常见的限制性营养物质有作为氮源 的氨、氨基酸；作为碳源的葡萄糖、乳 酸及生长因子，无机盐等。
三、同步培养



微生物细胞极其微小，但它也有一个自小到大 的过程，即个体生长。要研究微生物的个体生 长，在技术上是极为困难的。 目前主要使用的方法是： 同步培养技术分析细胞各阶段的生物化学特性 变化。 电子显微镜观察细胞的超薄切片。
死亡原因？ 营养短缺；代谢毒物增 多；pH、Eh改变；溶氧 不足。
t
时间
稳定期与生产实践

指导思想：延长稳定期。 措施： 1.调节pH； 2.注意降温、通风； 3.中和排除有毒代谢产物； 4.稳定期是生产收获时期，注意把握好收获时机。
（4）衰亡期（老年）
死亡率＞出生率 ？ 细胞畸形 细胞死亡,出现自溶 有的微生物细胞产生或释放出一些产物。 如氨基酸、转化酶、抗生素等。现象。
单细胞微生物典型生长曲线
生 长 速 + 率 0 指 数 期
延滞期 指数期 稳定期 衰亡期
_
菌 数 目 的 对 数 值
延 滞 期
总菌数
稳定期
衰 亡 期
活菌数
0 时间t
微生物的数量很大，都是10的n次方，取对数作图时 方便，0-10代表1～1010
（1）延滞期－“万事开头难”

特征： 代谢活跃，个体体积、重量增加，
（2）指数期（青年）
快，平均代时（繁殖一代的时间）最短， 生长速率常数最大。 细胞的化学组成、形态、生理特性比较一致。