南方红豆杉茎叶提取物镇痛抗炎作用的实验研究
- 格式:pdf
- 大小:147.71 KB
- 文档页数:2
浙江中医杂志2015年8月第5O卷第8期
南方红豆杉茎叶提取物镇痛抗炎作用的实验研究
楼娉婷 夏爱萍 应 茵。
1 浙江中医药大学附属第三医院 浙江杭州310005
2 浙江省立同德医院 浙江杭州310012
摘要 目的:研究南方红豆杉提取物的抗炎和镇痛作用。方法:采用角叉菜胶致大鼠足跖肿胀模型评 价南方红豆杉茎叶提取物的抗炎作用,采用甲苯致痛小鼠模型评价其镇痛作用。结果:南方红豆杉茎
叶提取物各剂量组对角叉菜胶致大鼠足跖肿胀均有抑制作用,抗炎效应呈剂量相关性。各剂量组均能 显著减少甲醛致痛实验中小鼠的舔足次数(P<0.05,P<0.01)。结论:南方红豆杉茎叶提取物具有 良好的镇痛抗炎作用。
关键词 南方红豆杉茎叶提取物 镇痛 抗炎 实验研究
南方红豆杉又称紫杉、红榧、红豆杉,属我国一 级保护植物,为我国所特有。由于从红豆杉属植物的
树皮中提取的紫杉醇具有广谱、高效的抗癌作用,使 其成为是当今社会研究最热门的药用植物之一。目 前,南方红豆杉的茎叶利用率低,其价值没有完全体
现_1]。为验证南方红豆杉的临床疗效,寻找其有效部
位,本文采用乙醇渗漉的方式提取其茎叶中富集萜类 成分,将其制备成涂剂,局部给药。以角叉菜胶致大 鼠足跖肿胀模型及甲醛致痛小鼠模型对其镇痛、抗炎
作用进行药效学评价。通过该实验研究,以期为南方
红豆杉外用制剂的发展提供依据。 1材料与方法
1.1 药品与试剂:南方红豆杉茎叶由浙江中医药大 学附属第三医院中药房提供,系2012年5月采自浙 江省杭州市;阳性对照药双氯芬酸纳软膏(北京诺华
制药有限公司,批号:X3743)。 1.2 实验动物:雄性SD大鼠(SPF级),体重180
 ̄220g,由上海西普尔一必凯实验动物有限公司提供, 合格证号:2008001638711;雄性ICR小鼠(SPF
级),体重18~20g,由上海西普尔一必凯实验动物有 限公司提供,合格证号:2008001638706。 1.3红豆杉茎叶提取物涂剂的制备:取干燥南方红
豆杉茎叶1OOg,经初粉后,以75 乙醇浸渍过夜, 以5ml/min的流速,在室温下进行渗漉,渗漉体积
2L。收集渗漉液在35℃条件下,减压蒸馏回收乙醇, 得药物浸膏,备用。
称取不同量的药物浸膏,加入适量乙醇和二甲亚 砜并以水稀释,配制成含75 乙醇、10 二甲亚砜的
# 通讯作者:应 茵,E-mail:kingadams@163.com 3种剂量(O.1g药材/ml、0.3g药材/ml、0.9g药材/ m1)的涂剂。
1.4 角叉菜胶致大鼠足跖肿胀实验:取SD大鼠50 只,雄性,体重200±20g,随机分成5组,每组10 只。设为南方红豆杉茎叶提取物低剂量组(0.1g/
m1)、中剂量组(0.3g/m1)、高剂量组(0.9g/m1)、 双氯芬酸纳软膏组及模型组。以所得南方红豆杉涂剂 外用,每日给药2次,连续3天。末次给药30min
后,于大鼠足趾腱膜皮下注入1 角叉菜胶0.1ml致 炎,致炎后1h、2h、3h、4h用足趾测量器检测大鼠 足趾体积。
1.5 甲醛致痛实验:取ICR小鼠5O只,雄性,随机 分成5组,每组1O只。设为南方红豆杉茎叶提取物 低剂量组(O.1g/m1)、中剂量组(O.3g/m1)、高剂量 组(O.9g/m1)、双氯芬酸纳软膏组及模型组。以所得
南方红豆杉涂剂外用,每日给药2次,连续给药3 天。末次给药1h后,将5 甲醛溶液5O l注射至小 鼠标记爪足底侧皮,立即将小鼠放到玻璃箱中,记录 小鼠0~lOmin,lO ̄60min两个时相内舔足次数。
1.6 统计学处理:采用SPSS13.0统计软件进行分 析,组内比较用配对t检验,组间比较用方差检验,
计数资料用)c。检验。 2 结果 2.1 南方红豆杉茎叶提取物对角叉莱胶诱发的大鼠 足跖肿胀的影响:造模后1h、2h、3h及4h的数据显 示,角叉菜胶诱发的小鼠足跖肿胀在4h内呈持续增 长状态。双氯芬酸纳软膏、南方红豆杉茎叶提取物组
(O.1g/ml,0.3g/ml,0.9g/m1)在致炎1h后均开始 显示出对足跖肿胀的抑制作用,且红豆杉茎叶提取
物高、中、低剂量组在抑制大鼠足跖肿胀方面,呈 浙江中医杂志2015年8月第5O卷第8期
一定的剂量依赖性关系。高剂量组的抑制作用尤其
明显,在造模1h及2h后,小鼠足趾肿胀程度与模 型对照组比较,有显著性差异(P<O.05),其抑制 肿胀的效果优于阳性对照药。中剂量组次之,在致炎
1h后与模型对照组相比具有显著性差异(P<0.05)。 见表1。
表1各组小鼠足肿胀情况比较( ±s,m1)
注:与模型对照组比较,*P<O.05。
2.2 南方红豆杉茎叶提取物对小鼠甲醛致痛反应的 影响:实验结果显示,双氯芬酸纳软膏、红豆杉茎叶 提取物均能减少小鼠注射甲醛后0~lOmin、10~
60min两个时相的舔足时间。第一时相内,红豆杉茎
叶提取物虽能减少舔足时间,但差异无统计学意义
(P>O.05)。第二时相内,南方红豆杉茎叶提取物中、 高剂量组可有效减少小鼠的舔足次数,与模型组对照
组相比,有显著性差异(P<0.05)。见表2。实验结 果表明,南方红豆杉茎叶提取物对小鼠甲醛致痛反应
中,注射甲醛1O~60rain后有显著的抑制疼痛作用。
表2 各组小鼠添足次数比较(z±S,次)
注:与模型对照组比较,*P<O.05,**P<O.o1。
3讨论 南方红豆杉作为当前研究最热门的药用植物之
一,其作用机制成为研究的焦点。有学者研究发现红 豆杉叶内含有多种紫杉烷二萜化合物[2],能够影响炎
症因子,调节免疫L3]。
本文采用小鼠甲醛致痛模型和角叉菜胶诱发的大 鼠足跖肿胀模型研究南方红豆杉茎叶提取物的镇痛抗
炎作用。其中角叉菜胶诱发的大鼠足跖肿胀模型是筛
选抗炎药物的常规模型[4],常用来观察药物对急性炎 症过程的影响,在此模型中,南方红豆杉乙醇浸提取
物各剂量组对大鼠足跖肿胀均有抑制作用,其中高剂 量组能显著性抑制足跖肿胀作用且明显优于阳性药
物,可将其开发成治疗局部肿胀或关节的外用制剂。 另有报道称 ],红豆杉茎叶水提物具有一定的镇痛作
用,本文采用乙醇渗漉、低温回收溶剂的方式提取南 方红豆杉紫杉烷类成分,以甲醛致痛模型对其镇痛作 用进行对照研究,证实其为南方红豆杉镇痛作用有效
部位。通过对结果的分析,研究进一步发现南方红豆
杉茎叶提取物对甲醛造模后第二时相的反应具有显著 的抑制作用,对第一时相作用差。由于两个时相引起 疼痛的性质不同,在造模0~lOmin内发生的第一时 相反应,主要是甲醛直接作用于伤害性感受器引起,
为非炎症性疼痛;在造模1O~60min后发生的第二时 相反应,主要是由炎症机制参与所引起的疼痛[6]。据
此推测,南方红豆杉茎叶提取物的镇痛作用可能与参 与抗炎过程有关,具体作用机制有待进一步研究。
4参考文献 [1]马明东,刘跃建.红豆杉资源及开发利用综述[J].四川林业科 技,2004,25(1):21—25. [2]余龙江,兰文智.中国红豆杉叶浸膏中紫杉烷的分离纯化及 成分鉴定[J].林产化学与工业,2002,22(3):45—48. [3]朱婉萍,陈锐,鲁潇,等.紫杉醇脂质体对佐剂关节炎模型鼠 的治疗作用研究[J].浙江中医杂志,2012,47(6):406—407 [4]徐叔云.药理实验方法学[M].第2版.北京:人民卫生出版 社,1994:713-749. [5]童丽姣,江月仙,郭伟娣,等.红豆杉茎叶镇痛作用的实验研 究[J].浙江临床医学,2008,10(4):439—440 [-6]Steinar Hunskaar,Kjell Hole.The formalin test in mice:dis— sociation between inflammatory and non-inflammatory pain[J]. Pain,1987,30:103—114.
收稿日期 2014—10—16