二甲苯和无水乙醇的蒸馏实验

特点：
•塔板提供了汽液 分离的场所；
•每一块塔板是一 个混合分离器；
•足够多的板数可 使各组分较完全分 离。
说明：
1、下降的液相泡点tn-1与上升的气相露点tn+1不等， 当气液平衡时，两相温度相等tn，即传质伴有传热。 2、重组分由气相冷凝至液相，放出潜热，轻组分 由液相汽化成气相，需要潜热，二者同时发生，潜 热抵消；
6.4.2 精馏段操作线方程
V L D Vyn1 Lxn DxD
LD yn1 V xn V xD
L L D
xn
D L D
xD
令R
L D
——回流比
yn1
R R1
xn
xD R1
——精馏段操作线方程
精馏段操作线:
y
当R, D, xD为一定值时, 该操作线为一直线.
斜率: R L
xD
R1 V
p fB(t) fA(t) fB(t)
——泡点方程
气液两相平衡组成间的关系：
pA pyA pA0 xA
yA
pA0 P
xA
气相组成yA与温度（露点）的关系
yA
pA0 p
xA
pA0 p
p pB0 pA0 pB0
fA(t) p
p fB(t) fA(t) fB(t)
——露点方程
3、组成~温度图（t~x~y图)
缺点： 1.收率低； 2.设备重复量大，设备投资大； 3.能耗大，过程有相变。
问题：工业上如何实现？
2. 有回流的多次部分汽化和多次部分冷凝
6.3.3 连续精馏装置流程
１. 连续精馏装置 进料板：原料液进入 的那层塔板。
精馏段：进料板以上的 塔段。

结晶紫水溶液(0.1%)
货号：G1064
规格：100ml
保存：室温，避光，6个月。

产品说明：
结晶紫(Crystal violet)又称甲紫，属于碱性染料，可以和细胞核中的DNA结合，产生细胞核染色，从而将细胞核染成紫色。

结晶紫在细胞学、组织学和细菌学等方面应用极广，是一种优良的染色剂。

操作说明：（仅供参考）
1、样品处理
1对于石蜡切片：
二甲苯中脱蜡5～10min。

换用新鲜的二甲苯，再脱蜡5～10min。

无水乙醇5min。

90%乙醇2min。

70%乙醇2min。

蒸馏水2min。

2对于冰冻切片：
蒸馏水2min。

③对于培养细胞：
用4%多聚甲醛固定。

蒸馏水洗涤2分钟。

更换新鲜的蒸馏水，再洗涤2min。

2、结晶紫染色：
①结晶紫染色液染色。

②用蒸馏水或自来水充分洗涤，进行观察和拍照。

染色结果：
组织或细胞深紫色
注意事项：
1、结晶紫对人体有害，请注意适当防护。

2、第一次使用本试剂时建议先取1～2个样品做预实验。

3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

相关产品：
G1072结晶紫甲醇溶液2.5%
G1071结晶紫饱和甲醇溶液
G1070草酸铵结晶紫染色液。

HE染色试剂配置A：0.5~1%的伊红酒精溶液：称取伊红Y0.5~1g，加少量蒸馏水溶解后，再滴加冰醋酸直至浆糊状。

以滤纸过滤，将滤渣在烘箱中烤干后，以95%酒精（即工业酒精，如果不怕浪费，用无水乙醇配制也可）100毫升溶解。

B：苏木素染液配方：(配制3000ml，可按比列减少)苏木精6g无水乙醇100ml硫酸铝钾150g蒸馏水2000ml碘酸钠1.2g冰醋酸120ml甘油900ml配制方法：将苏木素溶于无水乙醇，再将硫酸铝钾溶于蒸馏水，溶解后将甘油倾入一起混合，最后加入冰醋酸和碘酸钠。

C：1%盐酸酒精分化液：将1毫升浓盐酸加入99毫升70%酒精中即可。

染色流程(1)二甲苯（Ⅰ）15min(2)二甲苯（Ⅱ）15min（3）二甲苯：无水乙醇=1:12min(4)100%乙醇（Ⅰ）5min(5)100%乙醇（Ⅱ）5min(6)80%乙醇5min(7)蒸馏水5min(8)苏木精液染色5min(9)流水稍洗去苏木精液1-3s(10)1%盐酸乙醇1-3s(11)稍水洗10-30s(12)蒸馏水过洗1-2s(13)0.5%伊红液染色1-3min(14)蒸馏水稍洗1-2s(15)80%乙醇稍洗1-2s(16)95%乙醇（Ⅰ）2-3s(17)95%乙醇（Ⅱ）3-5s(18)无水乙醇5-10min(19)石炭酸二甲苯5-10min(20)二甲苯（Ⅰ）2min(21)二甲苯（Ⅱ）2min(22)二甲苯（Ⅲ）2min(23)中性树胶封固注：①第（11）、（12）步可省去，（13）步冲水时间需延长至20-30min。

②第（21）步如果不用石炭酸二甲苯，可改用无水乙醇。

*冷冻切片HE染色步骤：（1）冰冻切片固定10～30s（2）稍水洗1～2s（3）苏木精液染色（60℃）30～60s（4）流水洗去苏木精液5～10s（5）1%盐酸乙醇1～3s（6）稍水洗1～2s（7）促蓝液返蓝5～10s（8）流水冲洗15～30s（9）0.5%曙红液染色30～60s（10）蒸馏水稍洗1～2s（11）80%乙醇1～2s（12）95%乙醇1～2s（13）无水乙醇1～2s（14）石炭酸二甲苯2～3s（15）二甲苯（Ⅰ）2～3s（16）二甲苯（Ⅱ）2～3s（17）中性树胶封固。

第1篇一、实验目的1. 掌握组织切片的制作方法。

2. 学习使用显微镜观察组织切片。

3. 了解动物基本组织的形态和结构。

二、实验原理组织切片是将动物组织制成薄片，用于显微镜观察的一种技术。

通过观察组织切片，可以了解组织的形态、结构和功能。

三、实验材料与仪器1. 实验材料：兔子肝脏组织、石蜡、切片刀、显微镜等。

2. 实验仪器：显微镜、切片机、烤箱、载玻片、盖玻片、酒精灯、染色缸等。

四、实验步骤1. 取材：将兔子肝脏组织固定于4%多聚甲醛溶液中，固定24小时以上。

2. 脱水：将固定好的组织从固定液中取出，放入75%酒精中浸泡1小时，依次放入85%酒精、90%酒精、95%酒精和无水乙醇中浸泡各1小时。

3. 浸蜡：将无水乙醇中的组织取出，放入醇苯中浸泡5-10分钟，依次放入二甲苯中浸泡各5-10分钟，最后放入熔化的石蜡中浸泡1小时。

4. 包埋：将浸好蜡的组织取出，放入预热的包埋机中包埋，待蜡凝固后取出。

5. 切片：将包埋好的蜡块置于切片机上，切取4微米厚的切片。

6. 染色：将切片置于载玻片上，用HE染色法进行染色。

7. 观察：使用显微镜观察染色后的切片，记录观察结果。

五、实验结果1. 肝细胞：细胞呈多边形，细胞核圆形，位于细胞中央，细胞质呈嗜酸性。

2. 肝窦：肝窦壁由内皮细胞构成，细胞呈扁平状，核位于细胞边缘。

3. 肝细胞脂肪变性：部分肝细胞浆内出现大小不等、数量不一的圆形空泡，肝小叶的中央带和中间带改变较明显。

六、实验讨论1. 组织切片技术是生物学研究中常用的一种方法，通过观察组织切片，可以了解组织的形态、结构和功能。

2. HE染色法是一种常用的染色方法，可以使组织切片中的细胞核和细胞质染色，便于观察。

3. 在实验过程中，应注意切片的厚度和染色时间，以保证观察结果的准确性。

七、实验结论通过本次实验，我们掌握了组织切片的制作方法，学会了使用显微镜观察组织切片，了解了动物基本组织的形态和结构。

八、实验反思1. 在实验过程中，应注意切片的厚度和染色时间，以保证观察结果的准确性。