植物根系活力检测试剂盒(萘胺比色法)
简介：
植物根系是活跃的吸收器官和合成器官，根的生长情况和代谢水平即根系活力直接影响植物地上部的生长和营养状况以及最终产量，是植物生长的重要生理指标之一。根系能氧化萘胺生成红色的萘胺化合物，根系对萘胺的氧化能力与其呼吸强度有密切联系。可以根据根系表面着色深浅，通过定量溶液中未被氧化的萘胺的量，以定量测定根系活力。
Leagene 植物根系活力检测试剂盒(萘胺比色法)检测原理是在弱酸性条件下，以萘胺为底物，萘胺与对氨基苯磺酸、亚硝酸盐作用生成稳定的红色偶氮化合物，于分光光度计检测吸光度，以吸光度变化所需萘胺进行计算。该试剂盒主要用于定量或定性测定植物根系活力。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：
自备材料：
1、 蒸馏水
2、 滤纸
3、 离心管或试管
4、 恒温箱或水浴锅
5、 比色杯
6、 分光光度计
操作步骤(仅供参考)：
1、 配制根系Assay buffer 工作液：取适量萘胺标准(100μg/ml)、根系Assay buffer ，按
萘胺标准(100μg/ml)：根系Assay buffer ：蒸馏水一定比例混合，即为根系Assay buffer 工作液，即配即用，不宜久置。
2、 稀释标准品：取萘胺标准溶液(100μg/ml)，按下表稀释。
加入物(ml)
1
2
3
4
5
6
编号 名称
TP1013 60T Storage
试剂(A): 萘胺标准(100μg/ml) 500ml RT 避光 试剂(B): 根系Assay buffer 500ml RT 试剂(C): 磺胺酸显色液 42ml
RT 避光 使用说明书
1份
萘胺标准(100μg/ml) 0.1 0.2 0.4 0.6 0.8 1
蒸馏水 1.9 1.8 1.6 1.4 1.2 1
萘胺浓度(μg/ml) 5 10 20 30 40 50
3、准备样品：取植物须根系，洗净，用滤纸吸干，完全浸没于根系Assay buffer工作液，
室温静置，取浸泡液即为待测样品。
4、加样：按照下表设置空白管、对照管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并
注意避免产生气泡。如果样品中的根系活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定，样品的检测最好能设置平行管，求平均值。
加入物(ml) 空白管标准管对照管测定管
根系Assay buffer工作液－－ 1.2 －
系列萘胺标准(1-6号管) － 1.2－－
待测样品－－－ 1.2
蒸馏水13.812.612.6 12.6
磺胺酸显色液0.60.60.6 0.6
亚硝酸显色液0.60.60.6 0.6
5、根系检测：将系列标准管室温静置，比色杯光径，以空白管调零，以分光光度计测定系
列标准管(1-6号)吸光度。将对照管、测定管室温静置，比色杯光径1.0cm，以分光光度计测定处对照管、测定管的吸光度(A对照0、A测定0)；避光孵育后，再以分光光度计测定处标准管、测定管的吸光度(A对照1、A测定1)。
计算：
以吸光度值为纵坐标，以萘胺浓度为横坐标，绘制萘胺标准曲线，根据吸光度与浓度关系直接计算回归方程，根据回归方程计算出A对照0、A测定0 、A对照1、A测定1所对应的浓度，即C对照0、C测定0 、C对照1、C测定1。
根系活力(μg/ml·g·h)=ΔC/(W×t)
式中：ΔC=(C测定1-C测定0)-(C对照1-C对照0)
W=植物须根系的重量(g)
t=孵育时间(h)=1(h)
注意事项：
1、磺胺酸显色液易挥发，请密闭保存，否则检测效率下降。
2、提高温度可以增加反应速度，但会降低重氮盐的稳定性，所以反应需在相同条件下进
行。
3、如果没有分光光度计，也可以使用普通的酶标仪测定，但应注意酶标板每孔最大体积。
4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：6个月有效。
附录(备选)-定性检测：
1、挖取处于不同生长状态的水生根系植株(如水稻等)数株，洗净根部后再用滤纸吸去根上吸附的水分。
2、取适量的萘胺标准(100μg/ml)，按萘胺标准(100μg/ml)：蒸馏水=1：3混合，即为萘胺溶液(25μg/ml)。
3、将植株完全浸没于萘胺溶液(25μg/ml)，避光静置24-36h，观察根系着色。
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