红缘天牛成虫对葡萄挥发物的EAG和行为反应张嫣;王星霁;张玲玲;李敏;刘强【摘要】为了研制对红缘天牛成虫具有较强引诱活性的诱剂,从其寄主植物葡萄的植株中选取6种挥发物,即1-戊烯-3-醇、亚油酸甲酯、4-甲基-1-戊醇、反式-2-己烯-1-醇、罗勒烯和乙酸乙酯,以前5种为单组分诱剂,并且将它们与乙酸乙酯按照不同组分和比例配制成14种多组分配方,用来测试红缘天牛成虫对这些诱剂的触角电位(EAG)和嗅觉行为反应.结果表明:对雌虫的EAG测试中,只有1-戊烯-3-醇的引诱活性较大,与对照相比差异具有统计学意义(P＜0.05);行为反应测试中,组合配方P1、P2、P3和P8、反式-2-己烯-1-醇对雌虫的引诱活性较大.雄虫的EAG反应结果中,亚油酸甲酯、4-甲基-1-戊醇、1-戊烯-3醇、P1等都对雄虫具有EAG活性,但只有亚油酸甲酯和4-甲基-1-戊醇与对照之间的差异具有统计学意义(P＜0.05);行为反应方面,罗勒烯、4-甲基-1-戊醇、P1、P2和P3等对雄虫具有引诱活性,罗勒烯的活性最大.由此认为,对于雌虫,组合配方的引诱活性总体上要好于单一组分;对于雄虫,单一组分的引诱活性要好于组合配方.【期刊名称】《天津师范大学学报（自然科学版）》【年(卷),期】2017(037)002【总页数】6页(P30-35)【关键词】红缘天牛;葡萄;挥发物;电生理反应;行为反应;引诱活性【作者】张嫣;王星霁;张玲玲;李敏;刘强【作者单位】天津师范大学生命科学学院,天津300387;天津师范大学天津市动植物抗性重点实验室,天津300387【正文语种】中文【中图分类】Q965红缘天牛（Asias halodendri）是天牛科（Cerambycidae）的一种重要蛀干害虫，寄主植物多达30种，在我国大部分地区均有分布[1].红缘天牛对沙棘（Hippophae rhamnoides L.）和四合木（Tetraena mongolica Maxim）危害极其严重[2-4]，在内蒙古西鄂尔多斯四合木核心区，红缘天牛可能已成为造成近期该地区四合木灭绝的主要原因之一[5].在该地区，采用林间防治、虫生真菌、细菌喷洒等对于防治红缘天牛效果均不理想.此外，由于红缘天牛有推出虫粪、木屑、蛀食出新虫道的习性，传统的化学防治具有很大局限性.利用植物源引诱剂治理天牛成虫，可以发挥有效的控制效果.如结合植物挥发物与天牛性信息素对星天牛、光肩星天牛、家天牛、褐梗天牛及松墨天牛等进行诱捕监测[6-10]，均取得了很好的诱捕效果；利用侧柏研制植物源引诱剂对双条杉天牛进行林间引诱，诱捕率高达86.6%[11].近年来，一些研究[12]中利用红缘天牛的寄主植物粗提物和挥发性活性物质研制出红缘天牛的引诱剂，对于挥发物的有效化学成分也有了一定的了解，目前已有对杏不同部位[1]、沙枣花[13]、沙棘[14]、枣树[15]等挥发物质活性的研究报道.葡萄也是红缘天牛的主要寄主植物之一.为了从葡萄中获得丰富高效的植物源引诱剂，本研究选取了葡萄植株不同部位的6种挥发性活性物质，以5种单一成分作为诱剂，并且以不同组分和比例配制成14种组合诱剂，测试红缘天牛雌虫和雄虫对19种化学物质的触角电位（EAG）和嗅觉行为反应.以期为研制高效无污染的红缘天牛诱剂提供信息资料.1.1 材料和仪器红缘天牛成虫：2015年5月采自西鄂尔多斯国家级自然保护区四合木核心区.将雌、雄分开，每10只放入通气良好的塑料瓶中，置于室内，确保天牛处于健康状态，备用.根据葡萄健康株、机械损伤株[16]以及离体根段挥发物[17]的分析结果，去除已经测定过的种类，选取分子质量在100×103～200×103之间的6种挥发物用于测定，包括：1-戊烯-3-醇，葡萄健康株挥发物成分，纯度＞97%，北京百灵威科技有限公司；反式-2-己烯-1-醇，机械损伤株挥发物成分，纯度96%，北京百灵威科技有限公司；4-甲基-1-戊醇和亚油酸甲酯，离体根段挥发成分，纯度分别为99%和＞95%，北京百灵威科技有限公司；罗勒烯，被取食植株挥发成分，纯度≥90%，上海晶纯生化科技股份有限公司；乙酸乙酯，机械损伤株挥发成分，纯度为99.5%，天津市江天化工有限公司.以液体石蜡为溶剂（纯度99%，天津市光复精细化工研究所）.触角电位仪由荷兰SYNTECH公司生产，包括微操作仪（SYNTECHMP-15）、刺激控制器（SYNTECH CS-55）和数据采集系统（SYNTECH IDAC-232）.Y型嗅觉仪由大气采样仪（QC-1S，北京市劳动保护科学研究所）、分流装置和Y型玻璃管构成，Y型玻璃管的测试臂长20 cm，内径为2 cm，两臂夹角为90°.1.2 方法以液体石蜡为溶剂，分别将1-戊烯-3-醇、反式-2-己烯-1-醇、亚油酸甲酯、4-甲基-1-戊醇和罗勒烯5种化合物配制成体积分数为5%、2.5%、1%、0.1%、0.01%、0.005%、0.001%和0.000 5%的溶液，测定红缘天牛雌、雄虫对不同化合物不同体积分数的触角电位（以液体石蜡为空白对照）和嗅觉行为反应.在引诱活性范围内，选择EAG反应相对值较高的化合物与乙酸乙酯（根据陈易彤等[18]的结果设定其体积分数为1%）按照表1中的组分和体积比制成14种组合配方，对红缘天牛雌、雄虫进行生物活性测定.具体的EAG和嗅觉行为测定方法参照文献[1].1.3 统计分析触角电位相对值（EAG相对值）及行为选择结果的计算方法参照文献[1]，具体如下：（1）EAG反应相对值（V）的计算式中：R代表刺激物的EAG反应值；C1和C2分别为刺激物作用前后2个对照的EAG值，以液体石蜡混合气体的反应结果获得对照反应值.（2）行为选择结果的计算式中：b为选择臂的天牛数量；c为对照臂的天牛数量.用卡方检验确定行为选择结果的差异是否具有统计学意义，当≥3.84时，差异具有统计学意义，当≥6.63时，差异具有高度统计学意义.利用SPSS17.0统计软件中的Tukey多重比较和配对T检验法比较雌、雄成虫对系列挥发物的反应差异.2.1 红缘天牛成虫对5种单一化合物的EAG反应红缘天牛雌虫和雄虫对5种化合物的EAG反应测定结果如图1所示.由图1（a）可以看出，红缘天牛雌虫对5种供试化合物均表现出一定的EAG反应，但最大EAG反应相对值对应的化合物浓度存在较大差异.1-戊烯-3-醇在体积分数为1%时，雌虫对该化合物的EAG反应相对值最大，为1.44（P＜0.05，与对照的差异具有统计学意义）；其次是4-甲基-1-戊醇，该化合物在体积分数为0.01%时，雌虫的EAG反应相对值为1.20；再次是反式-2-己烯-1-醇，该化合物在体积分数为0.005%时，雌虫的EAG反应相对值为1.09；罗勒烯在体积分数为0.01%时，雌虫的EAG反应相对值略低于反式-2-己烯-1-醇，为 1.07；亚油酸甲酯在体积分数为0.005%时，雌虫的EAG反应相对值为1.02，低于其他4种化合物的最大值.由图1（b）可以看出，亚油酸甲酯的体积分数为0.005%时，红缘天牛雄虫对该化合物的EAG反应相对值最大，为1.61（P＜0.05，与对照的差异具有统计学意义）；其次是4-甲基-1-戊醇，该化合物在体积分数为1%时，雄虫的EAG反应相对值为1.47（P＜0.05，与对照的差异具有统计学意义）；1-戊烯-3-醇在体积分数为1%时，雄虫对该化合物的EAG反应相对值为1.31；反式-2-己烯-1-醇和罗勒烯的体积分数均为0.1%时，雄虫对这2种化合物的EAG反应相对值最大，分别为1.16和1.12.综合红缘天牛雌虫和雄虫对不同体积分数的5种单一化合物的EAG反应结果可以看出，雌虫对体积分数为1%的1-戊烯-3-醇的EAG反应值最高，其次是0.01%的4-甲基-1-戊醇；雄虫对0.005%的亚油酸甲酯的EAG反应值最高，其次是1%的4-甲基-1-戊醇.2.2 红缘天牛成虫对5种单一化合物的嗅觉行为反应红缘天牛成虫对不同体积分数单一化合物的嗅觉行为反应测试结果如图2所示. 由图2（a）可以看出，红缘天牛雌虫对体积分数为0.001%的反式-2-己烯-1-醇的相对选择率最大，为33.33%；其次是体积分数为1%的1-戊烯-3-醇和0.001%的亚油酸甲酯，在这2种化合物中，雌虫的最大相对选择率均为26.70%；4-甲基-1-戊醇的体积分数为0.005%时，雌虫对该种化合物的相对选择率最大，为13.33%；罗勒烯的体积分数为0.01%时，雌虫对该种化合物的相对选择率最大，为6.67%.由图2（b）可以看出，红缘天牛雄虫对体积分数为0.01%的罗勒烯的相对选择率最大，为33.33%；其次是体积分数为0.005%的4-甲基-1-戊醇，雄虫对该化合物的最大相对选择率为26.67%；反式-2-己烯-1-醇和亚油酸甲酯的体积分数分别为0.01%和0.005%时，雄虫对这2种化合物的相对选择率最大，均为13.33%；1-戊烯-3-醇的体积分数为0.1%时，雄虫对该化合物的相对选择率最大，为6.67%.嗅觉行为测试结果还显示，每种化合物均在一定范围内对红缘天牛具有引诱活性，在引诱活性浓度范围之外则对红缘天牛表现出不同程度的忌避作用.如1-戊烯-3-醇，雌虫在体积分数为0.1%～2.5%范围内表现为选择作用，在其他浓度范围内则表现为不同程度的忌避作用；雄虫在体积分数为0.005%～0.1%范围内表现为选择作用，在其他浓度范围内表现为不同程度的忌避作用.对于亚油酸甲酯，雌、雄虫均在体积分数0.001%～1%的范围内表现出选择作用，在其他浓度范围内表现出忌避作用.2.3 红缘天牛成虫对14种组合配方的EAG反应测试红缘天牛对14种组合配方的EAG反应，结果如表2所示.由表2可以看出，在14种配方中，红缘天牛雌虫仅对P11和P2的EAG反应相对值大于对照，对其他配方的数值则均低于对照.雄虫能产生明显EAG反应的配方较多，EAG相对值由强到弱的配方依次为P1、P12、P13、P3、P2、P6.2.4 红缘天牛成虫对14种组合配方的嗅觉行为反应测试红缘天牛对14种组合配方的嗅觉行为反应，结果如表3所示.由表3可以看出，对雌虫的嗅觉行为测试中，P1、P2、P3、P6、P7、P8、P11、P12、P13共9种配方表现出了不同程度的引诱活性，P9、P14配方没有引诱活性，P4、P5和P10配方表现为忌避作用.P1、P2和P8这3种配方的引诱活性较高，与对照的差异具有统计学意义（P＜0.05）.对雄虫的行为测试中，P1、P2、P3、P4、P10、P12、P14共7种配方表现出不同程度的引诱活性，P5、P9、P11、P13配方没有引诱活性，P6、P7、P8配方有忌避作用.引诱活性最好的配方是P2和P3，相对选择率均为26.67%，P4、P12、P14的引诱活性最低，相对选择率均为6.67%.植物挥发物在植食性昆虫的寄主选择中起着重要作用[19]，植食性昆虫在远距离迁飞阶段，可通过植物挥发物的有效“直接子系统”对寄主植物进行识别[20-21].本研究选取了从葡萄植株不同部位分离出的6种具有挥发性的化合物，即1-戊烯-3醇、反式-2-己烯-1-醇、亚油酸甲酯、4-甲基-1-戊醇、罗勒烯和乙酸乙酯，以前5种为单组分诱剂，同时将这5种化合物与乙酸乙酯以不同的组分和比例配制成14种组合配方，对红缘天牛雌、雄虫进行EAG和嗅觉行为反应测试.总的来看，雌虫的EAG反应结果中，只有1-戊烯-3-醇与对照之间的差异具有统计学意义（P ＜0.05），4-甲基-1-戊醇、P2和P11的EAG反应相对值大于对照，但差异不具有统计学意义（P＞0.05）；而嗅觉行为反应方面，组合配方P1、P2、P3和P8、反式-2-己烯-1-醇对雌虫的引诱活性较大，其中P1、P2和P8与对照之间的差异具有统计学意义（P＜0.05）.雄虫的EAG反应结果中，亚油酸甲酯、4-甲基-1-戊醇、1-戊烯-3醇、P1等都对雄虫具有EAG活性，但只有亚油酸甲酯和4-甲基-1-戊醇的活性与对照相比差异具有统计学意义（P＜0.05）；嗅觉行为反应方面，罗勒烯、4-甲基-1-戊醇、P1、P2和P3等对雄虫具有引诱活性，罗勒烯的活性最大.19种诱剂对于红缘天牛雌、雄虫的引诱活性存在较大差异，除了引诱活性的强弱顺序不同外，试剂种类也存在差异.如对于雌虫，配方P11有引诱活性而P12没有引诱活性；对于雄虫，P12有引诱活性而P11没有引诱活性.对于雌虫，组合配方的引诱活性总体上要好于单一组分；对于雄虫，单组分的引诱活性要好于组合配方，这与张嫣等[22]的研究结果类似.红缘天牛雌、雄虫对于同一种诱剂的行为反应存在差异，雌虫对寄主挥发物的选择性往往大于雄虫，这可能与不同性别的成虫对于寄主的依赖性和需求不同有关.植物挥发物对于雌虫除了有助于其选择寄主进行补充营养外，还在选择交配场所、产卵场所等繁殖后代的行为中具有更重要的引导作用；而对于雄虫往往只是在成虫选择补充营养的寄主或者交尾场所有引导作用[23].多数情况下，EAG反应并不能代表昆虫的行为反应，如配方P1、P2、P8对雌虫的EAG反应值与对照之间的差异不具有统计学意义，在行为测试中却对雌虫表现出显著的引诱活性.这可能是因为红缘天牛触角中的少数神经元在行为选择中起重要作用，而EAG只是检测整个触角对化合物反应后电位的变化.因此不能仅靠昆虫触角EAG反应程度来判定昆虫行为反应的大小[23].【相关文献】[1] 张嫣，刘强.红缘天牛成虫对杏树挥发物的生理和行为反应[J].环境昆虫学报，2016，38（2）：386-394.ZHANG Y，LIU Q.Research on the EAG and behavial responses of Asias halodendri to the plant Prunus armeniaca′s volatiles[J].Journal of 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第５２卷第３期东㊀北㊀林㊀业㊀大㊀学㊀学㊀报Ｖｏｌ．５２Ｎｏ．３２０２４年３月ＪＯＵＲＮＡＬＯＦＮＯＲＴＨＥＡＳＴＦＯＲＥＳＴＲＹＵＮＩＶＥＲＳＩＴＹＭａｒ．２０２４１）中央引导地方科技发展专项项目（桂科ＺＹ２１１９５０１９）；桉蝙蛾综合防控技术开发项目（ＹＣＳＷ２０２２０７９）；国家自然科学基金青年科学基金项目（３２００１３２１）㊂第一作者简介：杨梦君，女，１９９９年１月生，广西高校亚热带人工林培育与利用重点实验室（广西大学）㊁广西大学林学院㊁广西森林生态与保育重点实验室（广西大学），硕士研究生㊂Ｅ－ｍａｉｌ：ｙａｎｇ⁃ｍｅｎｇｊｕｎ１１２３＠１６３．ｃｏｍ㊂通信作者：胡平，广西高校亚热带人工林培育与利用重点实验室（广西大学）㊁广西大学林学院㊁广西森林生态与保育重点实验室（广西大学），副教授㊂Ｅ－ｍａｉｌ：ｈｕｐｉｎｇｃｓ＠１６３．ｃｏｍ㊂收稿日期：２０２３年８月１３日㊂责任编辑：李春雪㊂松墨天牛对小蠹危害后马尾松挥发物的气相色谱－触角电位联用技术反应１）杨梦君㊀鲁进韬㊀许原㊀陈晓㊀杨振德㊀熊运凡㊀胡平（广西高校亚热带人工林培育与利用重点实验室（广西大学），南宁，５３０００４）㊀㊀摘㊀要㊀为探究松树材小蠹（ＸｙｌｅｂｏｒｕｓｆｅｓｔｉｖｕｓＥｉｃｈｈｏｆｆ）与松墨天牛（ＭｏｎｏｃｈａｍｕｓａｌｔｅｒｎａｔｕｓＨｏｐｅ）之间协同危害马尾松（ＰｉｎｕｓｍａｓｓｏｎｉａｎａＬａｍｂ）的机制，防控松墨天牛对松材线虫病的传播，采用动态顶空吸附的方法，收集了受松材线虫感染和松树材小蠹蛀干危害后的马尾松侧枝㊁以及其生长端上的１年生松梢的挥发物，利用气相色谱－质谱联用技术（ＧＣ－ＭＳ）和气相色谱－触角电位联用技术（ＧＣ－ＥＡＤ），鉴定和筛选了能引起未交配松墨天牛在营养补充时期成虫触角电位反应的组分㊂结果表明：在鉴定出的２４种化合物中有８种为活性物质，分别是α－蒎烯㊁莰烯㊁左旋－β－蒎烯㊁右旋萜二烯㊁长叶烯㊁假柠檬烯㊁萜品油烯和β－石竹烯㊂结合文献分析，推测α－蒎烯㊁左旋－β－蒎烯㊁莰烯㊁右旋萜二烯和β－石竹烯在吸引天牛取食方面有重要作用，并且假柠檬烯与右旋萜二烯两组分可能与小蠹危害有关㊂后续将通过室内行为试验进一步筛选能吸引未交配松墨天牛成虫的物质㊂关键词㊀松墨天牛；马尾松；松树材小蠹；植物挥发物；触角电位反应分类号㊀Ｓ７６３．７ＧＣ－ＥＡＤＴｅｃｈｎｉｑｕｅＲｅａｃｔｉｏｎｏｆＰｉｎｕｓｍａｓｓｏｎｉａｎａＶｏｌａｔｉｌｅＣｏｍｐｏｕｎｄｓＥｍｉｔｔｅｄＡｆｔｅｒＭｏｎｏｃｈａｍｕｓａｌｔｅｒｎａｔｕｓＨａｒｍｆｕｌＥｆｆｅｃｔｏｎＸｙｌｅｂｏｒｕｓｆｅｓｔｉｖｕｓ／／ＹａｎｇＭｅｎｇｊｕｎ，ＬｕＪｉｎｔａｏ，ＸｕＹｕａｎ，ＣｈｅｎＸｉａｏ，ＹａｎｇＺｈｅｎｄｅ，ＸｉｏｎｇＹｕｎｆａｎ，ＨｕＰｉｎｇ（ＧｕａｎｇｘｉＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｏｆＣｕｌｔｉｖａｔｉｏｎａｎｄＵｔｉｌｉｚａｔｉｏｎｏｆＳｕｂｔｒｏｐｉｃａｌＰｌａｎｔａｔｉｏｎＦｏｒｅｓｔｓｉｎＣｏｌｌｅｇｅｓａｎｄＵｎｉｖｅｒｓｉ⁃ｔｉｅｓ（ＧｕａｎｇｘｉＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ），Ｎａｎｎｉｎｇ５４０００３，Ｐ．Ｒ．Ｃｈｉｎａ）／／ＪｏｕｒｎａｌｏｆＮｏｒｔｈｅａｓｔＦｏｒｅｓｔｒｙＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，２０２４，５２（３）：１４１－１４６．ＩｎｏｒｄｅｒｔｏｅｘｐｌｏｒｅｔｈｅｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｓｙｎｅｒｇｉｓｔｉｃｄａｍａｇｅｔｏＰｉｎｕｓｍａｓｓｏｎｉａｎａＬａｍｂｂｙＸｙｌｅｂｏｒｕｓｆｅｓｔｉｖｕｓＥｉｃｈｈｏｆｆａｎｄＭｏｎｏｃｈａｍｕｓａｌｔｅｒｎａｔｕｓＨｏｐｅ，ａｎｄｔｏｃｏｎｔｒｏｌｔｈｅｓｐｒｅａｄｏｆＢｕｒｓａｐｈｅｌｅｎｃｈｕｓｘｙｌｏｐｈｉｌｕｓｄｉｓｅａｓｅｂｙＭ．ａｌｔｅｒｎａｔｕｓＨｏｐｅ，ｔｈｅｖｏｌａｔｉｌｅｃｏｍｐｏｕｎｄｓｆｒｏｍＰ．ｍａｓｓｏｎｉａｎａｌａｔｅｒａｌｂｒａｎｃｈｅｓａｆｆｅｃｔｅｄｂｙＢ．ｘｙｌｏｐｈｉｌｕｓｉｎｆｅｃｔｉｏｎａｎｄｄａｍａｇｅｂｙＸ．ｆｅｓｔｉｖｕｓｗｅｒｅｃｏｌｌｅｃｔｅｄｕｓｉｎｇｄｙｎａｍｉｃｈｅａｄｓｐａｃｅａｄｓｏｒｐｔｉｏｎ．Ｔｈｅｖｏｌａｔｉｌｅｃｏｍｐｏｕｎｄｓｆｒｏｍｔｈｅｏｎｅ⁃ｙｅａｒ⁃ｏｌｄｐｉｎｅｓｈｏｏｔｓａｔｔｈｅｇｒｏｗｉｎｇｅｎｄｗｅｒｅａｌｓｏｃｏｌｌｅｃｔｅｄ．ＧＣ－ＭＳａｎｄＧＣ－ＥＡＤｔｅｃｈｎｉｑｕｅｓｗｅｒｅｕｓｅｄｔｏｉｄｅｎｔｉｆｙａｎｄｓｃｒｅｅｎｔｈｅｃｏｍｐｏｎｅｎｔｓｔｈａｔｅｌｉｃｉｔｅｄｅｌｅｃ⁃ｔｒｏａｎｔｅｎｎｏｇｒａｍｒｅｓｐｏｎｓｅｓｆｒｏｍａｄｕｌｔｓｏｆｕｎｍａｔｅｄＭ．ａｌｔｅｒｎａｔｕｓｄｕｒｉｎｇｔｈｅｎｕｔｒｉｅｎｔｒｅｐｌｅｎｉｓｈｍｅｎｔｐｅｒｉｏｄ．Ｔｈｅｒｅｓｕｌｔｓｓｈｏｗｅｄｔｈａｔａｍｏｎｇｔｈｅ２４ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄｃｏｍｐｏｕｎｄｓ，８ｗｅｒｅａｃｔｉｖｅｓｕｂｓｔａｎｃｅｓ，ｉｎｃｌｕｄｉｎｇα－ｐｉｎｅｎｅ，ｃａｍｐｈｅｎｅ，（１Ｓ）－（１）－β－Ｐｉｎｅｎｅ，（＋）－Ｌｉｍｏｎｅｎｅ，ｌｏｎｇｉｆｏｌｅｎｅ，Ｐｓｅｕｄｏｌｉｍｏｎｅｎｅ，ｔｅｒｐｉｎｏｌｅｎｅ，ａｎｄβ－ｃａｒｙｏｐｈｙｌｌｅｎｅ．Ｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈｌｉｔｅｒａｔｕｒｅａ⁃ｎａｌｙｓｉｓ，ｉｔｉｓｓｐｅｃｕｌａｔｅｄｔｈａｔα－ｐｉｎｅｎｅ，（１Ｓ）－（１）－β－Ｐｉｎｅｎｅ，ｃａｍｐｈｅｎｅ，（＋）－Ｌｉｍｏｎｅｎｅ，ａｎｄβ－ｃａｒｙｏｐｈｙｌｌｅｎｅｐｌａｙｉｍｐｏｒｔａｎｔｒｏｌｅｓｉｎａｔｔｒａｃｔｉｎｇＭ．ａｌｔｅｒｎａｔｕｓｆｏｒｆｅｅｄｉｎｇ，ａｎｄｔｈａｔＰｓｅｕｄｏｌｉｍｏｎｅｎｅａｎｄ（＋）－ＬｉｍｏｎｅｎｅｍａｙｂｅａｓｓｏｃｉａｔｅｄｗｉｔｈＸ．ｆｅｓｔｉｖｕｓｈａｒｍ．Ｆｏｌｌｏｗ－ｕｐｉｎｄｏｏｒｂｅｈａｖｉｏｒａｌｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓｗｉｌｌｆｕｒｔｈｅｒｓｃｒｅｅｎｓｕｂｓｔａｎｃｅｓｔｈａｔｃａｎａｔｔｒａｃｔｕｎｍａｔｅｄＭ．ａｌｔｅｒ⁃ｎａｔｕｓａｄｕｌｔｓ．Ｋｅｙｗｏｒｄｓ㊀ＭｏｎｏｃｈａｍｕｓａｌｔｅｒｎａｔｕｓＨｏｐｅ；ＰｉｎｕｓｍａｓｓｏｎｉａｎａＬａｍｂ；ＸｙｌｅｂｏｒｕｓｆｅｓｔｉｖｕｓＥｉｃｈｈｏｆｆ；Ｐｌａｎｔｖｏｌａｔｉｌｅｓ；Ｅｌｅｃｔｒｏａｎｔｅｎｎｏｇｒａｍｒｅｓｐｏｎｓｅｓ㊀㊀松墨天牛（ＭｏｎｏｃｈａｍｕｓａｌｔｅｒｎａｔｕｓＨｏｐｅ）又称松褐天牛，属鞘翅目（Ｃｏｌｅｏｐｔｅｒａ）㊁天牛科（Ｃｅｒａｍｂｙｃｉ⁃ｄａｅ）㊁墨天牛属（Ｍｏｎｏｃｈａｍｕｓ）㊂松墨天牛是松树重要的蛀干害虫，同时也是全球毁灭性森林病害 松材线虫病的主要传播媒介，对我国马尾松（Ｐｉｎｕｓｍａｓ⁃ｓｏｎｉａｎａＬａｍｂ．）㊁油松（ＰｉｎｕｓｔａｂｕｌｉｆｏｒｍｉｓＣａｒｒｉèｒｅ）㊁华山松（ＰｉｎｕｓａｒｍａｎｄｉｉＦｒａｎｃｈ．）㊁落叶松（ＬａｒｉｘｇｍｅｌｉｎｉｉＫｕｚｅｎ．）和雪松（ＣｅｄｒｕｓｄｅｏｄａｒａＧ．Ｄｏｎ）等多种松树造成严重危害，造成松林大面积死亡［１－２］㊂防止松材线虫病蔓延的主要途径之一是防控媒介昆虫松墨天牛㊂常用的防控手段有及时清理枯死树木㊁喷洒化学药剂等，而在天牛的监测上，植物源引诱剂扮演了重要角色㊂已有研究表明，添加了植物源挥发物的诱芯能显著提升对天牛的诱捕效果［３］㊂因此，厘清松树挥发物中的引诱活性物质对松墨天牛的防控具有重要意义㊂植物挥发物是指植物的地上部分散发产生的挥发性有机化合物（ＶＯＣｓ），主要为萜类㊁醇㊁醛㊁酯类化合物㊂大多数寄主植物受到害虫的侵害时，会改变挥发性组分的种类㊁比例㊁浓度，这些虫害诱导挥发物（ＨＩＰＶｓ）可影响昆虫的行为，例如，棉花（Ｇｏｓ⁃ｓｙｐｉｕｍｓｐｐ．）被海灰翅夜蛾（ＳｐｏｄｏｐｔｅｒａｌｉｔｔｏｒａｌｉｓＢｏｉｓ⁃ｄｕｖａｌ）取食后，诱导产生的４，８－二甲基－１，３，７－壬三烯会抑制成虫的交配和产卵行为［４］；马铃薯甲虫（ＬｅｐｔｉｎｏｔａｒｓａｄｅｃｅｍｌｉｎｅａｔａＳａｙ）的成虫可被其幼虫危害后的马铃薯（ＳｏｌａｎｕｍｔｕｂｅｒｏｓｕｍＬ．）植株所吸引［５］㊂此外，虫害诱导挥发物对于同寄主的不同植食性昆虫也会产生一定的影响，有研究发现，受到蚜虫（ＭａｃｒｏｓｉｐｈｕｍｅｕｐｈｏｒｂｉａｅＴｈｏｍａｓ）危害的番茄（Ｓｏ⁃ｌａｎｕｍｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｕｍＬ．）植株更能吸引甜菜夜蛾（Ｓｐｏ⁃ｄｏｐｔｅｒａｅｘｉｇｕａＨｖｂｎｅｒ）取食［６］㊂本课题组在对感染松材线虫病初期和中期的马尾松进行调查时发现，在同时遭受松树材小蠹（Ｘ．ｆｅｓｔｉｖｕｓＥｉｃｈｈｏｆｆ）危害的马尾松嫩梢上极易发现被松墨天牛取食的痕迹㊂有试验证明，未交配的松墨天牛成虫对于受害马尾松挥发物呈负趋性［７］，据此推测，受小蠹蛀干危害的马尾松枝挥发物能吸引松墨天牛成虫前来取食，小蠹与松墨天牛存在协同危害的可能㊂本研究采用动态顶空吸附法收集受小蠹危害的马尾松侧枝与其生长端上的１年生松嫩梢的挥发性组分，利用气相色谱－质谱联用技术（ＧＣ－ＭＳ）和气相色谱－触角电位联用技术（ＧＣ－ＥＡＤ）初步鉴定其组分，并筛选出对松墨天牛有触角电生理反应的物质，为综合防治松墨天牛提供参考㊂１ 材料与方法供试植物：本试验在广西南宁兴宁区（地理中心坐标为１０８ʎ２２ᶄ１３．６ᵡＥ，２２ʎ５４ᶄ７．５ᵡＮ），对３棵已经感染松材线虫病的马尾松病株（图１－Ａ，Ｂ，Ｃ），采集受到松树材小蠹危害的侧枝，以及其生长端的当年生绿色嫩梢（图１－Ｄ，Ｅ，Ｆ），侧枝截面直径约６ｃｍ，长度约３０ｃｍ，当年生松梢长度约４０ｃｍ㊂将采集后的植物材料装入保鲜密封袋内保湿，带回实验室备用㊂Ａ㊁Ｂ㊁Ｃ为马尾松病株；Ｄ为被松墨天牛取食的嫩梢；Ｅ为被松树材小蠹危害的侧枝；Ｆ为１年生松嫩梢样品㊂图１㊀供试植物㊀㊀供试虫源：松墨天牛采自广西南宁兴宁区，收集受害的马尾松主干木段，带回实验室隔离饲养，待成２４１㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀东㊀北㊀林㊀业㊀大㊀学㊀学㊀报㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第５２卷虫羽化后，装入塑料杯内，用新鲜马尾松枝条饲养㊂以未交配的雌虫和雄虫为供试虫源㊂植物挥发物的收集：采用动态顶空吸附法收集受害的马尾松侧枝和嫩梢的挥发物，将两者分别放入聚对苯二甲酸乙二酯烘烤袋（江苏申凯包装高新技术股份有限公司，中国）内，利用ＱＣ－１Ｓ型大气采样仪（北京劳动保护研究所）进行抽提，进气口连接活性炭，出气口连接填充了ＰｏｒａｐａｒｋＱ吸附剂（８０／１００目，Ａｌｌｔｅｃｈ，美国）的石英玻璃管，通过聚四氟乙烯软管连接收集袋㊁活性炭㊁玻璃管㊁流量计（ＬＺＢ－３ＷＢ）和大气采样仪，做好各部分连接的密封㊂先将袋内空气抽走，泵入活性炭过滤后的净化空气，气体流量为４００ｍＬ／ｍｉｎ，密封循环采气６ｈ，采集均设３个重复㊂采集完成后，使用正己烷（色谱纯）对玻璃管内吸附的物质进行洗脱，随后将洗脱液迅速放入冰箱－２０ħ保存㊂挥发物组分测定：采用气相色谱－质谱联用仪（ＧＣ－ＭＳ，７８９０Ｂ－７０００Ｄ，安捷伦科技有限公司，美国）对受害后的马尾松挥发物洗脱液进行组分分析㊂气相色谱配备ＨＰ－５毛细管柱，每次进样量为１μＬ，进样口温度为２５０ħ，不分流模式，检测器温度为３００ħ，载气为Ｈｅ（１ｍＬ／ｍｉｎ）㊂升温程序设置为先以１０ħ／ｍｉｎ的速度升温到８０ħ，再以３ħ／ｍｉｎ升温到１１０ħ，然后以５ħ／ｍｉｎ升温到１６０ħ，保持３ｍｉｎ，共运行３０ｍｉｎ㊂质谱仪电离方式为电子电离（ＥＩ），能量为７０ｅＶ，离子源发生器温度２５０ħ，Ｓｃａｎ扫描模式，质量扫描范围质荷比（ｍ／ｚ）为３０ ３５０㊂松墨天牛对挥发物的触角电位反应：气相色谱－触角电位联用仪（ＧＣ－ＥＡＤ，７８９０Ｂ－ＩＤＡＣ４，安捷伦科技有限公司，美国；Ｓｔｙｎｔｅｃｈ公司，德国）载气为高纯度Ｎ２（１ｍＬ／ｍｉｎ），分流比１ʒ１㊂其余条件设置同气相色谱－质谱联用仪㊂使用手术刀将前期饲养的天牛雌㊁雄成虫各一个触角从基部切下，切除端节的少许末梢，用导电胶（ｓｐｅｃｔｒａ３６０Ｅｌｅｃｔｒｏｄｅ，德国）将触角两端粘到金属电极的两极，最后将电极插入触角电位仪探头处，使用气相色谱－触角电位联用仪１．２．５软件同时放大并记录触角电位（ＥＡＧ）和氢火焰离子化检测器（ＦＩＤ）信号㊂试验雌雄成虫各３头，每个触角测试重复３次㊂数据处理：数据采用ＡｇｉｌｅｎｔＭａｓｓＨｕｎｔｅｒＱｕａｌｉ⁃ｔａｔｉｖｅＡｎａｌｙｓｉｓ（Ｂ．０７．００）软件，根据各色谱峰对应的质谱图，连接由美国国家标准与技术研究院建立的ＮＩＳＴ１７标准质谱库，进行检索分析各组分的质谱数据，选取质谱匹配度高的化合物，定量分析采用峰面积百分比法确定各成分的相对质量分数㊂通过与气相色谱－触角电位联用仪㊁气相色谱－质谱联用仪峰图上的化合物峰形和保留时间进行对比，鉴定出具有电生理反应的物质㊂２㊀结果与分析２．１㊀受害马尾松侧枝与嫩梢挥发物的成分与相对质量分数对马尾松挥发物采用气相色谱－质谱联用仪分析，其总离子流图见图２，具体的物质见表１㊂从马尾松侧枝与嫩梢中检测出的２４种化合物以萜烯类居多，共２１种，其中单萜化合物有９种，倍半萜化合物有１２种，还有极微量酮类和酯类㊂侧枝与嫩梢挥发物组分不同，嫩梢中含有２０种，主要有α－蒎烯（５７．９３％）㊁左旋－β－蒎烯（１５．２６％）㊁假柠檬烯（１３．１５％）㊁莰烯（３．１２％）㊁长叶烯（２．０９％）㊁萜品油烯（２．０２％）等；侧枝中含有１６种，相对质量分数较高的为α－蒎烯（７６．３２％）㊁莰烯（５．０３％）㊁右旋萜二烯（５．１４％）㊁长叶烯（４．４７％）㊁左旋－β－蒎烯（３．６１％）等㊂侧枝和嫩梢中含有的相同组分为α－蒎烯㊁莰烯㊁左旋－β－蒎烯㊁月桂烯㊁萜品油烯㊁别罗勒烯㊁（＋）－α－长叶蒎烯㊁（＋）－环苜蓿烯㊁（＋）－长叶环烯㊁（＋）－苜蓿烯㊁长叶烯㊁β－石竹烯；不同的组分为右旋萜二烯㊁假柠檬烯㊁３－蒈烯㊁乙酸芳樟酯㊁３－乙基苯乙酮㊁左旋乙酸冰片酯㊁罗汉柏烯㊁（－）－α－可巴烯㊁β－波旁烯㊁β－榄香烯㊁β－可巴烯㊁大根香叶烯－Ｄ㊂两个部位化合物组分的相对质量分数也不同，差别较大的物质有α－蒎烯㊁左旋－β－蒎烯㊁右旋萜二烯㊁假柠檬烯和长叶烯；嫩梢中，左旋－β－蒎烯和假柠檬烯相对质量分数较高；侧枝中，α－蒎烯㊁右旋萜二烯和长叶烯相对质量分数较高㊂本次嫩梢中检测到的挥发性组分占到总离子流的９８．０１％，侧枝为９７．６１％，剩余组分为少量杂质和柱流失㊂表１㊀受害马尾松嫩梢与侧枝的挥发物成分及其相对质量分数序号保留时间／ｍｉｎＣＡＳ号分子式化合物名称相对质量分数％嫩梢侧枝１６．１００８０－５６－８Ｃ１０Ｈ１６α－蒎烯５７．９３７６．３２２６．５２０７９－９２－５Ｃ１０Ｈ１６莰烯３．１２５．０３３７．３８２１８１７２－６７－３Ｃ１０Ｈ１６左旋－β－蒎烯１５．２６３．６１４７．８８２１２３－３５－３Ｃ１０Ｈ１６月桂烯１．１６０．５５５９．２１８５９８９－２７－５Ｃ１０Ｈ１６右旋萜二烯ＮＤ５．１４３４１第３期㊀㊀㊀㊀㊀㊀杨梦君，等：松墨天牛对小蠹危害后马尾松挥发物的气相色谱－触角电位联用技术反应６９．２３６４９９－９７－８Ｃ１０Ｈ１６假柠檬烯１３．１５ＮＤ续（表１）序号保留时间／ｍｉｎＣＡＳ号分子式化合物名称相对质量分数％嫩梢侧枝７９．５９７１３４６６－７８－９Ｃ１０Ｈ１６３－蒈烯ＮＤ０．３６８１１．５６８５８６－６２－９Ｃ１０Ｈ１６萜品油烯２．０２０．２０９１３．３６４７２１６－５６－０Ｃ１０Ｈ１６别罗勒烯０．０２０．３１１０１８．３７６１１５－９５－７Ｃ１２Ｈ２０Ｏ２乙酸芳樟酯０．１９ＮＤ１１１８．５６１２２６９９－７０－３Ｃ１０Ｈ１２Ｏ３－乙基苯乙酮ＮＤ０．０２１２１９．１８３５６５５－６１－８Ｃ１２Ｈ２０Ｏ２左旋乙酸冰片酯０．２４ＮＤ１３２０．７０８５９８９－０８－２Ｃ１５Ｈ２４（＋）－α－长叶蒎烯０．２９０．４５１４２１．０７８２２４６９－５２－９Ｃ１５Ｈ２４（＋）－环苜蓿烯０．０２０．１４１５２１．１３７１１３７－１２－８Ｃ１５Ｈ２４（＋）－长叶环烯０．１８０．４８１６２１．２２２４７０－４０－６Ｃ１５Ｈ２４罗汉柏烯ＮＤ０．１０１７２１．２４９３８５６－２５－５Ｃ１５Ｈ２４（－）－α－可巴烯０．０５ＮＤ１８２１．４３９５２０８－５９－３Ｃ１５Ｈ２４β－波旁烯０．３３ＮＤ１９２１．５３８３６５０－２８－０Ｃ１５Ｈ２４（＋）－苜蓿烯０．１００．２３２０２１．５７９５１５－１３－９Ｃ１５Ｈ２４β－榄香烯０．０２ＮＤ２１２１．８４９４７５－２０－７Ｃ１５Ｈ２４长叶烯２．０９４．４７２２２２．１１１８７－４４－５Ｃ１５Ｈ２４β－石竹烯１．７３０．２０２３２２．２７８１８２５２－４４－３Ｃ１５Ｈ２４β－可巴烯０．０２ＮＤ２４２３．１８０２３９８６－７４－５Ｃ１５Ｈ２４大根香叶烯－Ｄ０．０９ＮＤ㊀㊀注：表中序号为１㊁２㊁３㊁５㊁６㊁８㊁２１㊁２２号物质为活性物质； ＮＤ 表示检测结果中不存在该物质㊂图２㊀马尾松挥发物气相色谱－质谱联用仪总离子流图２．２㊀松墨天牛成虫对受害马尾松挥发物的ＧＣ－ＥＡＤ反应由图３可知，利用雌㊁雄成虫触角筛选得到的活性物质是一致的㊂嫩梢中筛选出的有效物质有７种，分别是α－蒎烯㊁莰烯㊁左旋－β－蒎烯㊁假柠檬烯㊁萜品油烯㊁长叶烯㊁β－石竹烯；马尾松侧枝中筛选出的有效物质有５种，分别是α－蒎烯㊁莰烯㊁左旋－β－蒎烯㊁右旋萜二烯㊁长叶烯㊂Ａ为对嫩梢的ＧＣ－ＥＡＤ反应㊂其中，１为α－蒎烯；２为莰烯；３为左旋－β－蒎烯；６为假柠檬烯；８为萜品油烯；２１为长叶烯；２２为β－石竹烯；ａ为柱流失；ɬ为雌性成虫；ȶ为雄性成虫㊂Ｂ为对侧枝的ＧＣ－ＥＡＤ反应㊂其中，１为α－蒎烯；２为莰烯；３为左旋－β－蒎烯；５为右旋萜二烯；２１为长叶烯；ｂ为柱流失；ɬ为雌性成虫；ȶ为雄性成虫㊂图３㊀初羽化松墨天牛雌㊁雄成虫对受害马尾松挥发物的ＧＣ－ＥＡＤ反应２．３㊀马尾松健康与感病感虫植株挥发物组分以及松墨天牛ＧＣ－ＥＡＤ反应的比较分析通过对比一些健康马尾松挥发物的相关研究结４４１㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀东㊀北㊀林㊀业㊀大㊀学㊀学㊀报㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第５２卷果［８－１２］，相对质量分数较高的化合物组分中，除了假柠檬烯与右旋萜二烯，其余组分种类基本一致㊂目前针对松墨天牛与寄主马尾松之间的化学通讯已有很多研究结论，松墨天牛对健康马尾松挥发物的触角电位反应试验筛选得到的物质有α－蒎烯㊁β－蒎烯㊁水芹烯㊁石竹烯㊁月桂烯㊁β－月桂烯㊁萜品油烯㊁长叶烯㊁异己烯㊁雪松烯㊁乙酸龙脑酯等［１３－１４］㊂本次ＧＣ－ＥＡＤ试验中初步筛选出的活性组分共有８种，除了右旋萜二烯，其余７种组分都存在于嫩梢的挥发物中，将筛选结果与前人研究进行对比发现，健康马尾松与受害后马尾松挥发物存在相同的组分，如α－蒎烯㊁萜品油烯㊁长叶烯，同时也发现，在健康马尾松的挥发物组分中存在左旋－β－蒎烯，但相对质量分数较低，未能被筛选为活性物质，而在本试验中，受害后马尾松左旋－β－蒎烯相对质量分数较高，故能被筛选出来㊂３ 结论与讨论利用气相色谱－质谱联用仪对受松树材小蠹危害后的马尾松侧枝与嫩梢中的挥发物进行检测，共鉴定得出２４种化合物，其中８７．５％为萜烯类㊂通过与健康松树挥发物的对比发现，相对质量分数较高的组分只有假柠檬烯与右旋萜二烯不同，推测这两种物质或与小蠹危害有关㊂松墨天牛的寄主包含多种松科树种，例如云南松（ＰｉｎｕｓｙｕｎｎａｎｅｎｓｉｓＦｒａｎｃｈ．）㊁黑松（ＰｉｎｕｓｔｈｕｎｂｅｒｇｉｉＰａｒｌ．）㊁樟子松（Ｐｉ⁃ｎｕｓｓｙｌｖｅｓｔｒｉｓｖａｒ．ｍｏｎｇｈｏｌｉｃａＬｉｔｖ．）以及红松（ＰｉｎｕｓｋｏｒａｉｅｎｓｉｓＳｉｅｂｏｌｄ＆Ｚｕｃｃ．）等［１５－１８］，单萜和倍半萜类化合物常存在于这类植物的挥发物中㊂如云南松松针的挥发物组分有α－蒎烯㊁β－蒎烯㊁柠檬烯㊁萜品油烯㊁β－榄香烯㊁石竹烯㊁α－石竹烯等［１５］，黑松松梢的挥发物组分有α－蒎烯㊁莰烯㊁β－蒎烯㊁β－水芹烯㊁柠檬烯㊁α－萜品油烯㊁异长叶烯等［１８］㊂萜烯类化合物是植物挥发物中一类重要化合物，它使植物可与其周边环境及生物保持互作关系，因此，松类植物挥发性的萜烯类物质在与松墨天牛的化学通信中有重要作用㊂有试验在对比了健康松梢挥发物与取食危害后挥发物的组分，以及使用标准样品进行触角电位（ＥＡＧ）测试后得出，α－蒎烯㊁β－蒎烯㊁β－水芹烯和β－月桂烯为重要的活性物质［１９］㊂并且有研究证明，松墨天牛对寄主松树挥发物中的α－蒎烯㊁β－蒎烯㊁莰烯㊁月桂烯㊁柠檬烯㊁萜品油烯㊁β－石竹烯㊁β－水芹烯均可产生电生理活性［１３，２０－２２］，结合这些相关研究，本试验中，雌成虫与雄成虫气相色谱－触角电位联用技术（ＧＣ－ＥＡＤ）所筛选的活性物质在影响天牛行为方面有不可忽视的作用㊂松墨天牛对松树挥发物中的α－蒎烯㊁β－蒎烯㊁莰烯㊁β－水芹烯㊁右旋萜二烯㊁β－石竹烯等萜烯类物质都具有显著的趋向性［２１，２３］㊂其中，衰弱松树挥发物中的（＋）－α－蒎烯对松墨天牛有很好的引诱效果［２４］㊂本试验筛选得到的活性组分中，α－蒎烯㊁莰烯㊁左旋－β－蒎烯㊁右旋萜二烯和β－石竹烯很可能会吸引松墨天牛进行取食或产卵㊂此外，有研究表明，月桂烯可显著吸引松墨天牛并且促进其取食［２５－２６］；在进行松墨天牛的田间诱捕试验中发现，（＋）－３－蒈烯可诱捕到雌雄两性天牛［２７］；与松墨天牛同属于沟胫天牛亚科的云斑天牛（Ｂａｔｏｃｅｒａｈｏｒｓｆ⁃ｉｅｌｄｉＨｏｐｅ）成虫取食定位寄主野蔷薇的特异成分为３－蒈烯［２３］㊂由于昆虫触角电位反应程度与挥发性化合物浓度有一定关系，虽然我们没有筛选出月桂烯和３－蒈烯作为活性物质，但上述关于这两种化合物组分的行为试验证明其是有相关研究价值的，因此，对于本试验中其他微量组分也可根据情况做进一步探究㊂从种间关系的角度考虑，小蠹虫蛀干危害影响了树体内的物质运输，导致树脂分泌减少，这使得松墨天牛可以更好地取食松梢，两物种存在一定的协作关系㊂松墨天牛作为松材线虫的传播媒介，在未达到性成熟时取食枝叶，体内携带的松材线虫便有机会通过取食的伤口进入树体危害，故本次试验针对未交配成虫的活性物质筛选能有效帮助诱捕成虫，这将更有助于减少松材线虫病的扩散发生㊂虽然应用气相色谱－触角电位联用技术帮助筛选出了这些活性成分，但目前仍无法确定它们对于天牛是产生吸引还是趋避作用㊂此外，未交配的雌雄成虫在取食寄主时是否存在差异尚未确定㊂因此仍需要进一步进行行为试验，以探究这些活性物质的吸引或趋避作用，以及雌雄成虫的取食选择差异㊂综上所述，本次所收集并鉴定的受害马尾松挥发性化合物中，假柠檬烯和右旋萜二烯两种成分可能与小蠹危害有关；而α－蒎烯㊁左旋－β－蒎烯㊁莰烯㊁右旋萜二烯和β－石竹烯则可能在吸引天牛取食或产卵方面发挥重要作用㊂然而，对于假柠檬烯的作用有待进一步探究㊂鉴于天牛在未性成熟时取食就可能导致松材线虫病的传播，今后的研究应集中在如何利用挥发性化合物来吸引并刺激天牛进行取食㊂随后的室内行为试验将进一步筛选有效吸引未性成熟松墨天牛的物质㊂参㊀考㊀文㊀献［１］㊀ＡＫＢＵＬＵＴＳ，ＳＴＡＭＰＳＷＴ．Ｉｎｓｅｃｔｖｅｃｔｏｒｓｏｆｔｈｅｐｉｎｅｗｏｏｄｎｅｍａ⁃５４１第３期㊀㊀㊀㊀㊀㊀杨梦君，等：松墨天牛对小蠹危害后马尾松挥发物的气相色谱－触角电位联用技术反应ｔｏｄｅ：ａｒｅｖｉｅｗｏｆｔｈｅｂｉｏｌｏｇｙａｎｄｅｃｏｌｏｇｙｏｆＭｏｎｏｃｈａｍｕｓｓｐｅｃｉｅｓ［Ｊ］．ＦｏｒｅｓｔＰａｔｈｏｌｏｇｙ，２０１２，４２（２）：８９－９９．［２］㊀张心团，赵和平，樊美珍，等．松墨天牛生物学特性的研究进展（综述）［Ｊ］．安徽农业大学学报，２００４，３１（２）：１５６－１５７．［３］㊀徐智文，孔伟浩，周艳涛，等．６种诱芯对天牛科昆虫的诱捕效果［Ｊ］．东北林业大学学报，２０１８，４６（７）：９４－９８．［４］㊀ＨＡＴＡＮＯＥ，ＳＡＶＥＥＲＡＭ，ＢＯＲＲＥＲＯ⁃ＥＣＨＥＶＥＲＲＹＦ，ｅｔａｌ．Ａｈｅｒｂｉｖｏｒｅ⁃ｉｎｄｕｃｅｄｐｌａｎｔｖｏｌａｔｉｌｅｉｎｔｅｒｆｅｒｅｓｗｉｔｈｈｏｓｔｐｌａｎｔａｎｄｍａｔｅｌｏｃａｔｉｏｎｉｎｍｏｔｈｓｔｈｒｏｕｇｈｓｕｐｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｏｌｆａｃｔｏｒｙｓｉｇｎａｌｌｉｎｇｐａｔｈｗａｙｓ［Ｊ］．ＢＭＣＢｉｏｌｏｇｙ，２０１５，１３．ｄｏｉ：１０．１１８６／ｓ１２９１５－０１５－０１８８－３．［５］㊀ＢＯＬＴＥＲＣＪ，ＤＩＣＫＥＭ，ＶＡＮＬＯＯＮＪＪＡ，ｅｔａｌ．ＡｔｔｒａｃｔｉｏｎｏｆＣｏｌｏｒａｄｏｐｏｔａｔｏｂｅｅｔｌｅｔｏｈｅｒｂｉｖｏｒｅ⁃ｄａｍａｇｅｄｐｌａｎｔｓｄｕｒｉｎｇｈｅｒｂｉｖｏ⁃ｒｙａｎｄａｆｔｅｒｉｔｓｔｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｅｍｉｃａｌＥｃｏｌｏｇｙ，１９９７，２３（４）：１００３－１０２３．［６］㊀ＳＴＯＵＴＭＪ，ＷＯＲＫＭＡＮＫＶ，ＢＯＳＴＯＣＫＲＭ，ｅｔａｌ．Ｓｐｅｃｉｆｉｃｉｔｙｏｆｉｎｄｕｃｅｄｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｉｎｔｈｅｔｏｍａｔｏ，Ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｏｎｅｓｃｕｌｅｎｔｕｍ［Ｊ］．Ｏｅｃｏｌｏｇｉａ，１９９７，１１３（１）：７４－８１．［７］㊀郝德君，马凤林，王焱，等．松墨天牛对马尾松挥发物的触角电位和行为反应［Ｊ］．昆虫知识，２００７，４４（４）：５４１－５４４．［８］㊀申长茂，段文贵，岑波，等．广西产马尾松与湿地松针叶精油化学成分的比较［Ｊ］．色谱，２００６，２４（６）：６１９－６２４．［９］㊀ＬＩＸＪ，ＤＯＮＧＧＰ，ＦＡＮＧＪＭ，ｅｔａｌ．Ｃｏｍｐａｒｉｓｏｎｏｆｖｏｌａｔｉｌｅｏｒ⁃ｇａｎｉｃｃｏｍｐｏｕｎｄｓｆｒｏｍｕｎｉｎｆｅｓｔｅｄａｎｄＭｏｎｏｃｈａｍｕｓａｌｔｅｒｎａｔｕｓＨｏｐｅｉｎｆｅｓｔｅｄＰｉｎｕｓｍａｓｓｏｎｉａｎａＬａｍｂ［Ｊ］．ＥｎｔｏｍｏｌｏｇｉｃａｌＲｅｓｅａｒｃｈ，２０１７，４７（３）：２０３－２０７．［１０］㊀程满环，翟大才，毕淑峰．黄山松与马尾松松针挥发性成分对比分析［Ｊ］．南京林业大学学报（自然科学版），２０１８，４２（３）：９３－９８．［１１］㊀刘力恒，王立升，冯丹丹，等．马尾松和湿地松松针挥发性成分的提取及ＧＣ－ＭＳ比较分析［Ｊ］．分析试验室，２００８，２７（１１）：７５－８０．［１２］㊀粟本超，谢济运，陈小鹏，等．广西柳州产马尾松和湿地松松针挥发油的ＧＣ／ＭＳ分析［Ｊ］．质谱学报，２００８，２９（２）：７０－７５．［１３］㊀赖略，邹学冰，徐金柱，等．马尾松叶片挥发物组成及其对松墨天牛有触角电生理反应的活性成分鉴定［Ｊ］．林业与环境科学，２０２２，３８（３）：１４８－１５３．［１４］㊀王保新，许秀兰，肖前刚，等．松墨天牛对马尾松健康植株挥发物的ＥＡＧ反应［Ｊ］．农家参谋，２０１９（１９）：１０３－１０４．［１５］㊀陈敏，刘方炎，李永和．基于楚雄腮扁叶蜂产卵行为的云南松针叶挥发性物质分析［Ｊ］．福建农林大学学报（自然科学版），２０１８，４７（４）：３９８－４０２．［１６］㊀郭阿君，王志英，邹丽．樟子松挥发性有机物释放动态及其抑菌作用［Ｊ］．东北林业大学学报，２０１４，４２（４）：１１５－１１８．［１７］㊀王琪，严善春，严俊鑫，等．健康和虫害的红松挥发物对赤松梢斑螟及其寄生蜂寄主选择行为的影响［Ｊ］．生态学报，２０１３，３３（２３）：７４３７－７４４４．［１８］㊀郝德君，马凤林，王焱，等．松墨天牛对不同生理状态黑松挥发物的触角电生理和行为反应［Ｊ］．应用生态学报，２００６，１７（６）：１０７０－１０７４．［１９］㊀宁眺，樊建庭，方宇凌，等．不同危害状态下寄主萜烯挥发物含量的变化及松墨天牛对其组分的触角电位反应［Ｊ］．昆虫学报，２００６，４９（２）：１７９－１８８．［２０］㊀江望锦．松墨天牛成虫与寄主间化学信息联系机制的初步研究［Ｄ］．南京：南京林业大学，２００５．［２１］㊀李水清，张钟宁．马尾松枝条挥发性组分的鉴定及松墨天牛对其触角电生理反应［Ｊ］．昆虫知识，２００７，４４（３）：３８５－３８９．［２２］㊀李水清，张钟宁．松墨天牛成虫对幼虫虫粪挥发性物质的触角电位反应及林间驱避试验［Ｊ］．昆虫学报，２００８，５１（３）：２８４－２８９．［２３］㊀诸葛飘飘．杨树云斑天牛成虫寄主定位中的信息化学物质［Ｄ］．武汉：华中农业大学，２００９．［２４］㊀ＦＡＮＪＴ，ＳＵＮＪＨ，ＳＨＩＪ．ＡｔｔｒａｃｔｉｏｎｏｆｔｈｅＪａｐａｎｅｓｅｐｉｎｅｓａｗ⁃ｙｅｒ，Ｍｏｎｏｃｈａｍｕｓａｌｔｅｒｎａｔｕｓ，ｔｏｖｏｌａｔｉｌｅｓｆｒｏｍｓｔｒｅｓｓｅｄｈｏｓｔｉｎＣｈｉｎａ［Ｊ］．ＡｎｎａｌｓｏｆＦｏｒｅｓｔＳｃｉｅｎｃｅ，２００７，６４（１）：６７－７１．［２５］㊀ＦＡＮＪＴ，ＳＵＮＪＨ．Ｉｎｆｌｕｅｎｃｅｓｏｆｈｏｓｔｖｏｌａｔｉｌｅｓｏｎｆｅｅｄｉｎｇｂｅｈａｖ⁃ｉｏｕｒｏｆｔｈｅＪａｐａｎｅｓｅｐｉｎｅｓａｗｙｅｒ，Ｍｏｎｏｃｈａｍｕｓａｌｔｅｒｎａｔｕｓ［Ｊ］．ＪｏｕｒｎａｌｏｆＡｐｐｌｉｅｄＥｎｔｏｍｏｌｏｇｙ，２００６，１３０（４）：２３８－２４４．［２６］㊀ＩＫＥＤＡＴ，ＥＮＤＡＮ，ＹＡＭＡＮＥＡ，ｅｔａｌ．ＡｔｔｒａｃｔａｎｔｓｆｏｒｔｈｅＪａｐ⁃ａｎｅｓｅｐｉｎｅｓａｗｙｅｒ，ＭｏｎｏｃｈａｍｕｓａｌｔｅｒｎａｔｕｓＨＯＰＥ（Ｃｏｌｅｏｐｔｅｒａ：Ｃｅｒａｍｂｙｃｉｄａｅ）［Ｊ］．ＡｐｐｌｉｅｄＥｎｔｏｍｏｌｏｇｙａｎｄＺｏｏｌｏｇｙ，１９８０，１５（３）：３５８－３６１．［２７］㊀ＦＡＮＪＴ，ＫＡＮＧＬ，ＳＵＮＪＨ．Ｒｏｌｅｏｆｈｏｓｔｖｏｌａｔｉｌｅｓｉｎｍａｔｅｌｏｃａ⁃ｔｉｏｎｂｙｔｈｅＪａｐａｎｅｓｅｐｉｎｅｓａｗｙｅｒ，Ｍｏｎｏｃｈａｍｕｓａｌｔｅｒｎａｔｕｓｈｏｐｅ（Ｃｏｌｅｏｐｔｅｒａ：Ｃｅｒａｍｂｙｃｉｄａｅ）［Ｊ］．ＥｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔａｌＥｎｔｏｍｏｌｏｇｙ，２００７，３６（１）：５８－６３．６４１㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀东㊀北㊀林㊀业㊀大㊀学㊀学㊀报㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀㊀第５２卷。
电位测量仪安全操作及保养规程前言电位测量仪用于测量电路或设备的电势差，是实验室、工厂、研究机构等领域必不可少的设备之一。
本文将介绍电位测量仪的安全操作规程与保养规程，以确保操作人员的安全，并延长设备的使用寿命。
安全操作规程1. 使用前的准备在使用电位测量仪前，操作人员应该先进行以下准备工作：•检查仪器的线缆、插头等部件是否完好。
•确认使用仪器是否符合预期要求，并仔细读取使用说明书。
•对于一些有风险的操作，操作人员应该进行适当安全防护。
2. 使用时的注意事项在使用电位测量仪时，应严格遵守以下注意事项：•避免将仪器用于其不能测量的电路或设备，以免损坏仪器或造成人员伤害。
•在电路上进行测量时，必须断开电源，并对待测电路的相关部件进行短路保护。
•尽量避开高压电路，以免产生电击伤害。
•操作过程中，应注意保持身体干燥，并避免与水等液体接触，以免伤害仪器或自身。
•操作过程中，应避免长时间进行电刺激或电热刺激实验，以免对人体产生危害。
3. 操作后的注意事项在使用完电位测量仪后，应该进行以下操作：•断开电源，关闭相关设备，将仪器恢复到初始状态。
•根据需求，进行适当的清洗和消毒。
•定期检查仪器及相关部件的磨损情况，并及时维修。
•对于长期不使用的仪器，应进行适当的灰尘清除，并进行防潮处理。
•注意保持仪器的保存环境，避免受到湿度、温度等因素的影响。
保养规程为了保证电位测量仪的使用寿命，我们需要遵守以下保养规程：1. 日常保养•对于仪器的电源、线缆等部位，应定期进行检查，确认其是否完好。
•对于仪器的仪表、插头等部位，应进行适当清洗，在干燥后才能使用。
•在使用过程中，应避免过度摆放、移动等对仪器的振动和碰撞。
•对于长期不使用的仪器，应进行适当的保护措施，例如使用设备保护器。
2. 定期保养•定期检查仪器的电池和传感器等部位，确认其是否需要更换或维修。
•定期进行检查和清洗仪器的内部、外部部件、面板等区域，确认是否需要进行维护。
编号：河北科技师范学院
大型精密仪器、大宗物资设备
购置申报书
（单价5万元以上和总价10万元以上的物资设备）
项目名称：GC-EAD气相色谱-触角电位测量系统申请单位：生命科技学院（公章）
项目负责人：路常宽（签名）
申报日期： 2013 年 1 月 3 日
河北科技师范学院建设采购中心制
三、采购论证：（必须提供三家以上的生产厂商和型号规格，联系人及联系电话）
四、论证结论：（应对上述论证提出明确的意见和建议）
五、审批结论：
注：本表一式五份，院(系)、主管部门、国资处、财务处、建设采购中心各一份；。
