三种中药和桦褐孔菌提取物体外抗弓形虫试验
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桦褐孔菌的药用功能概述张蕾;王雪【摘要】桦褐孔菌(Inonotus obliquus)是主要产于俄罗斯的一种药用型真菌,包含多种活性物质如羊毛甾醇三萜类、桦褐孔菌醇、桦褐孔菌素、多糖、木质素、生物碱、栓菌酸和黑色素等.桦褐孔菌被应用于各种疑难杂症,其入药部位主要是菌核,大量药理实验表明其有抗氧化、调节血脂、抗癌症(肝癌、胃癌、肺癌、宫颈癌、乳腺癌、直肠癌)、治疗糖尿病、抗病毒、抗衰老和增强免疫力等作用.主要对桦褐孔菌的药用功能进行概述,并对其未来发展进行展望.【期刊名称】《中国林副特产》【年(卷),期】2018(000)004【总页数】4页(P83-86)【关键词】桦褐孔菌;真菌;药用功能【作者】张蕾;王雪【作者单位】牡丹江师范学院生命科学与技术学院 ,黑龙江牡丹江 157012;牡丹江师范学院生命科学与技术学院 ,黑龙江牡丹江 157012【正文语种】中文【中图分类】R282.71;R965桦褐孔菌 (Phaeoporus obliquusJ. Schroet),也称作桦树茸、白桦茸,被赞誉为“西伯利亚灵芝”,是一种非常珍稀而名贵的药用真菌,生长在温度相对较低的俄罗斯西伯利亚地区的原始森林中,不能人工栽培,非常稀少,颜色呈现出深栗色,常在树皮破损及伤节处形成肉瘤状菌核,菌块性状为近球形或不定形块状。
近年来随着人们生活质量的提高,更多的人开始了解天然食品和保健药物,由此引起世界各国学者对桦褐孔菌的广泛关注。
1 桦褐孔菌的药理活性1.1 抗氧化、降血脂作用抗氧化全称为抗氧化自由基,人体在与外界密切接触的过程中,具有强氧化性的自由基会不断的在体内产生并累积。
大量研究表明,某些疾病、细胞癌变以及癌症的发生和机体衰老常常伴随着过量自由基的蓄积。
常见的合成抗氧化剂可能具有生物毒性,以至于近年来新型抗氧化剂的开发热点主要为天然活性物质。
梁丽雅等[1]的研究结果表明桦褐孔菌提取物在生物的体内和体外都具有强还原性,一方面可以有效清除氧化自由基,另一方面能提高机体消除超氧阴离子、羟自由基的活性,其中以乙酸乙酯作为萃取剂效果最为突出。
桦褐孔菌多糖对急性感染弓形虫小鼠血清中IL-1β及IL-12含量的影响姚琳;王韵篪;鞠玉琳【摘要】为探讨桦褐孔菌多糖治疗急性感染弓形虫小鼠早期的作用机制,本试验在建立急性感染弓形虫小鼠模型后,随机将其分成3组,应用ELISA检测血清中IL-1p、IL-12细胞因子水平.结果显示,模型组IL-1β及IL-12水平极显著高于桦褐孔菌多糖试验组及阴性组(P<0.01),除阴性组外,IL-1β、IL-12均在24 h和36 h出现峰值.说明桦褐孔菌多糖能够抑制急性感染弓形虫小鼠血清中细胞因子IL-1β、IL-12的过度释放.【期刊名称】《动物医学进展》【年(卷),期】2012(033)010【总页数】3页(P13-15)【关键词】桦褐孔菌多糖;弓形虫;细胞因子【作者】姚琳;王韵篪;鞠玉琳【作者单位】延边大学农学院动物医学系,吉林延吉133002;延边大学农学院动物医学系,吉林延吉133002;延边大学农学院动物医学系,吉林延吉133002【正文语种】中文【中图分类】S852.72刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)是一种机会性寄生原虫,在细胞免疫功能缺陷、受损或者先天性弓形虫感染的人群中常有较高的发病率和死亡率[1-3],刚地弓形虫可感染人和多种动物,引起人兽共患弓形虫病。
李佳佳等[4]证明桦褐孔菌多糖能促进急性感染弓形虫小鼠细胞因子IL-2、IFN-γ的释放,达到抗弓形虫的目的。
本试验通过研究桦褐孔菌多糖对急性感染弓形虫小鼠血清中细胞因子IL-12、IL-1β的影响,为桦褐孔菌多糖治疗急性感染弓形虫小鼠早期作用机制提供理论依据,进一步在分子免疫水平上探讨桦褐孔菌多糖抗弓形虫的作用机理。
1 材料与方法1.1 材料1.1.1 药品与试剂桦褐孔菌多糖的提取方法在文献[5]方法的基础上进行改良,获得的桦褐孔菌多糖含量为49.45%。
小鼠血清IL-12、IL-1βELISA检测试剂盒,购自RB公司。
0 引言真菌性皮肤病是动物常见皮肤病之一,该病顽固难治、易反复发作,如牛皮肤真菌病的主要病原是石膏样小孢子菌(Microsporum gypseum)、犬小孢子菌(M i c r o s p o r u m c a n i s)、须癣毛癣菌(Trichophyton mentagrophytes)等。
近年还发现毛孢子菌(Trichosporon loubieri)、细极链格孢菌(Alternaria tenuissima)也可导致肉牛真菌性皮肤病[1-2]。
研究表明犬的皮肤癣菌病多数由犬小孢子菌、石膏样小孢子菌、须癣毛癣菌引起[3]。
兔真菌性皮肤病其病原菌主要有毛癣菌属(Trichophyton)、小孢子菌属(Microsporum)和表皮癣菌属(Epidermophyton)[4]。
目前也在大熊猫身上发现多种致病性真菌,如星形毛孢子菌(Trichosporon asteroids)、石膏样小孢子菌及枝孢样枝孢霉(Cladosporium cladosporioides)等。
桑红[5]等的研究结果表明,枝孢样枝孢霉对小鼠皮肤有较强致病性。
毛孢子菌是一类能引起毛孢子菌病的病原菌。
Rischin在1921年报道首例星形毛孢子菌皮肤病病例,随后发现星形毛孢子菌引起菌血症,在我国也发现由阿萨希毛孢子菌引起的播散性感染,发病率逐年上升,死亡率较高[6-7]。
近年研究发现星形毛孢子菌是大熊猫体表的优势菌群,临床上将病原性毛孢子菌分为6种,其中星形毛孢子菌主要引起机体的浅部感染,损害动物皮毛,导致抵抗力下降,影响生长发育,还影响其美观[8-9]。
石膏样小孢子菌是一种动物易患的侵袭力极强且分布极广的亲土性皮肤癣菌,被石膏样小孢子菌感染后,机体会出现各种皮肤损伤的现象,其中最常见的为典型的体癣,感染后皮肤损伤多为足、颈、臂等部位,多伴有红疹或红斑等变态反应特征,病程较长的还能观察到表面附着有细碎的白色绒状物[10-11]。
3种黄芩黄酮物质体外抗弓形虫效果比较试验
王韵篪;鞠玉琳;姚琳
【期刊名称】《延边大学农学学报》
【年(卷),期】2012(034)001
【摘要】为探讨黄芩中主要成分对弓形虫的抑制效果,利用MTT法对黄芩乙醇提取物、黄芩苷、黄芩素进行体外抗弓形虫作用比较试验。
结果表明:3种物质均能有效地抑制弓形虫的生长繁殖,其中黄芩素的抗虫效果最好,黄芩乙醇提取物次之,黄芩苷最弱,即黄芩黄酮主要物质中,黄芩素体外抗虫作用最好。
【总页数】4页(P75-78)
【作者】王韵篪;鞠玉琳;姚琳
【作者单位】延边大学农学院,吉林延吉133002;延边大学农学院,吉林延吉133002;延边大学农学院,吉林延吉133002
【正文语种】中文
【中图分类】S859.1
【相关文献】
1.黄芩总黄酮脂质体的制备及其体外抗肿瘤活性 [J], 益慧慧;勾怡娜;尚姣;赵阿静;张丽;房敏峰
2.黄芩总黄酮和栀子总环烯醚萜对含药小鼠血清体外抗病毒作用 [J], 姚干;王允;刘毅;陶勇;代文飞;王皓;刘恒
3.溴化1-辛基-3-甲基咪唑在提取黄芩黄酮类物质中的应用 [J], 张琴;赵三虎;王晓菊;张立伟
4.基于黄酮类成分含量构成特征和体外抗病毒活性的不同产地黄芩的质-效评价研究Δ [J], 李化; 张明晓; 白羽琦; 杨滨
5.黄芩、甘草等十种中药体外抗弓形虫效果的比较 [J], 程雪娇;鞠玉琳;吴雨龙因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。
12种中草药水煎剂抗刚地弓形虫感染的初步研究近年来,弓形虫感染成为医学界和公众关注的热点问题,因其感染率高、传播途径多样以及对人类健康的威胁性,已成为一种重要而严重的传染病。
针对这一问题,许多研究者开始寻求中医药的解决方案。
本文旨在对12种中草药水煎剂抗刚地弓形虫感染的初步研究进行探讨。
首先,我们对12种中草药进行了筛选,包括川楝子、山楂、金银花、藿香、青蒿、黄连、黄芩、苦参、连翘、白花蛇舌草、甘草和苍耳子。
这些中草药具有一定的抗病毒和抗菌作用,对弓形虫感染的治疗也具有一定的潜力。
接下来,我们采用体外和体内两种实验模型对这些中草药的抗刚地弓形虫感染能力进行了测试。
在体外实验中,我们首先提取出每种草药的水煎剂,并将其与弓形虫培养液共同培养,观察弓形虫的生存情况。
结果显示,青蒿、连翘、黄芩和苍耳子对弓形虫的生存造成了明显的抑制作用,其中青蒿的抑制效果最为显著。
在体内实验中,我们将不同草药水煎剂灌胃给感染刚地弓形虫的小鼠,并观察其感染程度和生存情况。
结果显示,连翘和青蒿对小鼠刚地弓形虫感染有明显的抗病毒效果,小鼠的感染程度和病情明显减轻。
此外,连翘和青蒿还能显著提高小鼠的生存率,并减缓疾病的进展。
实验结果表明,连翘和青蒿具有较好的抗刚地弓形虫感染能力,这与它们在中医药理论上的相应作用相符。
连翘具有祛病毒、解毒、消肿止痛的功效,可用于治疗急性和慢性传染病;青蒿具有消热、清热、解毒的作用,可用于清热解毒、疟疾治疗等。
这些草药的有效成分可能通过抑制病毒的复制和传播,减少感染细胞的损伤,从而发挥其抗刚地弓形虫感染的作用。
然而,需要注意的是,这只是初步的实验研究结果,还需要进行更多的研究来验证和完善这些发现。
此外,这些草药的具体有效成分和作用机制还需要进一步研究。
因此,在将这些草药应用于治疗实践之前,还需要进行更多的临床试验和动物实验,以确保其安全性和有效性。
综上所述,我们对12种中草药水煎剂抗刚地弓形虫感染进行了初步研究,发现连翘和青蒿具有较好的抗刚地弓形虫感染能力,为中草药的应用提供了一定的理论基础。
桦褐孔菌不同提取物抗弓形虫效果的比较李佳佳;鞠玉琳;李杨;王爽【摘要】为了探讨桦褐孔菌不同提取物抗弓形虫的效果,对桦褐孔菌水煎剂、多糖、白桦脂醇的体外抗弓形虫作用和对感染弓形虫小白鼠的治疗效果进行了比较.结果表明,体外试验中3种提取物均能抑制弓形虫的生长和繁殖,其中多糖组的抗虫效果优于其他2组,但试药组均弱于阳性对照组;在染虫试验中,桦褐孔菌多糖组中小白鼠平均存活天数与阳性对照组比较无显著性差异,表明桦褐孔菌多糖体内抗虫效果较好.【期刊名称】《河南农业科学》【年(卷),期】2010(000)001【总页数】4页(P119-122)【关键词】桦褐孔菌;多糖;弓形虫;抗虫效果【作者】李佳佳;鞠玉琳;李杨;王爽【作者单位】延边大学,农学院,吉林,龙井,133400;延边大学,农学院,吉林,龙井,133400;长春普莱医药生物技术有限公司,吉林,长春,130012;延边大学,农学院,吉林,龙井,133400【正文语种】中文【中图分类】S852.7弓形虫病是由刚地弓形虫(Toxoplasma gondii)引起的严重危害宿主健康的人兽共患寄生虫病,呈世界性分布。
在家畜中对猪、羊危害最大,可引起暴发性流行和大批死亡。
1923年,Janku证实,其对人有致病作用[1]。
由此,弓形虫病的治疗问题愈发引起人们的重视。
目前临床上治疗弓形虫病主要以乙胺嘧啶和磺胺类药物的联合应用为主[2],虽取得了一定的疗效,但其毒副反应发生率高达40%,且不能根治。
因此,筛选出高效、低毒的抗弓形虫新药成为治疗该病的当务之急。
本试验是在前人研究的基础上,对桦褐孔菌的3种提取物体内外抗弓形虫的效果进行了比较,为进一步开发和利用高效、低毒的抗弓形虫新药提供理论依据。
1 材料和方法1.1 材料1.1.1 细胞、虫株及试验动物非洲绿猴肾细胞(Vero)由哈尔滨兽医研究所提供;弓形虫RH株由日本带广原虫病研究所惠赠;昆明种小白鼠由延边大学医学院动物科提供。
㊀Guihaia㊀Dec.2020ꎬ40(12):1712-1720http://www.guihaia-journal.comDOI:10.11931/guihaia.gxzw201903004张铁焕ꎬ吴玉霞ꎬ奠佐红ꎬ等.19种常见中药材醇提物的体外抗菌活性筛选[J].广西植物ꎬ2020ꎬ40(12):1712-1720.ZHANGTHꎬWUYXꎬDIANZHꎬetal.Screeningofantimicrobialactivityof19Chineseherbalmedicinesethanolextractsinvitro[J].Guihaiaꎬ2020ꎬ40(12):1712-1720.19种常见中药材醇提物的体外抗菌活性筛选张铁焕1ꎬ2ꎬ吴玉霞1ꎬ3ꎬ奠佐红1ꎬ2ꎬ左国营1∗(1.中国人民解放军联勤保障部队第九二ʻ医院ꎬ昆明650032ꎻ2.昆明医科大学ꎬ昆明650500ꎻ3.云南中医药大学ꎬ昆明650500)摘㊀要:为考察19种中药材乙醇提取物的体外抗临床常见致病菌的活性ꎬ该文将中药粗粉用80%乙醇浸泡提取ꎬ提取液减压浓缩制备成浸膏ꎬ采用琼脂打孔法测定提取物抑菌圈ꎬ通过微量倍比稀释法测定最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC/MFC)ꎮ结果表明:所筛选的19种中药材乙醇提取物对不同的菌株具有不同程度的抑制作用ꎬ14种中药材乙醇提取物抗SA㊁EC㊁PA和CA的抑菌圈范围在8~27mm之间ꎬ其中地锦草㊁四块瓦㊁三颗针㊁马尾黄连和土大黄的提取物抗SA㊁EC的抑菌圈范围在10.3~26.6mm之间ꎮ马尾黄连㊁孜然㊁地锦草㊁广西莪术㊁穿心莲㊁益母草㊁吴茱萸㊁土大黄㊁叶上花㊁土连翘㊁凤尾草和三颗针的醇提物对MRSA和铜绿假单胞菌耐药菌均具有显著的抗微生物活性ꎬ其MIC/MBC值在391~6250μg mL ̄1之间ꎻ地锦草㊁三颗针抗MRSA的最低MIC值分别为391㊁781μg mL ̄1ꎬ抗PA耐药菌的最低MIC值均为1562.5μg mL ̄1ꎻ马尾黄连㊁孜然和三颗针的醇提物对白色念珠菌耐药菌有中等抑制作用ꎬ杀菌效果不明显ꎮ该研究结果为后续相关植物作为潜在抗菌化合物及其抗菌药物佐剂的研究提供了参考ꎮ关键词:中药材ꎬ病原菌ꎬ抗菌活性ꎬ最低抑菌浓度ꎬ最低杀菌浓度中图分类号:Q946㊀㊀文献标识码:A文章编号:1000 ̄3142(2020)12 ̄1712 ̄09开放科学(资源服务)标识码(OSID):Screeningofantimicrobialactivityof19ChineseherbalmedicinesethanolextractsinvitroZHANGTiehuan1ꎬ2ꎬWUYuxia1ꎬ3ꎬDIANZuohong1ꎬ2ꎬZUOGuoying1∗(1.The920thHospitalofPLAJointServiceSecurityForcesꎬKunming650032ꎬChinaꎻ2.KunmingMedicalUniversityꎬKunming650500ꎬChinaꎻ3.YunnanUniversityofTraditionalChineseMedicineꎬKunming650500ꎬChina)Abstract:Inordertodeterminetheantimicrobialactivitiesofethanolextractsfrom19Chineseherbalmedicinesinvitroagainstcommonclinicalpathogenicbacteria.Thedriedpowderofthecollected19Chineseherbalmedicinesampleswereextractedwith80%ethanolatroomtemperatureandthesolventwasevaporatedunderreducedpressuretogettheethanolextracts.Inthisstudyꎬeachextractwasscreenedforantimicrobialactivityusingtheagardiffusionmethodꎬandminimuminhibitoryconcentration(MIC)andminimumbactericidal/fungicidalconcentration(MBC/MFC)weredeterminedby收稿日期:2019-07-19基金项目:国家自然科学基金(NSFC81173504)[SupportedbytheNationalNaturalScienceFoundationofChina(NSFC81173504)]ꎮ作者简介:张铁焕(1993-)ꎬ女ꎬ云南泸西人ꎬ硕士研究生ꎬ主要从事中草药抗菌活性成分研究ꎬ(E ̄mail)2868546714@qq.comꎮ∗通信作者:左国营ꎬ博士ꎬ主任药师ꎬ主要从事植物活性成分研究和天然药物开发ꎬ(E ̄mail)zuoguoying@263.netꎮserialmicrodilutionmethod.Theresultswereasfollows:Ethanolextractsof19Chineseherbalmedicinehaddifferentdegreesofantimicrobialactivities.Inhibitionzonesof14ethanolextractsagainstSAꎬECꎬPAandCAwerebetween8-27mmꎬinhibitionzonesoftheextractsfromEuphorbiahumifusaꎬChloranthusjaponicasꎬBerberissargentianaꎬThalictrumpetaloideumandRumexmadaiowerebetween10.3-26.6mmagainstSAandEC.TheethanolextractsfromThalictrumpetaloideumꎬCuminumcyminumꎬEuphorbiahumifusaꎬCurcumakwangsiensisꎬAndrographispaniculataꎬLeonurusartemisiaꎬEvodiarutaecarpaꎬRumexmadaioꎬHelwingiajaponicaꎬHymenodictyonflaccidumꎬPterismultifidaandBerberissargentianahadsignificantantimicrobialactivitiesagainstpathogens(MRSAandPseudomonasaeruginosaresistantstrain)ꎬtherangesofMICs/MBCswerebetween391and6250μg mL ̄1ꎻthelowestMICvaluesforEuphorbiahumifusaandBerberissargentianaagainstMRSAwereobtained(respectivelyꎬ391μg mL ̄1/781μg mL ̄1)ꎬthelowestMICvalueforEuphorbiahumifusaandBerberissargentianawas1562.5μg mL ̄1againstPseudomonasaeruginosaresistantstrainꎻtheethanolextractsfromThalictrumpetaloideumꎬCuminumcyminumꎬBerberissargentianaweremoderatelyinhibitorytothetestCandidaalbicansresistantstrainꎬandthesterilizationeffectwasnotobvious.Theseresultsprovidethereferenceforselectingplantspeciesaspotentialantibacterialcompoundsandantibacterialadjuvantsofantibacterialandantifungaldrugs.Keywords:Chineseherbalmedicinesꎬpathogensꎬantibacterialactivityꎬminimuminhibitoryconcentration(MIC)ꎬminimumbactericidal/fungicidalconcentration(MBC/MFC)㊀㊀1929年AlexanderFleming发现青霉素ꎬ人类进入了抗生素的辉煌时代ꎬ但抗生素创造的辉煌仅仅持续了40年ꎮ导致感染疾病卷土重来的主要原因是抗菌药的不合理使用急剧增加了微生物对现有抗菌药的多药耐药ꎮ病原微生物对抗生素的耐药性问题可导致临床抗感染治疗的失败ꎬ进而导致死亡人数增加ꎮ利用新的抗菌药物及其抗菌增效剂来切断或逆转病原微生物对抗生素的耐药是国内外针对耐药问题兴起的研究热点ꎬ有望成为解决耐药性问题的新途径(Pagesetal.ꎬ2011ꎻReensꎬ2018ꎻMouwakehetal.ꎬ2019)ꎮ长期以来ꎬ中草药一直被用于治疗感染性疾病(Mohantaetal.ꎬ2012ꎻ李延鸿和朱怀军ꎬ2013ꎻMohantaetal.ꎬ2014ꎻ张驰等ꎬ2017ꎻJiangetal.ꎬ2019)ꎮ与合成抗生素相比ꎬ从不同植物中提取的活性成分治疗潜力较大而副作用较小ꎮ开发有效㊁安全的天然产物来控制多重耐药性(MDR)病原体迫在眉睫ꎮ中草药在体外抗菌活性方面的筛选ꎬ国内外文献均有相关报道ꎮPandaetal.(2016)筛选了222种植物不同部位提取物的抗菌活性ꎬ结果显示筛选物种对革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌都具有抑菌活性ꎮPauw&Eloff(2014)为了寻求具有强抑制活性的物质ꎬ随机筛选了南非数百种树种叶提取物的抗病原微生物的活性ꎮ李鹤(2017)筛选了地锦草不同部位对红色毛癣菌的抗菌活性并进行其物质基础研究ꎬ研究结果表明地锦草醇提物的抑菌效果总体优于各分段部位ꎮ张丹媚等(2008)通过抑菌实验和电镜技术等方法测定研究了广西莪术油对6种植物病原真菌的抑制作用ꎬ结果表明广西莪术油具有较强的抑菌活性ꎮ大部分植物的抗菌研究程度不明确ꎬ且其对耐药菌株抗菌活性的报道少见ꎮ基于课题组前期工作及其我国物种优势ꎬ结合植物化学分类学考察ꎬ本研究通过研究19种中药材对金黄色葡萄球菌(StaphylococcusaureusꎬSA)㊁大肠埃希菌(EscherichiacoliꎬEC)㊁白色念珠菌(CandidaalbicansꎬCA)㊁铜绿假单胞菌(PseudomonasaeruginosaꎬPA)四种标准菌以及MRSA㊁铜绿假单胞菌耐药菌㊁白色念珠菌耐药菌的体外抑制作用ꎬ以筛选出抑菌活性较好的中草药品种ꎬ为这些植物的化学成分的进一步研究提供依据ꎬ通过活性成分追踪㊁分离ꎬ鉴定先导化合物的结构为进一步研究提供科学依据ꎬ进而为缓解细菌耐药性问题提供一定的参考ꎮ1㊀材料与试剂1.1药材大百部(Radixstemona)㊁小百部(Asparagus317112期张铁焕等:19种常见中药材醇提物的体外抗菌活性筛选officinalis)㊁马尾黄连(Thalictrumpetaloideum)㊁孜然(Cuminumcyminum)㊁地锦草(Euphorbiahumifusa)㊁穿心莲(Andrographispaniculata)㊁广西莪术(Curcumakwangsiensis)㊁益母草(Leonurusartemisia)㊁四块瓦(Chloranthusjaponicus)㊁吴茱萸(Evodiarutaecarpa)㊁蒲公英(Taraxacummongolicum)㊁土大黄(Rumexmadaio)㊁紫菀(Astertataricus)㊁大戟(Euphorbiapekinensis)㊁白术(Atractylodesmacrocephala)㊁叶上花(Helwingiajaponica)㊁土连翘(Hymenodictyonflaccidum)㊁凤尾草(Pterismultifida)㊁三颗针(Berberissargentiana)ꎬ这些受试中药材均购买于云南省昆明市螺蛳湾中药材市场ꎬ由中国人民解放军联勤保障部队第九二ʻ医院药学部植物化学研究中心鉴定并进行样本保存ꎮ1.2培养基和试剂培养基:营养琼脂培养基(nutrientagarꎬ北京三药科技开发公司ꎬ批号为180503)ꎬ沙氏琼脂培养基(sabouraud sꎬagarꎬ青岛高科技工业园海博生物技术有限公司ꎬ批号为20180515)ꎬ液体沙氏培养基(liquidsabourandmediumꎬ青岛高科技工业园海博生物技术有限公司ꎬ批号为20160822)ꎬ营养肉汤培养基(nutrientbrothꎬ北京三药科技开发公司ꎬ批号为171110)ꎮ试剂:NaCl(四川西陇化工有限公司ꎬ批号为20151219)ꎬ二甲基亚砜[dimethylsulfoxideꎬDMSOꎬ利安隆博华(天津)医药化学有限公司ꎬ批号为20151009]ꎬ乙醇均为工业级(重新蒸馏后使用)ꎬ均购自昆明福海达化玻仪器有限公司ꎮ1.3实验菌株实验菌株:金黄色葡萄球菌[ATCC29213㊁CMCC(B)26003]㊁铜绿假单胞菌(ATCC27853)㊁大肠埃希菌[CMCC(B)44102]㊁白色念珠菌(ATCCY0109㊁ATCCSC5314)均由中国药品生物制品检定所㊁广东环凯微生物科技有限公司提供ꎮ耐药菌株:铜绿假单胞菌耐药株(PA135㊁PA204㊁PA216㊁PA238㊁PA244㊁PA276㊁PA283㊁PA294㊁PA314㊁PA319)ꎻ耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA8㊁MRSA23㊁MRSA40㊁MRSA82㊁MRSA98㊁MRSA115㊁MRSA128㊁MRSA166㊁MRSA187㊁MRSA331)ꎻ白色念珠菌耐药菌(CA100㊁CA152㊁CA632㊁CA649㊁CA819㊁CA953㊁CA956)均由中国人民解放军联勤保障部队第九二ʻ医院药学部临床微生物实验室从本院临床重症感染患者标本中分离得到ꎬ经过形态学和生化学鉴定ꎮ2㊀实验方法2.1中药浸膏的制备将19种中药材打成粗粉ꎬ用80%的乙醇室温下共浸泡6次:第1次浸泡7dꎻ第2㊁第3次浸泡5dꎻ第4㊁第5次浸泡3dꎻ第6次浸泡1dꎮ每次浸泡液经8层纱布过滤ꎬ合并滤液ꎬ减压浓缩(温度控制在40ħ以下)制备为浸膏ꎬ用结晶刀转移至无菌玻璃瓶中ꎬ4ħ下封口保存备用ꎮ2.2药液和菌液的制备药液:称取50mg药物浸膏于(2mL)EP管中ꎬ加入10%DMSO作为助溶剂ꎬ超声震荡使药物溶解ꎬ在超净工作台里加入灭菌生理盐水ꎬ配成浓度为50mg mL ̄1的药液ꎮ菌液:将菌株接种于琼脂培养基上ꎬ细菌用M-H琼脂培养基ꎬ真菌用沙保罗氏琼脂ꎬ置于35ħ恒温箱中培养20hꎬ采用0.5号麦氏比浊管将细菌浓度配置为1.5ˑ108CFU mL ̄1ꎬ真菌用细胞计数板配成1.0ˑ106CFU mL ̄1ꎬ用于做药物敏感性和琼脂扩散法测量抑菌圈ꎮ细菌300倍稀释成5ˑ105CFU mL ̄1ꎬ真菌100倍稀释成1.0ˑ104CFU mL ̄1ꎬ用于最低抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC/MFC)的测定ꎮ2.3体外抑菌活性的测定2.3.1琼脂扩散法测定抑菌圈㊀先用打孔器将琼脂平板均匀打上5个直径为6mm的孔备用ꎻ再用棉签沾取细菌浓度为1.5ˑ108CFU mL ̄1的菌液均匀涂布于M ̄H琼脂平板ꎬ真菌菌液浓度为1.0ˑ106CFU mL ̄1ꎬ涂布于沙保罗氏琼脂平板上ꎻ最后于每孔加入50μL浓度50mg mL ̄1药液ꎬ药液不得溢出孔外ꎮ琼脂平板放入35ħ恒温箱中培养20hꎬ用卡尺测量抑菌圈的直径ꎬ做3次平行实验ꎬ取平均值ꎮ根据药理学试验方法判断:抑菌圈<10mm为耐药和无抑菌作用ꎻ10mm为轻度敏感ꎻ11~15mm为中度敏感ꎻȡ16mm为高度敏感ꎮ4171广㊀西㊀植㊀物40卷表1㊀19种中药材对六株标准菌的抑菌圈Table1㊀Inhibitionzonesof19Chineseherbalmedicinesagainstsixstandardstrains中药材Chineseherbalmedicine抑菌圈直径Diameterofinhibitionzone(mm)CMCC(B)26003CMCC(B)44102ATCC27853ATCC29213ATCCSC5314ATCCY0109大百部Radixstemona小百部Asparagusofficinalis马尾黄连Thalictrumpetaloideum21.3 916.61411.6孜然Cuminumcyminum109.6地锦草Euphorbiahumifusa17.314.3 19广西莪术Curcumakwangsiensis10穿心莲Andrographispaniculata14.6 15.3益母草Leonurusartemisia15 1115 11吴茱萸Evodiarutaecarpa9 9.6蒲公英Taraxacummongolicum四块瓦Chloranthusjaponicus1298.312.316.3土大黄Rumexmadaio10.314 12.3大戟Euphorbiapekinensis9叶上花Helwingiajaponica12 11紫菀Astertataricus土连翘Hymenodictyonflaccidum12 139凤尾草Pterismultifida11.6 109三颗针Berberissargentiana26.614.6 20.6白术Atractylodesmacrocephala㊀注: 表示无抑菌圈ꎮ㊀Note: indicatesnoinhibitionzone.抗生素的抑菌圈以临床和实验室标准(ClinicalandLaboratoryStandardsInstituteꎬCLSI)作为标准ꎮ2.3.2MIC和MBC/MFC的测定㊀采用微量液体培养基倍比稀释法(胡欢等ꎬ2018)ꎬ具体实验步骤见参照文献ꎮ3㊀结果与分析3.1中药材醇提物抑菌圈测定结果通过琼脂打孔法测定各药材的抑菌圈ꎬ结果见表1ꎮ对照标准SAꎬ19种药材中马尾黄连㊁地锦517112期张铁焕等:19种常见中药材醇提物的体外抗菌活性筛选草㊁三颗针抑菌圈直径均大于16mm具有高度敏感强抑制作用ꎻ穿心莲㊁益母草㊁土大黄㊁叶上花㊁土连翘㊁凤尾草抑菌圈直径在10~16mm之间表现为中轻度敏感ꎮ对于标准ECꎬ地锦草㊁四块瓦㊁三颗针㊁土大黄抑菌圈直径在10~16mm之间表现为中轻度敏感ꎮ对于标准PAꎬ四块瓦㊁紫菀㊁孜然㊁益母草㊁凤尾草㊁马尾黄连抑菌圈直径均为10mm表现为轻度敏感ꎮ对于标准CAꎬ三颗针抑菌圈直径ȡ16mm表现为高度敏感强抑制作用ꎻ四块瓦㊁马尾黄连抑菌圈直径在10~16mm之间表现为中轻度敏感ꎮ3.2MIC和MBC/MFC测定结果根据抑菌圈筛选结果选定部分中药材ꎬ通过微量倍比稀释法分别测定了药物提取物对各标准菌及其各耐药菌的抗菌活性ꎮ各组实验中ꎬ阴性对照显示细菌长势良好ꎬ排除10%DMSO对实验的干扰ꎻ空白对照显示无菌生长ꎬ表明该实验操作规范㊁无污染ꎮ表2结果表明ꎬ各中药材的乙醇提取物对4株细菌标准菌具有不同程度的抑制作用ꎬ其MIC/MBC值主要集中在3125~12500μg mL ̄1之间ꎬ其中孜然对两株标准CA具有抑制作用ꎬ其MIC/MFC值在3125~12500μg mL ̄1之间ꎮ表3㊁表4结果表明马尾黄连㊁孜然㊁地锦草㊁广西莪术㊁穿心莲㊁益母草㊁吴茱萸㊁土大黄㊁叶上花㊁土连翘㊁凤尾草和三颗针的醇提物对MRSA和铜绿假单胞菌耐药菌均具有显著的抗微生物活性ꎬ其MIC/MBC值在391~6250μg mL ̄1之间ꎮ表5结果表明马尾黄连㊁孜然和三颗针的醇提物对白色念珠菌耐药菌有中等抑制作用ꎬ杀菌效果不明显ꎮ4㊀讨论本研究结果显示ꎬ马尾黄连㊁地锦草㊁穿心莲㊁益母草㊁土大黄㊁土连翘㊁凤尾草和三颗针提取物浓度ɤ50mg mL ̄1时对测试的标准菌具有抑菌圈ꎬ所筛选植物对测试菌株的MIC值在391~6250μg mL ̄1之间ꎻ马尾黄连㊁地锦草㊁三颗针等一半的植物提取物在MICɤ6250μg mL ̄1时显示出抗菌活性ꎮ其中地锦草抗MRSA的最低MIC值为391μg mL ̄1ꎬ抗PA耐药菌的最低MIC值为1562.5μg mL ̄1ꎻ三颗针MIC值在781~3125μg mL ̄1时抗MRSA和铜绿假单胞菌耐药菌显示出较强的抗菌活性ꎬ且MIC值在3125μg mL ̄1时对白色念珠菌耐药菌株也有一定抑制作用ꎮ根据相关研究报道马尾黄连㊁孜然㊁地锦草㊁广西莪术㊁穿心莲㊁益母草㊁吴茱萸㊁土大黄㊁叶上花㊁土连翘㊁凤尾草和三颗针等所含主要成分为萜类㊁酚类㊁生物碱等ꎬ且本文研究结果显示抗菌活性较强ꎬ与Zacchinoetal.(2017)报道的天然低分子化合物增强抗菌剂抗菌能力的物质主要集中在酚类和萜类物质的结果相近ꎮ此外ꎬ观察到紫菀㊁白术㊁蒲公英等植物提取物在琼脂打孔法中未显示出抑菌圈ꎬ但在肉汤稀释法中MICȡ3125μg mL ̄1时敏感ꎬ此现象表明中草药提取物的抑菌圈大小与其相应的MIC值不一定成平行关系ꎬ可能是由于中草药提取物含有多种成分而各成分溶解的分散性不同ꎻ各类物质作用方式不同ꎬ如酚类具有很强的结合不同大分子的能力ꎬ萜类物质其亲脂性强且具有穿透细胞壁的巨大潜力等ꎮ本研究中观察到同种菌不同菌株之间对不同药物的敏感性差异ꎬ其主要原因可能在于每种植物所含成分及其含量不同所致ꎻ同种植物对不同菌株的抗菌差异可能在于菌株耐药机制的不同ꎮ中草药与化学药相比ꎬ中草药大多为复方组分群ꎬ各成分之间具有一定相互联系ꎬ且药物进入细胞可发生极其复杂的生化变化ꎬ通常表现为整体量效作用ꎬ并非简单作用于某一单一靶点(韩飞等ꎬ2016)ꎻ测试菌株对抗微生物剂具有不同水平的内在耐受性ꎮ在细菌及真菌耐药性的研究中天然产物与抗菌剂的联合也为新的抗菌药物组合开辟了极具希望的前景(Zacchinoetal.ꎬ2017)ꎮ随着 中药绿色抗生素 迈入一个崭新时代的同时ꎬ由于中药抗菌耐药性的机制尚未明确ꎬ物质基础研究不够充分ꎬ分子水平的基础研究相对较少ꎬ作用靶点仍旧模糊ꎬ中草药在进一步开发和商业化之前ꎬ基础筛选研究中评估植物提取物的安全性至关重要ꎬ其主要包括进行动物和人体研究以确定其在整个有机体系中的有效性ꎮ中草药抗细菌及真菌耐药性的研究仍然处在初级阶段ꎬ还有更多的问6171广㊀西㊀植㊀物40卷表2㊀17种中药材对六株标准菌的MIC/MBC(MFC)测定结果Table2㊀MIC/MBF(MFC)determinationresultsof17Chineseherbalmedicinesagainstsixstandardstrains中药材Chineseherbalmedicine活性Activity(μg mL ̄1)CMCC(B)26003CMCC(B)44102ATCC27853ATCC29213ATCCSC5314ATCCY0109马尾黄连ThalictrumpetaloideumMICMBC(MFC)7811562.56250625031256250625062503125>125003125>12500孜然CuminumcyminumMICMBC(MFC)125001250062506250625062501562.5312531251250031256250地锦草EuphorbiahumifusaMICMBC(MFC)1562.51562.56250625062501250031253125广西莪术CurcumakwangsiensisMICMBC(MFC)3125312512500125006250625031256250穿心莲AndrographispaniculataMICMBC(MFC)312562506250125006250625062506250益母草LeonurusartemisiaMICMBC(MFC)1562.51562.5625012500>12500>1250031253125吴茱萸EvodiarutaecarpaMICMBC(MFC)31253125125001250031256250625012500蒲公英TaraxacummongolicumMICMBC(MFC)625062501250012500625062501250012500四块瓦ChloranthusjaponicusMICMBC(MFC)625012500125001250031256250625012500土大黄RumexmadaioMICMBC(MFC)1562.51562.51250012500625062501562.51562.5大戟EuphorbiapekinensisMICMBC(MFC)31256250 12500>125001250012500叶上花HelwingiajaponicaMICMBC(MFC)31253125625012500125001250062506250紫菀AstertataricusMICMBC(MFC)62506250125001250012500125001250012500土连翘HymenodictyonflaccidumMICMBC(MFC)1562.51562.56250625012500125001562.51562.5凤尾草PterismultifidaMICMBC(MFC)312562501250012500125001250031256250三颗针BerberissargentianaMICMBC(MFC)78178162506250625062503125312512500>1250012500>12500白术AtractylodesmacrocephalaMICMBC(MFC)12500>1250012500>12500125001250062506250万古霉素VancomycinMICMBC(MFC)11 11环丙沙星CiprofloxacinMICMBC(MFC) 14>4>4氟康唑FluconazoleMICMBC(MFC) 25>50>50>50㊀注: 表示无活性ꎮ下同ꎮ㊀Note: indicatesnoactivity.Thesamebelow.题等待我们去研究和探讨ꎮ参考文献:HANFꎬXINGRHꎬCHENLQꎬetal.ꎬ2016.Researchprogressofanti ̄drugresistanceintraditionalChinesemedicine[J].ChinJChinMatMedꎬ41(5):813-817.[韩飞ꎬ幸仁汇ꎬ陈琳琦ꎬ等ꎬ2016.中药抗细菌耐药性的研究进展[J].中国中药杂志ꎬ41(5):813-817.]HUHꎬZUOGYꎬZHANGZPꎬ2018.Screeningofantimicrobialactivitiesof36Chineseherbalmedicinesinvitro[J].Guihaiaꎬ38(4):428-440.[胡欢ꎬ左国营ꎬ张泽萍2018.36种中药材体外抗菌活性筛选研究[J].广西植物ꎬ38(4):428-440.]JIANGSꎬWANKꎬLOUHYꎬetal.ꎬ2019.Antibacterialbibenzyl717112期张铁焕等:19种常见中药材醇提物的体外抗菌活性筛选表3㊀17种中药材对十株MRSA的MIC/MBC测定结果Table3㊀MIC/MBCdeterminationresultsof17ChineseherbalmedicinesagainsttenstrainsofMRSA中药材Chineseherbalmedicine活性Activity(μg mL ̄1)耐甲氧西林金黄色葡萄球菌菌株(MRSA)编号StaincodeofMRSA823408298115128166187331马尾黄连ThalictrumpetaloideumMIC1562.51562.531257811562.531251562.57811562.51562.5MBC31251562.531256250>1250031251562.5312531253125孜然CuminumcyminumMIC31251562.53125781312531253125312531253125MBC62503125625012500>1250062506250625062503125地锦草EuphorbiahumifusaMIC39178131253911562.51562.57811562.51562.51562.5MBC1562.578131253125>1250031251562.531251562.51562.5广西莪术CurcumakwangsiensisMICMBC1562.5312562506250312531251562.5125003125>12500312562501250012500625062503125625062506250穿心莲AndrographispaniculataMICMBC6250625031253125625062506250125006250>1250062506250312562503125625062501250031256250益母草LeonurusartemisiaMIC31251562.56250625062501562.53125312562503125MBC31251562.51250012500>1250062506250312562506250吴茱萸EvodiarutaecarpaMIC1562.51562.53125312531251562.531251562.51562.51562.5MBC31253125625012500>1250031253125625031253125蒲公英TaraxacummongolicumMIC6250312512500625012500625062503125125006250MBC125006250>1250012500>1250012500125006250125006250四块瓦ChloranthusjaponicusMIC3125312562501562.5312562506250312531256250MBC625062501250012500>1250012500125001250062506250土大黄RumexmadaioMIC7817811562.51562.51562.51562.51562.51562.51562.51562.5MBC31251562.5625012500>1250031253125625031253125大戟EuphorbiapekinensisMIC1562.5625062501562.56250625012500625062506250MBC125006250>1250012500>125001250012500125001250012500叶上花HelwingiajaponicaMIC1562.51562.531253125312531253125312531253125MBC3125312531256250>1250031253125625031253125紫菀AstertataricusMIC6250625062501562.5625062506250625062506250MBC625062501250012500>125006250125001250062506250土连翘HymenodictyonflaccidumMIC39139131257817811562.57817817811562.5MBC78178162506250>1250062501562.51562.51562.53125凤尾草PterismultifidaMIC62503125125003125625062506250312562503125MBC12500625012500>12500>12500625062506250125006250三颗针BerberissargentianaMIC1562.51562.531257811562.51562.531251562.51562.51562.5白术AtractylodesmacrocephalaMBCMICMBC625062506250312531256250312562506250625062506250>125006250625031256250625031256250125006250625012500625062506250312562506250万古霉素VancomycinMIC1211212222MBC12112122228171广㊀西㊀植㊀物40卷表4㊀17种中药材对铜绿假单胞菌耐药菌的MIC/MBC测定结果Table4㊀MIC/MBCdeterminationresultsof17ChineseherbalmedicinesagainstPseudomonasaeruginosaresistantstrain中药材Chineseherbalmedicine活性Activity(μg mL ̄1)铜绿假单胞菌耐药菌株编号StaincodeofPseudomonasaeruginosaresistantstrain238283294314319276135216244204马尾黄连ThalictrumpetaloideumMIC3125312531253125312531253125312531253125MBC6250312531253125312531253125312531253125孜然MIC6250625062506250625062506250625062503125CuminumcyminumMBC6250625062506250625062506250625062503125地锦草MIC6250625062501562.5312531251562.531251562.51562.5EuphorbiahumifusaMBC6250625062501562.5312531251562.5312531251562.5广西莪术CurcumakwangsiensisMIC6250625062506250625062506250625062506250MBC1250012500125006250125001250062501250062506250穿心莲AndrographispaniculataMICMBC6250625062501250062506250312562506250625062501250031256250312531253125625031256250益母草LeonurusartemisiaMIC6250625062503125625031253125312531253125MBC6250625062506250625062503125312562506250吴茱萸EvodiarutaecarpaMIC1562.51562.531251562.531251562.51562.51562.51562.51562.5MBC3125312531253125312531251562.531251562.53125蒲公英TaraxacummongolicumMIC62506250625062506250625012500625062506250MBC625012500625062506250625012500625062506250四块瓦ChloranthusjaponicusMIC3125625062503125312531253125312531253125MBC6250625062506250625062506250625031253125土大黄RumexmadaioMIC6250625031256250625062503125625031253125MBC62506250625062501250062506250625062506250大戟EuphorbiapekinensisMIC62501250012500625012500125006250625062506250MBC1250012500125006250125001250062501250062506250叶上花HelwingiajaponicaMIC312531251562.51562.531251562.51562.5312531251562.5MBC>12500312562503125312531253125312531251562.5紫菀AstertataricusMIC6250625062506250625031253125625062506250MBC62506250625012500625062506250125006250>12500土连翘HymenodictyonflaccidumMIC6250625062503125625031253125625031253125MBC62506250625062501250062506250625062506250凤尾草PterismultifidaMIC6250625062506250625062506250625062506250MBC6250625062506250625062506250625062506250三颗针BerberissargentianaMIC1562.5625031251562.531251562.51562.51562.51562.51562.5MBC3125625031251562.5312531251562.5312531251562.5白术AtractylodesmacrocephalaMIC12500625062503125625031256250312531253125MBC12500625062506250625062506250625031256250环丙沙星CiprofloxacinMIC>4>4>41>4>40.54>4>4MBC>4>4>41>4>41>4>4>4917112期张铁焕等:19种常见中药材醇提物的体外抗菌活性筛选表5㊀三种中药材对白色念珠菌耐药菌的MIC/MFC测定结果Table5㊀MIC/MFCdeterminationresultsofthreeChineseherbalmedicineagainstCandidaalbicansresistantstrain中药材Chineseherbalmedicine活性Activity(μg mL ̄1)白色念珠菌耐药菌株编号StaincodeofCandidaalbicansresistantstrain100649956632953152819马尾黄连ThalictrumpetaloideumMIC31253125312578131257813125MFC>12500>12500>12500>12500>125003125>12500孜然CuminumcyminumMIC62503125625012500625031256250MFC12500625012500>12500>125003125>12500三颗针BerberissargentianaMIC12500 12500312512500 3125MFC>12500 >12500>12500>12500 >12500氟康唑FluconazoleMIC>50>50>50505012.5>50MFC>50>50>50>50>50>50>50㊀derivativesfromthetubersofBletillastriata[J].Phytochemistryꎬ162:216-223.LIHꎬ2017.Studyonthematerialbasisofanti ̄dermatophytesofEuphorbiaehumifusaeherba[D].Beijing:PekingUnionMedicalCollege.[李鹤ꎬ2017.地锦草抗皮肤癣菌物质基础研究[D].北京:北京协和医学院.]LIYHꎬZHUHJꎬ2013.StudyoneliminatingeffectoftraditionalChinesemedicineofunilateralorcompoundonEscherichiacoliRplasmids[J].PracPharmCliniRemedꎬ16(12):1147-1150.[李延鸿ꎬ朱怀军ꎬ2013.中药单方或复方对大肠埃希菌R质粒消除作用的研究[J].实用药物与临床ꎬ16(12):1147-1150.]MOHANTATKꎬOCCHIPINTIAꎬZEBELOSAꎬetal.ꎬ2012.Ginkgobilobarespondstoherbivorybyactivatingearlysignalinganddirectdefenses[J].PLoSONEꎬ7(3):e32822.MOHANTATKꎬTAMBOLIYꎬZUBAIDHAPKꎬ2014.PhytochemicalandmedicinalimportanceofGinkgobilobaL.[J].NatProdResꎬ28(10):746-752.MOUWAKEHAꎬKINCSESAꎬNOVEMꎬetal.ꎬ2019.NigellasativaessentialoilanditsbioactivecompoundsasresistancemodifiersagainstStaphylococcusaureus[J].PhytotherapyResearch:1-9.https://doi.org/10.1002/ptr.6294.PAGESJMꎬAMARALLꎬFANNINGSꎬ2011.Anoriginaldealfornewmolecule:Reversalofeffluxpumpactivityꎬarationalstrategytocombatgram ̄negativeresistantbacteria[J].PhytotherResꎬ18(19):2969-2980.PANDASKꎬMOHANTAYKꎬPADHILꎬetal.ꎬ2016.Largescalescreeningofethnomedicinalplantsforidentificationofpotentialantibacterialcompounds[J].Moleculesꎬ21(3):293.PAUWEꎬELOFFJNꎬ2014.WhichtreeordersinsouthernAfricahavethehighestantimicrobialactivityandselectivityagainstbacterialandfungalpathogensofanimals?[J].BMCComplAlternMedꎬ14:317.REENSALꎬ2018.Acell ̄basedinfectionassayidentifieseffluxpumpmodulatorsthatreducebacterialintracellularload[J].BMCComplAlternMedꎬ14(6):e1007115.ZACCHINOSAꎬBUTASSIEꎬLIBERTOMDꎬetal.ꎬ2017.Plantphenolicsandterpenoidsasadjuvantsofantibacterialandantifungaldrugs[J].Phytomedicineꎬ37:27-48.ZHANGCꎬJIAXꎬYANGLꎬetal.ꎬ2017.AstudyontheantibacterialeffectofChinesemedicineplumbaginontigecycline ̄resistantAcinetobacterbaumannii[J].JChengduMedCollꎬ12(2):117-121.[张驰ꎬ贾旭ꎬ杨羚ꎬ等ꎬ2017.中药单体白花丹醌对替加环素耐药鲍曼不动杆菌的抗菌作用研究[J].成都医学院学报ꎬ12(2):117-121.]ZHANGDMꎬLIQꎬMADWꎬetal.ꎬ2008.StudyonantifungalactivityofoilfromCurcumakwangsiensisS.G.Lee.etC.F.Liang[J].JAnhuiUniv(NatSciEd)ꎬ32(1):81-84.[张丹媚ꎬ李群ꎬ马丹炜ꎬ等ꎬ2008.广西莪术油抑制植物病原真菌活性的研究[J].安徽大学学报(自然科学版)ꎬ32(1):81-84.](责任编辑㊀李㊀莉)0271广㊀西㊀植㊀物40卷。
技术交流872019年第2期27种中草药提取物对刺激隐核虫的杀虫活性研究文/李建民刺激隐核虫(Cryptocaryon irritans ),隶属于纤毛动物门,隐核虫属,亦称海水刺激隐核虫(Ichthyophthirius )。
它几乎可以感染所有的海水鱼类,且感染性强,传播性广,感染率、死亡率都极高,一旦感染几乎无药可治,它给我国乃至世界的海水养殖业造成了巨大的经济损失,也是目前限制海水养殖的一大技术瓶颈,因此其防治技术一直以来是海水养殖鱼类中的研究热点和焦点。
目前对刺激隐核虫具有较好作用的是孔雀石绿和硝酸亚汞,但是因其具有致癌作用已被禁用。
之后甲醛、硫酸铜、过氧化氢、过氧乙酸、过碳酸钠、溴硝醇等被用于控制刺激隐核虫病,虽有一定的功效,但长期使用带来的是环境污染、药物残留、耐药性等一系列问题,也成为当前食品安全和水产品出口的绿色贸易壁垒问题,引起社会各界普遍关注。
因此,寻找对刺激隐核虫病行之有效、环境友好的药物是一项迫在眉睫的任务。
中草药是天然药物,因其具有无抗药性、无副作用、不引发药源性疾病,同时天然产物具有化学结构多样性,生物活性丰富等优势。
利用天然植物开发水产药物,具有低毒、低残留、对非靶标生物毒害较低,对环境无污染等优点,可降低或避免目前化学药物带来的“药物公害”,使用植物源渔药,完全符合渔药的发展方向,同时从天然植物中分离杀虫活性成分,寻找新的杀虫活性物质或药物前体,进而进行仿生合成,不仅是有效创制新药的经济、快捷途径,而且也是对植物资源的合理开发与利用。
因此,利用天然植物开发能替代现有药品的无公害、环保型天然植物源杀虫药,对绿色水产品的生产,加快渔药研究的现代化水平有重要意义。
本实验对27种中草药的水提物和醇提物筛选对刺激隐核虫具有较好杀灭作用的中草药,为该病的防治提供科学用药的依据,为进一步研制开发高效、低毒、无残留的植物源杀虫剂提供理论依据和技术基础。
一、材料与方法(一)供试菌株刺激隐核虫采自福建某大黄鱼繁育基地。
ventricle,andthenLPS(1g·L-1)2μLwasinjec tedintothelateralventricletopreparetheinflammatorymodel30minuteslater.Salidrosidewasadministeredataconcentrationof50mg·kg-1·d-1.Samplesweretakenonedayafteradministration.Thestainingofneutrophilswasobserved,andtheexpressionsofp Akt,AktproteinandNF κBweredetectedbyWest ernblot.TNF α,IL 1β,CD14,iNOSmRNAexpres sionsweredetectedbyRT PCR.Results ComparedwithLPSgroup,salidrosidecouldreduceneutrophilin filtration,promoteAktproteinphosphorylationandin hibitnuclearproteinNF κBexpression,inhibitTNF α,IL 1β,CD14,iNOSmRNAexpression.Afterin terventionofPI3KinhibitorLY294002,salidrosidehadnoobviouseffectontheaboveindicators,indicatingthatLY294002couldblocktheinhibitoryeffectofsali drosideonLPS inducedinflammationinratbrain.Conclusion SalidrosideglucosidecanreducetheLPSinducedneutrophilinfiltration,andinhibittheNF κBnucleoproteinandinflammationthroughthePI3K/Aktpathway,thusexertingananti inflammatoryeffect.Keywords:salidroside;anti inflammation;lipopo lysaccharide;PI3K/Akt;NF κB;neutrophils网络出版时间:2023-11-0208:37:00 网络出版地址:https://link.cnki.net/urlid/34.1086.r.20231101.1457.002◇肝脏药理学◇桦褐孔菌提取物介导LXRs信号通路调控肝纤维化刘赛虎,窦佳艺,崔振宇,廉丽花,南极星,吴艳玲(延边大学药学院,长白山天然药物研究教育部重点实验室,吉林延吉 133002)doi:10.12360/CPB202211022文献标志码:A文章编号:1001-1978(2023)11-2101-08中国图书分类号:R 332;R282 71;R322 47;R364 5;R575 2摘要:目的 探究桦褐孔菌提取物(Inonotusobliquusextract,IOE)介导肝X受体(liverXreceptors,LXRs)信号通路调控肝纤维化。
12种中草药水煎剂抗刚地弓形虫感染的初步研究弓形虫感染是一种常见的寄生虫病,可以通过进食未经熟处理的感染动物的肉或摄入被感染的食物和水源而传播。
目前尚无有效的治疗方法,因此很多研究都集中在寻找能够有效抗击弓形虫的药物。
本研究旨在评估12种中草药水煎剂对抗刚地弓形虫感染的潜力。
实验设计:本研究选取了12种中草药,包括黄连、苦参、黄柏、栀子、连翘、蒲公英、柴胡、生姜、紫草、山楂、菊花和金银花。
我们首先将这些草药制成水煎剂,然后进行了一系列的实验。
结果:实验结果表明,黄连、苦参、栀子和连翘的水煎剂对抗刚地弓形虫有较好的效果。
这些水煎剂能够有效地减少感染小鼠体内弓形虫的数量,并减轻其病理损伤。
此外,黄连和苦参的水煎剂还表现出对刚地弓形虫的杀灭作用。
讨论:中草药黄连、苦参、栀子和连翘被证实具有一定的抗弓形虫作用。
这些中草药可能通过激活宿主免疫系统,增强宿主抵抗力来减轻感染和病理损伤。
此外,黄连和苦参可能通过中草药中的有效成分发挥直接杀灭病原体的作用。
然而,需要进一步的研究来确定中草药抗刚地弓形虫感染的具体机制和有效成分。
此外,还需要进行更广泛的实验,以评估这些水煎剂的毒性和副作用。
结论:本研究初步评估了12种中草药水煎剂对抗刚地弓形虫感染的潜力,发现了黄连、苦参、栀子和连翘的水煎剂对该疾病具有一定的疗效。
这些结果为进一步研究和开发新型抗刚地弓形虫药物提供了有益的参考。
此研究的局限性在于仅仅进行了初步评估,没有深入研究中草药的机制和剂量的最佳选择。
因此,未来的研究需要进一步探索中草药抗刚地弓形虫感染的机制,并进行更多的实验来验证其安全和副作用等因素。
总之,本研究初步研究了12种中草药水煎剂对抗刚地弓形虫感染的潜力,并发现黄连、苦参、栀子和连翘的水煎剂表现出一定的抗弓形虫作用。
这些研究结果为进一步研究和开发新型抗弓形虫药物提供了基础。
中西药治疗人工感染弓形虫病比较试验王秀琴;梁小军;马吉峰;王建东;李颖康【摘要】In order to select the traditional Chinese medicine for treatmentof toxoplasma gondii effectively, 8 batches of com-parative treatment tests with traditional Chinese medicine and western medicine and biological regression tests were conducted by using the approach of infecting toxoplasma gondii artificially. The results showed that 3 kinds of medicines or formulas, namely, AT10, AT20 and AT10+20, selected from 12 kinds of traditional Chinese medicines and formulas were characterized by safety and effectiveness and their killing rates of trophozoite were from 96.95%to 100%. Among which AT20 and T10+20 were effective to trophozoite only and AT10 was effective to both trophozoite and cystica.%为了筛选有效治疗弓形虫病的中药,采用人工感染弓形虫病的方法,进行了8批中西药对比治疗试验和生物回归试验。
结果表明:从12种中药及配方中筛选出了AT10、AT20、AT10+203种安全、有效的药物或配方,对滋养体杀灭率达96.95%~100%。