猪人工授精技术的操作规程

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猪人工授精技术的操作规程 

李杰 

(杭州大观山种猪育种有限公司,浙江杭州311115) 中图分类号:¥828.3 4文献标识码:B文章编号:1005—7307(2015)02—0030—004 

猪人工授精技术是养猪生产中经济有效的技术 

措施之一,是种猪培育和商品猪生产的有效方法,也 是实现养猪生产现代化的重要手段。 人工授精技术的最大优点是可以明显减少公猪 

的饲养数量,增加优良公猪的利用机会,从而提高猪 群的整体质量。 

1后备公猪的调教 1.1调教要求 

一是后备公猪达7~8月龄,体重120 kg以上, 健康无病、营养良好、精力充沛,并已经有过与母猪 

接触训练者,方可开始采精调教。调教宜在早上喂 

食前(如已喂食,则不能马上调教,需休息0.5 h以 后进行),尽量选择晴天更好。调教前任公猪在室 

外适当运动对调教工作有一定好处。 二是采精栏要清扫干净,移去一切能影响公猪 注意力或可能妨碍调教的杂物,然后将公猪赶人采 

精栏调教。调教前应剪除公猪包皮外长毛,挤去包 皮内积尿,用0.1%高锰酸钾溶液擦拭消毒包皮周 

围和腹下部位,用清水洗净擦干。 三是采精人员要使公猪集中精力于采精台并诱 

导其爬跨。调教时问以10~20 min为宜,一次不成 第2 d再进行;在调教中如若发现公猪有厌烦、对台 

猪无兴趣或爬跨受挫、情绪不佳时应立即停止本次 调教。在整个调教过程中切忌对公猪粗暴鞭打和大 

声呵斥,爬跨姿势不当要耐心帮助纠正。适当保持 与公猪的距离,以防公猪攻击。公猪如果调教成功, 

应隔天再采精,以巩固调教效果。以后每周采精1 次,坚持1个月。 1.2调教措施 

一是采精台上可泼洒适量发情母猪尿液、其他 

公猪的精液或唾沫,通过强烈气味刺激公猪性欲和 爬跨。 二是公猪包皮外按摩阴茎有促使勃起的作用, 

收稿日期:2014-08.16 或站在采精台一侧,与公猪相对诱导其爬跨。 三是在其他公猪采精时让被调教公猪隔栅观摩 

以激起其性欲,但要注意隔离,不能任两头公猪直接 接触而发生斗殴。 四是采精时可先采已调教好的公猪,完毕后再 

赶人需调教公猪,让其嗅闻前一头公猪在采精台上 

留下的强烈气味,以激起性欲。 五是将一头发情旺盛的母猪带至采精台旁,任 

被调教公猪爬跨,经过数次爬跨公猪性欲达到高潮 时赶离母猪,转而引导公猪爬跨采精台。 

2采精前准备 2.1采精栏和采精台清扫 采精栏和采精台要打 

扫干净,移去一切可能影响公猪注意力或妨碍采精 

的杂物,但不能用水冲洗,防止地面湿滑。采精栏内 不能抽烟和留有烟味及其他异味。 2.2采精用品准备采精用品包括采精杯,玻璃 棒,温度计,载玻片,盖玻片,滤纸,橡皮筋,一次性保 

鲜袋及手套,光学显微镜等。直接接触精液的物品 均须严格消毒,使用前放人4O℃的恒温鼓风干燥箱 

中干燥和预热。 2.3稀释液制备应用蒸馏水器制备足够双蒸水, 

倒人1000 mL放有磁珠的烧杯中,一般加入一包稀 释粉,然后放置搅拌器上搅拌,待烧杯中稀释液完全 

澄清后(一般需15~30 min)停止搅拌,最后将稀释 液倒人消毒后的干净瓶内(如500 mL生理盐水玻 

璃瓶),置于35~36℃的恒温水浴锅内加热。新配 制的稀释液应静置1 h左右以稳定pH值和渗透压, 

方可用于稀释精液。 3采精技术 3.1徒手法采精徒手法采精由于不需器械,方法 

简便,可分段收集精液,因此已被世界各国普遍采 

用。将准备采精公猪赶入采精栏内,等待其爬跨。 

一般需跨上爬下数次,待性欲旺盛后方才稳定,采精 人员可从侧后接近公猪进行采精。采精人员一手戴 

上双层一次性手套,一手拿套有滤纸的采精杯。用 2015年第2期 浙江畜牧兽医 3l 

带有手套的手挤去包皮内的积尿和污垢,用0.1% 高锰酸钾溶液擦拭消毒包皮周围和腹下部位,再用 

清水洗净擦干。当公猪爬上采精台,等猪后躯连续 几次挺出阴茎时,摘掉外面的脏手套,迅速用手握住 

阴茎龟头螺旋部分,拇指轻轻按摩龟头顶端,四指适 当施压,压力由小到大,紧随阴茎的抽动不放手,随 

着进一步勃起顺势拉出阴茎。在整个过程中要避免 阴茎部位碰到采精台或公猪体表部位,以防阴茎特 

别是龟头部位擦伤和避免可能存在的污染。射精开 始后即移开拇指,仍然保持节律性施压,另一手用采 

精杯接住射出的精液。采精时尽可能使阴茎保持水 平状态或略微朝上,以防包皮积尿流入采精杯而污 

染精液。 公猪射精后,开始射出的多为清亮精清,因比较 脏,不宜接入集精杯内。然后射出稍稠、乳白色、富 

含精子的精液。以后射出的精液或稀或稠交替出 

现,胶粒会伴着精液一同射出,数量以胶粒为多,可 用拇指随时拨除,以免影响精液采集或掉入采精杯 影响精液过滤。公猪射精一次后要停顿片刻,阴茎 

来回抽动几次后才能再次射精,采精人员要紧握阴 茎并再次施压,按摩龟头促使其再次射精。一般可 

反复2—3次。最后射出的精液则很稀,无任何使用 价值,但一定要保证射精过程完整,使公猪感到兴 

奋,以维持较好的性反射。 射精完毕后,采精人员要顺势将阴茎送回包皮 

内,迅速站起离开,防止公猪突然倒下或跳下时会压 踩到采精人员。最好任公猪自行爬下采精台,如有 

困难者(尤其是老年公猪),应适当辅助让其爬下采 精台,以免公猪(如肢蹄)受伤,待其恢复常态后赶 

人原饲养栏内。 3.2假阴道法采精假阴道法是借助模仿母猪阴 

道功能的器具,只能采集全份精液,要求有一定设 备,清洗费时费力,目前应用较少。优点是能维持适 宜的温度与压力、防止公猪阴茎和精液不受污染。 

如外界气温较低,手握法易使公猪阴茎遇冷回缩,或 引起射精不完全,采用假阴道法则可防止类似情况 

发生。 采精前先在洗净、消毒、干燥的假阴道内涂抹少 量润滑剂(如液体石蜡);夹层内注入总容量达2/3 

的40℃温水,插上双连球充气;连接带保温护套的 集精瓶。当公猪爬上采精台后,采精员在假阴道开 

口处接纳公猪阴茎,通过双连球有节律地施加适当 压力,以增加其快感。假阴道应向悬挂集精瓶处倾 斜,以防精液倒流。公猪射精完毕后,随着阴茎的软 

缩应逐渐放掉假阴道内空气,取下集精瓶,严防脏物 

落人集精瓶内而污染精液。 4精液品质检查 精液常规检查项目有:精液量、色泽、气味、pH 

值、活力、密度等。 

可作定期检查项目有:死活精子比例、畸形率、 精子存活时间、美蓝褪色时间、抗力系数等。 采集后的精液必须立即进行检查。 

4.1 精液量精液的密度近似于1 g/mL,所以可 

通过电子秤称重来计算精液量。 4.2 色泽和气味正常的猪精液为乳白色,略有腥 味,乳白色程度越深说明精子密度越大。如呈粉红 

色则可能混有血液;黄绿色带有异味则混有浓液;黄 色则混有尿液。各种色泽、气味异常的精液应废弃 

禁用,查找发生原因,及时采取措施。 4.3 pH值新鲜精液可用精密pH试纸或酸度计 测定。正常猪精液pH值为7~7.5,如果精液中含 

有大量微生物污染或含大量死精时,可使pH值上 升而呈偏碱性,可使精子存活率、受精力和保存效果 受到明显影响。 

4.4 活力 采精、稀释后,保存、输精前都要进行精 子活力检查。观察精子活力必须在35—38℃的显 

微镜恒温台或可置人显微镜的保温箱中进行,在 100~150倍显微镜下观察。低温保存的精液必须 

先缓缓升温。将需要检查的精液轻微摇动或用玻璃 棒稍稍搅动至均匀,滴在载玻片盖上盖玻片后检查。 

活力采用十级评分,即按一个视野中直线前进运动 

精子的估计百分比分成十级,从0开始,活精子每上 升10%,评分上升0.1分。凡作旋转运动、原地摆 动的精子均不作活精计算。旋转运动或倒退运动的 

精子往往是受到冷休克或稀释液与精液不等渗等原 因所致,有可能恢复正常;原地摆动则是精子衰老即 

将死亡的标志。一般精子活力在0.6以下不宜作输 精用;用于稀释保存或做冻精的原液精子要求活力 在0.8以上。 

4.5 密度测定精子密度,一般可采用估测法或光 电比色计法测定。 

估测法估测精子密度简便易行,常与精子活力 测定(原精)同时进行,根据显微镜观察精子问的间 

隙大小分为密、中、稀三级。密级:精子间空隙很小,

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小到容不下1个精子;中级:精子间有一定空隙,可 

容纳1~2个精子;稀级:精子间空隙很大,可容纳 2个以上精子。 

光电比色计法测定精子密度是将精确计数的精 液以不同比例稀释制成标准管,用光电比色计测定 

其透光度,制成透光度和密度的对照表或曲线图。 将需要测定的精液样品先在光电比色计上测得透光 

度,便可在对照表或曲线图中查出其密度。该法要 求测定精液必须将胶状物等过滤干净,以免影响测 

定的准确度。 4.6死活精子比例 以伊红(刚果红)一苯胺黑 

(苯胺兰)染色涂片检查,死精主要因精子头部在苯 胺黑的暗背景中可被染成红色,活精则因其机能的 

半透过性膜能防止色素侵入,故不着色。由于非直 

线前进运动的精子亦不着色,故采用该法得出的测 定结果常比直接镜检方法要高,一般只适用于新鲜 精液检查。 4.7 畸形率精子形态是否正常和受精力密切相 关,畸形率是其中一项重要的检查项目。具体步骤 是制片一阴干一酒精固定一漂洗一阴干一染色 

(红、蓝墨水,美蓝,龙胆紫均可)一阴干,然后在显 

微镜(400倍)下观察计数。检查精子总数应不少于 200个,计算出畸形精子的百分率。常见的畸形精 

子类型有:头部巨大,圆形,细长或双头;颈部膨大, 纤细,屈折,带有原生质滴;中段膨大,纤细,弯曲,双 

体,带有原生质滴;主段短小,弯曲、双尾和带原生质 滴等。如精子畸形率超过20%,则禁止用作输精 

用,公猪则应停用一段时间,改善环境,加强饲养,恢 复正常后再采精使用。 4.8精子存活时间 精子存活时间是指精子在体 

外的一定条件下能生存的时间。通常将精液稀释后 置于0℃冰箱中,定时取出少量精液逐步升温至 

37%,用显微镜检查,每天2~3次,直到精子全部死 亡或只有摇摆运动时止,所需总的时数即为精子存 

活时间。存活时间越长,说明精子活力越强,品质 越好。 4.9 美蓝褪色时间美蓝是氧化还原指示剂,氧化 

时呈蓝色,容易氢化还原而褪色。因为精液中有去 氢酶,活精在呼吸时氧化脱氢而使美蓝还原成无色。 

美蓝褪色时间也就可以作为精子代谢能力的一个简 明标志,也能反映出精子活力和密度的高低。一般 以含0.02%美蓝的生理盐水与4倍量的精液混匀, 装入1 mL小试管中,以石蜡封口隔绝氧气,放在 40℃下观察褪色所需时间。 4.10抗力系数抗力可大致表示出精子在体外对 

所处环境的生活力。方法是在0.02 mL精液中逐次 

加入1%氯化钠溶液10 mL,同时用显微镜观察精子 的存活状况,直至精子全部死亡,加入氯化钠溶液总 量与精液量之倍数即为抗力系数。 

5精液稀释 通过检查精液的精子密度、活力、数量,结合输 

精的母猪头数,以确定稀释倍数。一般要求每mL 稀释精液中含有0.5亿个以上的精子数,保证每头 母猪每次输精后获得80 mL输精量时能有不少于 

40亿个有效精子。 

例如:某公猪一次采精量为200 mL,活力为 0.8,密度为2亿个/mL,则总精子数为400亿个,按 每瓶需要40亿个精子,可以稀释成10瓶,按每瓶精 

液80 mL,需要向200 mL精液中加入稀释液