菌种扩大培养

酵母菌扩大培养方法一、酵母菌扩大培养的重要性。

1.1 酵母菌在很多领域都非常重要啊。

像做面包的时候，没有酵母菌，那面包就不会蓬松柔软，就像一块硬邦邦的石头，简直是“味同嚼蜡”。

酿酒的时候呢，酵母菌更是关键角色，没有它，哪来的美酒飘香啊。

所以，为了满足生产或者实验等需求，我们就得进行酵母菌的扩大培养。

1.2 扩大培养就好比是给酵母菌“扩充队伍”。

原本少量的酵母菌，经过扩大培养，数量增多了，就能更好地发挥它们的作用。

这就像盖房子，原本只有几个小工，慢慢扩充成一个大的建筑队，这样就能更快更好地把房子盖起来。

二、准备工作。

2.1 首先得有合适的培养基。

培养基就像是酵母菌的“食物”和“住所”。

一般来说，常用的有麦芽汁培养基。

这麦芽汁就像是酵母菌的“美味佳肴”，能让酵母菌茁壮成长。

根据不同的需求，也可以用合成培养基，就像给酵母菌定制的“营养套餐”。

2.2 容器也很关键。

要选择干净、无菌的容器。

这就好比我们住房子，肯定要选择干净整洁的房子一样。

如果容器不干净，有杂菌，那就像家里进了小偷，会影响酵母菌的正常生长。

小量培养的时候，可以用试管或者小锥形瓶；要是大量培养，那就得用大的发酵罐了。

2.3 还有接种的工具，像接种环之类的，也要提前消毒好。

这就像我们做饭前要把厨具洗干净一样，不能让脏东西影响了酵母菌的培养。

三、接种。

3.1 接种的时候要小心谨慎。

从保藏的酵母菌菌种中挑取少量的酵母菌，就像从宝藏中小心翼翼地取出一颗明珠一样。

把这少量的酵母菌接种到准备好的培养基中。

如果是液体培养基，接种的时候要尽量让酵母菌均匀地分布在培养基里，可不能让它们“挤成一团”。

3.2 在接种过程中，要严格遵守无菌操作的原则。

这就像我们在医院做手术一样，必须保证无菌环境。

一旦有杂菌混入，那可就“前功尽弃”了。

酵母菌就可能被杂菌“欺负”，长不好甚至死亡。

四、培养条件。

4.1 温度是个很重要的因素。

不同的酵母菌适合生长的温度不太一样，一般来说，在20 30摄氏度之间比较合适。

菌种的扩大培养、污染的检测与判别种子扩大培养是指将保存在砂土管、冷冻干燥管中处休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化后，再经过扁瓶或摇瓶及种子罐逐级扩大培养,最终获得一定数量和质量的纯种过程。

这些纯种培养物称为种子。

微生物工业自从采用纯种发酵以来，产率有了很大的提高，然而防止杂菌污染的要求也更高了。

人们在与杂菌污染的斗争中，积累总结出很多宝贵的经验。

规范了管理措施，设计了一系列设备(例如密闭式发酵罐，培养基灭菌设备，无菌空气制备设备等)和管道，应用了无菌室甚至无菌车间，建立了无菌操作技术，因而大大降低了发酵染菌率。

但是某些发酵工业还遭受着染菌的威胁，染菌后轻者影响产率、产物提取收得率和产品质量，重者造成“倒罐” ，不但浪费大量原材料，造成严重的经济损失，还会对周围环境造成破坏。

凡是在发酵液或发酵容器中侵入了非接种的微生物统称为杂菌污染，及早发现杂菌并采取相应措施，对减少由杂菌污染造成的损失至关重要。

因此检查的方法要求准确、快速。

发酵污染可发生在各个时期。

种子培养期染菌的危害最大，因严格防止。

一旦发现种子染菌，均应灭菌后弃去，并对种子罐及其管道进行彻底灭菌。

发酵前期养分丰富，容易染菌，此时养分消耗不多，应将发酵液补足必要养分后迅速灭菌，并重新接种发酵。

发酵中期染菌不但严重干扰生产菌株的代谢，而且会影响产物的生成，甚至使已形成的产物分解。

由于发酵中期养分已被大量消耗，代谢产物的生成又不是很多，挽救处理比较困难，可考虑加入适量的抗生素或杀菌剂。

如果是发酵后期染菌，此时产物积累已较多，糖等养分已接近耗尽，若染菌不严重，可继续进行发酵;若污染严重，可提钱放罐。

染菌程度越重，危害越大;染菌少，对发酵的影响就小。

所以，实际生产中，应当根据污染程度和发酵时期区别对待。

器材与试剂1.器材高压蒸汽灭菌锅、超净工作台、带摇床的培养箱、显微镜、天平、三角瓶、试管、移液管、培养皿、接种针、平板涂布器、酒精灯、载玻片2.试剂营养琼脂、葡萄糖、磷酸二氢氨、七水合硫酸镁、氯化钠、磷酸氢二钾、牛肉膏、蛋白胨、0.4%酚红溶液、蒸馏水、番红染液、香柏油、擦镜液3.培养基(1)营养琼脂培养基：直接称量营养琼脂粉4.5g，溶于100mL蒸馏水配制，pH 7.2，分装到试管中，灭菌后摆成斜面。

简述种子扩大培养的一般流程下载温馨提示:该文档是我店铺精心编制而成，希望大家下载以后，能够帮助大家解决实际的问题。

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名词解释1、菌种的扩大培养：菌种的扩大培养就是把保藏的菌种，即砂土管，冷冻干燥管中处于休眠状态的生产菌种接入试管斜面活化，再经过扁瓶或药瓶和种子罐，逐级扩大培养后达到一定的数量和质量的纯种培养过程。

2、生长因子：从广义上讲，凡是微生物生长不可缺少的微量的有机物质，如氨基酸、嘌呤、嘧啶、维生素等均称生长因子。

如以糖质原料为碳源的谷氨酸生产菌均为生物素缺陷型，以生物素为生长因子,生长因子对发酵的调控起到重要的作用。

3、临界氧浓度：指不影响呼吸所允许的最低溶氧浓度。

对产物而言，便是不影响产物合成所需的最低浓度。

4、诱变育种：用各种物理、化学、生物的因素人工诱发基因突变进行的筛选，称为诱变育种。

5、培养基：广义上讲培养基是人工配制的提供微生物或动、植细胞的生长、繁殖、代谢和合成人们所需产物的营养物质和原料，同时培养基也为微生物培养提供除营养外的其它所必须的条件6、前体：前体指某些化合物加入到发酵培养基中，能直接被微生物在生物合成过程中合成到产物物分子中去，而其自身的结构并没有多大变化，但是产物的产量却因加入前体而有较大的提高。

7、反复补料培养：随着补料的进行,培养液体积不断增大,达到一定程度时,将部分培养液从反应器中放出,剩下部分继续进行补料分批培养，如此反复进行。

8、呼吸商：指生物体在同一时间内，释放二氧化碳与吸收氧气的体积之比或摩尔数之比，即指呼吸作用所释放的CO2和吸收的O2的分子比。

9、临界稀释率：10、空气的相对湿度：空气中水蒸气分压力和同温度下饱和水蒸气分压力之比11、补料分批培养：一种介于分批培养和连续培养之间的操作方式,在进行分批培养的时候,向反应器内加入培养基的一种或多种成分,以达到延长生产期和控制培养过程的目的.12、竞争性抑制：若在反应体系中存在着与底物结构相类似的物质，该物质也能在酶的活性部位上结合，从而阻碍了酶与底物的结合，使酶催化底物的反应速率下降，这种抑制为竞争性抑制。

13、培养基的分批灭菌：将配好的培养基放在发酵罐或者其他的容器中，通入少量的蒸汽将培养基和所有设备仪器灭菌的过程，也称实罐灭菌。