细胞生物学-细胞培养课件-传代培养

温度)
上次课的实验结果
FL
上次课的实验结果
FL
上次课的实验结果
其他同学的细胞大部分污染（第一天）
上次课的实验结果
培养物是否被污染，如培养液变为黄色且 混浊，表示该瓶被污染（细菌）。
上次课的实验结果
其他同学的细胞大部分污染（第一天） 少数没污染，但无细胞原代培养成功
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实验报告——每天记录
动物细胞传代培养
药学与生物科学学院生物科学系 李国庆 杨南扬
实验原理
细胞培养 （Cell Culture）
细胞培养(cell culture)是指细胞的离 体培养，是在无菌条件下，把动物或植 物的细胞从机体中分离出来，置于培养 皿中，并在一个合适的环境中，给以营 养物质，使之继续生存和繁殖的方法。
细胞培养的应用
1.基础研究： 基因功能、疾病发生机理等。
2.药物研究与开发： 新药筛选、疫苗研究与开发、基因工程药物研究 与开发、细胞工程药物研究与开发等。
3.生物制药： 疫苗生产、基因工程药物生产、诊断用和药用单 克隆抗体生产 、细胞工程药物生产等。
实验结果—组织块法培养细胞的观察
实验结果—消化法培养细胞的观察
器材与试剂
超净工作台 二氧化碳培养箱 倒置显微镜 细胞（原代培养的细胞） 滴管、培养瓶、瓶塞等 培养液：10%小牛血清DMEM 消化液：0.25%胰蛋白酶液
细胞传代消化法
观看视频
细胞传代消化法示意图
显微镜下细胞消化前后示意图
细胞间空隙增大，瓶底呈花斑状
注意
无菌操作 胰蛋白酶消化时间要严格掌握(浓度、pH、
原代培养 （Primary Culture）
原代培养(primary culture)，或称 为初代培养，就是从供体取下组织细 胞后在体外进行的首次培养，中途不 分割培养物。常用的原代培养方法有 组织块培养法和消化培养法。
传代培养 （Secondly Culture）
传代培养(secondly culture)，在原代 培养物铺展为单细胞层后，将原代培养细 胞分开接种到两个或多个新的培养瓶中继 续培养增殖。
成功 失败