7实验七果蝇的双因子杂交实验

果蝇双因子杂交试验摘要：果蝇具有容易饲养，生活周期短，生长迅速，繁殖力强，后代数量多等优点，因而常被作为模式生物进行遗传学研究。

实验通过对黄体对黑体，长翅对残翅两对性状的杂交实验所得结果验证了独立分配定律，对试验结果进行了X2测验并分析了其中的影响因素。

关键词：果蝇双因子独立分配规律X2测验前言：果蝇(Drosophila melanogaster)属双翅目小型昆虫，是经典的遗传学实验材料。

摩尔根的论断，其学生穆勒则开创了x射线诱变的先河。

作为一种良好的动物实验材料,果蝇具有生长迅速,繁殖力强;后代数量大,便于统计分析;个体小,外饲养管理方便;变异类型多,易于观察和杂交组合;染色体巨大,且数量较少,便于观察研究等优点。

通常作为遗传学实验材料的果蝇是果蝇属（Drosophila）的黑腹果蝇(D.melanogater)。

果蝇广泛地存在于全球温带及热带气候区，而且由于其主食为腐烂的水果，因此在人类的栖息地内如果园，菜市场等地区内皆可见其踪迹。

果蝇的整个生活史包括卵、幼虫、蛹、和成虫。

果蝇在生命科学领域的研究价值主要存在于两个方面:一方面是果蝇本身作为被研究对象供人们研究;另一方面是果蝇作为一种模式生物被应用于生命科学研究的各个领域,果蝇的研究具有非凡的意义。

因此选择果蝇作为实验的亲本材料，通过其F1，F2代的统计分析来研究其体色（黄体对黑体），及翅长（长翅对残翅）的遗传方式。

1实验材料与实验方法：1．1实验材料：黄体残翅（♂）×黑檀体长翅（♀）1．2 实验方法与步骤1．2．1 果蝇形状特征鉴别观察附表二果蝇成虫的雌雄鉴别方法雄蝇雌蝇肉眼鉴别体形较小体形较大。

腹部呈圆桶状，尾端钝圆呈黑色。

腹部呈椭圆形，尾端尖长。

腹部背面有3条细黑纹及1条宽黑纹致使尾端呈一明显黑点。

腹部背面有5条排列均匀的黑色横纹，见明显黑点。

腹部可见4个腹片。

腹部可见6个腹片解剖镜下鉴别腹部尾端可见抱握器及阴茎。

腹部可见生殖孔和腔板。

1组、果蝇单因子杂交实验正交:雌长翅果蝇×雄残翅果蝇F1代：56只都是长翅果蝇F2代：长翅果蝇172只残翅果蝇41只实验数据收集处理（卡方测验），分析实验结果果蝇双因子自由组合杂交实验正交:雌黑檀体果蝇×雄残翅果蝇(反交比正交好)F1代：43只都是长翅果蝇（少）F2代：灰身长翅果蝇148只灰身残翅果蝇43只黑檀体长翅果蝇67只黑檀体残翅果蝇11只实验数据收集处理（卡方测验），分析实验结果果蝇的伴性遗传正交:雌红眼（野生）果蝇×雄白眼果蝇F1代：雌、雄都是红眼果蝇（75只）F2代：雌性都是红眼果蝇（88只）；雄白眼果蝇（47只）、雄红眼果蝇（56只）实验数据收集处理（卡方测验）反交:雌白眼果蝇×雄红眼（野生）果蝇F1代：雌都是红眼果蝇（40只）、雄都是白眼果蝇（37只）F2代：雌性红眼果蝇（62）、雌性白眼果蝇（72只）；雄白眼果蝇（66只）、雄红眼果蝇（59只）实验数据收集处理（卡方测验）说明伴性遗传的正、反交的差别。

分析实验结果2组、果蝇单因子杂交实验正交:雌长翅果蝇×雄残翅果蝇F1代：59只都是灰身长翅果蝇F2代：长翅果蝇157只残翅果蝇41只实验数据收集处理（卡方测验），分析实验结果果蝇双因子自由组合杂交实验(反交比正交好)反交:雌残翅果蝇×雄黑檀体果蝇F1代：68只都是长翅果蝇F2代：灰身长翅果蝇169只灰身残翅果蝇48只黑檀体长翅果蝇55只黑檀体残翅果蝇14只实验数据收集处理（卡方测验），分析实验结果果蝇的伴性遗传正交:雌红眼（野生）果蝇×雄白眼果蝇F1代：雌、雄都是红眼果蝇（43只）F2代：雌性都是红眼果蝇（84只）、雄白眼果蝇（49只）雄红眼果蝇（43只）实验数据收集处理（卡方测验）反交:雌白眼果蝇×雄红眼（野生）果蝇F1代：雌都是红眼果蝇（44只）、雄都是白眼果蝇（54只）F2代：雌性红眼果蝇（56）、雌性白眼果蝇（65只）；雄白眼果蝇（46只）雄红眼果蝇（61只）实验数据收集处理（卡方测验）说明伴性遗传的正、反交的差别。

生命科学学院遗传学实验报告实验五六七：双因子杂交、伴性遗传和三点测交一、实验目的：1、通过对果蝇的杂交实验，正确理解分离定律的实质，并验证与加深理解三个的遗传规律。

2、认识伴性遗传的正、反交差别，掌握伴性遗传的特点。

3、掌握绘制遗传学图的原理和方法，加深对重组值、遗传学图、双交换、并发率和干涉等概念的理解。

4、掌握果蝇的杂交技术，并学会记录交配结果和掌握统计处理的方法。

二、实验器材：1、材料： 18号果蝇（野生型）及三种突变体果蝇即14号果蝇（黒身残翅）、w号果蝇（白眼）和6号果蝇（白眼卷刚毛小翅）2、试剂：乙醇、乙醚、果蝇培养基等3、器具：麻醉瓶、酒精灯、白瓷板、毛笔、镊子、培养管、棉球等三、实验原理：果蝇具有生活史短、繁殖率高、饲养简便、染色体数目少（2n=8）和突变性状多等特点，是研究遗传学的好材料。

本次设计实验就是利用果蝇进行一系列的遗传学验证实验和染色体基因相对顺序和距离的测定，下面简要介绍关于双因子杂交、伴性遗传和三点测交的基本原理。

1、双因子杂交：果蝇的灰体基因（E）与黑檀体基因（e）为一对相对性状，位于ⅢR70.7位置，而长翅（Vg）与残翅（vg）为另一对相对性状，位于ⅡR67.0位置。

这两对基因是没有连锁关系的，位于不同染色体上的非等位基因。

因此非同源染色体的这两对非等位基因可以很好的验证自由组合定律。

自由组合规律：位于非同源染色体上的两对非等位基因，其杂合体在形成配子时，等位基因彼此分离，进入不同的配子中，非等位基因可自由组合进入同一配子，结果产生4种比例相等的配子。

若显性完全， F1自交产生F2代表现出4种表型，比例为9：3：3：1。

双因子杂交的遗传规律：双因子杂交正交双因子杂交反交18♀×14♂ 14♀ × 18♂2、伴性遗传：位于性染色体上的基因叫作伴性基因，其遗传方式与位于常染色体上的基因有一定差别，它在亲代与子代之间的传递方式与雌雄性别有关，伴性基因的这种遗传方式称为伴性遗传（sex-linked inheritance ）。

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实验步骤
1.在杂交前19－20天按杂交组合数量，计划和 培养好亲本。
2.收集处女蝇：一般选择在晚上9点钟把亲本 (种蝇)全部活的成虫转出处死（一个都不能 剩），第二天9点钟前（12小时内，最好8－ 10小时内）把培养瓶里羽化的成虫转出，并 按♀、♂分开培养，所得的♀蝇即为处女蝇。
3.按各杂交组合需选的果蝇品系，每瓶放入3 －5对，塞好瓶塞，贴好标签，置于25℃恒 温培养箱中培养。
2. 挑处女蝇时， 每次只挑12小时内羽化成 虫，超过12小时的成虫已逐渐 有交配能力,必须一只不留地倒
出处死,才能进行第 二次挑选
3. 刚羽化的果蝇色淡白，体软绵， 难辨♀♂，务必小心区别
4. 使用毛笔和瓷板，要用酒精棉球 消毒，同时必须凉干才能使用。
5. 每个杂交组合放果蝇 2－3对，用毛笔把果蝇扫进 试管，试管要平放，待蝇醒后， 方能竖起，避免果蝇粘在培养
基上被闷死，杂交组合配 好后，放回培养箱。
6. 培养箱温度保持在25℃， 不要随意更改或调整其他旋
钮，以免影响整个实验。
实验结果的观察和统计
1.把各杂交组合的果蝇成虫分别倒出试管， 并逐个组合麻醉，观察性状，做好记录。
2.样本自由度为n-1
4.根据实际观察数计算理论值。 5.计算2 值，结果必须与显著平准作比较
系列杂交实验内容
1.果蝇的单因子实验杂交组合
18＃♀ x 2 ＃♂ (正交） 2＃♀ x 18＃♂(反交)
2.果蝇二对因子自由组合实验的杂交组合
e♀ x 2＃♂ (正交)
2＃♀ x e＃♂ (反交)
3.果蝇的伴性遗传杂交组合
18＃♀ x 22＃♂ (正交) 22＃♀ x 18＃♂ (反交)