蓝莓最佳继代培养基的筛选试验
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激素配比和pH值对蓝莓试管苗增殖生长的影响张舵;杨艳敏;魏永祥;刘成;王莉;魏鑫;刘有春【摘要】该文以对土壤pH值适应性截然不同的蓝莓品种‘斯巴坦’和‘北陆’试管苗为试材,研究二者组织培养条件下对激素配比和pH值的要求.结果表明:‘斯巴坦’试管苗增殖培养基最佳激素配比为ZT0.3 mg/L+IBA 0.2 mg/L,pH值4.5;‘北陆’试管苗增殖培养基最佳激素配比ZT0.3 mg/L+IBA 0.1 mg/L,pH值5.0.【期刊名称】《北方果树》【年(卷),期】2015(000)003【总页数】2页(P13-14)【关键词】蓝莓;激素配比;pH值【作者】张舵;杨艳敏;魏永祥;刘成;王莉;魏鑫;刘有春【作者单位】辽宁省果树科学研究所,辽宁熊岳115009;辽宁省果树科学研究所,辽宁熊岳115009;辽宁省果树科学研究所,辽宁熊岳115009;辽宁省果树科学研究所,辽宁熊岳115009;辽宁省果树科学研究所,辽宁熊岳115009;辽宁省果树科学研究所,辽宁熊岳115009;辽宁省果树科学研究所,辽宁熊岳115009【正文语种】中文【中图分类】S663.2蓝莓种苗常规的繁殖方法繁殖速度慢,远远满足不了市场需求[1];而组织培养技术可以快速、高效地进行蓝莓种苗的繁殖[2]。
关于蓝莓组培扩繁的研究已有一些报道[3],但因蓝莓品种的不同[4],最适合蓝莓试管苗增殖生长的激素配比、pH 值也有差异。
本试验以对土壤pH值(4.3~4.7)要求严格的‘斯巴坦’和对土壤pH值(4.3~5.5)要求宽泛的‘北陆’为试材,研究不同激素配比和不同pH值组合对其试管苗增殖生长的影响,以期筛选出二者最适激素配比、pH值的增殖培养基,为蓝莓的工厂化育苗提供理论基础。
1 材料与方法试验于2012年7—12月在辽宁省果树科学研究所组织培养室进行。
试验材料为组织培养室保存的‘斯巴坦’和‘北陆’试管苗。
将试管苗茎条剪成单芽的茎段,3个茎段为一丛,每瓶4~6丛,接种到 WPM+琼脂4.6g/L+糖 30g/L、pH值5.2的培养基上,在温度25℃、相对湿度50%、光强1500Lx、光照12h的条件下培养,继代3次后,作为试验材料。
菌根菌分离及其在蓝莓育苗中的应用研究赵鑫;詹立平;邹学忠【摘要】Nine mycorrhizal fungi strains(named LMJGJ01…LMJGJ09)were isolated from root of Duke and wild Vaccinium uligi⁃nosum adopting mycorrhizal tissue separation process,and six of them could form symbiotic tissue with Vaccinium uliginosum root. Infection rate of mycorrhizal fungi,seedling survival rate of co-culture and its effects on Vaccinium uliginosum transplanting seed-ling growth were studied in this research. The results showed that the two strains LMJGJ07 and LMJGJ08 were compatibly applied in the Vaccinium uliginosum seedling production.%采用菌根组织分离法从野生蓝莓新鲜根系中分离得到9株纯化的真菌菌株,其中6株真菌菌株能够与蓝骑士蓝莓根系形成共生组织。
通过菌根菌侵染率、共培养苗木成活率及其对蓝莓移栽苗生长效应的比较研究,结果表明,LMJGJ07和LMJGJ08两株蓝莓菌根菌适宜在蓝莓种苗生产中应用。
【期刊名称】《辽宁林业科技》【年(卷),期】2015(000)004【总页数】4页(P8-10,58)【关键词】蓝莓;菌根菌;菌根菌分离;共培养;育苗【作者】赵鑫;詹立平;邹学忠【作者单位】辽宁林业职业技术学院,辽宁沈阳 110101;辽宁医药职业学院,辽宁沈阳 110101;辽宁林业职业技术学院,辽宁沈阳 110101【正文语种】中文【中图分类】S718.81蓝莓(Vaccinium uliginosum),又名笃斯越桔,杜鹃花科越桔属,其果实风味独特,营养丰富,被誉为“浆果之王”[1]。
杂种蓝莓(野生ב美登’)组培快繁1)甄成;毕显禹;李淑娟;孙小环;许艳玲;石德山【摘要】为了建立高效的杂种蓝莓组培快繁技术体系,以大兴安岭地区野生蓝莓和栽培品种‘美登’(‘Blomi-don’)杂交获得的杂交种子为试材,筛选出杂交种子最佳无菌处理条件,获得蓝莓杂种无菌苗。
再以杂种无菌苗茎段为外植体,探究了不同质量浓度植物生长调节剂( ZT)、蔗糖及继代周期对丛生芽诱导的影响,并探讨了培养基种类及植物生长调节剂IBA质量浓度对生根诱导的影响。
结果表明:杂交种子经75%酒精和3%次氯酸钠分别处理20 s和7 min效果最好,污染率为0;添加0.6 mg· L-1 ZT和20 g· L-1蔗糖的WPM培养基为丛生芽诱导最佳培养基,诱导率高达100%,且芽丛密集、长势好;芽诱导期间,30 d 的继代周期最有利于丛生芽的增殖,增殖倍数高达34.72;最佳生根培养基为添加0.4 mg· L-1 IBA的1/2WPM培养基,生根率高达88%,且生根周期仅为40 d,移栽成活率达到85%以上。
%The objective of the study is to establisha rapid propagation system of hybrid blueberry .The wild blueberry of Dax-ing’ an Mountains and the cultivar of ‘Blomidon ’ were selected as parents to take intervarietal crosses and the hybrid seeds.The best sterile treatment conditions for hybrid seeds were selected and the sterile seedlings were got .The effects of the concentration of ZT , the contents of source and subculture cycle on frequency of cluster buds induction were conducted by using stem segments of seedlings as explants .The influence of different types of medium and concentration of IBA on the induction of adventitious root was analyzed .The contamination rate of hybrid seeds was 0 after sterilized with 75%ethanol and 3%sodium hypochlorite for 20 sand 7 min, respectively.The best medium for cluster buds induction was WPM contai-ning 0.6 mg· L-1 ZT and 20 g· L-1 source.The induction rate was up to 100%and the cluster buds grew well .During the bud induction, the optimal subculture cycle for buds proliferation was 30 d with the proliferation coefficient of 34.72.The best rooting medium was 1/2WPM containing 0.4 mg· L-1 IBA, the rooting rate was 88%, and the rooting period was only 40 d.The survival rate of transplanting was more than 85%.【期刊名称】《东北林业大学学报》【年(卷),期】2016(044)005【总页数】5页(P29-33)【关键词】蓝莓;野生ב美登’;杂交种子;组织培养;快速繁殖【作者】甄成;毕显禹;李淑娟;孙小环;许艳玲;石德山【作者单位】林木遗传育种国家重点实验室东北林业大学,哈尔滨,150040;林木遗传育种国家重点实验室东北林业大学,哈尔滨,150040;林木遗传育种国家重点实验室东北林业大学,哈尔滨,150040;大兴安岭地区农业林业科学研究院;大兴安岭地区农业林业科学研究院;大兴安岭地区农业林业科学研究院【正文语种】中文【中图分类】Q943.1分类号Q943.1The objective of the study is to establish a rapid propagation system of hy brid blueberry. The wild blueberry of Daxing’an Mountains and the cultivar of ‘Blomidon’ were selected as parents to take intervarietal crosses a nd the hybrid seeds. The best sterile treatment conditions for hybrid seeds were selected and the sterile seedlings were got. The effects of the concen tration of ZT, the contents of source and subculture cycle on frequency of cluster buds induction were conducted by using stem segments of seedlin gs as explants. The influence of different types of medium and concentrati on of IBA on the induction of adventitious root was analyzed. The contami nation rate of hybrid seeds was 0 after sterilized with 75% ethanol and 3% sodium hypochlorite for 20 s and 7 min, respectively. The best medium for cluster buds induction was WPM containing 0.6 mg·L-1 ZT and 20 g·L-1 source. The induction rate was up to 100% and the cluster buds grew wel l. During the bud induction, the optimal subculture cycle for buds prolifera tion was 30 d with the proliferation coefficient of 34.72. The best rooting m edium was 1/2WPM containing 0.4 mg·L-1 IBA, the rooting rate was 88%, and the rooting period was only 40 d. The survival rate of transplanting was more than 85%.蓝莓是杜鹃花科(Ericaceae)越桔属(Vacciniodeae)植物的总称,为多年生灌木或小乔木,因其果实富含抗氧化剂、花色素苷、类黄酮等与清除人体自由基和抗衰老机能密切相关的化合物,深受国内外广大消费者的追捧,目前已跻身于世界五大健康食品行列,并有世界水果之王的美誉[1-2]。
蓝莓组织培养研究进展综述标题:蓝莓组织培养研究进展综述一、引言蓝莓,作为一种营养丰富、具有抗氧化和抗衰老作用的水果,越来越受到人们的喜爱。
然而,由于蓝莓种植的难度大、对环境要求高,以及病毒和细菌的感染等问题,传统的种植方法无法满足人们对蓝莓的需求。
组织培养作为一种有效的植物繁殖方法,能够快速、大量地繁殖蓝莓,并且可以消除病毒和细菌的感染。
因此,蓝莓组织培养成为了当前的研究热点。
二、蓝莓组织培养技术1、外植体选择在蓝莓组织培养中,选择合适的外植体是关键。
常用的外植体包括叶片、茎尖、花药、果实等。
其中,茎尖具有再生能力强、遗传特性稳定等特点,是最常用的外植体之一。
2、培养基选择蓝莓组织培养需要选择合适的培养基。
常用的培养基有MS、WPM、N6等。
其中,MS培养基是最常用的培养基之一,能够满足蓝莓组织培养过程中对营养、激素等的需求。
3、激素配比在蓝莓组织培养过程中,激素的配比也是关键因素之一。
适宜的激素配比能够促进细胞的分裂和生长,提高组织的再生能力。
常用的激素包括细胞分裂素(如BA、KT等)和生长素(如NAA、IAA等)。
4、培养条件控制在蓝莓组织培养过程中,温度、光照、湿度等环境条件对组织的生长和再生也有重要影响。
适宜的培养条件能够促进组织的生长和再生,提高繁殖效率。
三、蓝莓组织培养的应用1、快速繁殖通过组织培养技术,可以快速大量地繁殖蓝莓,满足市场需求。
同时,组织培养还可以消除病毒和细菌的感染,提高种苗的质量和产量。
2、基因工程育种通过基因工程育种技术,可以改良蓝莓的品质、抗病性、抗逆性等性状。
组织培养技术作为基因工程育种的关键步骤之一,能够提供大量的无菌苗,为基因工程育种提供基础。
3、保存珍稀品种对于一些珍稀、濒危的蓝莓品种,通过组织培养技术可以对其进行保存和保护。
同时,组织培养还可以提供无菌苗,为迁地保护和就地保护提供支持。
四、研究展望1、优化培养基和激素配比虽然现有的培养基和激素配比能够满足蓝莓组织培养的需求,但是还有优化的空间。
《不同品种蓝莓组培快繁及移栽驯化技术研究》一、引言蓝莓作为一种营养丰富、口感独特的水果,近年来在国内外市场上的需求量持续增加。
为了满足市场需求,蓝莓的种植技术和繁殖技术成为了研究的热点。
本文针对不同品种蓝莓的组培快繁及移栽驯化技术进行研究,以期提高蓝莓的产量和品质,促进蓝莓产业的发展。
二、组培快繁技术1. 材料与方法(1)材料准备:选取健康、无病虫害的蓝莓母株,采集其嫩芽作为外植体。
(2)组培快繁技术流程:对采集的外植体进行消毒处理,然后进行初代培养,诱导出愈伤组织,再通过继代培养和生根培养,最终得到完整的蓝莓幼苗。
2. 结果与分析(1)不同品种蓝莓的愈伤组织诱导情况存在差异,适宜的激素浓度和培养条件对愈伤组织的生长有显著影响。
(2)继代培养和生根培养的过程中,适宜的温度、光照和营养条件对蓝莓幼苗的生长有重要影响。
(3)通过组培快繁技术,可以在短时间内大量繁殖蓝莓幼苗,提高繁殖效率。
三、移栽驯化技术1. 材料与方法(1)材料准备:选择生长健壮、根系完整的蓝莓组培苗,进行移栽。
(2)移栽驯化流程:选择适宜的栽培基质和地理位置,进行蓝莓苗的移栽。
移栽后,通过控制水分、肥料、温度等环境因素,进行蓝莓苗的驯化。
2. 结果与分析(1)适宜的栽培基质和地理位置对蓝莓苗的生长有重要影响。
一般来说,疏松、肥沃、排水良好的土壤和适宜的气候条件有利于蓝莓苗的生长。
(2)移栽后,通过合理的水分、肥料、温度管理等措施,可以促进蓝莓苗的根系发育,提高其抗逆能力。
(3)移栽驯化过程中,需要注意逐步适应新的环境条件,避免因环境变化过大而导致蓝莓苗的生长受阻。
四、讨论与展望通过组培快繁技术和移栽驯化技术的结合,可以有效地提高蓝莓的产量和品质。
未来,可以进一步研究不同品种蓝莓的生理生态特性,优化组培快繁和移栽驯化技术,以提高蓝莓的抗病虫害能力和适应能力。
同时,可以探索蓝莓的采后处理和贮藏技术,延长蓝莓的货架期,满足市场的长期需求。
蓝莓组培技术一、实验室设计1.洗涤室:器具的洗涤、干燥2.配置室:进行药品的保存、配置、消毒、分装等。
3.灭菌室:对培养进行高温高压灭菌,有时候也会把培养基的熬制、分装放在此房间。
4.接种室:进行材料的接种,内置超净工作台或接种箱。
外设缓冲间-放置拖鞋、工作服、工作帽等。
5.培养室:植物材料的无菌培养,室内主要有培养架和控制温度及光照的设备。
其他配套:大型组培室,包括工厂化组培车间还好专门配套仓库、更衣室和办公室等,有的还要配备细胞学观察实验室,进行培养材料的组织学、细胞学、观察照相等。
二、常用设备和器材1.高压蒸气灭菌锅:用于培养基、蒸馏水和接种器械的灭菌消毒。
2.超菌工作台:用于培养物的无菌操作。
(由鼓风机、滤板、操作台、紫外灯和照明灯组成)3.接种工具:包括镊子、剪刀、解剖刀、洒精灯、接种器械灭菌器等。
4.培养设备:包括空调机、定时器、温度控制器、增湿机或去湿机、培养架、光照培养箱等。
5.配置设备:包括天平、酸度计、磁力搅拌器、蒸馏水器、烘箱或玻璃仪器烘干器、电炉、药品柜、冰箱或冷柜、晾瓶架等。
在这些仪器设备中,高压灭菌锅、超净工作台、电子天秤、培养架、冰箱、接种工具等是组培必备的,也是每天都要用到的,因此质量要可靠。
三、玻璃器皿的选择和清洗1.玻璃器皿的选择*试管- 适合于用少量培养基及试验各种不同配方时选用。
*三角锥瓶- 适用于各种培养(如固体培养、液体培养、大规模培养或一般培养)。
*L形管和T形管- 为专用的旋转式液体培养试管。
*培养皿- 适于作单细胞的固体平板培养、胚和花药培养和无菌发芽。
*角形培养瓶和圆形培养瓶- 适用于液体培养用,如单细胞和原生质体的浅层培养。
*组培瓶/果酱瓶- 常用作试管苗大量繁殖用的培养瓶。
2.玻璃器皿的清洗(1)清洗玻璃器皿用的洗涤剂有肥皂、洗洁精、洗衣粉、和铬酸钾洗涤液。
(2)清洗时先将器皿中的残渣除去,用清水洗净,再用热的肥皂水或洗洁精洗净,清水冲洗干净后用蒸馏水冲洗一次,干后备用。
蓝莓属于杜鹃花科越橘属植物,为多年生落叶或常绿灌木或小灌木树种。
蓝莓的繁殖方法较多,有种子育苗、绿枝扦插、硬枝扦插、根插、分株、嫁接等,但繁殖速度较慢,品种容易退化。
利用组织培养繁殖速度较快,且能保持品种特性,具有脱毒效果,是当前蓝莓大量繁殖应用最主要的技术之一。
1外植体的选择1.1外植体来源从田间或温室中生长健壮的无病虫害的植株上选取发育正常的当年生长新梢,离体培养易于成功。
因为这部分器官或组织代谢旺盛,再生能力强。
1.2外植体大小茎尖1.5cm、茎段2.0cm或花芽。
外植体太小不易成活,外植体太大杀菌不彻底,易污染。
1.3取材季节离体培养的外植体最好在植物生长的最适时期取材,大兴安岭5月15日-6月15日或8月5日-25日。
若取材在生长末期或已经进入休眠期取样,则外植体会对诱导反应迟钝或无反应。
1.4取材时间春夏的晴天中午进行。
2外植体的消毒外植体的彻底消毒是控制污染的前提。
外植体取材→自来水冲洗(60~90min)→70%酒精表面消毒(20~60s)→无菌水冲洗(3~5遍)→氯化汞(0.5%)消毒剂处理(8~10min)→无菌水充分洗净(3~5遍)→备用3外植体的接种将消毒过的外植体在超净工作台上进行分离,切割成所需的材料大小,并将其转移到灭过菌的培养基上的过程。
培养基用WPM改良培养基,激素用6-苄基腺嘌呤或玉米素。
接种前超净工作台面用70%酒精擦洗后,再喷一遍酒精,再用紫外线灯照射30分钟,接种用的器皿用前高压锅消毒灭菌,接种过程中用酒精灯多次烤烧灭菌。
接种工作人员戴上口罩,双手用酒精棉擦拭2遍,接种时动作一定要轻,预防把酒精灯、酒精瓶等碰倒,引起火灾。
4外植体的培养4.1温度蓝莓瓶苗最适的培养温度25℃,温度过低(<15℃)或过高(>35℃)都会抑制细胞组织的增殖和分化,对培养物生长不利。
4.2光照培养室要求每日光照12~16小时,需日光灯补光。
4.3通气外植体的呼吸需要氧气,氧气在调节器官的发生中可起到重要作用。
L u n y u a n蓝莓(Blueberry),又名越橘,是一种多年生的落叶果树。
蓝莓,果实为深蓝色,因此得名蓝莓。
蓝莓在我国的种植时间比较长,主要的种植区域在我国的华东、华中、华南到西南以及东北地区,野山蓝莓主要分布在山地以及不规则的丘陵地带,主要海拔高度为400~1400米[1]。
蓝莓果实中含有大量的营养物质,平均每100克新鲜果实内含蛋白质600mg,脂肪550nag,碳水化合物14g,并且还含有丰富的维生素和微量元素,尤其是Ca、P、Mg、Zn、Fe、Cu含量特别丰富,其抗氧化能力显著高于其它水果[2]。
本试验以现在种植面积比较大的蓝丰品种为研究对象,对其组织培养体系的建立进行了研究,希望可以为我国蓝莓的繁殖技术提供参考依据。
1试验材料与方法1.1试验材料本次试验的材料取自聊城市农科院的自建苗圃内。
1.2试验方法1.2.1初代培养在春季蓝莓刚刚开始发芽时,挑选生长良好,没有病虫害的当年生纸条,用枝剪剪下,然后简称1cm作用长度的小段,一个小段上至少带一个饱满芽,用流动的自来水冲洗30min,然后在超净台内用75%的酒精首次消毒处理,时间30s,用无菌水冲洗3-5次,以外植体上完全没有酒精味道为准,然后再用0.1%的HgCl溶液进行二次消毒处理,完成后再用无菌水冲洗3-5次。
根据HgCl消毒时间的长短,分为6个处理,每个处理50瓶,每瓶1个外植体,重复3次。
45天后统计外植体的生长情况。
1.2.2增殖培养在初代培养基内培养45天后,转移到增殖培养基内(蔗糖含量、琼脂含量、pH、温度、光照时间同上),基本培养基为WPM,根据ZT和IBA的浓度,分为9个处理,每个处理20瓶。
每瓶5个,重复3次。
45天后统计外植体的增殖情况。
1.2.3生根培养培养50天,用剪刀分成单株,然后用生根粉蘸根,栽植到生根基质(苔藓)中,大约45天后,其根部就会长出细小的根系。
根据生根剂的浓度分为4个处理。
每个处理100颗小苗,重复3次。