紫外线致HeLa细胞损伤作用的研究

.基础研究•缺氧诱导的UCHL5增强宫颈癌Hela细胞辐射抗性焦圣元高巧慧达飞郭利王晋郭娟李静刘军叶空军军医大学军事预防医学系辐射防护医学教研室，西安710032通信作者：刘军叶，Email：******************.cn【摘要】目的研究缺氧诱导的泛素竣基末端水解酶L5(UCHL5)在调节宫颈癌Hela细胞備射敏感性中的作用方法以宫颈癌Hela细胞为研究对象，1%。

2条件下培养观察UCHL5表达水平的变化采用Western blot和实时定量聚合酶链反应(PCR)检测慢病毒载体感染Hela细胞后稳定调变UCHL5的效率，转录本分为空白对照组、过表达对照组、过表达UCHL5组转录本1-4和沉默对照组、沉默UCHL5组转录本1〜2将实验所用的细胞分为过表达对照组、过表达UCHL5组、沉默对照组和沉默UCHL5组。

采用流式细胞术检测8Gy丫射线照射48h后细胞的凋亡率；采用细胞克隆形成实验检测0、2、4、6Gy y射线单次照射培养2周后4组细胞的克隆形成率；采用3-(4,5-二甲基噬睦-2)-2.5-二苯基四氮哇漠盐(MTT)实验检测4组细胞培养1周后的增殖率以及联合0、2、4、6、8,lOGyy射线照射后的增殖率。

使用基因表达谱数据动态分析癌症基因组图谱数据库宫颈癌组织和正常组织中抗缺氧诱导因子la(HIF-la)与UCHL5表达的相关性。

采用双荧光素酶报告基因实验观察HIF-la对UCHL5的激活作用，组间比较采用单样本r检验，采用Pearson检验进行相关性分析；结果缺氧可诱导宫颈癌Hela细胞UCHL5的表达「Western blot和实时定量PCR结果显示，感染后的Hela细胞町显著上调或下调UCHL5的表达，其中.过表达UCHL5组转录本2和沉默UCHL5组转录本2的表达均较高，所以选择此2种转录本进行后续实验克隆形成实验结果显示.与接受相同剂量照射的过表达对照组相比，上调UCHL5增加了Hela细胞的克隆形成率，在0、2、4、6Gy剂量照射后克隆形成率的差异均有统计学意义(014.16、19.22、&76、6.79,均P<0.05)、流式细胞术结果显示，与沉默对照组相比，沉默UCHL5促进了Hela细胞的凋亡(010.29.P<0.05),增加了丫射线诱导的细胞凋亡率(Q52.01,P<0.05)MTT实验结果显示，与过表达对興组相比，上调UCHL5可升高宫颈癌Hela细胞的增殖率，增殖率在第3天时差异有统计学意义(/=3.905.P<0.05)；与过表达对照组相比，等剂量照射UCHL5上调组升高了受照细胞的增殖率，在剂量为6、8、10Gy时，细胞的增殖率差异均有统计学意义(/=3.40、4.06、3.68,均P<0.05)。

紫外线的皮肤损伤机制及具有紫外线防护作用的天然产物的研究进展路婷婷;陈亚泽;卢涛;张予阳【摘要】皮肤长期暴露在紫外线下可以引起皮肤损伤,出现皮肤光老化甚至出现皮肤癌变和其他皮肤病变.紫外线引起的皮肤光老化的主要机制有:氧化应激、炎症反应、细胞凋亡、胶原和弹性蛋白的降解等.目前国内外关注的焦点是开发紫外线防护剂,目前主要研究的有黄酮类化合物、萜类化合物、鞣质类、香豆素类等.该文主要对紫外线的皮肤损伤机制及天然来源紫外线防护剂的研究进展进行综述.%Prolonged exposure to UV radiation can cause skin damage such as skin photoaging, skin cancer and other skin lesions. UV-induced skin damage mechanisms mainly include oxi-dative stress, inflammation, apoptosis, collagen and elastin degradation, etc. The current international focus of attention is the development of natral products including botanicals ultraviolet protective agents, the main researches contain flavonoids, terpe-noids, tannin, coumarin, etc. This review will help to maintain the UV-induced skin damage mechanisms and herbal products including botanicals ultraviolet protective agents.【期刊名称】《中国药理学通报》【年(卷),期】2012(028)012【总页数】5页(P1655-1659)【关键词】紫外线防护剂;天然产物;皮肤光老化;胶原;氧化应激;UVA/B【作者】路婷婷;陈亚泽;卢涛;张予阳【作者单位】沈阳药科大学生命科学与生物制药学院,辽宁,沈阳,110016;天津武警后勤学院生药学与药剂学教研室,天津,300162;山东体育学院图书馆,山东,济南,250102;天津武警后勤学院附属医院皮肤科,天津,300162;沈阳药科大学生命科学与生物制药学院,辽宁,沈阳,110016【正文语种】中文【中图分类】R-05;R28;R322.99;R751.05;R818随着大气臭氧层遭到严重破坏，太阳紫外线(UV)辐射强度照射不断增强，且UV具有累积效应，对人们的生活工作影响越来越大。

紫草素对人宫颈癌Hela细胞增殖的影响及其作用机制研究于海荣;苗浩;庞冲;左彦珍【期刊名称】《中国生化药物杂志》【年(卷),期】2015(000)004【摘要】目的：研究紫草素对人宫颈癌Hela细胞增殖的影响及其作用机制。

方法用MTT法检测紫草素对人宫颈癌Hela细胞的增殖抑制作用；通过测定内源性活性氧、线粒体膜电位，探讨紫草素对Hela细胞氧化损伤的作用机制。

结果紫草素抑制Hela细胞增殖且呈剂量依赖性。

紫草素可剂量依赖性地升高Hela细胞内源性活性氧水平，降低线粒体膜电位，抗氧化剂NAC能显著性的降低紫草素的抗肿瘤活性。

结论线粒体膜电位的改变和内源性活性氧的生成是紫草素抑制人宫颈癌Hela细胞增殖的作用机制之一。

%Objective To study effect of Shikonin on human cervical cancer Hela cell growth suppression in vitro and its mechanism. Methods MTT assay was used to examine the growth inhibition of Shikonin in Hela cells.And then, the measurement of both ROS Levels and Mitochondrial Membrane P otential (ΔΨm ) were performed to clarify the mechanism of antitumor in Hela cells by Shikonin.Results Shikonin significantly inhibited the growth of Hela cells in a concentration-dependent manner.Shikonin increased generation of en-dogenous reactive oxygen species ( ROS) and decreased mitochondrial membrane potential.Furthermore, anti-oxidants N-acetylcysteine ( NAC) could significantly reduce the antitumor activity of SK in Helacells.Conclusion These results suggest that mitochondrial aerobicrespiration shift and endogenous ROS augmentation contribute to the action of Shikonin against Hela cells.【总页数】3页(P16-18)【作者】于海荣;苗浩;庞冲;左彦珍【作者单位】承德医学院，河北承德 067000;承德医学院，河北承德 067000;承德医学院，河北承德 067000;承德医学院，河北承德 067000【正文语种】中文【中图分类】R285【相关文献】1.miR-218对新藤黄酸抑制人宫颈癌HeLa细胞增殖作用的影响及机制研究 [J], 石玉荣;刘健;陈素莲;杨滢2.红花多糖对人宫颈癌Hela细胞增殖、凋亡及侵袭作用机制研究 [J], 张静;姚霞;李晓苗;李晋琼3.BGJ398与顺铂单独或联合作用对宫颈癌HeLa细胞增殖、凋亡、侵袭的影响及其机制研究 [J], 宋前燕;毛熙光4.三叶青提取物对宫颈癌HeLa细胞增殖的影响及作用机制研究 [J], 黄慧伟; 杜蔚连; 邓茜5.miRNA-451在宫颈癌中的表达及对宫颈癌Hela细胞增殖与凋亡影响的作用机制研究 [J], 李艳;陈文玉;陈小平;陈友国因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

广东化工2020年第12期· 76 · 第47卷总第422期白藜芦醇抗紫外损伤的初步研究李芳，何燕，王治昕，曾慧婷，贺光祖(湖南环境生物职业技术学院化学教研室，湖南衡阳421001)[摘要]目的：探索白藜芦醇(RES)干预紫外损伤的有效途径，为研究其药理活性提供新思路。

方法：以400 J·m-2的剂量建立紫外(主要是UVC)损伤HeLa细胞的模型；在UV损伤细胞的前、中、后期加入RES进行干预，筛选干预效果最佳的处理方式；对筛选的最佳结果进行细胞水平和分子水平的初步评估。

结果：RES干预紫外损伤的最佳方式为与紫外同时处理30 min，最佳处理浓度为50 μM，存活率提高了59.5 %。

RES能通过上调OGG1的表达和减少脂质过氧化产物(MDA)的堆积来抵抗紫外造成的氧化损伤。

结论：与紫外同时处理细胞时，RES能显著减轻紫外对细胞的损伤，提示白藜芦醇具有出色的抗紫外损伤能力，推测可将其应用于防晒和护肤产品的研发。

[关键词]白黎芦醇；UV；氧化损伤[中图分类号]TQ [文献标识码]A [文章编号]1007-1865(2020)12-0076-03The Preliminary Study of Resveratrol Resists UV DamageLi Fang, He Yan, Wang Zhixin, Zeng Huiting, He Guangzhu(Department of Chemistry, Hu’nan Polytechnic of Environment and Biology, Hengyang 421001, China) Abstract: Objective:To explore an effective way for resveratrol (RES) to resist UV damage, and to provide a new idea for studying its pharmacological activity. Methods: The HeLa cells were damaged by UV (mainly UVC) at the dose of 400J·m-2. RES was added before, during and after UV-damaged cells for intervention, and the best treatment was selected. The optimal screening result was initially evaluated at the cellular and molecular levels. Results: The best way to resist UV damage was to treat with RES at the same time for 30min.The best treatment concentration of RES was 50 μM and the survival rate was increased by 59.5%.RES resisted the oxidative damage caused by UV by up-regulating the expression of OGG1 and reducing the accumulation of lipid peroxidation product (MDA). Conclusion: When the cells were treated with UV at the same time, RES could significantly reduce the damage caused by UV. That suggests RES has excellent to resisit UV damage and presumably can be applied to the research and development of sunscreen and skin care products.Keywords: Resveratrol；UV；Oxidative Damage白藜芦醇(RES)是在植物体内发现的一种天然抗毒素，目前已在虎杖、葡萄等近百种植物中发现[1]。

不同剂量中波紫外线照射对角质形成细胞的氧化损伤作用尹颂超;张云青;薛晓杨;李欢【摘要】Objective To investigate the oxidative damage effect on keratinocytes from UVB at different doses.Methods Human keratinoctes were exposed to UVB at different doses of5mJ/cm2,10mJ/cm2,20mJ/cm2,30 mJ/cm2,40mJ/cm2. After 24h, the content of cellular malond-ialdehyde (MDA), the LDH in culture solution, the activity of cellular superoxide dismutase ( SOD) and the cellular viability were measured.Results The decrease of SOD activity and the cellular viability, and the increase of MDA and LDH were induced by UVBin a dose-dependent manner. Irradiation of keratinocytes with UVB at10mJ/ cm2 resulted in a signiifcant decrease of cellular viability and a signiifcant increase of LDH in culture solution. The decrease of SOD activity and the increase of MDA were induced at 20mJ/cm2 and 30~40mJ/ cm2, respectively. Conclusion The oxidative damage on keratinocytes can be induced by UVB irradiation at 30~40mJ/cm2.%目的：观察不同剂量中波紫外线（UVB）照射对角质形成细胞（HaCaT细胞）的氧化损伤作用。

重楼药理作用的研究进展何明生;李秀【摘要】Paris polyphylla is a traditional Chinese Medical herb that has been used for thousands of year. Modem pharmacological studies have shown that Paris possess a variety of pharmacological effects ,such as anti - tumor, anti - inflammatory, antibacterial, sedation, analgesia, hemostasis. In recent years, the pharmacological mechanism of Paris polyphylla focuses on its anti - tumor and renal protective effects. This paper reviewed the progress in the studies on pharmacological effects of Paris polyphylla.%重楼(Rhizoma Paridis)为常用中药,种类众多,资源丰富,有清热解毒,消肿止痛,凉肝定惊的功效.现代药理研究表明,重楼具有抗肿瘤、消炎、抑菌、镇静、镇痛、止血等作用等多种药理作用.近年来对重楼药理作用的研究主要集中在其抗肿瘤和肾脏保护作用上,作者就重楼的药理作用国内外最新研究现状作一综述.【期刊名称】《世界中医药》【年(卷),期】2012(007)006【总页数】4页(P579-582)【关键词】重楼;药理作用;抗肿瘤;重楼总皂苷【作者】何明生;李秀【作者单位】云南省肿瘤医院血液科,云南省昆明市西山区昆州路519号,650118;云南省肿瘤医院血液科,云南省昆明市西山区昆州路519号,650118【正文语种】中文重楼(Rhizoma Paridis)，为百合科植物云南重楼Paris polyphylla Smithvar.yunnanensis(Franch.)Hand.－Mazz.或七叶一枝花 Paris polyphylla Smith var.chinensis(Franch.)Hara的干燥根茎。

紫外导致的DNA损伤与修复论文由于臭氧层的损耗到达地球表面的紫外辐射日渐增加。

而关于增加的紫外辐射对生物体的各种作用机制已引起了研究者的极大兴趣。

而DNA在从细菌到人的各种生物体中无疑是紫外线导致的损伤的重要目标。

紫外辐射能够导致两种常见的，具有遗传与细胞双重毒性的DNA损伤：环丁烷-嘧啶二聚体（CPD）和6-4光产物（6-4PP）及其杜瓦异构体。

但是，在长期的进化中，细胞已经进化出了很多修复或耐受机制来抵抗由紫外线及其他因素导致的DNA损伤。

在光复活酶的帮助下进行的光复活作用是很多生物体中最重要和常见的修复机制。

切除修复，它可以划分成碱基切除修复（BER）与核苷酸切除(NER)修复，在一些生物体中也是一种重要的修复途径。

这种途径分别是由一些糖基化酶和聚合酶催化的。

此外，像二聚体旁路，重组修复等其它一些修复途径也在不同的生物体中发挥着作用。

本综述讨论了紫外线导致的DNA损伤及相关的修复途径，并对未来的研究工作做了展望。

紫外线DNA损伤；光复原作用；切除修复；损伤旁路1DNA损伤（DNA damage）是指在外界因素作用下，DNA的结构发生变化，DNA损伤可以通过转录，翻译的产物——RNA与蛋白质来作用于细胞,并影响其代谢。

DNA 损伤可分为两大类型： 1.内源性损伤，如被正常代谢的副产物活性氧物种攻击导致的损伤（自发突变）； 2.外源性损伤，由外部因素引起，例如：（1）来自太阳的紫外射线； (2）其他频率的辐射，包括X射线和γ射线；(3)水解和热解； (4)某些植物毒素； (5)人造的突变物质，如吸烟产生的某些烃等。

如果这些损伤得不到修复，细胞的正常生命活动就会受到破坏，由细胞构成的生命体就会产生突变，并会由此而诱发一系列的遗传疾病。

为了防止DNA损伤而造成突变，生物体的细胞通过自身的DNA修复系统对其进行自我修复——DNA修复（DNA repair）以维持自身遗传的稳定性。

每个正常生物体内都存在着能―医治‖DNA损伤的复杂的修复系统，它们就像一个受过良好训练的维修小组，不停地对受损DNA进行着修复。

JNK信号通路与临床疾病研究综述范为民【期刊名称】《中西医结合研究》【年(卷),期】2015(007)006【总页数】5页(P313-316,319)【作者】范为民【作者单位】皖南医学院弋矾山医院中医科,安徽芜湖 241001【正文语种】中文c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase，JNK)，又称为应激激活蛋白激酶(SAPK)，属于丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)家族的一类。

上世纪九十年代，在紫外线照射的HeLa细胞提取物过程中被发现[1]，可参与人类细胞的胚胎发育、细胞分化、细胞增殖、细胞死亡的过程。

近些年研究证实，JNK信号通路活化参与多种临床疾病发生发展过程，调控JNK信号通路可作为临床疾病防治的作用靶点。

1.1 生物学特性JNK编码为3个基因，分别是JNK1(SAPK-γ)、JNK2(SAPK-α)和JNK3(SAPK-β)。

JNK1和JNK2基因在全身广泛表达，而JNK3基因仅限于脑、心脏、睾丸等部位表达[2]。

每个JNK基因分子量为46×103和54×103，主要位于细胞质。

这些基因通过选择性剪接而形成10种异构体，不同剪接蛋白的产生主要基于羧基末端是否存在延伸。

而另一种选择性剪接仅针对于JNK1和JNK2，即对亚结构域Ⅸ和Ⅹ之间的2个外显子进行编码。

正是由于上述选择性剪接作用，改变了JNK与底物对接点相互作用的能力而影响了底物的特异性[3-4]。

1.2 JNK信号通路的激活与调控JNK信号通路可被细胞外多种因素刺激而致使细胞内发生一系列反应，这些因素包括细胞因子(如TNF-α、IL-1、EGF等)、应激(如紫外线、电离辐射、氧化损伤等)以及某些G蛋白偶联受体等。

JNK信号通路调控网络主要由上游调节因子、下游靶基因和靶蛋白、支架蛋白等3部分组成。

JNK通路的上游调节因子需要经过3级酶促级联反应：MAPKKKs、MAPKKs、MAPKs。

顺铂对Hela细胞辐射增敏的体外实验探讨分析目的：分析顺铂对宫颈癌细胞系Hela的细胞毒性和辐射增敏作用，以及射线与顺铂联合应用时的效应关系。

方法：采用MTT法检测Hela细胞在不同浓度和辐射剂量下的细胞抑制作用；当辐射和顺铂联合应用时，检测细胞抑制率，分析顺铂与辐射联合应用时协同效应的条件。

结果：细胞抑制率随药物浓度增加而增大；单纯辐射组细胞抑制率随着剂量增加而增加；单纯顺铂组细胞抑制率随着浓度增加而增加；辐射+顺铂组细胞抑制率随着辐射剂量增加而升高；结论：顺铂和辐射联合应用对宫颈癌Hela细胞增殖有明显的抑制效果，建议应尽早的应用顺铂增敏化疗。

顺铂是临床中最常用的化疗增敏药物之一，目前国内外的众多临床治疗之中普遍采用同步放化疗的综合治疗模式，通过应用小剂量的化疗药物，增加放射线对肿瘤细胞的杀伤作用。

但是，化疗药物和放射线都对细胞有着严重的毒副作用，使临床中的多数患者难以接受。

此次研究实验，只要针对辐射剂量与顺铂浓度之间的影响效应。

1 资料与方法1.1 Hela细胞对顺铂敏感性的测定将Hela细胞悬液接种于96孔培养板中，每孔100μL。

参考研究报道[1]将顺铂确定从低到高8个浓度。

培养箱中培养24h，实验孔中加入适量药物培养24h。

终止培养后每孔加入20μLMTT试剂，混均后继续培养4h。

弃上清、加入150μL 二甲基亚砜，震荡仪震荡20min，酶标仪上490nm波长检测各孔吸光度值，每组取5个复孔的平均值，通过公式计算细胞抑制率[2]。

细胞移植率=1-（实验组吸光度值/对照组吸光度值）×100%，计算半数致死浓度（IC50）值。

1.2 照射方法所有照射均匀室温下照射，采用6MV-X线，剂量率4Gy/min，分别一次性给予各实验组6、8、10、12、14、15Gy和0、4、8、12Gy辐射剂量，源板距100cm。

1.3 MTT法测定顺铂的辐射增敏性将细胞分为4组，空白对照组、单纯辐射组、单纯顺铂组、辐射+顺铂组。