四氯化碳诱导ICR小鼠和C57小鼠的肝纤维化模型比较

肝纤维化动物模型造模方法的研究进展I. 综述肝纤维化是一种严重的肝脏疾病，其病理特征为肝实质中大量纤维组织增生，导致肝脏功能受损。

肝纤维化的发生和发展受到多种因素的影响，如病毒感染、药物毒性、酒精性肝病等。

因此建立有效的动物模型对于研究肝纤维化的发病机制和治疗方法具有重要意义。

本文将对近年来关于肝纤维化动物模型造模方法的研究进展进行综述。

在构建肝纤维化动物模型时，首先需要选择合适的动物种类。

常用的动物模型包括CRISPRCas9基因敲除小鼠、自发性肝纤维化大鼠、四氯化碳(CCl诱导的肝纤维化大鼠等。

其中CRISPRCas9基因敲除小鼠是目前最为理想的肝纤维化动物模型之一，因为它可以精确地靶向特定基因进行敲除，从而有效地模拟人类肝纤维化的病理过程。

目前主要采用CRISPRCas9技术进行基因敲除。

通过构建特定的sgRNA序列，可以特异性地靶向目标基因，实现对其表达水平的抑制。

这种方法的优点是操作简便、高效，且可以精确地控制基因敲除的范围和程度。

然而CRISPRCas9技术仍存在一定的局限性，如可能导致非特异性敲除、影响其他基因的表达等。

因此未来还需要进一步优化该技术，以提高其在肝纤维化动物模型构建中的应用效果。

另一种常用的肝纤维化动物模型构建方法是通过化学物质的直接或间接作用诱导肝纤维化。

常用的化学物质包括四氯化碳(CCl、二甲基亚硝胺(DMN)、苯并芘等。

这些化学物质可以通过不同途径进入肝脏，引起肝细胞损伤和坏死，进而导致肝纤维化的发生。

然而这种方法存在一定的毒副作用，如长期暴露于高浓度的CCl4可能会导致肝癌的发生。

因此在使用化学物质诱导法构建动物模型时，需要严格控制剂量和时间，以降低实验风险。

A. 肝纤维化的定义和重要性肝纤维化是一种严重的肝脏疾病，其特征是正常肝细胞被大量的胶原纤维所替代，导致肝脏结构和功能的严重改变。

这种病变过程被称为纤维化，最终可能导致肝硬化，甚至肝癌。

因此对肝纤维化的早期诊断和治疗具有重要的临床意义。

肝损伤动物模型的研究进展肝损伤是指肝脏受到各种原因引起的不同程度损害的病理过程。

肝损伤的研究对于深入了解肝脏病理生理学机制、发现新的治疗靶点和开发新的药物具有重要意义。

动物模型是肝损伤研究的重要手段之一，通过构建适用的动物模型，可以模拟人类肝损伤的发生和发展过程，为肝损伤的基础研究和临床治疗提供有力支持。

常用的肝损伤动物模型包括化学性损伤模型、物理性损伤模型和生物学性损伤模型。

化学性损伤模型是利用特定的化学物质对动物肝脏进行损伤，常用的化学物质有四氯化碳、二乙二酸、乙醇和亚硝酸等。

物理性损伤模型是通过不同的物理因素对动物肝脏造成损伤，常见的有手术切除、缺血再灌注和冷冻等。

生物学性损伤模型是利用病原体感染、毒素作用或基因突变等因素引起肝损伤。

在化学性损伤模型中，四氯化碳（CCl4）是常用的肝损伤诱导剂。

CCl4会在肝脏中产生活性氯自由基，进而导致肝细胞膜的破坏和肝细胞损伤。

研究表明，CCl4模型可以模拟急性和慢性肝损伤的发生和发展过程。

在物理性损伤模型中，手术切除是常用的研究方法，通过肝叶的摘除可以模拟肝切除术后的肝再生和组织损伤修复过程。

在生物学性损伤模型中，病原体感染模型是研究肝炎和肝硬化等感染性肝损伤的重要手段。

近年来，肝损伤动物模型的研究得到了广泛关注，取得了一系列重要进展。

利用基因编辑技术构建特定基因敲除或过表达的动物模型，可以探究特定基因在肝损伤中的功能和作用机制。

使用CRISPR/Cas9技术敲除一些促炎因子基因，可以研究这些基因在非酒精性脂肪性肝病和肝纤维化中的作用。

利用转基因和基因表达技术构建特定基因表达的动物模型，可以模拟人类肝病的发病机制和临床表现。

构建APOE敲除小鼠模型，可模拟人类高脂血症和动脉粥样硬化的发生过程。

利用大型动物模型，如猪、猴等，可以更好地模拟人类的肝损伤，并提高疗效和安全性的评价。

猪模型可以模拟人类慢性肝炎病毒感染和肝硬化的发展过程。

肝损伤动物模型的研究已经取得了重要进展。

2024中性粒细胞在肝纤维化中的作用摘要肝纤维化是慢性肝病进展及肝硬化转归的关键环节。

肝脏免疫微环境失衡是肝纤维化的关键病理机制之一，中性粒细胞在其中发挥着重要作用。

本文就中性粒细胞在不同病因所致肝纤维化中的作用机制研究进展进行了概述。

【关键词】肝纤维化;中性粒细胞;综述肝纤维化是由多种病因如酒精性肝病(a1coho1icIiverdisease z A1D).非酒精性脂肪性肝病(nona1coho1icfatty1iverdisease z NAF1D)x病毒性肝炎、胆汁淤积等导致的慢性肝损伤向肝硬化发展的关键病理过程，主要涉及肝细胞损伤、间质细胞活化、炎性细胞浸润、细胞外基质(extrace11u1armatrix,ECM)过度沉积等。

近年来,以肝星状细胞(hepaticste11ateCe11HSC)与肝脏天然免疫细胞所构成的肝脏免疫微环境失衡而导致肝纤维化进展是重要的研究热点，主要围绕固有免疫细胞如巨噬细胞、自然杀伤细胞(natura1ki11erce11s,NKCe1IS)等与HSC间相互关系展开研究，然而中性粒细胞在其中的作用却鲜有关注。

传统观点认为中性粒细胞属于终末分化细胞，是一群有着抗菌功能的同质细胞，但越来越多的证据表明，中性粒细胞具有免疫抑制性，并参与多种器官纤维化进程，这表明中性粒细胞具有可塑性和异质性。

本文就中性粒细胞在肝纤维化中的作用展开综述。

一、中性粒细胞的基本生物学特征中性粒细胞由骨髓造血干细胞发育而来，造血干细胞经多能祖细胞阶段分化为粒细胞-单核细胞髓样祖细胞随后在粒细胞集落刺激因子或粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的作用下，经成髓细胞、早幼粒细胞、中幼粒细胞、晚幼粒细胞等阶段，最终分化为成熟的中性粒细胞，释放至循环中。

经典的中性粒细胞从血液中募集至炎症部位(包括肌肉、皮肤、肠系膜等)，是通过选择素-PSG1-整合素的途径实现的。

然而Senger团队研究发现肝脏招募中性粒细胞并不遵循此经典途径，他们认为中性粒细胞通过与肝脏内皮细胞的特异受体(I 型二肽酶)结合，从而募集至肝脏。

肝纤维化实验动物模型造模方法及应用研究进展冯英巧;杨元生;崔淑兰;陈垦;王晖【摘要】肝纤维化是肝脏对持续损伤作出的以细胞外基质过度累积为主要特点的一种常见的免疫应答.目前尚无理想的治疗药物或方法,因此研究肝纤维化的发生机制对寻找有效的治疗药物及其方法有重要意义,理想的动物实验模型是上述研究的关键所在.尽管目前有四氯化碳造模法、乙醇造模法及免疫造模法等肝硬化动物模型制备方法,但各法均有其利弊,而理想的、重复性好且适合广泛推广应用的标准模型仍需继续探索.本文对肝纤维化动物模型的研究和应用进展作一综述.【期刊名称】《广东药学院学报》【年(卷),期】2013(029)005【总页数】5页(P570-574)【关键词】肝纤维化;肝硬化;动物模型;机制;治疗【作者】冯英巧;杨元生;崔淑兰;陈垦;王晖【作者单位】广东药学院临床医学院,广东广州510006;广东药学院附属第二医院,广东广州510006;广东药学院护理学院,广东广州510006;广东药学院临床医学院,广东广州510006;广东药学院中药学院,广东广州510006【正文语种】中文【中图分类】R-332肝纤维化(liver fibrosis，LF)是肝脏遭受反复或慢性损伤后的一种损伤与修复过程，主要与慢性炎症和引起慢性肝脏损伤的化学因素相关，现已成为一个发病率和死亡率都很高的世界医学难题(非酒精性脂肪性肝病平均累及世界人口的10%～24%，在我国高达15.35%)，各种肝病多数经肝纤维化最后发展为晚期的肝硬化成为肝病死亡的主要原因[1]。

目前除了在肝硬化晚期进行肝移植尚无其他有效的治疗策略，因此，构建能够模拟人体肝纤维化甚至肝硬化过程的理想动物模型成了探索早期诊断、寻找肝纤维化有效治疗策略、改善肝硬化病情和预后的关键。

本文就近几年有关肝纤维化的建模及其应用进展作一综述。

1 化学造模法1.1 四氯化碳(CCl4)诱导的肝纤维化模型CCl4可引起肝脏损伤及纤维化而被广泛用于诱导肝纤维化动物模型。

ICR小鼠与BalBc小鼠在构建正常小鼠模型中的比较钟凯;计融;李业鹏;李玉伟;李燕俊;韩春卉;赵熙;张靖;陈庭君【期刊名称】《中国食品卫生杂志》【年(卷),期】2003(15)4【摘要】小鼠模型广泛应用于食品科学、毒理学及相关学科。

为提供ICR小鼠和BalB c的背景 ,本研究考察了 10项免疫指标治疗。

选用ICR小鼠、BalB c小鼠各6 0只 ,按《保健食品功能学评价程序和检验方法》进行试验。

在迟发型变态反应(DTH)、半数溶血值、巨噬细胞鸡红细胞吞噬率、NK细胞活性 4项指标中 ,BalB c小鼠显著优于ICR小鼠 ,揭示在这 4项实验中BalB c小鼠应为首选。

在脾脏体重比值、ConA刺激的小鼠淋巴细胞转化、单核 -巨噬细胞碳廓清能力、巨噬细胞鸡红细胞吞噬指数 4项指标中 ,两种小鼠差异没有显著性 ,因此在这 4项实验中ICR 小鼠可以替代BalB c小鼠。

另外 ,在胸腺体重比值、小鼠的抗体生成细胞数两项指标中 ,ICR小鼠的表现优于BalB c小鼠 ,其机理还不明了 ,有待进一步研究。

【总页数】3页(P295-297)【关键词】小鼠模型;ICR小鼠;BalB/c小鼠;保健食品;功能学评价;动物实验;免疫学【作者】钟凯;计融;李业鹏;李玉伟;李燕俊;韩春卉;赵熙;张靖;陈庭君【作者单位】中国疾控中心营养与食品安全所【正文语种】中文【中图分类】TS218【相关文献】1.无菌ICR小鼠和普通ICR小鼠血液中生化正常值的测定和比较 [J], 涂新明2.四氯化碳诱导ICR小鼠和C57小鼠的肝纤维化模型比较 [J], 钟霞;王丽;王洪连;沈宏春;徐川岚;刘育杭3.四氯化碳诱导ICR小鼠和C57小鼠的肝纤维化模型比较 [J], 钟霞;王丽;王洪连;沈宏春;徐川岚;刘育杭4.无菌ICR小鼠和普通ICR小鼠血‘液中生化正常值的测定和比较 [J], 涂新明;木内吉宽5.AG490对于ICR/Balbc小鼠皮肤移植效果的影响 [J], 王彬;冯新顺;薛武军因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

棉皮素在四氯化碳诱导的既存肝纤维化小鼠中的作用研究徐岑璐;刘叶;何佳澄;楚亚楠;王一然;苏炳银;李淑蓉;太颢然【期刊名称】《成都医学院学报》【年(卷),期】2024(19)3【摘要】目的探讨天然类黄酮棉皮素对四氯化碳(CCl_(4))诱导的肝纤维化模型小鼠的作用。

方法将C57BL/6J小鼠随机分为对照组、CCl_(4)组和CCl_(4)+棉皮素组,每组6只。

除对照组外,其余两组均采用20%CCl_(4)橄榄油溶液(0.75 μL/g, 2次/周,持续6周)腹腔注射,建立肝纤维化模型。

CCl_(4)+棉皮素组于造模第6周开始每天腹腔注射棉皮素(10 mg/kg)进行干预,对照组与CCl_(4)组小鼠同一时间注射等体积的PBS溶液。

末次给药24 h内,3组均取新鲜肝脏组织,并灌注固定制备石蜡切片;采用HE染色与Masson染色观察3组肝脏组织病理改变;免疫组化染色检测3组α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase3)、活化型半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Cleaved Caspase3)的表达情况;同时采用蛋白质印迹技术检测α-SMA表达情况。

结果与对照组相比,CCl_(4)组肝脏结构破坏,胶原纤维明显增生,形成纤维间隔,α-SMA、Caspase3、Cleaved Caspase3的蛋白表达水平升高(P<0.05),CCl_(4)+棉皮素组胶原纤维沉积减少,α-SMA、Caspase3的蛋白表达水平下降(P<0.05)。

结论天然类黄酮棉皮素可减少CCl_(4)诱导的肝纤维化模型小鼠胶原纤维沉积、肝星状细胞激活和细胞凋亡,对肝脏起保护作用。

【总页数】5页(P381-385)【作者】徐岑璐;刘叶;何佳澄;楚亚楠;王一然;苏炳银;李淑蓉;太颢然【作者单位】成都医学院发育与再生四川省重点实验室;成都医学院病理学与病理生理学教研室;成都医学院组织学与胚胎学教研室【正文语种】中文【中图分类】R361.2【相关文献】1.双氢青蒿素抑制四氯化碳诱导的小鼠肝纤维化的实验研究2.栀子柏皮汤不同配伍对四氯化碳诱导肝纤维化小鼠的治疗作用3.1，25-（OH）2D3联合α-干扰素治疗四氯化碳诱导肝纤维化小鼠的疗效研究4.金蝉花多糖对四氯化碳诱导小鼠肝纤维化的治疗作用及其机制研究5.五味子甲素对四氯化碳诱导小鼠肝纤维化的保护作用及其机制研究因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

四氯化碳致小鼠急性肝损伤模型建立与考察付双楠;高达;郭佳佳;苗明三;朱平生;宫嫚【期刊名称】《肝脏》【年(卷),期】2022(27)9【摘要】目的考察四氯化碳(CCL 4)致小鼠急性肝损伤稳定的动物模型,便于临床新药的研究与应用。

方法将KM小鼠随机分为空白组、模型组和联苯双酯组(5.625 mg/kg),通过腹腔注射0.1%CCL 4溶液复制小鼠急性肝损伤,检测造模后3 h、6 h、12 h和24 h的转氨酶水平、肝脏指数、肝组织病理变化进行模型稳定性研究。

结果模型组染毒后,ALT在3 h(45.21±13.17 IU/L)轻度升高(P<0.01)、12h(112.30±30.54 IU/L)和24 h(121.98±21.66 IU/L)升高明显(P<0.01);AST在3h(162.51±28.57 IU/L)、6 h(192.07±31.05 IU/L)、12 h(250.75±90.82 IU/L)、24 h(274.27±44.02 IU/L)均升高(均P<0.01),但在12 h和24 h升高显著;肝脏指数在3 h(6.72±1.90 g/100 g)、6 h(7.27±1.38 g/100 g)轻度升高(P<0.01),12h(12.41±1.18 g/100 g)及24 h(14.90±2.56 g/100 g)升高明显(P<0.01);肝脏病理变化在12 h及24 h可见明显的肝细胞肿胀、炎性细胞浸润,24 h损伤程度更显著。

结论腹腔注射0.1%CCL 4溶液制备小鼠急性肝损伤模型时,在12~24 h小时之间建模更适宜。

【总页数】5页(P1036-1040)【作者】付双楠;高达;郭佳佳;苗明三;朱平生;宫嫚【作者单位】解放军总医院第五医学中心中医肝病科;河南中医药大学【正文语种】中文【中图分类】R28【相关文献】1.四氯化碳致小鼠急性肝损伤动物模型建立方法的研究2.四氯化碳诱导小鼠急性肝损伤模型的建立和优化3.高活性小牛血去蛋白提取物对四氯化碳致急性肝损伤模型小鼠的保护作用4.四氯化碳致小鼠急性肝损伤模型的研究5.四氯化碳致小鼠急性肝损伤模型造模要素及中医药防治的数据挖掘研究因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

#### 实验背景肝癌是全球范围内最常见的恶性肿瘤之一，严重威胁人类健康。

近年来，随着生物技术和分子生物学的发展，小鼠肝癌模型已成为研究肝癌发生发展机制的重要工具。

本研究旨在建立一种高效、稳定的小鼠肝癌模型，并探讨其应用价值。

#### 实验材料1. 实验动物：SPF级昆明种小鼠，体重20-25g，雌雄各半。

2. 实验试剂：四氯化碳（CCl4）、橄榄油、肝细胞培养液、胎牛血清、聚凝胺（PFA）、H&E染色液、苏木素染色液、伊红染色液等。

3. 实验仪器：显微镜、离心机、电热恒温培养箱、组织切片机、染色机等。

#### 实验方法1. 小鼠分组：将小鼠随机分为实验组和对照组，每组10只。

2. 实验组：每天用橄榄油溶解CCl4，按照1:9的比例配制成CCl4溶液，以0.2ml/只的剂量给实验组小鼠腹腔注射，每周注射3次，连续12周。

3. 对照组：每天用橄榄油溶解CCl4，按照1:9的比例配制成CCl4溶液，以0.2ml/只的剂量给对照组小鼠腹腔注射，每周注射3次，连续12周。

4. 取材：在第12周结束时，对实验组和对照组小鼠进行安乐死，取出肝脏，用生理盐水冲洗，置于10%甲醛溶液中固定。

5. 组织学观察：将肝脏组织进行常规石蜡包埋、切片，进行H&E染色、苏木素-伊红（HE）染色和免疫组化染色。

6. 结果分析：观察肝脏组织的形态学变化、肿瘤生长情况、肿瘤细胞增殖和凋亡情况。

#### 实验结果1. 肝脏组织学观察：实验组小鼠肝脏组织出现明显的肝细胞损伤、变性、坏死和纤维化，部分小鼠出现明显的肝细胞癌变；对照组小鼠肝脏组织无明显异常。

2. 肿瘤生长情况：实验组小鼠肝脏肿瘤生长迅速，肿瘤直径明显大于对照组，且肿瘤数量多于对照组。

3. 肿瘤细胞增殖和凋亡情况：实验组小鼠肿瘤细胞增殖指数（PI）明显高于对照组，而肿瘤细胞凋亡指数（AI）则低于对照组。

#### 实验讨论1. 本实验采用CCl4诱导小鼠肝癌模型，结果表明该模型具有良好的肿瘤生长和癌变特点，可用于研究肝癌的发生发展机制。

四氯化碳腹腔注射致大鼠肝纤维化机理研究摘要四氯化碳（CCl4）在工业中被广泛使用，但同时也是致病性很强的化学物质之一。

大剂量的四氯化碳腹腔注射可以造成大鼠肝脏纤维化，这个过程涉及到许多细胞和分子，包括肝星状细胞、基质金属蛋白酶、肝细胞增殖因子等。

通过对四氯化碳致肝纤维化机制的探究，可以为预防和治疗肝纤维化提供理论依据。

本文综述了近年来对四氯化碳致大鼠肝纤维化机理的研究进展，以期为进一步深入研究提供指导。

引言肝纤维化是一种病理变化，主要表现为肝脏纤维化，细胞间质增生。

这种病理变化死亡率极高，导致的疾病有肝硬化等。

近年来，生物医学界对肝纤维化机理的研究非常活跃，多种因素可以导致肝纤维化。

其中，四氯化碳是致肝纤维化有力证据之一。

四氯化碳在工业中用于溶剂、引发剂等，同时也是致病性很强的化学物质之一。

另外，四氯化碳是一种引起腹腔注射、口服、吸入等损伤作用的化学物质。

研究四氯化碳致大鼠肝纤维化机制，对于预防和治疗肝纤维化具有重要的意义。

四氯化碳致大鼠肝纤维化机制及相关分子肝星状细胞肝星状细胞是肝组织中一个重要的细胞成分，其在肝纤维化的过程中起着重要的作用。

肝星状细胞是一种重要的合成胶原等结构蛋白的细胞，肝纤维化时会增殖并沉积更多的ECM（extracellular matrix，细胞外基质），导致肝脏脏器功能受损。

四氯化碳能够刺激肝星状细胞产生胶原等 ECM，长期刺激会导致肝组织生物学性质的改变，此时肝细胞开始发生变性、坏死，甚至引起肝硬化等，其机制是肝纤维化的重要组成成分。

基质金属蛋白酶基质金属蛋白酶（MMPs）是一类在肝脏纤维化过程中起重要作用的酶，它主要参与细胞外基质的分解、修复和代谢等生理过程。

细胞外基质主要为胶原、弹性纤维等结构蛋白，它们在细胞的形态和功能中起着重要的作用。

在肝脏纤维化过程中，MMPs主要功能是切割 ECM，将结构蛋白分解为小分子，使其成为肝星状细胞所需要的构成基质的单体，同时还能够促进肝星状细胞表达更多的 ECM。

CCl4诱导的小鼠肝脏纤维化模型肝纤维化是指肝脏内弥漫性细胞外基质（特别是胶原）过度沉积，不是一个独立的疾病，是许多慢性肝病共同的病理过程，几乎各种慢性肝病（化学毒性、感染性、遗传代谢性、自身免疫性，以及胆汁淤积性）都可以导致肝纤维化。

CCl4是诱导实验动物产生肝纤维化和肝硬化最广泛使用的化学性肝毒物。

在肝细胞内质网中，经肝微粒体内依赖于细胞色素P450 的具有混合功能的氧化酶激活后，CCl4产生了自由CCl3·及Cl，它们与肝细胞内大分子发生共价结合，可攻击膜不饱和脂质，引发活性氧自由基的产生和脂质过氧化，损伤肝细胞，从而导致狄氏间隙内原本静止的贮脂细胞活化，释放出Ⅳ型胶原酶，降解Ⅳ型胶原。

同时该细胞由合成分泌Ⅲ型胶原改为合成分泌I 型胶原，取代了Ⅳ型胶原，促使肝脏纤维化1.实验动物SPF级BablC小鼠，健康，雄性，体重为18g-20g2.实验分组实验分六组：正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组，每组15只动物。

3.实验周期6W4.主要试剂CCl4（上海国药集团）5.建模方法按5ml/kg 体重皮下注射体积分数为20% CCl4的油剂溶液（CCl4：橄榄油=1:4）, 每3天1次，连续6W。

对照组动物皮下注射等量等次的橄榄油溶剂。

正常饮食饲养，观察动物活动、精神状况和饮食量,实验前后称量小鼠体重。

完成持续给药6W后，称体重，戊巴比妥钠腹腔注射麻醉小鼠，摘眼球取血，室温静置2h后于4℃3000r离心10分钟提取血清，放入-80℃冰箱冻存。

同时取肝左叶组织1.5cm×1cm×0.2cm于10%中性福尔马林中固定，石蜡包埋；其余肝组织液氮冷冻-80℃保存。

6.模型评价1.大体观察：CCl4组小鼠随着给药时间延长活动逐渐减少, 精神萎糜,毛发蓬乱无光泽；大体标本显示，CCl4组肝脏与周围组织粘连明显，肝边缘圆顿，肝脏表面和切面呈弥漫的细小结节。

2.肝脏指数变化：取肝脏，称质量，计算肝脏指数=肝脏重/体重，CCl4组小鼠肝脏显著高于对照组小鼠。