生化二理论部分
填空
1 RNA的提取方法（①苯酚法）（②去污剂法）（③盐酸胍法）
2 二苯胺法测定DNA含量样品中含有少量RNA并不影响测定，但因（蛋白质）（多种糖类及其衍生物）（芳香醛）羟基醛等能与二苯胺反应形成有色化合物，故能干扰DNA定理。
简答
1.提取DNA/RNA去除杂蛋白的方法有几种原理是什么？
答1变性剂法：用SDS等去污剂使蛋白质变性，可以直接从生物材料中提取DNA；
2苯酚法：用含水的酚溶液沉淀蛋白质和DNA，分层、离心。因蛋白变性，抑制了核酸酶活性，并且操作过程比较缓和，可以得到较好的DNA制品；
3氯仿法：用含辛醇或异戊醇的氯仿振荡核蛋白，使乳化，离心除蛋白，DNA在上层水相，用乙醇沉淀上层，可将DNA沉淀出来。
2.二苯胺法测DNA含量的原理以及乙醛的作用。
答DNA分子中的2-脱氧核糖在酸性环境中变成ω-羟基-γ-酮基戊醛，与二苯胺试剂作用生成蓝色化合物（λmax=595nm）。DNA在40 ~ 400微克范围内，光吸收值与DNA的浓度成正比。
乙醛可增加二苯胺法测定DNA的发色量，又可减少脱氧木糖和阿拉伯糖的干扰，能显著提高测定的灵敏度。
3 0.14mol/lNaCl分离DNA和RNA的原理。
答物和植物组织的脱氧核糖核蛋白（DNP）可溶于水或浓盐溶液（如1mol/L氯化钠），但在0.14mol/L氯化钠盐溶液中溶解度最低，而核酸核蛋白（RNP）则在0.14mol/L氯化钠中溶解度最大，利用这一性质可将其分开。
生化二操作部分
紫外—可见分光光度发影响因素（不知道）
提取动物DNA的流程（自己看吧）
DNA/RNA提取及测定时的注意事项
提取：①在低温下进行操作；
②减少物理因素对核酸的机械剪切力；
③防止过酸、过碱引起核酸降解，控制pH值范围（pH值5-9），并要保持一定离子强度；
④防止核酸的生物降解；
生化一理论及操作
填空
Folin-酚法测定蛋白含量时folin甲试剂是（碱性）反应试剂，（）能还原乙试剂中的（磷钼酸）（磷钨酸）还原成
（）和蛋白质中的（）（）和folin乙中的（）（）
2凝胶层析利用被分离物质的（分子大小）（形状不同）进行分离。
2名词解释
1.米氏常数：Km值是酶的特征常数之一，只跟酶的性质有关，而与酶的浓度无关。
2.正交表符号L9(34)每个代表的意义
L: 正交表的代号
9：正交表横行数
3：字码数（因素的水平数）
4：正交表纵列数（最多允许安排因素的个数）
3蔗糖酶活力测定原理（ppt79页）
蔗糖蔗糖酶的作用→D-果糖+ D-葡萄糖
DNS试剂+ D-葡萄糖强酸，沸水浴→氨基化合物
4.有机分级沉淀
向水溶液中加入一定量亲水性的有机溶剂，降低溶质的溶解度，使其沉淀析出的分离纯化方法。
3简答
1细胞破裂的方法
（1）机械（匀浆）法
（2）超声波处理法
（3）反复冻融法：
（4）化学处理法：
（5）溶胞作用(酶溶解法)：
（6）自溶法：
2. SDS凝胶电泳中过硫酸铵(AP) TEMED（四甲基乙二胺）CL离子甘氨酸的作用
AP 催化剂引发聚合
TEMED 加速剂促凝作用加速聚丙烯酰胺凝聚
CL 甘氨酸浓缩效应（明天给你看）
3.双倒数法求VM、KM时用的米氏方程是什么？怎样求VM KM ？曲线特点是什么？
1 Km 1 1
((( = (( ( ((( + ((
V Vmax [S] Vmax
斜率是KM Y轴截距倒数是VM
特点自己看吧
4离子交换层析的原理步骤
原理：以离子交换剂为固定相，以特定的离子溶液为流动相，利用离子交换剂对待分离的各种离子结合力的差异，而将混合物中不同离子进行分离的层析技术。
步骤: 平衡-上样-吸附-洗脱-再生(具体的自己看看)
