水稻愈伤组织的诱导实验报告

提高水稻愈伤组织再生频率的研究
水稻是我国的主要粮食作物之一，其生产量和质量直接关系到国家的粮食安全和经济发展。

然而，水稻在生长过程中难免会受到各种病虫害的侵袭，导致产量下降。

为了解决这一问题，科学家们通过研究水稻的愈伤组织再生频率，提高水稻的抗病能力，从而提高水稻的产量和质量。

愈伤组织是指植物在受到外界伤害后，通过细胞分裂和分化形成的一种新的组织。

在水稻中，愈伤组织可以通过培养基的处理和激素的添加来诱导其再生。

然而，水稻的愈伤组织再生频率较低，限制了其在水稻育种中的应用。

为了提高水稻愈伤组织再生频率，科学家们进行了大量的研究。

他们发现，愈伤组织再生频率与培养基的成分、激素的种类和浓度、温度、光照等因素密切相关。

通过优化这些因素，可以显著提高水稻愈伤组织再生频率。

科学家们还通过基因编辑技术，对水稻中与愈伤组织再生相关的基因进行了研究。

他们发现，一些基因的突变可以显著提高水稻愈伤组织再生频率。

这些研究为进一步提高水稻愈伤组织再生频率提供了新的思路和方法。

提高水稻愈伤组织再生频率是提高水稻产量和质量的重要途径之一。

科学家们通过优化培养条件和基因编辑技术，不断探索提高水稻愈
伤组织再生频率的新方法，为水稻育种和生产提供了有力的支持。

水稻愈伤组织的诱导实验报告实验目的：本实验旨在探究水稻愈伤组织的诱导方法，为将来的水稻遗传改造研究提供参考。

实验材料和仪器：1. 材料：水稻种子、MS培养基、植物生长调节剂2,4-D、生长调节剂TDZ、无菌器具、琼脂、无菌操作室。

2. 仪器：无菌操作台、显微镜、实验室平衡器等。

实验步骤：1. 生物材料准备：选取幼苗期生长良好、品种鲜明的水稻种子作为材料。

将水稻种子进行表面消毒，处理方法为分别用70%的酒精和5%的次氯酸钠(1:1)混合消毒3-5分钟，然后充分清洗。

2. 建立组织培养体系：将消毒后的水稻种子在无菌操作台上进行分离培养。

将种子取出后，从胚乳中取出胚轴，用剪刀消毒后放入含有MS培养基的无菌培养瓶中，置于无菌操作室中进行培养。

在35-37°C下连续培养3-5天。

3. 筛选愈伤组织：将培养2-3天的胚轴等植物试管苗等组织放置在含有不同浓度的2,4-D和TDZ的培养基中，培养10-15天。

筛选出生长具有愈伤能力的组织，采用显微镜等方法进行观察，并进行相应的分离和培养。

4. 愈伤组织的维持和复壮：将筛选出的愈伤组织维持在含有2,4-D和TDZ的培养基中，定期进行转移或分离。

当愈伤组织增生至一定程度后，将其转移到不含激素的培养基中，进行复壮。

实验结果：在实验过程中，我们选择了4个不同浓度的2,4-D和TDZ进行培养，筛选出了愈伤组织，并进行了维持、修复工作。

经过5次转移和增殖培养，我们成功地建立了稳定的水稻愈伤组织体系。

结论：本实验采用的方法可行，成功地建立了稳定的水稻愈伤组织体系。

本研究为今后的水稻遗传改造和抗性育种提供了良好的基础。

摘要水稻成熟种子具有细胞全能性。

本实验以错误!未找到引用源。

+2,4-D为基本培养基，添加NAA和6-BA为分化培养基，对水稻种子材料进行体外培养，诱导形成愈伤组织，并进行分化。

在培养基中添加一定量的激素给种子形成愈伤组织提供动力。

结果表明，在合适的培养条件下愈伤组织的分化程度很高，但培养基因素或光照条件使得褐化现象严重。

关键词水稻成熟种子组织培养愈伤组织诱导分化激素1前言细胞工程是指应用现代细胞生物学、发育生物学、遗传学和分子生物学的理论与方法，按照人们的需要和设计，在细胞水平上的遗传操作，重组细胞的结构和内含物，以改变生物的结构和功能，即通过细胞融合、核质移植、染色体或基因移植以及组织和细胞培养等方法快速繁殖和培养出人们所需要的新物种的生物工程技术。

其常用技术手段有植物组织培养，植物体细胞杂交、动物细胞培养、动物细胞融合、单克隆抗体、胚胎移植、核移植等。

根据细胞类型的不同，可以把细胞工程分为植物细胞工程和动物细胞工程两大类。

本实验主要综述细胞工程中植物细胞工程的植物组织培养这一技术手段。

植物组织培养技术的应用范围包括快速繁殖、培育无病毒植物，通过大规模的植物细胞培养来生产药物、食品添加剂、香料、色素和杀虫剂等。

植物组织培养，诱导愈伤组织形成和形态发生，使一个离体的细胞、一块组织或一个器官的细胞，通过脱分化形成愈伤组织，并由愈伤组织在分化形成植物体。

在植物组织培养中，由于植物细胞具有全能性，即植物的体细胞具有母体植株全部遗传信息并会发育成为完整的个体。

因而，每一个植物细胞可以像胚胎细胞一样，经离体培养再生成为植株。

随着细胞工程技术的不断发展，植物细胞和组织培养这一细胞工程技术也无例外地得到发展，目前已在许多植物上，特别是在农林生产实践中得到了广泛应用。

尤其在林木优良品种和无性系的快速繁殖方面进展较快。

本实验旨在利用NAA和6-BA的组合调控来诱导水稻成熟种子的愈伤组织，加深对外植体消毒、接种的无菌操作技术，学习外植体愈伤组织诱导的方法。

水稻愈伤组织转化一、实验目的1.掌握植物组织培养的基本原理；2.学习水稻愈伤组织的诱导方法；3.学习农杆菌转化法的原理，掌握农杆菌转化水稻愈伤组织的方法；4.学习转基因植株的各种鉴定方法（包括PCR检测、GUS染色、Southern-blot、Western-blot、FISH等），同时能够操作PCR与GUS染色鉴定的方法。

二、实验原理1.植物组织培养植物组织培养（plant tissue culture）是指在无菌条件下，将离体的植物器官、组织、细胞以及原生质体和花药等，在人工控制的培养基上培养，使其生长、分化以及形成完整植株的技术。

自1902年Haberlandt 首先用紫鸭跖草( Tradescantia )的叶片栅栏组织进行培养来，植物组织培养已有100余年历史。

用于离体培养的各种植物材料称为外植体（explant）。

根据外植体的类型，又可将组织培养分为：器官培养、组织培养、胚胎培养、细胞培养以及原生质体培养等。

（从这个角度讲，本学期的实验属于胚胎培养。

）植物组织培养的理论基础是植物细胞全能性。

2.基因工程基因工程技术是在离体条件下对不同生物的遗传物质(DNA)进行人为“加工”，并按照人们的意愿重新组合，以改变生物的性状和功能，然后再通过适当的载体将重组DNA转入生物体或细胞内，并使其在生物体内或细胞中表达，从而获得新的生物机能。

这种利用基因工程技术获得的植物一般称为“基因工程植物”。

自1983年首次获得转基因植物以来，转基因技术发展十分迅速，成功进行转基因的植物已达60多种，在世界上批准进入田间试验的转基因植物已超过500例，有些转基因产品已进入市场。

通过基因工程改良作物品种在未来的农业生产中日益显示出巨大潜力。

3.农杆菌转化法转基因的方法有很多，对于植物而言，最常用的是农杆菌转化法和基因枪法。

农杆菌转化法使用的是根癌农杆菌，其内含Ti质粒：T-DNA（Transferre DNA）区：农杆菌Ti 质粒中向植物中转移并整合进植物基因组中的部分。

水稻愈伤组织的诱导李希北京科技大学化学与生物工程学院生物科学与技术系，北京，100083摘要：以水稻种子为外植体，研究了外植体的消毒方法和接种技术，了解了水稻愈伤组织诱导的过程。

结果表明水稻种子接种在诱导培养基上两天已产生愈伤组织发芽2mm，四天愈伤组织呈现浅黄色发芽5-10mm，6天愈伤组织颜色加深发芽1-2cm，8天愈伤组织为橙黄色发芽2-3cm，无杂菌污染。

关键词：水稻种子外植体诱导愈伤组织引言自Niizeki和Oono1968年首次获得水稻花粉植株以来，水稻组织培养取得了很大的进展，如各种水稻品种愈伤组织的诱导、继代、植株再生培养基的筛选，遗传特性，基因工程转化体系的建立等等。

水稻种子愈伤组织的诱导是这些研究的基础，因此掌握外植体的消毒方法和接种技术，了解了水稻愈伤组织诱导的过程至关重要。

以植物器官、组织、细胞等作外植体进行离体培养时，在一定的诱导培养条件下都能诱导形成愈伤组织。

外植体源自自然环境均为带菌状态，在接种前都必须进行消毒。

对于难消毒的材料，有时要几种消毒剂配合使用。

本次试验使用的诱导剂为2,4-D，诱导率为100%。

1 材料与方法1.1 材料1.1.1实验材料水稻成熟种子（用于诱导愈伤组织）；1.1.2仪器设备及用具超净工作台培养室、培养皿：￠9cm×2枪形镊量筒：100mL×2三角瓶：50mL×2(无菌)；废液缸；保鲜膜；标签纸1.1.3试剂及培养基试剂：75%酒精，2%NaCLO，无菌水(每组1瓶400mL)培养基：诱导培养基：MS+2,4-D2mg/L+蔗糖30g/L+琼脂8g/L（pH5.8）1.2 实验方法1.2.1 MS固体培养基配制：由于实验室中的MS培养基已含有蔗糖和琼脂，所以直接按照41.5g/L的浓度配置。

实验中配置50ml培养基，需依次加入2.075gMS，0.1mg2,4-D；用NaOH或HCl调节PH=5.8；高压蒸汽锅121℃灭菌20min。

一、实验目的1. 掌握植物组织培养技术的基本操作流程。

2. 熟悉愈伤组织的诱导方法及再分化过程。

3. 学习植物激素在愈伤组织形成与再分化中的作用。

4. 了解植物细胞的全能性及组织培养技术在植物育种中的应用。

二、实验原理植物组织培养技术是将植物器官、组织或细胞在人工条件下进行无菌培养，使其在适宜的培养环境中生长、分化，最终形成完整植株的过程。

愈伤组织是植物组织培养过程中的一个重要阶段，它是由已经分化的细胞脱分化形成的无定形细胞团。

通过诱导愈伤组织，可以进一步分化为根、茎、叶等器官，实现植物繁殖和育种。

三、实验材料与试剂1. 实验材料：水稻叶片、玉米叶片、胡萝卜根段。

2. 试剂：无菌水、无菌滤纸、70%乙醇、5%次氯酸钠、琼脂、蔗糖、硝酸钙、硝酸钾、硝酸铵、磷酸二氢钾、生长素、细胞分裂素、琼脂酶、滤纸等。

四、实验步骤1. 材料预处理（1）将水稻叶片、玉米叶片、胡萝卜根段分别用70%乙醇消毒30秒，再用5%次氯酸钠消毒5分钟，最后用无菌水清洗3次。

（2）将消毒后的材料用无菌滤纸吸干水分。

2. 愈伤组织诱导（1）将预处理后的材料切成约1cm×1cm的小块，放入含有不同浓度生长素和细胞分裂素的MS培养基中。

（2）将培养皿放入培养箱中，在适宜的温度和光照条件下培养。

3. 愈伤组织再分化（1）将愈伤组织转移到含有不同浓度生长素和细胞分裂素的MS培养基中。

（2）在适宜的温度和光照条件下培养，观察愈伤组织分化为根、茎、叶等器官的情况。

4. 数据记录与分析（1）观察并记录愈伤组织的生长情况，包括生长速度、愈伤组织颜色、形态等。

（2）观察并记录愈伤组织再分化为根、茎、叶等器官的情况，包括器官形态、生长速度等。

（3）分析不同植物激素浓度对愈伤组织形成与再分化的影响。

五、实验结果与分析1. 愈伤组织诱导实验结果表明，水稻叶片、玉米叶片、胡萝卜根段在含有不同浓度生长素和细胞分裂素的MS培养基中均能诱导出愈伤组织。

一、实验目的1. 掌握植物组织培养的基本原理和操作技术。

2. 熟悉愈伤组织诱导培养的方法和过程。

3. 学习分析愈伤组织诱导培养过程中可能遇到的问题及解决方法。

二、实验原理植物组织培养技术是利用植物细胞的全能性，将植物的器官、组织或细胞在人工控制条件下，通过脱分化、再分化等过程，培育成完整的植株或具有经济价值的生物材料。

愈伤组织是植物组织培养过程中的一种中间产物，是植物细胞脱分化、再分化过程中的一种重要阶段。

三、实验材料与试剂1. 材料：水稻种子、无菌水、无菌滤纸、剪刀、镊子等。

2. 试剂：1/2MS培养基、蔗糖、琼脂、活性炭、氯化钙、2,4-D、NAA、6-BA等。

四、实验方法与步骤1. 种子表面消毒（1）将水稻种子放入无菌水中浸泡30分钟；（2）用无菌滤纸吸干种子表面的水分；（3）将种子放入含有1%氯化钙溶液中浸泡10分钟；（4）用无菌水冲洗3次，每次1分钟；（5）将种子放入含有70%乙醇的溶液中浸泡30秒；（6）用无菌水冲洗3次，每次1分钟；（7）将种子放入含有1%次氯酸钠溶液中浸泡10分钟；（8）用无菌水冲洗5次，每次2分钟。

2. 外植体接种（1）将消毒后的种子放入含有1/2MS培养基的培养皿中；（2）用无菌镊子将种子均匀分布在培养皿底部；（3）用无菌滤纸覆盖种子，保持培养皿内湿润；（4）将培养皿放入培养箱中，温度设置为25℃，光照时间为12小时/天。

3. 愈伤组织诱导（1）当外植体长出白色愈伤组织时，将愈伤组织转移到含有2,4-D 2 mg/L和NAA 1 mg/L的1/2MS培养基中；（2）将愈伤组织放入培养皿中，保持培养皿内湿润；（3）将培养皿放入培养箱中，温度设置为25℃，光照时间为12小时/天。

4. 愈伤组织继代培养（1）当愈伤组织生长到一定大小后，将其转移到含有2,4-D 1 mg/L和NAA 0.5 mg/L的1/2MS培养基中；（2）将愈伤组织放入培养皿中，保持培养皿内湿润；（3）将培养皿放入培养箱中，温度设置为25℃，光照时间为12小时/天。

吉林农业大学学报2000,22(4):36~40J ournal o f Jilin A gr icultur al University用农杆菌将Bt基因导入水稻愈伤组织的研究X 贝丽霞1王守德2史芝文2徐仲2郭三堆3(11黑龙江八一农垦大学植物科技学院黑龙江密山158308;21东北农业大学生物工程系哈尔滨150030;31中国农业科学院生物技术研究中心北京100081)摘要:从水稻成熟胚诱导出的愈伤组织经继代培养后可以产生大量的胚性愈伤组织。

通过采用农杆菌共培养法转化上述胚性愈伤组织,在附加羧苄青霉素Cb(500L g/mL)和卡那霉素K m(50L g/mL)的选择培养基上进行抗性愈伤组织的筛选,在附加羧苄青霉素Cb(500L g/mL)和卡那霉素K m(25L g/mL)的分化培养基上诱导抗性芽。

GU S酶活性检测和PCR检测结果均为阳性,证明外源目的基因(Bt)已在寒地水稻抗性愈伤组织中整合并表达。

抗性再生植株的G U S酶活性及PCR检测正在进行中。

关键词:水稻;农杆菌;共培养;Bt基因;遗传转化中图分类号:Q78文献标识码:A文章编号:1000-5684(2000)04-0036-05Agroba cterium tumefaciens Bt Gene Tran sfer in Embryogen ic Calli of R ice BEI L-i x ia1,WANG Shou-de2,SH I Zh-i wen2,XU Zhong2,GU O San-dui3(1.College of Plant Science and Technology,Heilongj iang August Fir st Land Reclam ation Uni-versity,Mishan,H eilongj ing158308,China;2.Dep ar tment of Biological E ngineering, N or thest Univer sity o f A gr iculture,Harbin150030,China;3Center o f Biological T ech-niques,Chinese A cademy of Agr icultural Sciences,Beij ing100081,China)Abstract:Many embryogenic calli w ere produced by subculture of calli induced from mature em-bryo of rice.The embryogenic calli were transformed after incubating the calli w ith Agr obacteri-um tumef aciens,and the resistant calli w ere selected on selectivemedia containing Cb(500L g/ mL)and Km(50L g/mL).T he resistant shoots were induced on differentiation m edia containing Cb(500L g/m L)and Km(25L g/mL).Finally,the regenerative plantlets were gained.Gus en-zym e activity test and PCR test show ed that the foreign gene(Bt)had been integrated and ex-pressed in Ory za sativa L.GUS enzy me activity test and PCR test of resistant plantlets is in prog ress.Key words:Ory za sativa L.;A grobacterium tumef aciens;co-cultivation;bacillus thuringiensis gene;genetic transform ation水稻是世界上最主要的粮食作物之一。

摘要水稻成熟种子具有细胞全能性。

本实验以错误!未找到引用源。

+2,4-D为基本培养基，添加NAA和6-BA为分化培养基，对水稻种子材料进行体外培养，诱导形成愈伤组织，并进行分化。

在培养基中添加一定量的激素给种子形成愈伤组织提供动力。

结果表明，在合适的培养条件下愈伤组织的分化程度很高，但培养基因素或光照条件使得褐化现象严重。

关键词水稻成熟种子组织培养愈伤组织诱导分化激素1前言细胞工程是指应用现代细胞生物学、发育生物学、遗传学和分子生物学的理论与方法，按照人们的需要和设计，在细胞水平上的遗传操作，重组细胞的结构和内含物，以改变生物的结构和功能，即通过细胞融合、核质移植、染色体或基因移植以及组织和细胞培养等方法快速繁殖和培养出人们所需要的新物种的生物工程技术。

其常用技术手段有植物组织培养，植物体细胞杂交、动物细胞培养、动物细胞融合、单克隆抗体、胚胎移植、核移植等。

根据细胞类型的不同，可以把细胞工程分为植物细胞工程和动物细胞工程两大类。

本实验主要综述细胞工程中植物细胞工程的植物组织培养这一技术手段。

植物组织培养技术的应用范围包括快速繁殖、培育无病毒植物，通过大规模的植物细胞培养来生产药物、食品添加剂、香料、色素和杀虫剂等。

植物组织培养，诱导愈伤组织形成和形态发生，使一个离体的细胞、一块组织或一个器官的细胞，通过脱分化形成愈伤组织，并由愈伤组织在分化形成植物体。

在植物组织培养中，由于植物细胞具有全能性，即植物的体细胞具有母体植株全部遗传信息并会发育成为完整的个体。

因而，每一个植物细胞可以像胚胎细胞一样，经离体培养再生成为植株。

随着细胞工程技术的不断发展，植物细胞和组织培养这一细胞工程技术也无例外地得到发展，目前已在许多植物上，特别是在农林生产实践中得到了广泛应用。

尤其在林木优良品种和无性系的快速繁殖方面进展较快。

本实验旨在利用NAA和6-BA的组合调控来诱导水稻成熟种子的愈伤组织，加深对外植体消毒、接种的无菌操作技术，学习外植体愈伤组织诱导的方法。

水稻愈伤组织的诱导实验报告
实验目的：
通过诱导方法获取水稻愈伤组织，为后续的基因转化等实验打下基础。

实验材料和设备：
水稻种子、MS培养基、2,4-D溶液、NaClO溶液、无菌操作
器材、显微镜等。

实验步骤：
1.种子消毒：将水稻种子放入1% NaClO溶液中浸泡10分钟，再用去离子水洗净后，放进无菌操作室中。

2.种子发芽：将消毒后的种子放进含有营养的MS培养基中，
在25℃下进行光照培育。

3.愈伤组织诱导：将发芽后的幼苗从培养基中取出，用无菌水
清洗。

将茎部和叶片等不同部位的组织嫁接在含有2,4-D溶液
的MS培养基上，培养在25℃下、光照下，观察诱导组织的
生长情况。

4.分离愈伤组织：当组织生长到一定大小后，用无菌操作器材
将组织用无菌剪刀分离下来。

5.愈伤组织培养：将分离出的愈伤组织放入含有NAA、BA、MS培养基中进行培养。

结果分析：
在诱导的茎部和叶片等不同部位，均出现了白色愈伤组织的诱导生长。

经过分离和培养，得到了纯化的愈伤组织。

通过显微镜观察发现，愈伤组织的细胞间隙变窄，胞间质增多，中心细胞数量增多，细胞核增大，一些细胞内的小器官也出现转化现象。

结论：
通过2,4-D溶液的诱导方法，可以在水稻幼苗的不同部位诱导出白色愈伤组织，愈伤组织的分离和培养也取得了成功。

实验结果为后续的基因转化、基因工程等实验提供了基础。

实验二愈伤组织诱导及观察一.实验目的通过愈伤组织诱导的操作，使同学们了解进行植物组织培养时的一些关键操作技术和方法，如外植体的选择、培养基母液配制、使用液配制、分装灭菌、外植体表面消毒、接种、培养、愈伤组织诱导原理和方法以及接种后污染率，愈伤组织诱导率的统计与观察。

使同学们能够亲身体会、了解激素对外植体的作用，还使同学们了解无菌培养的无菌操作，清楚植物体的带菌部位等。

二.实验内容（一）、实验原理植物组织培养是指在无菌条件下，对离体植物组织（器官或细胞）分离并在培养基中培养，使其能够继续生长，甚至分化发育成一完整的植株的一门实验技术。

组织培养的理论依据是植物细胞的全能性，即植物体的每个细胞携带着一套完整的基因组，因此具有发育成完整植株的潜在能力。

植物组织当中原本已经分化的细胞，一旦脱离原有的机体环境，成为离体状态，在适宜的营养和外界条件下，就会表现出全能性，从已经分化定型的细胞，脱分化，成为恢复分裂能力的细胞，并能重新生长发育成完整的植株。

愈伤组织就是指一个离体的细胞、一块组织或一个器官的细胞，通过脱分化不断分裂、增生子细胞，这些细胞分裂快，结构疏松，颜色浅而透明，逐渐形成了无序结构的一团细胞。

在植物组织培养中，主要目标是诱导愈伤组织形成和形态发生，使一个离体的细胞、一块组织或一个器官的细胞，通过脱分化形成愈伤组织，并由愈伤组织再分化形成植物体。

愈伤组织的形成从一块外植体形成典型的愈伤组织，大致要经历三个时期：起动期、分裂期和形成期。

起动期是指细胞准备进行分裂的时期。

用于接种的外植体的细胞，通常都是成熟细胞，处在静止状态。

起动期是通过一些刺激因素(如机械损伤、改变光照强度、增加氧等)和激素的诱导作用，使外植体细胞的合成代谢活动加强，迅速进行蛋白质和核酸的合成。

机械损伤能诱导植物体细胞开始分裂，如伤口上会出现愈伤组织。

在植物组织培养中沿用了愈伤组织这一名词，但是植物组织培养中诱导外植体细胞分裂形成的愈伤组织，大都不是损伤的结果。

毕业论文开题报告生物工程水稻愈伤组织的诱导1 选题的背景和意义水稻是人们重要的粮食作物之一，也是经典的模式植物．生长和分裂旺盛的胚性愈伤组织细胞培养是获得转基因植物的最好来源。

近年来，研究者先后从水稻各部位诱导出愈伤组织和再生植株。

虽然，幼穗、幼胚、花粉粒、花药愈伤组织诱导率高，愈伤组织质量好而受到青睐，但上述材料多受季节限制，取材不便，阻碍了水稻组织培养的进一步发展．本实验选用本省粳稻种子为材料，对其在不同培养基条件下的出愈率及愈伤组织状态进行研究，以期获得状态较好的愈伤组织，为进一步利用其进行悬浮细胞培养及转基因研究提供理论及实验依据。

2 相关研究的最新成果及动态自1965年我国开展水稻细胞培养研究后，研究者以水稻幼穗、幼胚、花粉粒和花药为材料进行组织培养研究，取得了较大的进展，尤其是建立起来的水稻胚性悬浮细胞系可作为基闪枪的理想受体，在水稻的遗传转化，品种培育巾具有重要作用。

再如细胞次生代谢物的生产，即通过细胞培养可得到大量合成的植物次生化合物，如生物碱、抗菌剂、利血平、橡胶、类同醇、糖类衍生物、天然色素等很多物质。

远源杂种植物的产生，是指由受精后障碍导致远缘杂交的植物不孕，使得植物的种间和远缘杂交常难以成功。

采用胚的早期离体培养可以使杂种胚正常发育，产生远缘杂交后代，从而育成新物种。

植物的快速繁殖，是指利用植物组织培养技术对外植体进行离体培养，使其短期内获得遗传性一致的大量再生植株的方法。

植物快速繁殖是植物组织培养技术在农业生产中应用最广泛，产生经济效益最大的研究领域，涉及的植物种类繁多，技术日益成熟并程序化，繁殖速度突破了植物自然繁殖的界限，成就了工厂育苗的梦想。

植物种质资源的离体保存，即从20世纪60年代开始，人们利用细胞和组织培养再生植株的技术，进行了离体保存种质的研究。

种质资源离体保存是指对离体培养的小植株、器官、组织、细胞或原生质体等材料，采用限制、延缓或停止其生长的处理使之保存，在需要时可重新恢复其生长，并再生植株的方法。

水稻的植物组培的Microsoft Word 文档水稻的植物组培的microsoftword文档水稻的组织培养姓名：侯小龙班级：生物09104学号4教练：习在星水稻的植物组培实验报告班级：盛科09104学号：4姓名：侯小龙实验目的：1.让学生了解植物组织培养中常用的清洗技术和灭菌方法；掌握常用器具（如玻璃器皿、剪刀、镊子等）的清洗工艺、灭菌方法及注意事项，为后续实验做好准备。

2.学习培养基配制与灭菌方法。

3.学习和掌握植物外植体表面消毒的常规方法。

4.学习诱导植物器官外植体形成愈伤组织的方法5.了解愈伤组织继代培养的基本原理，学习愈伤组织继代培养的方法。

6.了解愈伤组织再分化原理，学习愈伤组织生根培养的方法。

实验原理：离体的植物细胞具有其个体的全套的遗传物质，在一定的条件下可以再次脱分化，再分形成心的植株的能力，这就是植物细胞的全能性。

因此只要给定水稻种子适宜的条件，我们可以诱导其胚状体再次分化，形成愈伤组织，一团无色的包庇细胞。

这种细胞分裂的能力旺盛，再把这写愈伤组织扩大培养，经原代培元，继代培养，生根培养，最后可以形成一个完整实验器材：材料：高压蒸汽灭菌器、超净工作台、电子天平、冰箱、pH试纸、烧杯、量筒、试剂瓶、三角瓶、耳球秤、移液管、洗瓶台秤（灵敏度0.2~0.5g）实验所需的各种玻璃器皿、金属制品和塑料制品，烧杯（300ml，500ml），量筒（500ml，50ml），三角瓶（50ml）移液管玻璃漏斗玻璃棒玻璃笔pH值试纸洗涤耳球线包装纸石棉网洗涤瓶无菌纸一次性手套酒精灯标签纸记号笔超净工作台烧杯镊子剪刀手术刀试剂：MS中大元素母液微量元素母液铁盐母液维生素（有机元素）母液蔗糖琼脂2-4，DnaA甘露醇koh6 Ba酒精漂白剂实验内容：1.MS培养基的制备2.水稻种子的消毒与原代培养3.水稻种子的继代培养4.水稻的生根培养实验步骤：1.MS培养基的制备本次试验每2人一组，每3组一大组，每大组配制1000mlms培养基。

水稻愈伤组织诱导与之植株再生培养体系的建立1：研究的目的和意义1.1：研究的目的1.1.1. 以水稻成熟胚为外植体，寻求一个科学的实验方法，探讨愈伤组织的产生规律。

1.1.2. 用相同的培养方式对不同类型的籼稻品种和粳稻品种成熟胚进行组织培养，比较不同类型的水稻品种成熟胚愈伤组织诱导率之间的差异。

1.1.3. 通过植株再生培养体系,寻求提高水稻成熟胚的再生频率的方法，建立水稻不同种间成熟胚高效的培养体系。

1.2：研究的意义1.2.1. 水稻种子是水稻组织培养研究中使用最早的外植体,与其它外植体相比,种子胚具有再生周期短,再生植株育性好,取材不受生长季节的限制,灭菌容易,外植体均匀,重复性好等优点,因而是一种理想的研究材料。

但种子胚也存在诱导率不高,品种差异明显等限制因素[1]。

为了不断优化该体系的各个环节,人们做了大量研究,有关的研究报道也较多。

杨跃生等[2]以籼稻栽培种成熟胚诱导形成的愈伤组织为材料,对影响植株再生的一些因素进行了研究。

发现与N6相比MS培养基中的无机大量成分严重抑制再生植株根系生长,但MS的无机微量成份对诱导植株再生的效果则较明显。

较高浓度的BA利于诱导更多的植株再生,而较低的BA 浓度则利于壮苗和植株根系的形成。

增加诱导培养基或分化培养基中的渗透压和琼脂浓度,维代培养时加入适量的激动素或6-节基氨基嚓吟以及在分化培养基中加入活性炭、玉米素和AgNO3等均可提高水稻愈伤组织的分化成苗率[3]。

另有研究则发现脱水处理能有效促进水稻愈伤组织的植株再生[4-6]。

目前用于作物转基因的外植体,主要有胚性悬浮细胞系,成熟胚愈伤组织,幼胚及其愈伤组织,花药愈伤组织,分生组织盘,萌发的胚!叶或根,茎尖分生组织等,其中成熟胚具有取材方便,不受季节的限制,在转基因研究中有着较为广阔的应用前景，但是到现在为止,适合不同籼稻品种的有效组织培养体系还未建立,特别是釉稻品种成熟胚的组织培养效果很差,因此,严重影响了籼稻基因工程的开展，为此,进行籼稻愈伤组织的高频率诱导,胚性愈伤组织的保持及高频率绿苗分化的研究,是一项极其重要的水稻细胞工程和基因工程研究的基础工作，因此,研究籼稻成熟胚的组织培养特性,建立杂交水稻亲本成熟胚再生体系具有极其重要的理论和现实意义。

毕业论文文献综述生物工程水稻愈伤组织的诱导及应用一、前言部分1.1 关于水稻愈伤组织的简介水稻是人们重要的食粮之一，由于其基因组小，通过组织培养易获得再生植株等特点而在基因克隆、基因功能验证以及遗传转化等研究方面成为模式植物．生长和分裂旺盛的胚性愈伤组织细胞培养是获得转基因植物的最好来源．因此，建立一个高效再生体系是实现基因转化的先决条件[1]．近年来，研究者先后从水稻各部位诱导出愈伤组织和再生植株．虽然，幼穗、幼胚、花粉粒、花药愈伤组织诱导率高，愈伤组织质量好而受到青睐被广泛用于水稻的遗传转化、品种培育中[2-3]．但上述材料多受季节限制，取材不便，阻碍了水稻组织培养的进一步发展．1.2 组织培养所谓的植物组织培养是指在无菌和人工控制的环境条件下，利用适当的培养基对离体的植物器官组织细胞及原生质体进行培养，使其再生细胞或完整植株的技术[4]。

其研究的类型主要包括组织培养、器官培养、细胞培养、及原生质体培养。

随着研究T作的深入进展，上述5个方面的研究理论和技术体系逐渐得到完善促使植物组织培养的应用范围日益广阔延伸。

组织培养作为一种育种技术在水稻等重要粮食作物已广泛应用，并培育出一大批优良品种，自1965年我国开展水稻细胞培养研究后，研究者以水稻幼穗、幼胚、花粉粒和花药为材料进行组织培养研究，取得了较大的进展，尤其是建立起来的水稻胚性悬浮细胞系可作为基闪枪的理想受体，在水稻的遗传转化，品种培育巾具有重要作用。

再如细胞次生代谢物的生产，即通过细胞培养可得到大量合成的植物次生化合物，如生物碱、抗菌剂、利血平、橡胶、类同醇、糖类衍生物、天然色素等很多物质。

远源杂种植物的产生，是指由受精后障碍导致远缘杂交的植物不孕，使得植物的种间和远缘杂交常难以成功。

采用胚的早期离体培养可以使杂种胚正常发育，产生远缘杂交后代，从而育成新物种。

植物的快速繁殖，是指利用植物组织培养技术对外植体进行离体培养，使其短期内获得遗传性一致的大量再生植株的方法。