可溶性淀粉合成酶(SSS)活性检测试剂盒说明书 紫外分光光度法

抗性淀粉检测试剂盒K-RSTAR（100次分析）前言抗性淀粉（RS）是指在人小肠内不能被酶解的淀粉，在大肠部分或完全发酵。

RS是总膳食纤维的组分之一。

原理（AOAC法 ;AACC法32-40）抗性淀粉的测定方法：样品使用α-胰淀粉酶和淀粉葡糖苷酶（AMG）37℃振荡水浴孵育16小时，在这期间，通过两种酶的联合作用，非抗性淀粉被溶解，水解成D-葡萄糖，孵育结束后，加入等体积的乙醇或工业甲基化酒精（IMS,变性乙醇）终止反应。

离心上述溶液，收集上清勿弃，底部残留絮状团即为样品中的RS，用含水的IMS或乙醇（50%v/v）洗涤絮状团，洗涤后离心，再重复一次洗涤离心，收集离心后获得的上清，与之前收集的上清混合。

小心倒出试管残留的液体，将絮状团置于冰水浴中，加入2M KOH溶解，溶解的同时用磁力搅拌机剧烈搅拌。

用醋酸盐缓冲液将这个溶液调至中性，用AMG将淀粉定量水解成葡萄糖。

D-葡萄糖用葡糖氧化酶/过氧化物酶试剂（GOPOD）测定，这也是对样品中RS含量的测定。

非抗性淀粉（可溶性淀粉）的测定可通过集中的上清液并定容至100mL，再用GOPOD测定D-葡萄糖完成。

应用性和精确性这个方法需要样品中RS含量多于2% w/w。

如RS含量多于2% w/w，常规标准误差为+5%。

少于2% w/w RS的误差更高。

试剂盒瓶子1：淀粉葡糖苷酶AMG，12 mL，3300U/ mL，条件为，40℃下，底物为可溶性淀粉，[单位或为200U/mL，条件为，40℃下，底物为对硝基苯基β-麦芽糖苷]。

AMG溶液应完全没有可检测到的游离D-葡萄糖。

4℃下稳定性> 3年。

瓶子2：α-胰淀粉酶(胰酶，10g，3Ceralpha U/mg)。

4℃下稳定性> 3年。

瓶子3：GOPOD 试剂缓冲液。

磷酸钾缓冲液（1M，），对羟基苯甲酸（0.22M）和叠氮化钠（%W/V）。

4℃下稳定性> 3年。

瓶子4：GOPOD试剂酶。

葡糖氧化酶（>12,000U）加上过氧化物酶（>650U）和4-氨基安替比林（80mg）。

β-葡萄糖醛酸苷酶（β-GD）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定货号：BC1910规格：50T/48S产品内容：提取液：液体60mL×1瓶，4℃保存；试剂一：液体5mL×1瓶，4℃保存；试剂二：粉剂×1瓶，-20℃保存；临用前加入5mL蒸馏水，充分溶解待用；用不完的试剂仍-20℃保存；试剂三：液体37.5mL×1瓶，4℃保存；试剂四：1μmol/mL标准储备液10mL，4℃保存；产品说明：β-GD广泛存在于动物组织中，是一种参与肿瘤侵袭和转移过程的基质降解酶，具有水解固醇葡萄糖醛酸和酸性粘多糖等生理功能。

该酶在肝细胞中含量较高。

此外在胃癌组织中含量丰富，测定胃液β-GD活性对于研究胃癌具有重要的意义。

β-GD催化苯酚β-D-葡萄糖醛酸产生游离的酚酞，通过测定苯酚含量反应该酶活性高低。

需自备的仪器和用品：可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。

操作步骤：一、样品测定的前处理按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。

8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

二、测定步骤1、分光光度计预热30min以上，调节波长至540nm，蒸馏水调零。

2、样本测定（在EP管中加入下列试剂）试剂名称（μL）加样孔测定管标准管空白管试剂一100100100试剂二100100100样本501μmol/mL50蒸馏水50混匀后，37℃水浴30min试剂三750750750混匀，540nm下测定各管吸光值注意：标准管和空白管只需测一次。

三、β-GD活性计算（1）按样本鲜重计算：单位定义：每小时每g鲜重样品中催化产生1μmol酚酞的量为一个活力单位。

β-GD（μmol/h/g鲜重）=(C标准管×V1)×（A测定管-A对照管）÷（A标准管-A空白管）÷(W ×V1÷V2)÷T=2×（A测定管-A对照管）÷（A标准管-A空白管）÷W（2）按样本蛋白浓度计算：单位定义：每小时每mg组织蛋白催化产生1μmol酚酞的量为一个活力单位。

BC0910 -- 第 1 页，共 3 页谷氨酰胺合成酶（GS ）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。

货号：BC0910 规格：50T/24S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称 规格 保存条件 提取液 液体30 mL×1瓶 2-8℃保存 试剂一 液体12 mL×1瓶 -20℃保存 试剂二 液体12 mL×1瓶 -20℃保存 试剂三 粉剂×2瓶 -20℃保存 试剂四液体15 mL×1瓶2-8℃保存溶液的配制：试剂三：临用前取一瓶加入5mL 蒸馏水充分溶解备用，用不完的试剂-20℃分装可保存4周，避免反复冻融。

产品说明：GS （EC 6.3.1.2）主要存在于植物中，是生物体内氨同化的关键酶之一，催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺，不仅可以防止过多的铵离子对生物有毒性，而且谷氨酰胺也是氨的主要储存和运输形式。

GS 在ATP 和Mg 2+存在下，催化铵离子和谷氨酸合成谷氨酰胺；谷氨酰胺进一步转化为γ-谷氨酰基异羟肟酸，在酸性条件下与铁形成红色的络合物；该络合物在540nm 处有最大吸收峰。

Glutamic Acid + NH 4+GlutamineGlutamine γ- Glutamyl Hydroxamic Acid Iron Hydroxamic注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL 玻璃比色皿、研钵/匀浆器/细胞破碎仪、冰和蒸馏水。

操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL ）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL 提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率200W ，超声3s ，间隔10s ，重复30次）；8000g 4℃离心10min ，取上清，置冰上待测。

土壤尿酸酶活性检测试剂盒说明书货号：UPLC-MS-4018规格：50T/24S紫外分光光度法产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称规格保存条件试剂一液体2mL×1瓶（自备）2-8℃保存试剂二A液液体0.5mL×1支2-8℃保存试剂二B液液体17.5mL×1瓶2-8℃保存试剂三液体40mL×1瓶2-8℃保存试剂四液体60mL×1瓶2-8℃保存标准品液体1mL×1支2-8℃保存溶液的配制：1、试剂一：自备甲苯；2、试剂二：临用前按照试剂二A液︰试剂二B液=1︰35的比例混合，根据样本量所需使用当天现配现用；3、标准品：5µmol/mL的尿酸溶液。

产品说明：土壤尿酸酶（Soil Uricase，S-UR）是一种与核酸代谢有关的氧化还原酶，主要是将土壤中的核酸腺嘌呤与尿酸等物质转化成尿囊素和尿囊酸，进而生成尿素供植物利用。

土壤尿酸酶能够催化尿酸生成尿囊素、CO2和H2O2，尿酸在284nm有特征吸收峰，通过测定反应前后尿酸的减少量，来表示土壤尿酸酶活性。

（284nm）Uric Acid UreaseAllantoin+H2O2+CO2注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、研钵、可调式移液器、1mL石英比色皿、冰、30~50目筛、甲苯（不允许快递）和蒸馏水。

操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30~50目筛。

二、测定步骤1、紫外分光光度计预热30min以上，调节波长至284nm，蒸馏水调零。

2、将5µmol/mL标准溶液用蒸馏水倍比稀释为0.5、0.25、0.125、0.0625、0.03125、0.015625µmol/mL标准溶液待用。

柠檬酸合酶（CS）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。

货号：BC1060规格：10T/5S产品简介：CS（EC 2.3.3.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体基质中，是三羧酸循环第一个限速酶，是三羧酸循环主要调控位点之一。

CS催化乙酰CoA和草酰乙酸产生柠檬酰辅酶A，进一步水解产生柠檬酸；该反应促使无色的DTNB转变成黄色的TNB，在412nm处有特征吸光值。

试验中所需的仪器和试剂：可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、1mL玻璃比色皿和蒸馏水。

产品内容：提取液：液体5mL×1瓶，-20℃保存；试剂一：液体2.5mL×1瓶，-20℃保存；试剂二：液体0.1mL×1支，-20℃保存；试剂三：液体25mL×1瓶，4℃保存；试剂四：粉剂×1支，4℃保存，临用前加入1mL双蒸水，用不完的试剂仍4℃保存；试剂五：粉剂×1支，-20℃保存，临用前加入500μL双蒸水，用不完的试剂仍-20℃保存；试剂六：粉剂×1支，-20℃保存，临用前加入1.5mL双蒸水，用不完的试剂仍-20℃保存；操作步骤：一、样本前处理组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离：1称取约0.1g组织或收集500万细胞，加入1mL提取液和10μL试剂二，用冰浴匀浆器或研钵匀浆。

2将匀浆液600g，4℃离心5min。

3将上清液移至另一离心管中，11000g，4℃离心10min。

4上清液即胞浆提取物，可用于测定从线粒体泄漏的CS。

5在沉淀中加入200μL试剂一和2μL试剂二，反复吹打充分混匀，用于CS测定。

6柠檬酸合酶酶活即沉淀和上清液中的酶活之和。

二、测定步骤：1、分光光度计预热30min以上，调节波长至412nm，蒸馏水调零。

2、试剂三置于25℃（一般物种）或者37℃（哺乳动物）水浴中预热10min左右（保证无沉淀）。

谷胱甘肽还原酶（GR）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法货号：UPLC-MS-4490规格：50T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称规格保存条件试剂一液体100mL×1瓶4℃保存试剂二液体3mL×1瓶4℃保存试剂三粉剂×1瓶4℃保存溶液的配制：1、试剂三：临用前加入5.0mL蒸馏水，混匀。

产品说明：GR是广泛存在于真核和原核生物中的一种黄素蛋白氧化还原酶，GR催化GSSG还原生成GSH，是谷胱甘肽氧化还原循环的关键酶之一（通常昆虫中GR被TrxR取代）。

GR催化NADPH还原GSSG生成GSH，有助于维持体内GSH/GSSG比值。

GR在氧化胁迫反应中对活性氧清除起关键作用，此外GR还参与抗坏血酸－谷胱甘肽循环途径。

GR能催化NADPH还原GSSG再生GSH，同时NADPH脱氢生成NADP+；NADPH在340nm有特征吸收峰，相反NADP+在该波长无吸收峰；通过测定340nm吸光度下降速率来测定NADPH脱氢速率，从而计算GR活性。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：紫外分光光度计、低温离心机、水浴锅、移液器、匀浆器/研钵、1mL石英比色皿和蒸馏水。

操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）称约0.1g组织，加入 1.0mL试剂一，冰上充分研磨，10000rpm4℃离心10min，取上清液，待测。

二、测定步骤1.紫外分光光度计预热30min以上，调节波长到340nm，蒸馏水调零。

2.试剂一置于25℃（普通物质）或者37℃（哺乳动物）中预热30min以上。

3.空白管：取1mL石英比色皿，加入50μL试剂二，100μL试剂三，850μL试剂一，于340nm测定10s和190s 吸光度，记为A空1和A空2。

顺乌头酸酶（ACO）活性检测试剂盒说明书货号：UPLC-MS-4326规格：50T/48S紫外分光光度法产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称规格保存条件试剂一液体80mL×1瓶2-8℃保存试剂二液体35mL×1瓶2-8℃保存试剂三液体0.6mL×2支-20℃保存试剂四液体50mL×1瓶2-8℃保存溶液的配制：1、试剂三：易挥发试剂，使用后尽快拧紧盖子，密封后放入-20℃保存；产品说明：顺乌头酸酶（Aconitase,ACO）是细胞内一种重要的铁硫蛋白酶，主要存在于胞浆与线粒体中。

ACO催化细胞内柠檬酸经中间产物顺乌头酸生成异柠檬酸的可逆反应，对维持三羧酸循环及乙醛酸循环的顺利进行起着重要作用。

顺乌头酸酶催化异柠檬酸生成顺乌头酸，顺乌头酸在240nm有特征吸收峰，通过检测顺乌头酸的产生速率来计算该酶活性。

ACOIsocitric Acid CIS-Aconitate(240nm)注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：紫外分光光度计、低温台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、超声波细胞破碎仪、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

操作步骤：一、顺乌头酸酶的提取（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）A、总顺乌头酸酶的提取称取约0.1g组织或收集500万个细胞（细菌），加入1mL试剂一与10μL试剂三，用匀浆器或研钵于冰上匀浆。

将匀浆置于冰上超声波破碎（功率300W，超声3秒，间隔9秒，重复15次），4℃，11000×g离心15min，取上清置于冰上待测（若以蛋白浓度计算，则需留出足够量来测定蛋白浓度Cpr1）。

用于测定总顺乌头酸酶活性（建议将样本用蒸馏水稀释4-10倍后检测）。

B、胞浆与线粒体顺乌头酸酶的提取(1)称取约0.3g组织或收集1500万个细胞，加入1.5mL试剂一与15μL试剂三，用匀浆器或研钵于冰上匀浆。

土壤过氧化物酶（S-POD）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。

货号：BC0890规格：50T/24S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称规格保存条件试剂一粉剂×2瓶2-8℃保存试剂二液体5 mL×1瓶2-8℃保存试剂三液体10 mL×1瓶2-8℃保存试剂四液体100 mL×1瓶（自备）2-8℃保存标准品液体10 mL×1瓶2-8℃保存溶液的配制：1、试剂一：临用前加入10 mL蒸馏水，用不完的试剂2-8℃保存一周；2、试剂四：自备乙醚；3、标准品：相当于每1mL乙醚相中含有0.2mg/mL紫色没食子素。

产品说明：S-POD主要来源于土壤微生物，能够氧化土壤有机物质产生过氧化物，在腐殖质的形成过程中具有重要作用。

S-POD催化有机物质氧化成醌，后者在430nm有特征光吸收。

Quinone (430nm) Array注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：可见分光光度计、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、0.5mol/L HCl溶液、1mL玻璃比色皿、30-50目筛、乙醚（不允许快递）、研钵、冰和蒸馏水。

操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干，过30-50目筛。

二、测定步骤1、标准品处理：将标准品用0.5mol/L HCl溶液稀释至0.1、0.08、0.06、0.04、0.02、0.01、0mg/mL，可参考下表。

序号稀释前浓度（µmol/mL）标准液体积（µL）蒸馏水体积（µL）稀释后浓度（µmol/mL）110100000.1218002000.08BC0890 -- 第1 页，共2 页316004000.06414006000.04512008000.02611009000.01备注：试验中每个标准管需1000µL标准溶液。

Beijing Solarbio Science & Technology Co., LtdTel: 400-968-6088超氧化物歧化酶（SOD）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。

货号：BC0170规格：50T/24S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称规格保存条件提取液液体60 mL×1瓶2-8℃保存试剂一液体15 mL×1瓶2-8℃保存试剂二液体160 μL×1支2-8℃保存试剂三液体11 mL×1瓶2-8℃保存试剂四液体0.5mL×1支2-8℃保存溶液的配制：1、试剂二：使用前先离心再吹打混匀。

根据样本量将试剂二用蒸馏水稀释10倍后使用，当天用完。

2、试剂四：根据样本量将试剂四用蒸馏水稀释5倍后使用，当天用完。

产品说明：SOD（EC 1.15.1.1）是一种广泛存在于生物体内的金属酶，是重要的氧自由基清除剂，能催化超氧化物阴离子发生歧化作用，生成H2O2和O2。

SOD不仅是超氧化物阴离子清除酶，也是H2O2主要生成酶，在生物抗氧化系统中具有重要作用。

通过黄嘌呤及黄嘌呤氧化酶反应系统产生超氧阴离子(O2-)，O2-可还原氮蓝四唑生成蓝色甲臜，后者在560nm 处有吸收；SOD可清除O2-，从而抑制了甲臜的形成；反应液蓝色越深，说明SOD活性愈低，反之活性越高。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、细胞超声破碎仪、冰和蒸馏水。

操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1.细菌或细胞样本：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清，按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500-1000:1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率200W，超声3s，间隔10s，重复30次），8000g 4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

过氧化物酶（POD）活性试剂盒说明书可见分光光度法注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。

货号：UPLC-MS-4538规格：50T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称规格保存条件提取液液体60mL×1瓶4℃保存试剂一液体40mL×1瓶4℃保存试剂二液体0.5mL×1瓶4℃保存试剂三液体10mL×1瓶4℃保存溶液的配制：1、试剂二：液体置于试剂瓶内EP管中，使用前需先离心。

取0.22mL试剂二加入3.33mL试剂一混合备用（约27T），现配现用，也可根据样本量按比例配制。

产品说明：POD（EC1.11.1.7）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，可催化过氧化氢氧化酚类和胺类化合物，具有消除过氧化氢和酚类、胺类毒性的双重作用。

POD催化H2O2氧化特定底物，在470nm有特征光吸收。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）1、细菌、细胞或组织样本的制备：细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20%或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆。

8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。

植物根系活力检测试剂盒（TTC 法）说明书可见分光光度法货号：BC5270 规格：50T/24S产品内容：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系索莱宝工作人员。

试剂名称 规格 保存条件 试剂一A 粉剂×2瓶 2-8℃保存 试剂一B 粉剂×2瓶 2-8℃保存 试剂二 液体70 mL×2瓶 2-8℃保存 试剂三 粉剂×3支常温保存 试剂四 液体130 mL×1瓶（自备）2-8℃保存 标准品粉剂×1支2-8℃保存溶液的配制：1、 试剂一：临用前取一瓶试剂一B 加入一瓶试剂一A 中，加入30mL 试剂二溶解。

现用现配。

配制好后置于2-8℃保存，一周内使用，若出现红色，则不能使用。

2、 试剂四：乙酸乙酯，自备。

提供一60mL 棕瓶3、 标准品：临用前加入1mL 试剂二，充分震荡混匀, 即10mg/mL TTC 标准液。

2-8℃可以保存1周，若出现红色，则不能使用。

产品说明：根系是植物吸收水分和矿质营养的主要器官，同时又是植物体中重要物质如氨基酸、激素等物质合成、同化、转化的器官，因此根的生长情况和活动能力直接影响植物个体的生长情况、营养水平和产量水平等，根系活力具有重要的实际意义。

TTC 可被氢还原成不溶性的红色三苯基甲臜（TTF ），TTF 在485nm 处有吸收峰。

当TTC 溶液渗入到植物根部组织时，呼吸过程产生的还原物质可将其还原成TTF(红色)，植物根部组织被染成红色。

根系活力强弱可用TTC 的还原量来表示。

此方法检测的根系活力即植物根系的脱氢酶活性。

TTC TTF （485nm ）注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：可见分光光度计、水浴锅/恒温培养箱、台式离心机、可调式移液器、1mL 玻璃比色皿、研钵/匀浆器、乙酸乙酯，冰和蒸馏水。

考马斯亮蓝法测蛋白含量测定试剂盒说明书分光光度法50管/48样注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

测定意义：样品可溶性蛋白质含量常常用于酶活性计算。

此外，可溶性蛋白质含量也用于食品等质量分析。

测定原理：在酸性溶液中，考马斯亮蓝G-250与蛋白质结合形成蓝色复合物；该复合物在620nm处有最大吸收峰，其颜色的深浅与蛋白质的浓度成正比。

该方法灵敏度高，适合微量蛋白质分析。

自备仪器和用品：离心机、分光光度计、石英比色皿、移液器和蒸馏水。

试剂组成和配制：试剂一：液体30 mL×1瓶，4℃保存。

样品中可溶性蛋白质提取：1. 液体样品：澄清液体样品可以直接测定。

2. 组织样品：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：20的比例（建议称取约0.05 g组织，加入1mL提取液（自备，根据需要选用酶提取缓冲液或者蒸馏水或者生理盐水））冰浴匀浆，8000g，4℃离心10min，取上清，即待测液。

（动物样品常常需要稀释）3. 细菌、真菌：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后8000g，4℃，离心10min，取上清置于冰上待测。

测定操作：1. 分光光度计预热30 min，蒸馏水调零。

2. 在石英比色皿中加入：试剂（μL）测定管空白管样本500蒸馏水500试剂一500 500混匀后，测定波长620 nm吸光值，△A=A测定-A空白。

注意：空白管只需要测定一次。

计算公式：标准曲线：y = 14.253x - 0.0007 R2 = 0.9997 x: 蛋白标准品浓度(mg/mL)y: 吸光值差值1.按液体样本体积计算：Cpr（mg/mL）=(△A+0.0007)÷14.253=0.07×(△A+0.0007)2.按组织样本质量计算：Cpr（mg/g）=(△A+0.0007)÷14.253×V总÷W=0.07×(△A+0.0007)÷WV总：提取液体积，1 mL; W：样本质量，g。

糖原磷酸化酶a (GPa)活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法货号：UPLC-MS-4181规格：50T/48S 产品内容：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。

溶液的配制：1、试剂二：临用前加入1.25mL 蒸馏水，充分混匀；4℃保存2个月；2、试剂三：临用前加入1.25mL 蒸馏水，充分混匀；可分装后-20℃保存4周，避免反复冻融；3、试剂四：临用前加入1.25mL 蒸馏水，充分混匀；可分装后-20℃保存4周，避免反复冻融；4、试剂五：临用前取一支加入1mL 蒸馏水，充分混匀；可分装后-20℃保存4周，避免反复冻融；5、试剂六：临用前取一支加入1mL 蒸馏水，充分混匀；可分装后-20℃保存4周，避免反复冻融；6、工作液的配制：临用前根据实验所需用量，按照试剂一：试剂二：试剂三：试剂四：蒸馏水=740μL:20μL:20μL:20μL:50μL （1T 的量）的比例，充分混匀，现用现配。

产品说明：糖原磷酸化酶是糖原分解代谢中的关键酶，催化糖原的磷酸化反应。

该酶分为有活性的糖原磷酸化酶a （Glycogen phosphorylase a,GPa ）和无活性的糖原磷酸化酶b （Glycogen phosphorylase b,GPb ）两种形式。

糖原的分解主要在糖原磷酸化酶a 的催化下进行。

未添加激活剂时，糖原磷酸化酶a 催化糖原和无机磷产生葡萄糖残基生成糖原和1-磷酸葡萄糖，磷酸葡萄糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶进一步依次催化NADP 还原生成NADPH ，在340nm 下测定NADPH 上升速率，即可反映糖原磷酸化酶a 活性。

Glycogen Gpa Glucose 1-Phosphate Phosphoglucomutase Glucose 6-PhosphateGlucose 6-Phosphate G6PDH NADP +6-Phosphogluconolactone +NADPH (340nm)注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

UDPG焦磷酸化酶（UGP）活性检测试剂盒说明书紫外分光光度法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。

货号:BC3360规格:50T/48S产品简介：尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶（UDP-glucose pyrophosphosphprylase，UGP，EC 2.7.7.9）在自然界广泛分布。

在葡萄糖合成糖原前催化葡萄糖活化，将1-磷酸葡萄糖与UTP分子合成为UDP-葡萄糖（UDPG），UDPG是高等植物和动物中主要活化酶的形式，作为葡萄糖基供体参与糖原、蔗糖、纤维素等的合成代谢。

UGP可逆的催化生成1-磷酸葡萄糖，其在磷酸葡萄糖变位酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶作用下将NADP转化为NADPH，UGP活性可以用340nm的吸光值的变化来反应。

试验中所需的仪器和试剂：紫外分光光度计、台式离心机、水浴锅、1mL石英比色皿、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。

产品内容：提取液：液体55mL×1瓶，4℃保存。

试剂一：粉剂×2瓶，-20℃避光保存。

临用前加15mL蒸馏水充分溶解；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融，-20℃保存2周。

试剂二：粉剂×1瓶，4℃避光保存。

临用前加5mL蒸馏水充分溶解；用不完的试剂分装后4℃保存，禁止反复冻融，4℃保存1周。

试剂三：粉剂×1支，-20℃避光保存。

临用前加1.4mL蒸馏水充分溶解；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融，-20℃保存2周。

试剂四：粉剂×2支，-20℃避光保存。

临用前每支加1mL蒸馏水充分溶解；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融，-20℃保存2周。

试剂五：液体5mL×1瓶，4℃保存。

试剂六：液体15mL×1瓶，4℃保存。

操作步骤：一、粗酶液提取：组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，然后，10000g，4℃，离心10min。

脂肪酶（LPS）活性检测试剂盒说明书可见分光光度法货号：UPLC-MS-4404规格：50T/48S产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。

试剂名称规格保存条件试剂一液体80mL×1瓶4℃保存试剂二液体10mL×1瓶常温保存试剂三液体20mL×1瓶4℃保存标准品液体59.3μL×1支4℃保存溶液的配制：标准品：临用前加入 1.435mL无水乙醇配成125µmol/mL的油酸标准溶液，充分溶解。

用前注意解冻溶解。

产品说明：LPS又称甘油酯水解酶，催化甘油三酯水解生成脂肪酸和甘油（或者甘油二酯和单酯）。

LPS广泛的存在于各种生物中。

血清中LPS的异常增高常见于胰腺炎和胰腺癌。

LPS催化油酯水解成脂肪酸，利用铜皂法测定脂肪酸生成速率，即可计算LPS活性。

注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。

如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：研钵/匀浆器、台式离心机、震荡混匀器、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、可调式移液枪、甲苯、无水乙醇、冰和蒸馏水。

操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）组织样本：称取约0.1g样本，加试剂一1.0mL充分研磨，于4℃，15000rpm离心30min，取上清液待测。

血清样本：直接检测。

二、测定步骤1、分光光度计预热30min以上，调节波长至710nm，甲苯调零。

2、试剂一和试剂二置于37℃水浴预热30min以上。

3、标准溶液的稀释：将125µmol/mL的油酸标准溶液用无水乙醇稀释为125、62.5、31.25、15.625、7.8125、3.9µmol/mL的标准溶液待测。

4、操作表：加入试剂（mL）空白管测定管标准管试剂一0.3750.3750.375试剂二0.1250.1250.125反复震荡混匀蒸馏水0.2上清液/血清0.2标准溶液0.2迅速震荡混匀后置于37℃水浴准确反应10min甲苯111反复震荡混匀后，室温4000rpm离心10min取出离心管，小心吸取上层溶液0.9mL，加入另一2mL塑料离心管中，按下表操作：试剂三0.2250.2250.225反复震荡混匀；室温4000rpm离心10min，小心吸取上层溶液800μL，加入1mL玻璃比色皿，于710nm处测定吸光值。