橄榄中总黄酮微波提取工艺研究

科学研究　食品研究与并发　２００８年８月　第２９卷第８期　

橄榄中总黄酮微波提取工艺研究　３９＝＝Ｉ　

赖雅平’。唐春红　。刘汝锋’。郭仕恒’。王东耀，。尚小琴’　

（１．广州大学化学化工学院，广东广州５１０００６；２．重庆工商大学环境与生物工程学院，重庆４０００６７）　

摘要：采用微波提取技术提取橄榄中的总黄酮，通过对比实验比较微波提取法与其它提取方法的差异，采用正　

交试验方法考察提取时间、乙醇浓度、微波辐射功率、液固比等因素对橄榄中总黄酮提取率的影响，研究优化提取　

工艺。结果显示，采用微波提取法黄酮提取效率明显高于振荡提取法和超声波提取法，最佳微波提ｇｘ＿ｒ＿艺为：乙醇　

浓度６０％、微波功率为５００Ｗ，辐射时间２５　ｒｎｉｎ，液固比２０：１，总黄酮收率可大于１％。　

关键词：橄榄；总黄酮；ａｔ波；提取工艺　

‘ｌｌＨＥ　ＴＯ　Ｉ１ＡＬ　’ＬＡＶ０　ＯＩＤＳ　Ｅ　Ｉ’ＲＡＣＴＩＯＮ　ＴＥＣＨＮＩＣＳ　ＦＲＯＭ　ＯＬＩＶＥ　ＢＹ　ＭＩＣＲＯＷＡＶＥ　

ＬＡＩ　Ｙａ—ｐｉｎｇ　，ＴＡＮＧ　Ｃｈｕｎ－ｈｏｎｇ２，ＬＩＵ　Ｒｕ－ｆｅｎｇ　，ＧＵＯ　Ｓｈｉ—ｈｅｎｇ　，ＷＡＮＧ　Ｄｏｎｇ－ｙａｏ　，ＳＨＡＮＧ　Ｘｉａｏ－ｑｉｎ　

（１．Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ　ａｎｄ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ　Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｇｕａｎｇｚｈｏｕ　５　１０００６，Ｇｕａｎｇｄｏｎｇ，Ｃｈｉｎａ；　

２．Ｃｏｌｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ　ａｎｄ　Ｂｉｏｌｏｇｉｃ　Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ　Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ｂｕｓｉｎｅｓｓ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，　

Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ　４０００６７，Ｃｈｉｎａ）　

Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ａｒｅ　ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｆｒｏｍ　ｏｌｉｖｅ　ｂｙ　ｍｉｃｒｏｗａｖｅ．Ｔｈｅ　ｓｅｖｅｒａｌ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｍｅｔｈｏｄｓ　ｗｅｒｅ　ｃｏｒｎ－　

ｐａｒｅｄ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｅｔｈａｎｏｌ　ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｎ，ｔｒｅａｔｅｄ　ｔｉｍｅ，ｍｉｃｒｏｗａｖｅ　ｐｏｗｅｒ　ａｎｄ　ｔｈｅ　ｒａｔｉｏ　ｏｆ　ｌｉｑｕｉｄ　ｔｏ　

ｓｏｌｉｄ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｙｉｅｌｄ　ｒａｔｉｏ　ｏｆ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｗｅｒｅ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅｄ　ｂｙ　ｔｈｅ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｔｅｓｔ．Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｈｓ　ｓｈｏｗ　ｔｈａｔ　ｔｈｅ　ｙｉｅｌｄ　ｏｆ　

ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｂｙ　ｍｉｃｒｏｗａｖｅ　ｉｓ　ｈｉｇｈｅｒ　ｔｈａｎ　ｔｈｅ　ｍｅｃｈａｎｉｃａｌ　ｓｈａｋｉｎｇ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ，ｔｈｅ　ｓｕｐｅｒｓｏｎｉｃ　ｍｅｔｈｏｄ，ａｎｄ　ｔｈｅ　ｒｅ－　

ｃｏｖｅｒｙ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｃｏｕｌｄ　ｂｅ　ｒａｉｓｅｄ　ｔｏ　１％ｗｉｔｈ　２０：１　ｏｆ　６０％ｅｔｈａｎｏｌ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ．ａｎｄ　ｔｈｅ　５００　Ｗ　ｍｉｃｒｏｗａｖｅ　

ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｌａｓｔｅｄ　ｆｏｒ　２５　ｍｉｎｕｔｅｓ．　

Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：ｏｌｉｖｅ；ｔｏｔａｌ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ；ｍｉｃｒｏｗａｖｅ；ｅｘｔｒａｃｔｅｄ　ｔｅｃｈｎｉｃｓ　

基金项目：广东省科技计划项目（２００５Ｂ１０４０１００３）　作者简介：赖雅平（１９６４一），男（汉），讲师，本科，从事食品加工方面研究及教学工作。　

表４　４种提取物中黄酮化合物的含量　Ｔａｂｌｅ　４　Ｔｈｅ　ｃｏｎｔｅｎｔ　ｏｆ　ｆｌａｖｏｎｏｉｄｓ　ｏｆ　ｅｘｔｒａｃｔｓ　ｏｆ　ｆｏｕｒ　ｋｉｎｄｓ　％　

杭菊Ｃｈｒｙｓａｎｔｈｅｍｕｍ批｝　ｒ０ｌｉｕｍＲａｍａｔ　３６．７９　

陈皮Ｃｉｔｒｕｓ　ｒｅｔｉｃｕｌａｔｅＢｌａｎｃｏ．８，３７　甘草ＧｌｙｃｙｒｒｈｉｚａｕｒａｌｅｎｓｉｓＦｉｓｃｈ．　１１．５９　

金莲花ＴｒｏＵｉｕｓ　ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ　８ｇｅ．　５１．１５　７１．Ｏ８　ｌ１．８９　

３５－３３　

９ｏ．７１　

的总黄酮纯度有显著提高：杭菊、陈皮、甘草、金莲花分　

别为原来的１．９３倍、１．４３倍、３．０５倍和１．７７倍。同时纸　

层析试验也表明，在点样量相同的情况下，陈皮、甘草、金　

莲花总黄酮Ⅱ可以检测出比总黄酮１种类更多的成分。　

从大孔树脂的吸附和解吸附试验可知，ＮＫＡ—ｌＩ树　脂比ＡＢ一８树脂更适于杭菊、陈皮、甘草、金莲花等花　

草茶总黄酮的分离纯化；经ＮＫＡ一１Ｉ树脂处理的总黄　

酮纯度均有显著提高，特别是杭菊和金莲花总黄酮Ⅱ　

的纯度更是分别达到了７１．０８％和９０．７１％，说明　

ＮＫＡ一１Ｉ树脂对这几种花草茶中的总黄酮均具有良好　

的精制效果。　

参考文献：　

【１】杨转琴，王磊，范娜，等．柚皮黄酮化合物含量及抗氧活性的研　

究叨．食品科学，２００６，２７（４）：１０２—１０５　

【２】杨红．中药化学实用技术【Ｍ】，北京：化学工业出版社，２００４：５７　

【３】潘廖明，姚开，贾冬英，等，大孔树脂吸附大豆异黄酮特性的研究叨，　食品与发酵工业，２００３，２９　：１５＿１８　

收稿日期：２００７—１１＿２３　维普资讯 http://www.cqvip.com －＝＝＝４０　。。　８２９　８　霞晶研　与嚣裳　第　卷第期　瑟瑟研　嘲　蠛　科学研究　

橄榄果实具有很高的营养价值，除鲜食外，橄榄还　

可以加工成各种凉果。近来兴起的橄榄汁又是别具一　

格的清凉保健饮料，天然果汁及果粉的加工生产也将　

有良好的前景。橄榄含有鞣质类（属多酚类）、有机酸、黄　

酮类、多糖、挥发油、Ｖ　、蛋白质、氨基酸以及微量元素　

Ｚｎ、Ｍｎ、Ｆｅ、Ｒｂ、Ｓｒ和Ｓｅ等，其中以鞣质类、黄酮类、Ｃａ　

和Ｖ　含量较多，可能是主要的有效成分　。优化橄榄　

提取工艺，提高橄榄的临床功用，是对橄榄进行开发利　

用的一个比较合理的方向　。随着微波技术的发展，其　

在植物提取中的应用及优势越来越被关注，微波提取　

方法不仅提取效率高，而且具有提取时间短，溶剂量少　

的特点［７－８１。本文将微波提取技术用于橄榄中黄酮等有　

效成分的提取，考察诸因素对提取率的影响，并通过正　

交试验等方法探讨优化提取工艺。　

１实验部分　

１．１原材料、试剂以及仪器　

橄榄：重庆江津市石蟆镇橄榄基地；芦丁对照品　

（生化试剂ＢＲ）：国药集团化学试剂有限公司；磷酸、钨　

酸钠、无水乙醇、硝酸铝、无水碳酸钠、氢氧化钠、亚硝　

酸钠、无水乙酸钠、冰醋酸：分析纯。　

ＤＨＧ－－９０７３ＢＳ－－ｌｌＩ电热恒温鼓风干燥箱：上海新苗医　

疗器械制造有限公司；ＦＷ８０高速万能粉碎机：天津市　

泰斯特仪器有限公司；７２１分光光度计：四川仪表九厂；　

ＫＱ一１００型超声波清洗器：昆明市超声仪器有限公司；　

ＨＷＺ－Ｂ型真空微波干燥设备：天水华圆制药设备科技　

有限公司；ＺＰ－２００振荡器：江苏太仓市实验设备厂。　

１．２实验方法　

１．２．１原料预处理　

橄榄：（连核）敲成碎片，用粉碎机粉碎成粉末状，　

并在６０℃烘干备用。　

１．２．２橄榄提取方法　

１．２．２．１振荡提取法　

精密称取９份５　ｇ橄榄粉末至干燥锥形瓶中。以　

２０：１液固比对应加入６０％、７０％、８０％乙醇提取剂提　

取，时间分别为４、６和８　ｈ。提取３次，合并滤液，然后　

用１００　ｍＬ容量瓶定容作为供试液。　１．２．２．２超声波提取法　

６０％、７０％、８０％乙醇超声波提取橄榄，液固比　

２０：１，每次提取时间４０　ｒａｉｎ，提取３次，然后合并滤液，　

定容。　

１．２．２－３微波提取法　

６０％、７０％、８０％乙醇微波提取橄榄，微波功率　

５００　Ｗ，提取时间２５　ｒａｉｎ，液固比２０：１，提取３次，然后　

合并滤液，定容。　

１－３芦丁标准曲线的测定　

准确称取在１０５　ｏＣ干燥恒重的芦丁对照品适量，　

用９５％乙醇溶解于５０　ｍＬ容量瓶定容，再准确吸取此　

溶液２０　ｍＬ，定容至１００　ｍＬ，即得对照品溶液。分别取　

对照品溶液０．５、１．０、１．５、２．０、２．５、３．０　ｍＬ，加蒸馏水至　

３　ｍＬ，加５％亚硝酸钠水溶液０．５　ｍＬ，放置６　ｒａｉｎ，加入　

ｌ０％硝酸铝０．５ｍＬ，混匀放置６ｒａｉｎ后加入５％氢氧化　

钠２．５ｍＬ，混匀，放置１５ｒａｉｎ后定容至１０ｍＬ，用７２２分　

光光度计在ｋ＝５００　ｎｍ处测吸光度，做工作曲线，如图１。　

浓度／（ｍｇ／２５　ｍＥ）　Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｉｏｒｄ（ｍｇ／２５　ｍＥ）　图１芦丁标准曲线　Ｆｉｇ．１　Ｓｔａｎｄａｒｄ　ｃｕｒｖｅ　ｏｆ　ｒｕｔｉｎ　

１．４样品的测定　

精密吸取２ｍＬ供试液置于２５ｍＬ容量瓶中，以上　

述绘制黄酮类化合物标准曲线的方法分别测样品液的　

吸光度，根据回归方程求出黄酮收率。　

２结果与讨论　

２．１不同提取方法对黄酮提取率的影响　

分别采用振荡提取法、超声波提取法和微波提取　

法提取橄榄原料，黄酮提取率如表１所示。　

表１不同提取方法对黄酮提取率的影响　Ｔａｂｌｅ　１　Ｔｈｅ　ｅｆｆｅｃｔ　ｏｆｄｉｆｅｒｅｎｔ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ　ｍｅ￣ｏｄ　ｏｎ　ｔｈｅ　ｙｉｅｌｄ　ｒａｔｉｏ　ｏｆｆｌａｖｏｎｏｉ

ｄｓ　维普资讯 http://www.cqvip.com 科学研究　莲　２００８年８月　第２９卷第８期　

由表１可知，微波提取法黄酮提取率明显优于振荡　

提取法和超声波提取法。振荡提取法不仅产物收率低，　

而且提取时间长，操作繁琐，不适宜工业放大应用；超声　

波提取法主要是利用其空化作用，即一定频率的超声波　

作用于溶液时，液体中小气泡发生共振现象，强烈的冲　

击波使细胞壁破裂，有效成分溶出，超声波提取法虽然　

收率较高，但是超声波频率不稳定，而且在容器内的共　

振不均匀。微波技术用于橄榄中黄酮类化合物的提取不　

仅产物收率高，而且还具有省时、高效、节能等特点。　

２．２微波提取优化工艺研究　

通过改变提取时间（Ａ）、乙醇浓度（Ｂ）、微波功率　

（Ｃ）、液固ＬＬ（Ｄ）４因素，考察各因素对黄酮提取率的影　

响。为优化工艺条件，设计四因素三水平的正交试验，　

如表２，结果见表３。　

表２　Ｌ　４）正交试验表因素水平表　Ｔａｂｌｅ　２　Ｌ　３４）ｔｈｅ　ｆａｃｔｏｒ　ａｎｄ　ｌｅｖｅｌ　ｏｆ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ　

表３　Ｌ９（３４）正交实验结果及分析　Ｔａｂｌｅ　３　Ｔｈｅ　ｒｅｓｕｌｔｓ　ａｎｄ　ａｎａｌｙｓｉｓ　ｏｆ　ｏｒｔｈｏｇｏｎａｌ　ｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｓ　４１　

对表３中的结果进行极差分析可知，各因素对　

总黄酮收率影响的主次顺序为Ｄ＞Ｃ＞Ａ＞Ｂ，即液固　

比对总提取收率影响显著，微波辐射功率、提取时　

间次之，而提取剂乙醇浓度影响较小，最优组合为　

Ａ２Ｂ１Ｃ１Ｄ３。　

３结论　

采用微波提取方法能够从橄榄中提取黄酮等有　

效成分，微波提取方法黄酮提取率明显高于机械振荡　

法和超声波法。从正交试验结果及极差分析可知，各　

因素影响提取率的次序为：液固比＞微波辐射功率＞提　

取时间＞提取剂乙醇浓度，最佳工艺条件为：乙醇浓度　

６０％、微波功率为５００　Ｗ，辐射时间２５　ｍｉｎ，液固比　

２０：１，总黄酮收率可大于１％。　

参考文献：　

［１］项昭保，陈海生，何从林．橄榄的化学成分与药理作用研究进展叨．　

时珍国医国药，２００６，１７（１　１）：２２９９—２３００