重医 临床免疫学检验 重点整理
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免疫学检验1、免疫是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能。
2、免疫应答分为识别阶段、活化阶段和效应阶段。
3、识别阶段,是巨噬细胞等抗原递呈细胞对外来抗原或自身变性抗原进行识别、摄取、降解和递呈抗原信息给T辅助细胞及相关淋巴细胞的阶段。
4、活化阶段,是T、B淋巴细胞在接受抗原信号后,在一系列免疫分子的参与下,发生活化、增殖,分化的阶段。
5、效应阶段,是浆细胞分泌特异性抗体,执行体液免疫功能。
7、免疫系统由免疫器官、免疫细胞和免疫分子构成。
8、中枢免疫器官是免疫细胞发育为成熟免疫细胞的场所,它包括骨髓和胸腺。
9、成年人和动物所有血细胞及淋巴细胞的发源地是骨髓。
10、T细胞发育的重要中枢器官是胸腺。
11、外周免疫器官及组织包括淋巴结、脾、黏膜伴随的淋巴组织。
富含血管的最大外周淋巴器官是脾。
12、自然杀伤细胞来源于骨髓造血干细胞,其发育成熟依赖于骨髓及胸腺微环境。
13、免疫球蛋白是B细胞经抗原刺激后增殖分化为浆细胞后产生的、执行体液免疫功能的一组球蛋白。
14、抗体是机体在抗原刺激下,由浆细胞合成分泌产生的具有免疫功能的球蛋白。
15、所有抗体是球蛋白,但不是所有的球蛋白都是抗体。
16、Igg是血清中含量最高的免疫球蛋白,是再次免疫应答的主要抗体,也是唯一能通过胎盘的抗体。
17、补体的激活途径有经典途径、替代途径、MBL途径。
18、正常血清中,含量最高的补体成分是C3、C419、细胞因子:由免疫细胞分泌具有生物活性的多肽或小分子蛋白质的总称,生物活性常表现为多效性、重叠性、拮抗效应和协同效应。
20、抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原决定族(表位)和抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性。
21、抗原抗体结合力:1. 静电引力;2. 范德华力(最小);3. 氢键结合力;4. 疏水作用力(最强)22、抗原与抗体结合的特异性,是两者在化学结构和空间构型上呈互补关系所决定的。
23、抗原抗体比例合适时,沉淀物形成快而多,称为等价带。
临床免疫学检验知识点1.免疫系统的基本知识:了解免疫系统的组成、功能和调节机制是理解临床免疫学检验的基础。
免疫系统由免疫器官(如脾脏、淋巴结、骨髓等)和免疫细胞(如淋巴细胞、巨噬细胞、树突细胞等)组成,其功能包括抵御病原体的入侵、清除异常细胞和产生抗体等。
2.免疫细胞的检测方法:常用的免疫细胞检测方法包括流式细胞术、免疫组化和染色技术等。
流式细胞术可用于检测和计数不同类型的免疫细胞,免疫组化和染色技术可用于检测细胞表面标记物和细胞内分子的表达水平。
3.免疫球蛋白的检测方法:免疫球蛋白是免疫系统中的重要成分,其浓度和种类的改变可以指示一些疾病的存在和进展。
测定免疫球蛋白的方法包括免疫电泳、免疫扩散和化学发光等技术。
4.免疫反应的检测方法:免疫反应的检测方法可以用于评估机体对病原体的免疫应答以及检测自身免疫疾病的存在。
常用的免疫反应检测方法包括抗体检测、细胞毒性测定和溶菌试验等。
5.自身抗体的检测方法:自身抗体是机体免疫系统对自身组织产生的免疫反应产物,其异常产生与自身免疫疾病的发生和进展密切相关。
常用的自身抗体检测方法包括酶联免疫吸附试验(ELISA)、间接免疫荧光和免疫印迹等。
6.免疫功能的评估方法:免疫功能的评估可以指导临床医生判断机体的免疫状况和预测疾病的发展趋势。
常用的免疫功能评估方法包括淋巴细胞亚群分析、细胞因子水平检测和细胞增殖测定等。
7.临床应用:临床免疫学检验在临床诊断和治疗中具有重要意义。
例如,检测艾滋病病毒抗体可用于艾滋病的早期诊断和监测;自身抗体的检测可用于系统性红斑狼疮和类风湿性关节炎的诊断;细胞因子水平的检测可以评估炎症反应和肿瘤的进展等。
综上所述,临床免疫学检验涵盖了多个方面的知识点,包括免疫系统的基本知识、免疫细胞和免疫球蛋白的检测方法、免疫反应和自身抗体的检测方法、免疫功能的评估方法以及临床应用等。
这些知识点对于临床医生正确使用和解读免疫学检验结果具有重要的指导意义。
免疫学考试重点归纳(全面)1抗原抗体反应:是指抗原与相应抗体在体内或体外发生的特异性结合反应。
抗原抗体间的结合力涉及静电引力、范德华力、氢键和疏水作用力,其中疏水作用力最强,它是在水溶液中两个疏水基团相互接触,由于对水分子的排斥而趋向聚集的力。
2亲和性(affinity):是指抗体分子上一个抗原结合点与一个相应抗原表位(AD)之间的结合强度,取决于两者空间结构的互补程度。
3亲合力(avidity):是指一个完整抗体分子的抗原结合部位与若干相应抗原表位之间的结合强度,它与亲和性、抗体的结合价、抗原的有效AD数目有关。
4抗原抗体反应的特点:特异性、可逆性、比例性、阶段性。
5带现象(zone phenomenon):一种抗原-抗体反应的现象。
在凝集反应或沉淀反应中,由于抗体过剩或抗原过剩,抗原与抗体结合但不能形成大的复合物,从而不出现肉眼可见的反应现象。
抗体过量称为前带,抗原过量称为后带。
6免疫原(immunogen):是指能诱导机体免疫系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的抗原。
7免疫佐剂(immuno adjustvant):简称佐剂,是指某些预先或与抗原同时注入体内,可增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答类型的物质。
8半抗原(hapten):又称不完全抗原,是指仅具有与抗体结合的能力(抗原性),而单独不能诱导抗体产生(无免疫原性)的物质。
当半抗原与蛋白质载体结合后即可成为完全抗原。
9载体(carrier):结合后能给予半抗原以免疫原性的物质。
10载体效应:初次免疫与再次免疫时,只有使半抗原结合在同一载体上,才能使机体产生对半抗原的免疫应答,该现象称为~。
11单克隆抗体(McAB):将单个B细胞分离出来,加以增殖形成一个克隆群落,该B细胞克隆产生的针对单一表位、结构相同、功能均一的抗体,即~。
12多克隆抗体(PcAb):天然抗原分子中常含多种不同抗原特异性的抗原表位,以该抗原物质刺激机体免疫系统,体内多个B细胞克隆被激活,产生含有针对不同抗原表位的免疫球蛋白,即~13基因工程抗体(GEAb):是利用DNA重组及蛋白工程技术,从基因水平对编码抗体的基因进行改造和装配,经导入适当的受体细胞后重新表达的抗体。
免疫学简介一、免疫学概念与免疫应答免疫应答过程:抗原的识别、处理、信息传递、免疫细胞的激活、增值、分化以与产生一系列的免疫效应分子免疫应答分为识别阶段、活化阶段、效应阶段1、识别阶段:是巨噬细胞等抗原呈递细胞对外来抗原或自身变性抗原进行识别、摄取、降解和递呈抗原信息给T副主席报与相关淋巴细胞的阶段2、活化阶段:是T、B淋巴细胞在接受抗原信号后,在一系列免疫分子的参与下,发生活化、增值、分化的阶段。
B细胞接受抗原信息分化为浆细胞,T细胞接受抗原刺激和协同刺激双信号后分化为效应细胞3、效应阶段:是浆细胞分泌特异性抗体,执行体液免疫功能。
T细胞中的Th细胞分泌细胞因子等效应分子,T杀伤细胞执行细胞毒效应功能。
另外有少量T、B细胞在增值分化后,不直接执行效应功能,而成为记忆细胞免疫应答效应多为生理性,是机体对外来抗原或自身变性抗原的清楚效应二、免疫组织与器官免疫系统由免疫器官、免疫细胞和免疫分子构成免疫器官按功能不同,分为中枢免疫器官和外周免疫器官。
中枢免疫器官是免疫细胞产生、分化和成熟的场所,由骨髓和胸腺组成;外周免疫器官是免疫应答的场所,有淋巴结、脾与扁桃体等组成。
单核细胞核淋巴细胞经血液循环与淋巴循环进出于外周淋巴组织与淋巴器官,形成机体免疫系统的免疫网络。
(一)中枢免疫器官1、骨髓2、胸腺:是一级淋巴上皮组织,是T细胞发育的重要中枢器官,胸腺由胸腺基质细胞(TSC)和胸腺细胞组成。
(二)外周免疫器官与组织1、淋巴结:分为皮质区与髓质区。
皮质区主要的细胞是B淋巴细胞又称为非胸腺依赖区。
淋巴结的中心是髓质区,由淋巴索和淋巴窦组成,淋巴索为之谜聚集的淋巴细胞,包括B 细胞、浆细胞、T细胞与巨噬细胞淋巴结主要功能:是共淋巴细胞栖息和增值的场所;是适宜于淋巴细胞增值分化发挥免疫应答的基地;是淋巴液运行中监视清除病原体异物的过滤监控站2、脾:是富含血管的最大外周淋巴器官。
3、黏膜伴随的淋巴组织:有B细胞、T细胞、浆细胞与巨噬细胞,受局部侵入的病原体激活执行固有和适应性的免疫应答,使B淋巴细胞活化分化为浆细胞,产多种Ig类别的看那个题,其中最主要的是IgA与分泌型IgA,执行体液免疫与局部特异免疫作用(三)淋巴细胞再循环与归巢三、免疫细胞(一)淋巴细胞:是免疫系统的主要细胞,包括T细胞、B细胞核NK细胞1、T细胞外周血中T细胞约占淋巴细胞的70%-75%。
免疫学检验1.T细胞:T细胞是在胸腺中发育成熟的淋巴细胞。
2.B淋巴细胞:B淋巴细胞是在骨髓内发育成熟的细胞。
3.辅佐细胞:在特异性免疫应答过程中,参与辅助淋巴细胞活化的细胞统称为辅佐细胞。
4.单核吞噬细胞系统包括外周血中的单核细胞和组织器官中的巨噬细胞。
5.抗原:是指能与T细胞抗原受体(TCR)以及B细胞抗原受体(BCR)结合,促使T细胞/B细胞增殖,分化,产生抗体或致敏淋巴细胞,并与之结合,进而发挥免疫效应的物质。
抗原具有两种基本性能:(1)免疫原性:指抗原能够刺激机体产生特异性免疫应答(产生特异性抗体或致敏淋巴细胞)的性质。
(2)免疫反应性:指抗原能与相应免疫应答产物(抗体或致敏淋巴细胞)在体内、体外发生特异性结合的性质。
6.影响抗原免疫性的因素(1)抗原因素:1.异质性指抗原与机体成分结构的差异程度,是作为抗原的必要条件。
2,抗原分子的理化性质,如分子量大小,化学组成和结构,通常环状分子蛋白质较直链分子蛋白质免疫原性强,还有分子构像与易接近性,以及物理状态。
(2)抗体因素:(宿主因素)1.遗传因素2.年龄、性别与健康状态3.抗原剂量及进入机体的途径,进入机体途径以皮内注射免疫原性最佳,皮下注射次之,肌肉注射、腹腔注射、静脉注射再次,口服免疫原性最差。
7.抗原表位:又称抗原决定簇,指存在于抗原分子表面的,能与TCR/BCR或抗体特异性结合,决定抗原特异性的特殊化学基团。
8.不完全抗原:仅有免疫反应性而无免疫原性的物质,又称半抗原,多为一些简单的小分子物质、药物等。
9.完全抗原:同时具有免疫原性和免疫反应性的物质成为完全抗原,大多数蛋白质类抗原属于此类。
10.11.超抗原:是指能直接非特异性激活某些T细胞亚型或B细胞亚型的物质。
12.免疫球蛋白的生物学功能(1)免疫球蛋白V区的功能:识别并特异性结合抗原,在体内可直接发挥中和作用,但不能直接溶解或杀伤带有特异抗原的靶细胞。
(2)免疫球蛋白C区的功能:1.激活补体2.与细胞Fc受体结合发挥多种生物学作用:①调理作用②ADCC③介导Ⅰ型超敏反应3.穿过胎盘和粘膜13.IgG为单体分子,是血清和细胞外液中含量最高的Ig,约占血清总Ig的75%-80%血清,IgM为五聚体,是血清中分子量最大的Ig,也是个体发育过程中最早合成和分泌的Ig,不能通过胎盘,若脐带血或新生儿血清中其水平升高提示有胎儿有宫内感染,体液免疫应答中,其水平升高提示有近期感染。
填空1.免疫防御功能异常可导致(感染、免疫缺陷)疾病。
2.抗原抗体反应的特点有(特异性、比例性、可逆性、阶段性)3•抗原抗体反应的温度一般以(15〜40 C)为宜,最适温度为(37 C)4•影响抗原抗体反应的环境因素主要有(电解质、pH、温度)5•某些特殊的抗原抗体反应对温度有一些特殊的要求,如冷凝集素在(4C)左右与红细胞结合最好,(20 C)以上反而解离。
6•抗原抗体的结合分子间的引力包括(静电引力、范德华引力、氢键引力和疏水作用力),其中作用最强的是(疏水作用力)1•间接凝集反应的类型包括(正向间接凝集、反向间接凝集反应、间接凝集抑制反应和协同凝集反应)四种类型。
2•参与凝集反应中的抗原称为(凝集原),抗体称为(凝集素),常用的直接凝集试验有(玻片法、试管法、玻片法)3•在间接凝集反应中正向凝集反应是用(抗原)致敏载体以检测标本中相应的(抗体),而反向间接凝集反应是用(抗体)致敏载体以检测标本中相应(抗原)4•间接抗球蛋白试验可用已知抗原型红细胞检测血清中的(不完全抗体),可用于输血前的(交叉配血)试验。
1.免疫沉淀反应是(可溶性抗原)与(相应抗体)的特异性结合2.棋盘格法(抗原)和(抗体)同时稀释,可一次完成(抗原)和(抗体)的滴定3.单向琼脂扩散是待测抗原从含有定量(抗体)的(凝胶)内自由向周围扩散,抗原抗体特异性结合,在两者比例合适的部位,形成(沉淀环)。
4.Maneini 曲线适用于(大分子抗原)的测定,在一定范围内,沉淀环随时间延长而扩大,抗原浓度与(扩散环直径的平方)呈线性关系,常用(普通)坐标纸作图。
5.Fahey 曲线适用于(小分子抗原)的测定,在一定范围内,沉淀环随时间延长而扩大,沉淀环直径与(抗原浓度的对数)呈线性关系,常用(半对数)坐标纸作图。
6.双向琼脂扩散试验可对抗原或抗体的存在、含量和相对分子量进行分析,沉淀线靠近抗原孔指示(抗体含量较高);靠近抗体孔则指示(抗原含量较高);不出现沉淀线则表明(无对应的抗原和抗体)。
临床免疫学与检验重要知识点汇总免疫应答主要分为哪几个阶段?1)识别阶段 2)活化与增值阶段 3)免疫效应中枢免疫器官与外周免疫器官有哪些器官组成?各有什么功能?1)中枢免疫器官:免疫细胞发生、分化、成熟得场所,如骨髓,胸腺2)外周免疫器官:免疫细胞产生应答得场所。
如脾脏,淋巴结,黏膜,扁桃体等。
T细胞、B细胞与NK细胞得主要功能分别就是什么?1)T细胞: 介导细胞免疫,辅助体液免疫。
2)B细胞: 产生体液免疫3)NK细胞:介导天然免疫,发挥细胞毒作用。
根据作用方式及其特点得不同,机体存在两类免疫简述各自得概念与特征?1)先天性免疫或固有性免疫,就是个体出生就是就具有得天然免疫,可通过遗传获得,就是机体在长期进化过程中逐渐建立起来得主要针对入侵病原体得天然防御功能。
其主要特征就是反应迅速,针对外来异物得范围较广,不针对某个特定异物抗原,也称非特异性免疫。
2)适应性免疫,就是个体出生后,接触到生活环境中得多种异物抗原,并在不断刺激中逐渐建立起来得后天免疫,也称获得性免疫。
其主要特征就是针对某个特定得异物抗原而产生免疫应答,开始得应答过程比较缓慢,一旦建立清除该抗原得效率很高,特异性很强,也称特异性免疫。
简述抗原抗体反应得原理。
答:抗原与抗体能够特异性结合就是基于抗原表位与抗体超变区分子间得结构互补性与亲与性,这种特性就是由抗原、抗体分子空间构型所决定得,它们之间得结合就是抗原表位与抗体超变区沟槽分子表面得结合简述抗原抗体反应得类型。
答:抗原抗体反应分为五种类型:①颗粒性抗原与相应抗体结合所产生得凝集反应;②可溶性抗原与相应抗体结合所产生得沉淀反应;③抗原抗体结合后激活补体所致得细胞溶解反应;④细菌外毒素或病毒与相应抗体结合所致得中与反应;⑤免疫标记得抗原抗体反应等。
什么就是带现象?答:在抗原抗体反应等价带前后,由于抗体或抗原过量(形成前带或后带),上清液中可测出游离得抗体或抗原,形成得沉淀物少,不出现可见反应,这种现象在做血清学试验时称为带现象。
临床免疫学检验部分抗血清的制备【原理】:用抗原刺激机体可以产生抗体,抗原的性质、纯度和活性影响其免疫动物后获得的抗体的的特异性和效价。
在体外有目的的制备抗原,经初次、再次免疫的过程可以获得高质量的抗体。
【注意事项】①制备佐剂时,一定要顺着同一方向用劲磨。
②检查油包水的方法:培养皿内加水,滴入混匀液,不散开即可。
如果第1次检查不合格,第2次检查必须重新倒水在平皿。
③免疫动物皮内注射时,可以在足垫、腋下、背部等处多点注射,总剂量1ml/只。
凝集反应颗粒性Ag或可溶性Ag(Ab)与载体颗粒结合成的致敏颗粒,与相应Ab(Ag)发生特异性反应。
在一定条件下,形成肉眼可见的凝集现象。
一、直接凝集反应:颗粒性Ag,与相应Ab直接结合。
在一定条件下,形成肉眼可见的凝集现象。
(1)玻片法凝集反应:【原理】:颗粒性Ag(细菌、红细胞等),与相应Ab直接结合。
在一定条件下,形成肉眼可见的凝集现象。
【意义】:①定性试验,可用已知抗体的诊断血清来测未知的抗原。
②可用于细菌分型、ABO 血型鉴定等。
【结果观察】:①对照区不发生凝集,为均匀浑浊的乳状液。
②试验区,伤寒菌液(Ag)与相应的Ab发生反应,出现肉眼可见的凝集块,为阳性。
如与对照相同则为阴性。
(2)试管法凝集反应:【原理】:用已知细菌作为一定浓度的悬液Ag,与一系列稀释的受检血清混合,经静置保温后观察每管内颗粒性Ag的凝集程度。
【结果观察】:①先看对照管,应无凝集现象,轻摇试管,细菌分散均匀,混浊。
再从第1管开始看。
②根据凝集度打“+”。
—:管底无沉淀,液体混浊,细菌分散均匀。
++++:管底有沉淀,上液澄清,细菌全部凝集。
+++:管底有沉淀,液体稍混, 细菌1/4不凝集。
++: 管底有沉淀,液体混浊,细菌1/2不凝集+: 管底仅少量有沉淀,液体混浊。
效价判断:以出现“++”凝集的最大稀释度,为该血清的凝集效价。
二、间接凝集反应:必须借助颗粒性载体,将可溶性Ag(Ab)致敏载体,成致敏颗粒,再检测标本中相应的Ab(Ag)。
一:名词解释1免疫学(immunology):是研究免疫系统的结构与功能,并通过对其在免疫应答过程中所产生的免疫保护与免疫损伤机制的研究,探讨有效的免疫措施,实现以防病,治病为目的的一门现代医学科学。
2免疫球蛋白(immunoglobulin):是B细胞经抗原刺激后增殖分化为浆细胞所产生的一种蛋白质,主要存在于血清等液体中,约占血浆蛋白总量的20%,IgG能与相应抗原特异性结合,执行体液免疫功能。
3补体(complement):是存在于人和脊椎动物血清与组织液中一组经活代后有酶活性的蛋白质,包括30余种可溶性蛋白和膜结合蛋白,故称为补体系统。
4细胞因子(cytokine):是由细胞分泌的具有生物活性的小分子蛋白物质的总称。
大多数细胞因子是低分子量的蛋白或糖蛋白。
5临床免疫学(clinical immunology):是将免疫学基础理论,临床疾病与免疫学技术相结合,用于研究疾病的免疫病理机制,诊断与鉴别诊断,评价治疗效果和判断预后的多个分支学科的总称。
6亲和性(affinity):是指抗体分子上的一个抗原结合点与一个相应抗原表位之间的结合强度,抗原抗体的亲和性取决于两者空间构型的互补的程度。
7亲和力(avidity):是指一个完整抗体分子的抗原结合部位与若干相应抗原表位之间的结合强度,亲和力与亲和性,抗体的结合价,抗原的有效抗原表位数目有关。
8免疫原(immunogen):是指能诱导机体免疫系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的抗原。
9半抗原(hapten):是指仅有抗原性而无免疫原性的物质。
10免疫佐剂(immunoadjuvant):预先或与抗原同时注入体内,可增强机体对该抗原的免疫应答或改变免疫应答类型,简称佐剂。
11凝集反应(agglutination reaction):是指细菌和红细胞等颗粒性抗原或表面包被可溶性抗原的颗粒性载机与相应抗体特异性结合后,在适当电解质存在下,出现肉眼可见的凝集现象。
【名词解释】1.抗原抗体反应:抗原抗体反应是指抗原与相应抗体在体内和体外发生的特异性结合反应2.亲和性;抗体分子上一个抗原结合点与对应的抗原决定簇之间的结合强度,3.亲和力;一个完整的抗体结合部位与若干个抗原表位之间结合的强度4.带现象;由于抗原或抗体过量,形成免疫复合物少,沉淀物少,上清液中可测出游离的抗原或抗体6.抗血清:将免疫原按照一定的免疫程序免疫动物,一定时间后,采集动物血液,分离得到含有抗体的血清。
7凝集反应;细菌、螺旋体、红细胞或细胞性抗原等颗粒性抗原,或可溶性抗原(或抗体)与载体颗粒结合成致敏颗粒后,它们与相应抗体(或抗原)发生特异性反应,在适当电解质存在下,形成肉眼可见的凝集现象8.直接凝集反应:颗粒性抗原直接与抗体结合,在电解质的作用下,出现肉眼可见的凝集现象(这个名解删除)9.间接凝集反应:将可溶性抗原或抗体吸附于颗粒性载体表面(加到了反应面积),然后与相应的抗体或抗原反应,在电解质的作用下,出现肉眼可见的凝集现象这个名解删除)10.沉淀反应:可溶性抗原与相应抗体在适当条件下发生特异性结合而出现的沉淀现象,其特性与经典的抗原抗体反应相同。
11.比放射活性:单位质量标记物中所含的放射性强度(每分子被标记物平均所结合放射性原子的数目)单位: Ci/g12.发射光谱:指固定激发波长,在不同波长下记录的样品发射荧光的强度。
13.激发光谱:指固定检测波长,用不同波长的激发光激发样品,记录相应的荧光发射强度。
14.荧光效率:荧光物质将光能转变成荧光的百分率,一定范围内与激发光强度呈正相关。
15.荧光寿命:荧光物质被激发后所产生的荧光衰减到一定程度时所用的时间。
16.荧光猝灭:荧光物质在某些理化因素作用下,发射荧光减弱甚至消退,称为荧光淬灭。
17.包被;将抗原或抗体结合于固相载体的过程18.封闭:抗原或抗体包被后,为防止固相载体没有完全包被,可能在后续实验中非特异性吸附蛋白,因此用1%~5%的牛血清白蛋白重新包被,覆盖所有蛋白结合位点,消除非特异性吸附19.固相膜免疫分析技术:以微孔膜作为固相载体,利用液体可以流过微孔膜也可以通过毛细管作用在膜上向前移行的特性,以酶标记或各种有色粒子(胶体金,胶体硒等)标记抗体或抗原作为标记物,通过抗原抗体反应或抗体检测的快速检验方法20.免疫金;指胶体金与抗原或抗体等大分子物质的结合,习惯称金探针21.免疫组织化学技术:又称免疫细胞化学技术,是指用标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应,对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项免疫检测方法。
临床免疫学检验1、免疫:是机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能2、免疫防御(对外);免疫自稳(防自身免疫病);免疫监视(防肿瘤)。
3、中枢免疫器官:骨髓、胸腺;外周免疫器官:淋巴结、脾脏(最大)、黏膜相关淋巴组织4、B细胞:通过识别膜免疫球蛋白来结合抗原,介导体液免疫;B细胞受体=BCR=mIg表面标志:膜免疫球蛋白(SmIg)、Fc受体、补体受体、EB病毒受体和小鼠红细胞受体。
成熟B细胞:CD19、CD20、CD21、CD22 (成熟B细胞的mIg主要为mIgM和mIgD)同时检测CD5分子,可分为B1细胞和B2细胞。
B细胞功能检测方法:溶血空斑形成试验(体液免疫功能)。
5、T细胞:介导细胞免疫。
共同表面标志是CD3(多链糖蛋白);辅助T细胞的标志是CD4;杀伤T细胞的标志是CD8;T细胞受体=TCR。
T细胞和NK细胞的共同表面标志是CD2(绵羊红细胞受体);CD3+CD4+CD8- = 辅助性T细胞(Th)CD3+CD4-CD8+ = 细胞毒性T细胞(Tc或CTL)(T细胞介导的细胞毒试验)CD4+CD25+ = 调节性T细胞(Tr或Treg)T细胞功能检测:植物血凝素(PHA)刀豆素(CONA)刺激T细胞增殖。
增殖试验有:形态法、核素法。
T细胞亚群的分离:亲和板结合分离法,磁性微球分离法,荧光激活细胞分离仪分离法*E花环试验是通过检测SRBC受体而对T细胞进行计数的一种试验;6、NK细胞:具有细胞介导的细胞毒作用。
直接杀伤靶细胞(肿瘤细胞和病毒感染的细胞)表面标志:CD16(ADCC)、CD56。
测定人NK细胞活性的靶细胞多用K562细胞株,而测定小鼠NK细胞活性则常采用YAC-1细胞株。
7、吞噬细胞包括:单核-吞噬细胞系统(MPS,表面标志CD14,包括骨髓内的前单核细胞、外周血中的单核细胞和组织内的巨噬细胞)和中性粒细胞。
(表达MHCⅡ类分子)8、人成熟树突状细胞(DC)(专职抗原呈递功能):表面标志为CD1a、CD11c和CD83。
【免疫学检验】知识点整理(第一部分)概论+抗原抗体反应1 免疫学基本概念及其生物学功能;免疫:机体识别和排斥抗原性异物的一种生理功能免疫三大功能:免疫防御、免疫自稳、免疫监视中枢免疫器官(骨髓和胸腺)外周免疫器官(淋巴结、脾脏、扁桃体)免疫细胞:淋巴细胞(T,B,NK)、单核巨噬细胞、其他免疫应答细胞(中性粒、嗜酸性、嗜碱性和肥大细胞)免疫分子:免疫球蛋白(IgM,IgG,IgA,IgE,IgD),补体,细胞因子,细胞黏附分子,人类白细胞分化抗原免疫应答:机体免疫系统接受抗原刺激发生的一系列反应,并以排出或分解该抗原为目的的反应过程。
过程:抗原的识别、处理、信息传递(识别阶段),免疫细胞的激活、增殖、分化(活化阶段)以及产生一系列的免疫效应因子(效应阶段)。
临床免疫学检验:研究免疫学检测理论、技术、应用,免疫疾病发病机制、免疫诊断、及防治的一门医学领域的应用学科。
免疫学检测技术的基础是抗原抗体反应,免疫学技术有凝集反应、沉淀反应、补体参与的反应、中和反应和标记免疫反应五种类型。
免疫检验:1)利用免疫检测原理和技术检测免疫活性细胞、抗原、抗体、补体、细胞因子、细胞黏附分子等免疫相关物质;2)体液中的微量物质如激素、酶、血浆微量蛋白、血液药物浓度、微量元素。
临床免疫学:利用免疫学理论和技术研究疾病的免疫病理机制、诊断和鉴别诊断、疗效评价、预后判断和预防的多个分支学科的总称。
免疫性疾病:各种原因引起的机体免疫应答异常所致的疾病,包括超敏反应性疾病、自身免疫病、免疫缺陷病和免疫增生病。
感染免疫学:研究病原微生物与宿主相互关系从而控制感染的学科,传统免疫学核心。
肿瘤免疫学:研究肿瘤免疫原性、机体抗肿瘤的免疫效应及机体的免疫功能与肿瘤发生、发展的相互关系以及肿瘤免疫诊断与防治的学科。
移植免疫学:研究移植物与宿主相互关系从而选择移植物和延长移植物存活的学科。
2 血清学反应的概念;抗体主要存在于血清中,体外的抗原抗体反应称为血清学反应。
【重医】临床检验免疫学临床检验免疫学⼀.绪论免疫学教学内容1.基础免疫学(Basic immunology)相关内容:抗原、抗体、补体、细胞因⼦、HLA、免疫系统、免疫应答。
以免疫应答为中⼼。
2.临床免疫学(Clinical immunology)1)抗感染免疫(Infection immunology)2)超敏反应(Hypersensitivity)3)⾃⾝免疫(Autoimmunity)4)肿瘤免疫(Tumor immunology)5)移植免疫(Transplantation immunology)3.免疫学实验技术(immunological techniques) 即:免疫学检验,根据免疫学基本理论建⽴起来的试验⽅法⼆.抗原抗体反应抗原抗体反应是抗原和相应抗体之间所发⽣的特异性结合反应,这种结合具有⾼度特异性,它既可以发⽣在体内,也可以发⽣在体外。
发⽣在体内的抗原抗体反应,是机体体液免疫效应的表现⽅式,具有溶菌、杀菌、中和毒素及调理吞噬的作⽤。
发⽣在体外的抗原抗体反应,根据抗原的物理性状(可溶性Ag或颗粒性Ag)及参加反应的物质不同,可分为:沉淀反应、凝集反应、中和试验及补体参与的反应等由于抗体都来⾃于⾎清,因此,我们将体外的抗原抗体反应⼜称为⾎清学反应。
本章讲的抗原抗体反应就是指发⽣在体外的抗原抗体反应抗原抗体反应原理1.Ag、Ab能特异性结合(内因):Ag、Ab能特异性结合,是由于Ag表位(抗原决定簇)和Ab V区之间的特异性结合,⼆者在空间结构上是严格互补的。
2.Ag、Ab结合的动⼒(外因):静电引⼒(⼜称库仑引⼒):它是指抗原和抗体分⼦上带有相反电荷-NH3+或-COO¯之间的相互吸引⼒。
例如Ab分⼦上赖氨酸离解层中含有-NH3+,Ag分⼦上天门冬氨酸离后含有-COO¯,这两者之间就可相互吸引⽽产⽣静电引⼒。
该⼒的⼤⼩与两个电荷间距离的平⽅成反⽐。
距离越近,静电引⼒就越强。
《临床免疫学检验技术》复习笔记一、绪论临床免疫学检验技术作为医学检验技术专业的核心课程,在医学领域中占据着至关重要的地位。
它主要阐述了基础免疫学和临床免疫学的基本理论、技术,以及常见免疫相关性疾病的免疫学特征和诊断方法。
二、抗原与抗体1. 抗原(Ag)是指能启动、激发和诱导免疫应答的物质,可被T、B 细胞表面特异性抗原受体识别及结合,激活细胞产生应答产物。
抗原是所有能启动、激发和诱导免疫应答的物质,其可被T、B 细胞表面特异性抗原受体(TCR 或BCR)识别并结合,激活T/B 细胞产生免疫应答,并与之发生特异性反应。
抗原可来自外界或自身,机体免疫细胞通常识别的抗原多数是蛋白质,少数是多糖、脂类和核酸等。
例如,2018 年长春长生疫苗事件中提到的疫苗就属于免疫学上所说的抗原范畴。
抗原的特性包括免疫原性、免疫反应性和特异性。
免疫原性是指抗原被T、B 细胞表面特异性抗原受体(TCR 或BCR)识别及结合,诱导机体产生适应性免疫应答的能力;免疫反应性,又称抗原性,是指抗原与其所诱导产生的免疫应答效应物质特异性结合的能力。
所有的抗原都有免疫反应性,但不一定有免疫原性。
同时具有免疫原性和免疫反应性的物质称为完全抗原;只有免疫反应性而无免疫原性的物质称为半抗原。
抗原的免疫原性主要取决于抗原的异物性和理化特性,也与机体的遗传、性别、生理状态以及抗原进入机体的途径和方式有关。
抗原通常为非己物质,抗原与抗体之间的亲缘关系越远,免疫原性越强。
天然抗原多为大分子有机物,蛋白质免疫原性较强;抗原分子量越大,则免疫原性越强;多支链或含环状结构基团的抗原较直链抗原免疫原性强;聚合状态蛋白较单体的免疫原性强;颗粒性抗原较可溶性抗原的免疫原性强。
此外,机体对抗原的免疫应答受多种遗传基因特别是主要组织相容性复合体基因的控制,还受年龄、性别与健康状态的影响。
在应用抗原免疫动物制备抗体时,选择合适的动物种类非常重要,应该选用发育成熟且健康的动物。
免疫学检验知识点总结免疫学检验是临床检验中非常重要的一个领域,通过检查人体的免疫系统功能,可以帮助医生诊断疾病、监测疾病进展以及评估治疗效果。
免疫学检验涉及到许多知识点,包括免疫学基础知识、免疫学检验方法、常见的免疫学检验指标等。
本文将对免疫学检验的相关知识点进行总结。
一、免疫学基础知识1. 免疫系统的组成免疫系统由两大部分组成:体液免疫和细胞免疫。
体液免疫主要通过抗体来进行免疫应答,而细胞免疫则通过吞噬细胞和T细胞来进行免疫应答。
2. 免疫系统的功能免疫系统的主要功能包括防御感染、清除异常细胞、调节炎症反应等。
免疫系统通过对抗原的识别和消除来维护机体内稳态,保护机体免受外界病原体的侵害。
3. 免疫系统的异常免疫系统的异常会引发一系列疾病,包括自身免疫病、免疫缺陷病、过敏性疾病等。
免疫系统的异常分析对于疾病的诊断和治疗至关重要。
二、免疫学检验方法1. 免疫荧光法免疫荧光法是一种常用的免疫学检验方法,包括直接免疫荧光法和间接免疫荧光法。
直接免疫荧光法可以用于检测抗原,间接免疫荧光法可以用于检测抗体。
该方法操作简便、灵敏度高,被广泛应用于临床诊断。
2. 酶联免疫吸附测定法(ELISA)ELISA是一种敏感度高、特异性强的免疫学检验方法,可以用于检测抗体或抗原。
它的操作简便,可以同时进行多个样本的检测,被广泛应用于病毒感染、免疫性疾病等的诊断。
3. 免疫印迹法(Western Blot)西方印迹法是一种用于检测蛋白质的技术,可以用于分析抗原或抗体的特异性。
该方法适用于检测免疫印迹图谱,可用于疾病的诊断和治疗。
4. 流式细胞术流式细胞术是一种用于分析或分选细胞的技术,可以用于检测免疫细胞的表面标记物、分析细胞免疫学特性等。
该方法操作简便、高通量化,被广泛应用于免疫学研究和临床诊断。
5. 免疫电泳法免疫电泳法是一种用于分离和检测蛋白质的技术,可以用于检测血清中的免疫球蛋白和其他蛋白质。
该方法适用于检测免疫球蛋白谱图、诊断多发性骨髓瘤等。
免疫学检验考试重点免疫学检验老师给的重点,自己总结的,当复习资料看看吧。
第一章绪论1、临床免疫学检验是研究免疫学检验的理论、技术、应用,以及临床免疫学性疾病发病机制、免疫诊断与防治的一门医学应用性学科。
2、临床免疫学(clinical immunology)是利用免疫学的基础理论和技术来研究临床疾病的免疫病理机制、诊断和鉴别诊断、治疗效果和预后判断以及疾病预防等多个分支学科的总称。
3、免疫学检验建立的基础第二章抗原抗体反应1、抗原抗体反应(antigen-antibody)是指抗原与相应抗体在体内或体外发生的特异性结合反应。
可发生于体内,也可发生于体外。
2、抗原抗体防御的原理是什么?具有哪些特点?原理:基于抗原表位与抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性,抗原与抗体间的结合是非共价键结合,通过静电场力、范德华引力(作用最小)、氢键结合力(最具特异性)、疏水作用力(作用最大)等分子间的引力结合在一起,在特异性的基础上形成非共价键由亲水胶体转化为疏水胶体。
特点:特异性、比例性、可逆性。
3、影响抗原抗体反应的因素有哪些?①反应物自身因素抗原(理化性状、分子量、表位的种类和数目)、抗体(来源、浓度、特异性与亲和力)。
②环境因素电解质、酸碱度(一般在6-8之间为宜)、温度(一般为15-40,常用抗原抗体反应为37)。
③对照的设置阴性对照、阳性对照、空白对照、标准品对照4、亲合力(avidity):抗体结合部位与抗原表位之间结合的强度,与抗体结合价直接相关即所谓多价优势。
5、亲和力(affinity):是指抗体分子单一抗原结合部位与抗原分子表面一个相应抗原决定簇(表位)之间的结合强度,它是抗原抗体之间固有的结合力。
第三章免疫原和抗体的制备1、抗体制备类型:单克隆抗体、多克隆抗体、基因工程技术。
2、各类抗体的制备原理和应用?单克隆抗体,原理:将抗原免疫的小鼠脾细胞与具有体外长期繁殖能力的小鼠骨髓瘤细胞通过融合剂(聚乙二醇,PEG)融为一体,在HAT选择性培养基的作用下,只让融合成功的杂交瘤细胞生长,经过反复的免疫学检测、筛选和单个细胞培养(克隆化),最终获得既能产生所需单克隆抗体,又能体外长期繁殖的杂交瘤细胞系,将这种杂交瘤细胞扩大培养,接种于小鼠腹腔,从小鼠腹腔积液中获取高效价的单克隆抗体。
临床免疫学检验重点整理(下)混合,在补体参与下,使抗体形成细胞周围那些受到抗体分子致敏的绵羊红细胞溶解,形成肉眼可见的溶血空斑,每一个空斑中央含一个抗体形成细胞,空斑数目即为抗体形成细胞数目。
细胞因子(CK):是由机体活化的免疫细胞及某些基质细胞分泌的小分子蛋白质,通过结合细胞表面的相应受体发挥生物学效应(有旁分泌、自分泌、内分泌)。
细胞粘附分子(CAM):是由细胞产生、介导细胞与细胞间或细胞与基质间相互接触和结合的分子。
酶联免疫斑点实验(ELISPOT):在包被有待测CK抗体的微孔板上,加入可分泌相应细胞因子的待测细胞,在有或无刺激物存在的条件下培养后,待测细胞向其周围分泌细胞因子,并被板上的特异性抗体捕获。
洗去细胞后用酶标抗体为一抗或二抗,分别做直接法和间接法。
所选底物应在酶促反应后形成不溶性产物。
一个斑点代表一个细胞因子分泌细胞,斑点的颜色深浅程度与细胞因子量相关。
目前在细胞因子检测方面应用较多的是IFN-γ的测定。
免疫球蛋白(Ig):是指具有抗体活性或化学结构与抗体相似的球蛋白。
可分为分泌型和膜型两类。
(现在认为,Ig与Ab没有什么区别)临床上常用速率散射免疫比浊法检测Ig。
免疫球蛋白测定的临床意义(一)年龄,年龄不同其血液中的Ig含量有一定变化,新生儿可由母体获得通过胎盘转移来的IgG,故血液中含量较高,接近成人水平。
婴幼儿体液免疫功能尚不成熟,Ig含量低于成人,各年龄段的正常参考区间见教材。
需要注意的是,血液Ig随年龄、性别、血型、种族及测定方法不同而有差别,各实验室需要建立自己的参考值范围。
(二)多克隆高Ig血症肝脏疾病如慢性活动性肝炎、原发性胆汁性肝硬化、隐匿性肝硬化等患者的血清中,三种免疫球蛋白均可升高。
慢性细菌性感染如结核、麻风、慢性支气管炎等血中IgG可升高。
宫内感染时脐带血或出生后的新生儿血清中IgM含量可增高。
自身免疫性疾病时三种Ig均可升高,如SLE患者以IgG/A升高较为多见,类风湿性性关节炎患者以IgM升高为主。
临床免疫学检查考点总结一、病毒性肝炎标志物检查HAV HBV HCV HDV HEV基因组线状单链RNA小RNA病毒科DNA病毒单股正链RNA(黄病毒属)单股环状RNA单股正链RNA(杯状病毒属)抗体系统IgM,表近期感染1周达高峰,持续2月逐渐下降,IgG可保持多年HBV颗粒又叫Dane颗粒,详见后不是保护性抗体是HCV感染的标志抗-HDV不是保护性抗体抗HEVIgM在发病初期产生是近期感染的标志备注100℃5min可完全灭活,紫外线、过氧乙酸等敏感HBV抵抗力强,100℃10min可灭活,对酒精敏感100℃5min可灭活一种缺陷病毒需HBV辅助才能复制消毒剂敏感免疫学标志临床意义HBsAg+ 最早出现血清学标志抗-HBs抗体:曾感染乙肝;接种了疫苗一种保护性抗体HBeAg(e抗原)HBV活动性复制和传染性标志抗-HBe 传染性减弱的标志HBcAg(核心抗原)存在于受染肝细胞核中,血液中检测不到,+表有传染性抗-HBcIgM 早期感染IgG 过去感染HBV DNA 最敏感最直接的HBV感染指标二、常用抗原抗体凝集反应项目缩写临床意义抗核抗体谱ANA包括dsDNA抗体、抗组蛋白抗体、抗可提取核抗原(ENA)抗体谱。
ANA——最常见于SLE、混合性结缔组织病抗Sm - SLE特异性指标抗双链DNA 抗体抗dsDNA SLE活动性指标类风湿因子RF类风湿性疾病时,RF的阳性率70%~90%,故本试验的特异性不高抗环瓜氨酸肽抗体CCP 是类风湿性关节炎特异而敏感的早期诊断指标抗链球菌溶血素“O”抗“O”升高常见于感染性心内膜炎、扁桃体炎、风湿热以及链球菌感染后肾小球肾炎,1周后开始升高,4~三、肿瘤标志物检查(一)甲胎蛋白(AFP)测定:升高见于肝癌(>300μg/L)、生殖腺胚胎性肿瘤(如睾丸癌、畸胎瘤),病毒性肝炎、肝硬化(但<300μg/L)(二)癌胚抗原(CEA)测定结肠癌、直肠癌、乳腺癌、胃癌、肺癌、胰腺癌等(三)前列腺特异抗原测定在前列腺癌时可见PSA水平明显升高四、免疫球蛋白1.IgG、IgA、IgM均增高常见于各种慢性感染、慢性肝病、肝硬化、淋巴瘤和某些自身免疫性疾病(如系统性红斑狼疮、类风湿关节炎等)2.单一免疫球蛋白增高主要见于免疫增殖性疾病(如多发性骨髓瘤、原发性球蛋白血症等)。
填空1.免疫防御功能异常可导致(感染、免疫缺陷)疾病。
2.抗原抗体反应的特点有(特异性、比例性、可逆性、阶段性)3.抗原抗体反应的温度一般以(15~40℃)为宜,最适温度为(37℃)4.影响抗原抗体反应的环境因素主要有(电解质、pH、温度)5.某些特殊的抗原抗体反应对温度有一些特殊的要求,如冷凝集素在(4℃)左右与红细胞结合最好,(20℃)以上反而解离。
6.抗原抗体的结合分子间的引力包括(静电引力、范德华引力、氢键引力和疏水作用力),其中作用最强的是(疏水作用力)1.间接凝集反应的类型包括(正向间接凝集、反向间接凝集反应、间接凝集抑制反应和协同凝集反应)四种类型。
2.参与凝集反应中的抗原称为(凝集原),抗体称为(凝集素),常用的直接凝集试验有(玻片法、试管法、玻片法)3.在间接凝集反应中正向凝集反应是用(抗原)致敏载体以检测标本中相应的(抗体),而反向间接凝集反应是用(抗体)致敏载体以检测标本中相应(抗原)4.间接抗球蛋白试验可用已知抗原型红细胞检测血清中的(不完全抗体),可用于输血前的(交叉配血)试验。
1.免疫沉淀反应是(可溶性抗原)与(相应抗体)的特异性结合2.棋盘格法(抗原)和(抗体)同时稀释,可一次完成(抗原)和(抗体)的滴定3.单向琼脂扩散是待测抗原从含有定量(抗体)的(凝胶)内自由向周围扩散,抗原抗体特异性结合,在两者比例合适的部位,形成(沉淀环)。
4.Maneini曲线适用于(大分子抗原)的测定,在一定范围内,沉淀环随时间延长而扩大,抗原浓度与(扩散环直径的平方)呈线性关系,常用(普通)坐标纸作图。
5.Fahey曲线适用于(小分子抗原)的测定,在一定范围内,沉淀环随时间延长而扩大,沉淀环直径与(抗原浓度的对数)呈线性关系,常用(半对数)坐标纸作图。
6.双向琼脂扩散试验可对抗原或抗体的存在、含量和相对分子量进行分析,沉淀线靠近抗原孔指示(抗体含量较高);靠近抗体孔则指示(抗原含量较高);不出现沉淀线则表明(无对应的抗原和抗体)。
7.免疫电泳是将(电泳)与(双向免疫扩散)相结合的一种免疫化学分析技术。
8.火箭免疫电泳是(电泳)与(单向免疫扩散)相结合的免疫技术。
9.对流免疫电泳是(电泳)与(双向免疫扩散)相结合的免疫技术。
10.对流免疫电泳中,抗体流向负极,是因为(电泳)速度小(电渗)速度大。
11.免疫浊度测定的基本原理是抗原抗体在特殊缓冲液中快速形成(免疫复合物),使反应液出现(浊度),并可根据其推算出抗原或抗体的量。
12.根据Rayleigh方程,散射比浊法中的散射光强度与入射光波长成(反)比,与粒子的浓度和体积成(正)比。
13.速率散射比浊法是测定单位时间内免疫复合物形成的(最快时间段)的散射信号值,此时的散射信号最强,速率散射信号值最大。
14.免疫胶乳浊度测定的原理与透射比浊法相似。
载体为大小适中、均匀的胶乳颗粒其直径应稍(小于)入射光波长目前多用(200)nm的胶乳颗粒。
15.免疫浊度测定的基本原则之一是反应体系中必须始终保持(抗体)过量。
16.凝胶内沉淀试验包括(单向扩散试验、双向扩散试验);抗原抗体最适比的基本测定方法为(抗原稀释法、抗体稀释法)。
1.标记免疫技术的示踪物有(酶、放射性核素、荧光素、化学或生物发光剂、胶体金) 2.放射免疫技术可分为(放射免疫分析RIA、免疫放射分析IRMA)两种基本类型。
3.采用125-I制备标记物的基本原理是以放射性碘原子置换被标记物分子中(酪胺酸或酪胺残基)或(组胺残基)上的氢原子。
1.荧光免疫技术的主要类型包括(荧光抗体染色技术、荧光免疫测定技术)。
2.荧光物质有(荧光素、其他荧光素物质)。
3.荧光抗体染色技术可分为(荧光免疫显微技术、流式荧光免疫技术)。
4.镧系稀土元素标记物制备的螯合剂有(多羧基酸类螯合剂、B-二酮体类螯合剂、BCPDA、菲洛林)5.荧光免疫测定根据抗原抗体反应后是否需要分离结合的与游离的荧光标记物而分为(均相、非均相)两种类型。
6.非均相荧光免疫测定法包括(时间分辨荧光免疫测定、荧光酶免疫测定)。
7.均相荧光免疫测定法包括(荧光偏振免疫测、底物标记荧光免疫测定)。
8.荧光素标记抗体的方法有(搅拌标记、透析标记法)。
1.膜载体酶免疫测定技术的类型主要有(斑点-ELISA免疫渗滤试验、免疫层析试验、免疫印迹法)2.酶免疫组织化学技术常用的酶有(HRP 、ALP 、β-半乳糖苷酶(β-Gal) )。
3.ELISA检测抗原的方法主要有(双抗体夹心法、双位点一步法、竞争法);检测抗体的方法主要有(间接法、双抗原夹心法、竞争法、捕获法)。
4.ELISA中三种必要试剂是(固相的抗原或抗体、酶标记的抗原或抗体、酶的反应底物)。
5.制备酶结合物常用的方法有(戊二醛交联法、过碘酸盐氧化法)。
6.在稀释液和洗涤液中加入(吐温一20),可以去除非特异性吸附。
7.均相酶免疫测定技术的类型主要有(酶增强免疫测定技术、克隆酶供体免疫分析技术)。
8.非标记抗体酶免疫组织化学技术的类型主要有(酶桥法、PAP法、双桥PAP法、APAAP 法)。
9.(SDS-PAGE、蛋白质转运、酶免疫测定)三项技术结合而成形成免疫印迹法。
10.常用于HRP标记抗原/抗体的方法:(戊二醛交联法、改良过碘酸钠法)。
1.化学发光免疫技术根据发光方式不同分为(化学发光酶免疫分析、化学发光免疫分析、点化学发光免疫分析)。
2.根据形成激发态分子的激发能可将发光分为三种类型(光照发光、生物发光、化学发光),发光剂分为(荧光素、生物发光剂、化学发光剂)三种。
3.HRP常用的发光底物为(鲁米诺);ALP常用的发光底物为(AMPPD、4-MUP)。
4.发光酶免疫分析的技术要点包括(抗原抗体反应、标记物游离部分和结合部分分离、酶促发光反应及检测)三个过程。
5.发光酶免疫分析常用的标记酶有(ALP、HRP),根据酶促反应底物不同,发光酶免疫分析可分为(荧光酶免疫分析、化学发光酶免疫分析)6.电化学发光免疫分析是(电化学、免疫测定)相结合的产物。
它的标记物的发光原理与一般化学发光不同,是一种在电极表面由(电化学)引发的特异性化学发光反应,实际上包括了(电化学、化学发光)两个过程。
7.ECLIA通过(电)启动发光反应,而CLIA是通过(化合物混合)启动发光反应。
1.不受位阻效应影响,更易发挥生物素活性作用的是(BCNHS)。
2.用于标记蛋白质醛基的,适用范围较BHZ宽的活化生物素是(BCHZ)。
3.在一定波长的光照射下,光敏基团可转变为芳香基硝基苯而直接与腺嘌呤N7位氨基结合的是(光生物素)。
4.生物素化蛋白质衍生物有二类,一种是(生物素化的大分子生物活性物质),另一种是(标记材料结合生物素后制成的标记物)。
5.用于亲和素标记的物质中,最常用的是(酶、异硫氰酸荧光素(FITC)、胶体金)。
1.用丙酮做固定剂的抗原是(免疫球蛋白);用1%聚甲醛做固定剂的抗原是(激素);用10%甲醛做固定剂的抗原是(类脂质);用95%乙醇做固定剂的抗原是(蛋白质);用四氯化磺做固定剂的抗原是(酶)。
2.免疫染色对特殊标本的进一步处理常用(冰冻切片、石蜡切片)法。
3.免疫组化染色后,阳性细胞的染色分布有三种类型,分别是(胞质型、细胞核型、细胞膜表面型)。
4.酶免疫组化技术中最常用的酶有(辣根过氧化物酶、碱性磷酸酶、葡萄糖氧化酶)。
5.免疫电镜标本的制备主要有(非包埋法免疫染、包埋前免疫染色、包埋后免疫染色)6.免疫组化中最常用的制片方法是(蛋白酶消化法、非特异吸附法)。
1.金免疫技术主要有(金免疫组织化学染色技术)和(金免疫测定技术),前者包括(免疫金(银)光镜染色技术、免疫金电镜染色技术);后者包括(斑点金免疫渗滤试验、斑点金免疫层析试验)等。
2.免疫金是指(胶体金与抗原(抗体) )的结合物,在免疫组织化学染色技术中,习惯上称之为(金探针)3.斑点金免疫层析试验方法学类型有(双抗体夹心法、竞争法、间接法)。
4.渗滤装置是斑点金免疫渗滤试验试剂盒中主要组成部分之一,由(塑料小盒、吸水垫料)和(点加了抗原或抗体的硝酸纤维素膜片)三部分组成。
5.斑点金免疫渗滤试验试剂盒由(渗滤装置、胶体金标记物、洗涤液)组成。
6.用于电镜的免疫金法可分为(包埋前染色、包埋后染色)两大类。
7.免疫金电镜染色技术包括(标本包埋、免疫组化染色)两个主要步骤。
8.为了消除待测血清标本中(非特异性IgG)的干扰,斑点金间接免疫层析法测抗体常设计成(反流免疫层析法)1.PBMCs包括(淋巴细胞)和(单核细胞)。
2.在反相溶血空斑试验中每一个空斑代表一个(分泌Ig的细胞)。
3.B细胞表面特异的标志是(SmIg)。
4.常用的测定淋巴细胞活力的方法是(台盼蓝染色法)。
5.淋巴细胞转化情况的判定方法有(形态学方法、3H—TdR掺入法、MTT比色法)。
6.淋巴细胞转化试验应用的同位素是(3-H ),细胞毒试验应用的同位素是(51-Cr)7.分离外周血白细胞常用的方法是(自然沉降法)和(聚合物加速沉降法)。
8.去除白细胞悬液中残留红细胞的常用方法有(无菌蒸馏水低渗裂解法、0.83%氯化铵处理法)。
9.去除单个核细胞悬液中单核细胞的常用方法有(黏附去除法、羰基铁粉吞噬去除法)。
10.检测T细胞数量的花环技术包括(E花环试验、葡萄球菌花环法、抗体致敏红细胞花环法);检测B细胞数量的花环技术主要有(Ea花环试验、Et花环试验)。
11.淋巴细胞的密度为(1.077±0.001)。
12.外周血经Ficoll分离液离心后从上到下分为(血清、PBMCs 、粒细胞、红细胞)层。
1.活化的TH1细胞产生的细胞因子主要有(IL-2 、IFN、IL-12 ),而TH2细胞主要产生的细胞因子为(IL-4、IL-5、IL-10)。
2.细胞因子常用的检测法包括(生物学检测法、免疫学检测法、分子生物学检测法)。
3.ELISA 测定法测定细胞因子常用(竞争法)。
1.补体参与的反应试验类型包括(免疫溶血试验、补体结合试验、补体依赖的细胞毒验、免疫黏附试验).2.参与补体结合试验的试剂可分为(指示系统、反应系统)两个系统。
3.Ⅲ型变态反应疾病患者的血清中补体水平(降低)。
4.补体的最佳保存温度是(一20℃以下),在(56℃)下30min即被灭活。
5.CH50试验中有(绵羊红细胞、溶血素、人血清)参与反应。
1.免疫球蛋白根据重链的不同可分为(IgM、IgG 、IgA、IgE、IgD )2.免疫固定电泳的特点是(周期短、敏感性高、分辨清晰、结果易于分析)3.Ig 中k/λ比率正常范围是(1.2~2.4)1.肿瘤抗原可分为(肿瘤相关抗原、肿瘤特异性抗原)两类。
2.肿瘤标志物检测的临床意义,归纳起来有(早期普查、肿瘤诊断、监测病情)等3.肿瘤标志物的检测对临床某些肿瘤有重要辅助诊断价值,如:AFP可辅助诊断(肝癌),CEA可辅助诊断(结肠癌),PSA可辅助诊断(前列腺癌)。