• 很快,密码子CCC对应Pro, AAA对应Lys, 但 poly(G)没有得到结果(高级结构的缘故)。
用统计 法尝试 确定含 多种核 苷酸的 密码子 的碱基 组份
1964年Nirenberg等发现将核苷酸三联体与对应 的AA-tRNA放在一起,AA-tRNA就会结合到 核糖体上去。
核糖体结合 实验:
Decoding of the Genetic code
Proteins are synthesized at rough ER
核糖体 20世纪50年代Paul Zamecnik通过将同位素标记的氨基酸注射 到大鼠体内,按不同时间取肝脏分析同位素标记的氨基酸跑到 哪里去了。时间长了会在任何地方都有同位素标记,但在注射 后数分钟就检测,同位素全部跑到了含有RNA的小颗粒中(即 核糖体, ribosome)。
密码的特点
• 连续性 • 兼并性
在不同生物中使用同义密码子的频率是不相同 的——偏爱密码
• 摆动配对(变偶现象) • 通用性
– 线粒体的密码有一定的差别 – AUG—起始密码和甲硫氨酸 – UAG、UAA、UGA—终止密码
硒半胱氨酸是大肠杆菌的第21个拥有密码子 的氨基酸(识别UGA)
高浓度时取代 正常Cys,用 在同步辐射实 验中
丙氨基酰tRNA:Ala-tRNAala 精氨基酰tRNA:Arg-tRNAarg 甲硫氨基酰tRNA: Met-tRNAmet
起始密码子AUG编码的Met由tRNAimet (真 核) 或tRNAfmet(原核)转运。 真核细胞起始密码子编码的Met不须甲酰化 大肠杆菌起始密码子编码的Met须甲酰化
The final solution
几乎同时,Gobind Khorana成功地合成了 非随机重复的多聚核苷 酸。当这些多聚物得到 的结果与 Nirenberg的 结果进行比较时,得到 了确切的密码子信息。 如 (AC)n得到的结果是 H和T等量参入,而密 码的分布是等量的CAC 和ACA,因此CAC对应 H, ACA对应T.