碱性蛋白胨水配制标准操作规程
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碱性蛋白胨水配制标准操作规程
1.目的
规范碱性蛋白胨水配制标准操作规程,保证培养基质量。
2.原理
在pH8.0~9.0环境中,霍乱弧菌能较好地生长繁殖,而其他大部分细菌在此环境中生长受抑制,因此霍乱弧菌在次培养基上生长占优势,为进一步分离培养提供有利条件。
3.用途
主要用于霍乱弧菌增菌培养用。
4.配方
蛋白胨10g、氯化钠20g、蒸馏水1000ml,pH8.4~8.8。
5.操作步骤
将上述成分混合加热溶解,调整pH至8.4~8.8,煮沸,稍冷后,分装试管,每支8ml,121℃高压灭菌15分钟,冷藏备用。
6.储存条件
2~8℃冰箱。
7.有效期
实验室自行规定,确保培养基质量。
8. 质量控制
8.1 质控频度每次新配制时做质控
8.2 质控方法及结果见表5-23.
表5-23 配制碱性蛋白胨水质量控制方法及结果试验方法结果
无菌试验生长试验平行试验<100支抽检5%,>100支
随机取10块,35℃培养
18~24小时,观察有无细
菌生长(若有细菌生长,
则营养肉汤变浑浊)
非O1群弧菌(质控菌株),
35℃孵育6h
无细菌生长
生长良好
生长抑制
生长良好
大肠埃希菌ATCC25922,
35℃孵育6h
副溶血弧菌(质控菌株),
35℃孵育6h
做质控时,取新旧批号的
培养基同时做
9.注意事项
蒸馏水配制时,由于蒸馏水pH偏低,故pH要重新测定。
参考文献
[1] 周庭银编著.临床微生物学诊断与图解.第二版.上海:上海科学技术出版社,2007
[2] 王钦升,周正明,高屹主编.实用医学培养基手册.北京:人民军医出版社,1999
(周庭银)
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